产β-葡萄糖苷酶的菌种的筛选,鉴定及其酶学特性

β-葡萄糖苷酶来源广泛,几乎存在于所有的生物体中,而不同来源的β-葡萄糖苷酶其性质也各不同.本文利用七叶苷分离培养基从土样中分离筛选出产6种β-葡萄糖苷酶时间较快的菌种,其中发现菌种WGEA1酶活性较高,随后对菌种WGEA1进行初步的鉴定并且采用DNS法测该菌株所产粗酶液的酶学特性.酶学特性表明,WGEA1产的β-葡萄糖苷酶最适温度是在50~55℃之间,最适pH在6~7之间;在低于50℃条件下,pH为5~8时,酶活较稳定,同时在最适反应时间30 min下,金属离子和有机溶剂都对酶活性影响很大,这些发现都为在非水相体系中酶法合成烷基糖苷奠定了一定的基础.     

果胶裂解酶的分离,提纯及其特征

用等电聚焦层析方法从酶制剂Pectinex Ultra SP-L中分离获得制备标准的内切果胶裂解酶(PL),并测定了这个内切-PL的一些重要物理、化学及生物化学特性。用分析用等电聚焦电泳,生物化学反应及薄层层析证明所制备的PL为纯品。所制备的内切-PL的一些特性数据如下:pl∶pH=3.9,K_m=1.91 mg/ml,V_(max)=0.88单位/min。用苹果果胶(酯化度为71%)为底物时,PL的最适pH为6.0,最适温度是60℃。用H-果胶(酯化度为94%)为底物时,作用的最适pH为8.5,最适温度是65℃。所制备的PL是高温稳定和pH稳定的。PL的活性被Na~+激活。     

植物几丁质酶的结构,基因及其表达

几丁质酶按其蛋白氨基酸序列结构的特征及同源性可分为六类,即：ＣｌａｓｓⅠ－Ⅵ。ＣｌａｓｓＩ在蛋白氨基酸结构上包括三个功能区域,Ｎ－端是富含半胱氨酸的几丁质结合工,约４０个氨基酸;Ｃ－端是酶的催化区,也是酶的主要功能区域,约３００个氨基酸;二者通过一个多变的交联区连接在一起。ＣｌａｓｓⅡ仅具有类似于ＣｌａｓｓⅠ的酶催化区域,而没有几丁质结构区和交联区。ＣｌａｓｓⅢ几丁质酶在氨基酸序列上与ＣｌａｓｓⅠ     

酶在食,药用菌菌种选育中的应用

食、药用菌无论是在自然界,还是人工栽培,它们都依赖于自身分泌出来的胞外酶,分解基物材料中的多聚体纤维素和木素作为自己的营养源。在相同条件下,不同菌株受基物诱导而产生的胞外纤维素酶和漆酶的能力的差异,就必然表现出在适应性和对基物的降解利用能力上的差异。...     

咖啡因对小麦幼苗生长,过氧化物酶同工 酶及根尖细胞有丝分裂的影响

３０ｐｐｍ以下浓度的咖啡因对小麦种子萌发,幼苗生长和胚根长度均有明显抑制作用。随着咖啡因浓度的增加,根尖细胞有丝分裂指数明显下降。低浓度时,过氧化物酶同工酶和苹果,酸脱氢酶没有变化,但高浓度时,使得这两种酶的活性几乎消失。     

在测定过氧化氢酶活动度时,对酶提取液和过氧化氢液适当用量的确定

在生活的植物中,过氧化氢酶活动度的大小,可以作为表示新陈代谢作用强弱的指标。这在不同种类的植物,或同种植物的不同生长階段,都可能有很大的差别。当我们进行测定同种植物的不同处理,或同一处理不同生长階段过氧化氢酶活动度时,必需考虑到所加过氧化氢析出氧的体积能用同一容器来测定。因此,所用滴管容积不宜太小,以100毫升为宜。尤其应考虑到氧析出不要太快,控制其在15分鈡以上才陆续而缓慢地析出完畢为適当。倘在1—2分钟内氧就完全析出,那末所得数据,就不能顯著地反映出各处理间的差异,因而测定就不能得     

猪肾酰化酶作用机制的研究——Ⅱ.酶蛋白中巯基,咪唑基与酶活力的关系

(1)酰化酶能被各种巯基試剂所抑制,其中以PCMB的抑制最为明显,在所有的抑制情况下,都保留有一定的剩余酶活力。巯基乙酸能完全解除PCMB的抑制,恢复程度随所加的浓度而定,当巯基乙酸过量子抑制剂150倍时,酶活力反而高于原始活力20%,若浓度再高,酶活力又重新下降。(2)酰化酶經光氧化后活力就迅速丧失,但加对色氨酸殘基专一的試剂N-溴代琥珀酰亚胺并不影响酶的活力。溴代乙酸在較高浓度下亦能抑制酶的活力,抑制程度在作用pH为5左右时較为明显。(3)pH不影响酰化酶与底物結合的米氏常数K_M,而影响最大反应速度V。从pH对V影响的作图中求出活性基团的pK值为5.9和8.6,分別相当于酶蛋白中組氨酸和半胱氨酸的解离常数。(4)从实驗結果中推測,組氨酸和半胱氨酸是酰化酶的必需基团,它們可能与酶中金属离子以配位价的形式結合而共同构成一活性中心,在酶催化反应吋底物先通过金属离子与酶相結合,然后再进一步被催化。     

琼胶酶酶学研究进展

琼胶酶是一类能够降解琼胶多糖的酶的总称,根据其降解琼胶多糖的作用方式不同,分为α-琼胶酶(EC3.2.1.158)和β-琼胶酶(EC3.2.1.81)两种。本文从琼胶酶的酶学性质、晶体结构、催化机制和酶基因研究等方面,综述了近年来国内外琼胶酶酶学的最新研究进展,这将有益于琼胶酶未来的应用。     

青霉素G酰化酶制备,晶体生长及初步晶体学研究

用基因工程菌Ｅ．ＣｏｌｉＡＥ１０９生产了青霉素Ｇ酰化酶,该酶经分离纯化后,摸索了晶体生长条件。用ＰＥＧ８０００作为沉淀剂以两种方法获得了晶体。晶体衍射能力超过２．０,初步晶体学研究显示晶胞参数ａ＝５２．１９,ｂ＝６９．３５,ｃ＝７３．９０,α＝６８．８０°,β＝７１．４０°,γ＝７４．２０°,空间群Ｐ１,收集了一套２．５分辨率的数据。     

桂枝汤对胃H,K—ATP酶活力的影响及对消炎痛引起胃H,K—ATP酶抑…

中药桂枝汤在整体水平上能极其显著的激活胃Ｈ,Ｋ－ＡＴＰ酶的活力,而离体水平上对该酶呈现明显抑制效应,消炎痛在整体和离体水平上均对胃Ｈ,Ｋ－ＡＴＰ酶呈现抑制作用,。桂枝汤在整体水平上对消炎痛引起胃Ｈ,Ｋ－ＡＴＰ酶的抑制作用有保护效应,这些结果提示桂枝汤可能通过机体整体调节实现其提高胃Ｈ,Ｋ－ＡＴＰ酶活力作用的,从而在Ｈ,Ｋ－ＡＴＰ酶水平上初步阐述了中药桂枝汤调整胃功能的可能作用机理,而且也为扩充桂枝