复合氨基酸注射液中L-色氨酸含量测定方法的研究

利用色氨酸结构中的吲哚基团在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛的特殊反应 ,在 6 10nm处测定复合氨基酸注射液中L 色氨酸的含量 ,获得满意的结果     

牛血清白蛋白水溶液的闪光光解

本文用闪光光解方法测定了BSA原初光解瞬态产物在300～600nm波长范围较完整的吸收光谱。在N_2气饱和及激发光波长<370nm条件下,BSA光解瞬态产物有五个吸收峰,位置分别在270、310、390、410和460nm,而在有氧或激发闪光中含有370nm以上光时,色氨酸三线态在460nm附近的吸收峰消失了,表征色氮酸中性自由基的510nm吸收峰却显现出来。光解瞬态吸收谱的测量表明:BSA光解主要发生在酪氨酸和色氨酸残基上,原初光解瞬态产物有对位α-氨基丙酸苯氧自由基Tyr(λ_(max)=410、390nm),色氨酸中性自由基(λ_(max)=510、310nm),色氨酸三线态(λ_(max)=460nm)和另一种未鉴定的自由基(λ=270nm)。本工作还用闪光光解方法测定了BSA分子中酪氨酸残基光解产生Tyr的ΔO.D._(410)对pH的依赖关系,该pH曲线有两个转折点(pH4.2和pH11),通过BSA分子里的酪氨酸残基光易变程度随溶液pH的变化证明:在中性和弱酸性条件下,BSA分子中大部分酪氨酸残基埋藏在分子的内部,不能或不易光解,但随着pH改变,光易变的酪氨酸残基数也改变。这和其他方法所测BSA构象转变结果基本一致,说明闪光光解方法有可能为构象研究提供某种信息。     

高效液相色谱法测定重组人干扰素α-2b注射液中乙二胺四乙酸二钠含量

目的:利用高效液相色谱(HPLC)法测定重组人干扰素α-2b注射液中EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠)的含量。方法:将EDTA二钠与氯化铁溶液于70℃水浴中反应20 min左右;色谱柱为SunFire C18(250 mm×4.6 mm,5μm,Waters),流动相为5%甲醇+95%0.64 g/L四丁基溴化铵和4.1 g/L三水合乙酸钠混合液,用冰乙酸调pH值至4.0,流速1 mL/min,检测波长254 nm。结果:该测定方法线性范围为0.025~0.5 g/L,线性关系良好(r=0.9997),加样回收率为98.27%(n=9,RSD=2.55%)。结论:本方法准确、快速、可靠,可用于重组人干扰素α-2b注射液中EDTA二钠含量的测定。     

高效液相色谱法测定1,25- 二羟基维生素D2纳米乳注射液的含量

目的:建立高效液相色谱法测定1,25-二羟基维生素D_2纳米乳注射液含量。方法:采用C18-STⅡ色谱柱(4.6×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水=85:15(V/V);流速:1.5 m L/min;检测波长:274 nm;温度:室温;进样量:200μL。结果:该方法专属性好,平均回收率99.96%(RSD为0.63%,n=9);溶液在冷藏(2~6℃)保存24 h稳定(RSD=0.98%,n=7);在0.06μg/m L~4.0μg/m L范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=201098 X-8412.5(R2=0.9998,n=9)。结论:该方法简便、快捷、灵敏度高、专属性强,可用于该注射液的含量测定。     

水解蛋白注射液中色氨酸测定方法的比较

本文对水解蛋白质注射液中色氨酸比色测定的方法进行了比较研究,结果表明用N-1一萘基乙二胺方法比对二甲氨基苯甲醛法具有灵敏度高(约相当于20倍),精密度好(前法的变异系数为1.7%,后法为13.1%)等优点,两法的平均回收率均为97%。另外,还测定了上述二法的吸收曲线和应用两法对武汉地区用不同工艺生产的水解蛋白注射液进行了实际考察。结果表明用酶法生产的水解蛋白,其色氨酸含量可达550μg/ml。     

水解蛋白注射液中色氨酸测定方法的比较

<正> 本文对水解蛋白注射液中色氨酸比色测定的方法进行了比较研究,结果表明用N-1-萘基乙二胺方法比对二甲氨基苯甲醛法具有灵敏度高(约相当于20倍),精密度好(前法的变异系数为1.7%,后法为13.1%)等优点,两法的平均回收率均为97%。另外,还测定了上述二法的吸收曲线和应用两法对武汉地区用不同工艺生产的水解蛋白注射液进行了实际考察。结果表明用酶法生产的水解蛋白,其色氨酸含量可达550μg/ml。     

比色法测定复方氨基酸注射液中亚硫酸盐的含量

目的:采用比色法测定复方氨基酸注射液中亚硫酸盐的含量。方法:以碱性品红·甲醛溶液为显色剂,检测波长为576nm。结果:二氧化硫在0.4～2mg·L-1质量浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.3041C-0.0505,(r=0.9923,n=5);平均回收率为99.9%(RSD=1.19%,n=9)。结论:按此方法检测方便快速,结果准确可靠,能满足对产品中亚硫酸盐含量控制的要求。     

HPLC法测定山茱萸注射液中马钱素和莫诺甙的含量

山茱萸注射液中有多种有效成分,采用高效液相色谱法对山茱萸注射液中的马钱素(Loganin)和莫诺甙(Morroniside)进行分离定量.色谱柱:Kromasil-100℃_(18)柱.流动相:0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液-乙腈(6.4:1).马钱素和莫诺甙的平均回收率和相对标准偏差分别为99.79%、1.51(n=6)和99.73%、2.75%(n=6).结果满意,可作为山茱萸主射液质量控制的标准方法.     

