荧光染色法与KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用比较

目的探索一种结果更可靠的真菌直接镜检方法。方法对600例临床高度疑似真菌感染的标本分别采用荧光染色法和KOH湿片法进行真菌直接镜检。结果荧光染色法和KOH湿片法的真菌检出率分别为97%和88.5%。结论荧光染色法是一种适合临床的、快速有效的真菌镜检方法。     

荧光染色法与KOH法在皮肤真菌检查中的效果比较

目的探讨真菌荧光法在皮肤浅部真菌筛查的敏感性。方法收集皮肤科门诊疑似真菌感染的患者标本,同时用KOH湿片法和真菌荧光染色法进行检测,并对检验结果进行对比。结果 1 209例患者中真菌荧光染色法阳性的阳性率为42.76%,KOH湿片法的阳性率为24.81%,结果差异有统计学意义(χ^2=87.094,P<0.05)。荧光染色法和KOH法在患者不同部位的阳性率:头面部为55.59%、7.90%,体股部为46.93%、30.06%,手足部为27.37%、26.25%,外阴部为31.85%、14.07%,指甲(趾甲)部为51.64%、48.36%;在不同疾病中的阳性率:马拉色毛囊炎为77.00%、8.50%,手足癣为48.04%、46.08%,体癣为50.31%、33.44%,甲癣为51.64%、48.36%,花斑癣为66.67%、48.00%,湿疹为10.24%、5.42%,皮炎为48.11%、9.43%。结论荧光染色法是一种简单、快速、准确的真菌镜检方法,值得在临床上推广使用。其总体的阳性率比KOH湿片法高,毛囊虫、疥疮等真菌荧光染色法在镜下更容易辨认。头面部、外阴等油脂分泌旺盛的部位以及马拉色毛囊炎、湿疹和皮炎等疾病推荐使用荧光染色法来排除是否有真菌的感染。     

KOH和乳酸酚棉蓝染色法在浅部真菌病直接镜检中的应用比较

直接镜检法是浅部真菌形态学检查的基本方法,也是最简单、快速、实用的实验室诊断方法[1].传统的方法是用10％ KOH做浮载液直接镜检,本实验用乳酸酚棉蓝染液和KOH溶液对同一患者的同一部位标本同时进行镜检,比较这两种方法的镜检阳性率. 1材料和方法 1.1标本来源 取自本院皮肤科门诊患者,拟诊为浅部真菌感染者.其中男245例,女182例,共427例.取材部位：甲部52例,头部28例,手足部163例,躯干、四肢及股部184例.     

芝加哥天蓝法在甲屑真菌检测中效果的评估

目的 探讨芝加哥天蓝染色法对甲真菌病患者标本检测效果.方法 收集皮肤科门诊确诊的甲真菌感染患者标本160例,同时用KOH湿片法、荧光染色法和芝加哥天蓝染色法对真菌进行镜下形态学观察,并比较真菌检出率.结果 芝加哥天蓝染色法和荧光染色法对真菌的形态结构清晰易辨.芝加哥天蓝染色法、荧光染色法和KOH湿片法的检出率分别为60...     

真菌荧光染色法与PAS染色法在肺隐球菌病病理学诊断中的比较

<正>肺隐球菌病是一种由隐球菌感染引起的肺部真菌疾病,具有传染性,近年来免疫功能正常的人群也有发病,整体发病率呈增高趋势^[1]。由于其临床症状无特异性,易与肺部其他疾病相混淆^[2]。检验科主要依靠革兰染色涂片法及真菌培养法检测,但革兰染色存在缺陷,其检出率不高,容易漏检,而真菌培养时间长,阳性率低^[3]。对于组织标本,病理科诊断该病一直以来用的都是较为传统的石蜡组织切片PAS染色法技术^[4],近年来真菌荧光染色法也作为一项比较成熟的染色方法被临床科室运用。     

荧光染色法、双重荧光染色法与KOH湿片法在甲真菌诊断中的比较研究

正甲真菌病由真菌感染甲板和甲床引起,以趾甲受累居多,约占皮肤科门诊足病患者的15.7%~([1])。目前皮肤科常用的实验室检查方法为氢氧化钾(KOH)直接涂片镜检和真菌培养法,但阳性率均不高。荧光染料通过与真菌细胞壁几丁质等多糖结合,在紫外光的激发下发出蓝绿色荧光。诸多研究表明荧光染色法的阳性率高于KOH湿片法~([2-5])。本研究用两种真菌荧光染色法(双重荧光染色法,荧光染色法)分别与20%KOH湿片法比较在甲真菌病检测中的阳性率、工作效率及难易程度。     

KOH试管法与玻片法在甲真菌检查中的效果比较

<正>甲真菌病是最常见的皮肤科疾病之一,发病率约占临床甲病的一半以上,病原菌包括皮肤癣菌、酵母菌和其他非皮肤癣菌性丝状真菌等,国内甲真菌病病原菌中皮肤癣菌占65%～70%,酵母菌占10%～30%。甲真菌病常表现为甲板增厚、分离、变色等临床症状,其临床表现有时不易与白甲症、黄甲综合征、甲银屑病、甲扁平苔藓等指(趾)甲疾病鉴别^[1-5],因此,病原学检查是诊断和鉴别诊断甲真菌病的关键依据。     

荧光染色法和KOH湿片法在诊断浅部真菌感染中的效果比较

目的探讨荧光染色法在浅部真菌镜检中的应用价值。方法收集100例皮肤科门诊疑似真菌感染的患者标本,分别运用荧光染色法和KOH湿片法对这些标本进行检测,并对检测结果进行比较。结果荧光染色法共检出56例真菌阳性,而KOH湿片法只有39例阳性。荧光染色法的阳性检出率明显高于KOH湿片法(χ2=5.79,P0.05)。结论荧光染色法是一种快速、准确的真菌检测方法,值得在皮肤科对真菌感染早期诊断的推广使用。     

莱芙特敏荧光染色法、Baso荧光染色法与KOH湿片法在诊断浅部真菌病的应用对比

正浅部真菌病包括手足癣、体股癣、甲真菌病、花斑糠疹和头癣等,目前最常用的诊断技术是KOH湿片法,其具有经济简便等特点,但易受标本中的杂质如油脂、纤维、气泡等干扰,依赖检查人员的主观判断,易造成误差[1-2]。近年来真菌荧光染色技术在各大医院推广,从最初需加A、B液两步法到一步法的改进,荧光染色液的种类也不断增多,我院皮肤科真菌实验室使用莱芙特敏荧光染色法、Baso荧光染色法和KOH湿片法同时对200份标本进行真菌直接镜检,探讨两种荧光染液染色法镜     

CFW荧光染色法在甲真菌病诊断中的应用研究

目的评估CFW(Calcofluor white)荧光染色法诊断甲真菌病的阳性率、准确性和效率。方法临床怀疑甲真菌病患者的病甲,同时进行10%KOH溶液湿片法镜检、真菌培养和CFW荧光染色法镜检,计算各自真菌检出阳性率,并统计CFW法与KOH镜检法或真菌培养的差异,比较KOH与CFW镜下特点。结果共入组100例拟诊为甲真菌病患者。CFW法镜检阳性率64%,KOH法镜检阳性率63%,真菌培养阳性率31%。CFW法与KOH法镜检阳性率比较差异无统计学意义(P0.05);CFW法镜检与真菌培养阳性率比较差异有统计学意义(P0.01)。但CFW制片比KOH更加简单、快速,镜下显示的真菌更清晰易辨。结论 CFW荧光染色法是一种方便、快速、准确性较高的诊断方法,可以提高甲真菌病诊断的准确性和效率。     

金胺O荧光染色在石蜡组织切片麻风病诊断中的应用

目的为了验证金胺O荧光染色法应用于石蜡组织切片麻风杆菌检测的可行性。方法用金胺O荧光法对6例确诊为麻风病的病理组织切片进行染色,并与抗酸染色结果进行对比。结果荧光染色法6例结果均为阳性,在暗背景下麻风杆菌显示明亮淡绿色荧光;在菌量较少荧光染色片中寻找单根麻风杆菌,较抗酸染色片更为容易。结论金胺O荧光染色法可用于石蜡组织切片麻风病的诊断,麻风杆菌单根散在时比抗酸染色法有一定优势。     

Fluorescent vital staining of plant sexual cell nuclei with DNA—specific fluorochromes and its application in gametoplast fusion

DNA－binding fluorochromes are often used for vital staining of plant cell nuclei.However,it is not always sure whether the cells after staining still remain in living state.We chose several criteria to estimate the validity of real vital staining for sexual cell nuclei.These were:the cytoplasmic streaming in pollen tubes whose nuclei were stined,the simultaneous visualization of fluorochromatic reaction and nucleus staining in isolated generative cells,and the capability of isolated.prestained generative or sperm cells to fuse with other protoplasts.The results confirmed that 4,6-diamidino-2-phenylindole(DAPI),Hoechst 33258 and mithramycin could be used as real vital stains,though their efficiency varied from case to case;among them DAPI showed best effect.The fluo rescent vital staining technique offered a useful means foridentification and selection of heterokaryons in gametoplast manipulation studies.     