高效液相色谱法快速直接测定酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸

利用酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸具有紫外吸收这一特征 ,选用 2 3 0 nm、2 1 0 nm和 2 78nm的检测波长 ,在 7min内分别检测了酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。三种氨基酸在 0 .0 1～ 1 .0 μmol/ ml浓度范围内呈显著的直线线性关系 ,相关系数均在 0 .9998以上。该方法不需衍生 ,直接测定 ,灵敏快速 ,结果准确可靠 ,适用于氨基酸注射液中低含量的酪氨酸和色氨酸准确检测 ,以及该三种氨基酸原料药纯度检测。     

响应面分析优化L-色氨酸清液发酵培养基

L-色氨酸是八种必需氨基酸之一,随着L-色氨酸应用市场的不断扩大,进行发酵法生产L-色氨酸的研究具有重要的现实意义。为了提高L-色氨酸产量,本文利用响应面分析法对L-色氨酸清液发酵培养基进行优化。利用优化培养基进行发酵,考察清液发酵对L-色氨酸发酵过程中生物量、L-色氨酸产量、副产物生成量的影响。结果表明:在优化条件下利用清液发酵培养基发酵,乙酸含量与原工艺相比降低了(6.75±1.26)%,L-色氨酸产量提高了(16.54±1.15)%,实验值与响应面分析预测值基本相符。     

肾茶熊果酸含量测定的研究

本试验研究用薄层扫描法测定肾茶中熊果酸含量。样品经适当提取后点于硅胶GF254薄层板上,以环已烷-氯仿-乙酸乙酯-甲醇(25:15:5:2)为展开剂,置于紫外光灯(波长254nm)下定位;双波长反射锯齿扫描,λ_S=520nm,λ_R=650nm。结果表明,经方法学考察,点样量在0.5~2.5μg范围内呈现良好的线性关系,其回归方程为y=3658.34X-7857.07,r=0.9998;平均回收率为101.57%,RSD=2.83%。     

外源色氨酸对海水胁迫下长春花幼苗生长及生物碱含量的影响

以长春花[Catharanthus roseus(L.)G.Don]为材料采用温室盆栽法,研究了不同浓度色氨酸对不同浓度海水处理14 d后长春花幼苗生长及吲哚生物总碱含量的影响.结果显示:(1)20%海水中加入不同浓度的色氨酸,长春花幼苗生长受到显著抑制,而丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量、色氨酸脱羧酶(TDC)活性、吲哚生物总碱含量均显著增加;(2)40%海水中加入不同浓度的色氨酸,TDC活性、吲哚生物总碱含量也得到显著提高,但幼苗生长受到严重伤害,生物产量显著降低,吲哚生物总碱的产量太低.研究表明,外源色氨酸能显著提高海水胁迫下长春花吲哚生物总碱的含量,而且用20%的海水中加入500 mg/L的色氨酸最有利于生物碱的积累.     

高效毛细管电泳法直接测定红豆杉悬浮培养细胞中游离芳香族氨基酸

建立了红豆杉悬浮培养细胞中游离芳香族氨基酸的高效毛细管电泳的分离直接紫外吸收测定方法。在优化的实验条件下 ,以间苯二酚为内标 ,未涂层融硅毛细管 (75 μmi.d .,总长 37cm ,有效分离长度 30cm)为分离通道 ,40mmol/L磷酸缓冲液 (pH10 .46 )为电泳介质 ,3sec(0 .5 psi)压力进样 ,15kV恒压电泳 ,2 0 0nm检测 ,在 9min内三种氨基酸得到分离测定。色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的线性范围分别为 2 .5 0～ 2 5 0 μmol/L(r =0 .996 2 ,RSD =2 .5 2 % )、1.2 5～ 2 5 0 μmol/L(r =0 .996 6 ,RSD =2 .12 % )和 2 .5 0～ 2 5 0 μmol/L(r=0 .9940 ,RSD =2 .93% ) ,苯丙氨酸回收率为 96 .8%± 1.37% ,酪氨酸回收率为 99.2 %± 3.0 4%。     