Structural organization of the toe pads in the amphibian Philautus annandalii (Boulenger, 1906)

We describe the morphology of toe pads in the Himalayan tree frog Philautus annandalii. These are expanded tips of digits and show modifications of their ventral epidermis for adhesion. The outer cells of toe pad epidermis (TPE) bear surface microstructures (0.7 × 0.2 μm), which are keratinized. Their cytoplasm contains no organelles, but pleomorphic nuclei and mucous granules (0.4–0.5 μm) that glue the keratin filaments. In the intermediate cell layer of TPE, similar keratinized microstructures as in the outer cells are present, so that when the outer layer is shed, it is ready with features for adhesion. These cells contain more keratin than the outer cells. The basal cell layer contains thin keratin bundles and usual cell organelles. The dermis contains mucous‐secreting glands, whose ducts open in the outer epidermal cell layer in channels. The dorsal epidermal cells lack surface microstructures and keratin bundles. Ultrastructural features suggest that toe pads utilize the surface microstructures for adhesion aided by mucus, in which the intermediate cell layer seems to bear the shear stress generated during locomotion. Further, TPE can expand and fit into an increased contact area of the substrate. The long, surface microstructures may also help in mechanical interlocking with rough surfaces on plants.     

肺隐球菌病标本在六胺银染色中的最佳温育时间

目的探索肺隐球菌在六胺银染色中的最适当温育时间,以期获得最佳染色效果,提高病理标本肺隐球菌病的诊断率。方法收集厦门大学附属第一医院病理科2017年1月—2017年12月确诊的30例肺隐球菌感染病例,每例病例选取最具代表意义的一个蜡块连续切片3张,不同蜡块为区组因素,将每个蜡块切取的3张切片简单随机化分为3组,每组1张,通过区组随机化将90张切片随机分为A、B、C 3组,A组切片在六胺银染液步骤中采用水温箱60℃温育20～25min,B组切片在六胺银染液中温育30～35min,C组切片在六胺银染液中温育40～50min。以10分制对90张六胺银染色片进行评分,比较3组切片得分情况、显微镜下的染色效果与诊断准确率。结果 B组切片镜下显示:隐球菌染成空心黑色,细胞核呈蓝色,周围肺纤维组织呈淡棕色至棕色,隐球菌与周围肺纤维组织染色对比清晰,染色效果显著高于A组与C组。结论在六胺银染色中,采用六胺银染液在水温箱60℃温育30～35min,病理切片六胺银染色评分结果得分更高、六胺银染色效果更好、肺隐球菌病的诊断准确率更高。     

Chromium (III) enhanced diamine silver staining of proteins and DNA in gels

Chromium (III) enhanced the sensitivities of diamine silver staining of four proteins between 6- and 50-fold over that of the Coomassie Brilliant Blue (CBB)-chromium modified thiosulfate-silver staining method (Zhou et al. Biotechnology Letters, 2002, 24: 1561–1567). Using six dsDNA fragments, the detection limits of this new method was 10 to 30 pg per band, being 10- to 25-fold more sensitive than previous methods.     

绿色荧光蛋白作为分子标记物在微生物学中的应用

荧光染料在微生物学中的应用受到广泛的关注。近年来 ,来源于发光性生物的荧光蛋白进一步丰富了微生物学的研究手段。其中绿色荧光蛋白 (Greenfluorescentprotein ,GFP ,来源于水母 )具有独特的应用价值。在活体研究中 ,GFP相对于其它报告蛋白 (如 β 半乳糖苷酶 )在原位、实时的微生物生理生化研究中有很多优越性。对GFP作为分子标记物在微生物学中的应用进行回顾 ,对GFP在微生物与宿主相互作用、生物膜(biofilm)、生物降解、细菌与原生动物相互作用、基因转导、基因表达、蛋白质定位以及生物传感器等领域的应用进行讨论 ,并扼要介绍了一些应用于荧光观察和定量分析的方法。