氨基酸-山梨醇输液的研制

本文报导利用卵清蛋白(提取过溶菌酶)经酸水解,通过离子交换树脂纯化等工艺,添加损失的色氨酸,配制成氨基酸—山梨醇输液,其氨基酸配比同卵清蛋白模式的氨基酸配比相符合,此模式是一个理想的模式必需氨基酸同非必需氨基酸之比是1:1,E(必需氨基酸)/T(总氮量)=3.2,我们产品E:N=1:1,E/T=3.15。可作高营养液之用。经临床验证疗效较好,安全可靠,无副作用,为江苏省生产氨基酸注射液闯开一条新路。     

利妥昔单抗注射液联合化疗治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤的疗效观察

目的:观察利妥昔单抗注射液联合化疗治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的疗效。方法:将2013年1月至2014年12月我院收治的71例B-NHL患者分为对照组(n=35例)和观察组(n=36例)。对照组给予常规化疗方案进行治疗,观察组在此基础上加用利妥昔单抗进行治疗,3个周期后评价其疗效及安全性。结果:观察组总有效率为91.67%,明显高于对照组的68.57%,对比差异有统计学意义(x2=5.979,P0.05);观察组不良反应总发生率为41.67%,略低于对照组的45.71%,但无统计学差异(x2=0.118,P0.05)。结论:利妥昔单抗注射液联合化疗治疗B-NHL中期疗效显著,且无严重不良反应,值得临床推广。     

HPLC法测定金菊五花茶颗粒中绿原酸的含量

目的:建立HPLC法测定金菊五花茶颗粒中绿原酸的含量。方法:色谱柱:Eclipse XDB-C18(150mm*4.6mm,5μm)流动相:甲醇-0.15%磷酸溶液(20:80)流速:1.0ml/min,检测波长:327nm。结果:绿原酸线性范围:0.026~0.260μg(r=0.9997),加样回收率为:99.20%,RSD=1.25%(n=6)。结论:本法操作简便,准确,可用于测定金菊五花茶冲剂中绿原酸的含量。     

动态光散射法测定病毒载体基因治疗产品的平均粒径及粒径分布

目的:建立病毒载体基因产品的粒径及分布的测定方法。方法:采用马尔文Zetasizer Nano ZS型纳米粒度仪,以氯化钠注射液作为稀释剂对样品进行适当稀释后,用手动测量方式进行测定。结果:测定的60 nm标准纳米粒子平均粒径为61.24±0.68nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.020±0.012 nm。重组人新型P53腺病毒注射液测定6次,平均粒径为122.42±1.80 nm,相对标准偏差(RSD)为1.4%;PDI值为0.056±0.014 nm,RSD为25.1%。重组人新型P53腺病毒注射液于37℃存放时,平均粒径和PDI值随时间延长有显著增加。至28天时,平均粒径增加到130.50,PDI值增加到0.265。结论:动态光散射法快速、简便、准确,可用于病毒载体基因治疗产品的粒径及分布的检测。     

HPLC测定莪术油葡萄糖注射液中四种成分的含量

采用HPLC法测定了莪术油葡萄糖注射液中四种成分(莪术二酮、莪术醇、牻牛儿酮、呋喃二烯)含量。本法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为甲醇-水(85∶15 V/V),流速为0.8mL/min,柱温:30℃,检测波长为215nm。在该色谱条件下,分别建立莪术二酮、莪术醇、牻牛儿酮、呋喃二烯的线性回归方程。结果表明,该法的精密度、重复性、稳定性良好(RSD<2.0%),平均回收率均大于96%(RSD<3.0%,n=5),通过测定得到莪术油葡萄糖注射液中四种主分的含量分别为67,26,20,45μg/mL。HPLC法准确、可靠、重复性良好,可用于莪术油葡萄糖注射液的质量控制。     

梯度洗脱高效液相色谱法测定桑叶中3种活性成分的含量

建立同时测定桑叶中绿原酸、芦丁和槲皮素含量的分析方法。色谱柱为NUCLEODUR C18 RP(250 mm×4.6 mm,5μm),光电二极管检测器,流动相为甲醇-质量分数0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱程序为0 min(30:70)-15min(30:70)-25min(50:50)-35min(85:15)-40min(30:70);流速0.8 ml.min-1,检测波长为350 nm。绿原酸、芦丁和槲皮素的线性范围分别为0.1144~1.0296μg(r=0.9996)、0.0436~0.3924μg(r=0.9999)和0.0452~0.4068μg(r=0.9997),平均回收率分别为97.7%(RSD=1.7%)、98.4%(RSD=2.2%)和100.6%(RSD=1.5%)。方法快速简便,专属性强,重复性好,可作为桑叶中绿原酸、芦丁和槲皮素的定量分析方法。     

色氨酸对海水处理下长春花生物碱含量的影响

以长春花为(Catharanthus roseus(L.)G.Don)材料进行温室实验,研究了不同浓度色氨酸对20%海水处理下长春花幼苗生物碱含量的影响,发现20%海水中加入色氨酸,长春花中色氨酸脱羧酶(TDC)活性提高,吲哚生物总碱以及长春碱、长春质碱、文多灵、长春新碱含量显著增加.其中加入500 mg/L的色氨酸最有利于生物碱含量的增加.