抗人淋巴细胞免疫球蛋白的临床应用进展

抗人淋巴细胞免疫球蛋白制品已经临床研究,证实有效,其中包括在肾、心脏、肝等器官移植的免疫排斥预防和治疗,骨髓移植的移植物抗宿主反应的预防,以及再生障碍性贫血的治疗等.     

传代人淋巴细胞免疫猪的免疫效果初探

目的用传代人淋巴细胞替代人T淋巴细胞进行猪的免疫,用于试制抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,P-ATG)免疫猪血浆,并评价其免疫效果。方法大量培养传代人淋巴细胞至免疫所需浓度及数量,采用常规猪免疫程序进行2次基础免疫及1次加强免疫,获得免疫猪血浆,用E玫瑰花环形成抑制试验和淋巴细胞毒试验进行效价检测。结果 3批免疫猪血浆的E玫瑰花环形成抑制试验结果均达到1∶1 000(花环形成率均小于对照组平均花环形成率的75%),淋巴细胞毒试验结果均达到1∶500(淋巴细胞死亡率均大于20%),效价均达到《中华人民共和国药典》2015版(三部)中生产用免疫猪血浆的效价标准。结论传代人淋巴细胞可作为人T淋巴细胞的替代免疫原进行猪的免疫,获得了效价合格的免疫猪血浆,用于P-ATG的制备。     

以人精子抗原消化道免疫后的体液免疫反应

The inbred Balb/c and C57 mice, and the outbred Swiss Webster mice were intragastrointestinally immunized with human sperm antigens. The lymphocytes from the spleen, mesenteric lymph node (MLN), Peyer's patch (PP) and uterus or epididymis were isolated and cultured. The lymphocyte-secreting antisperm IgG and IgA and the antisperm antibodies in the gut wash and serum were determined with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In the Balb/c and Swiss Webster mice, the immune responses to sperm have shown to be stronger than that in C57, stronger in female than in male. The antigenicity of sperm membrane extracts seems to be higher than that of whole sperm. Antisperm antibodies secreted by lymphocytes from the epididymis and uterus have demonstrated to be detectable. For stimulation of the local immune response, the intra-PP and intralumina immunizations are more effective than others.     

类球红细菌的免疫活性评价

目的 :评价类球红细菌的免疫活性。方法 :巨噬细胞吞噬试验、淋巴细胞转化试验、IL- 2的诱生和检测试验。结果 :类球红细菌 1号株具有调节和增强巨噬细胞吞噬功能 ,表现在免疫抑制组小鼠用光合细胞灌胃数周后 ,腹腔巨噬细胞吞噬百分率提高 6 1% ,吞噬指数提高 5 9% (P<0 .0 1)。在体外实验中 ,光合细菌三种不同抗原 (Ag1 、Ag2 、Ag3 )在一定程度上都有刺激脾淋巴细胞转化功能 ,特别是 Ag3 作用更为明显 ;在正常组 ,刺激指数提高了 6 5 % ;免疫抑制组 ,提高了 38% (P<0 .0 5 )。不管在正常组或免疫抑制组 ,Ag1 、Ag2 、Ag3 都具有诱生脾淋巴细胞产生 IL- 2的活性 ,其中 Ag2 的活性较明显 .结论 :类球红细菌 1号株对机体有一定的免疫活性。     

用体外免疫的人淋巴细胞建立抗破伤风类毒素的...

Human tonsil cells in vitro immunized with tetanus toxoid were fused with human-mouse heteromyeloma line RF to generate human-mouse hybridomas. Hybridoma 891112-50 was cloned and 2 subclones (891112-50-3 and -4) were obtained. The secreted antibodies from the subclones were antigen specific, since they did not cross react with three irrelevant antigens (OVA, TCS and F gamma G). The hybridomas were quite stable. After 13 passages in tissue culture flasks, they still retained their antibody secreting ability. From flow cytometry analysis the subclone 50-3 was more stable than the subclone 50-4. The human immunoglobulin contained in supernatant collected during regular passages was equivalent to 69.6 micrograms/ml.     

抗抑郁症药物的临床应用进展

抑郁症（depression）是一类受遗传因素影响,有一定生物学基础的疾病,其发生还受社会、心理、文化等多因素共同作用。抑郁症是以情感性精神障碍为主要表现,显著而持久的心境低落为主要特征的综合征。主要表现为情绪低落,言语减少,睡眠障碍,甚至企图自杀等症状[2]。其以高发病率、高复发率和高自杀率对社会造成极大危害,对个人、家庭产生深远的负面效果和沉重的经济负担。     

抗蛇毒血清临床应用体会

自1984年以来,我们应用抗蛇毒血清治疗各类毒蛇咬伤600余例,取得了满意的疗效.现就我们在临床应用中的一些体会介绍如下.1 运用抗蛇毒血清应及时足量抗蛇毒血清治疗毒蛇咬伤具有见效快,疗效确切等优点.但由于起初我们缺乏经验,病人就诊后,无论病情轻重,一律予先试敏后用药,结果一些如银环蛇咬伤等病情较危重者,试敏时间未到,或试敏阴性后在注药过程中,患者已出现呼吸麻痹等严重中毒症状,而被迫采取气管插管等急救措施,既给治疗与护理带来了许多困难,又影响疗效,更增加了病人的痛苦.另外,在及时用药的同时,把握好用药剂量,也极为重要.若药物用量不足,则全身中毒症状难以控制,或病情继续发展、恶化,甚者死亡.笔者曾遇1例尖吻蝮蛇咬伤严重中毒的患者,入院后即予注射精制抗五步蛇毒血清80001U,中毒症状未能得到控制,并进一步发展、加重,准备再予追加剂量时,患者拒绝而自动出院,结果死于多脏器功能损害.通过临床实践,吸取教训,我们总结出了“以缓治轻,以快治重”的给药方法和“酌情用量,中病方止”的用药原则,既病情较轻者,采用常规试敏阴性后用     

检测抗核抗体谱对自身免疫性疾病的临床应用

目的:分析自身免疫性疾病患者抗核抗体谱检测结果,探讨抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病诊断中的应用。方法:分别采用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测130例自身免疫性疾病患者和20例健康人的ANA和抗核抗体谱。结果:ANA在各种自身免疫性疾病中均有一定的阳性检出率,ANA在SLE中的检出率最高,阳性率为89.6%,其次为ITP、MCTD和SS。抗核抗体谱中的各种自身抗体在不同的自身免疫性疾病中有不同的敏感性和特异性。结论:采用间接免疫荧光法对ANA的检测对自身免疫性疾病有重要的筛查意义,抗核抗体谱检测对自身免疫性疾病的诊断有重要意义。     

以人精子抗原消化道免疫后的体液免疫反应

在Balb/c、C57和昆明鼠的消化道不同部位以人精子抗原免疫后,取其脾、肠系膜淋巴结、Peyer氏淋巴小结及子宫或附睾中的淋巴细胞进行培养。以ELISA法测定了这些部位的淋巴细胞所分泌的以及免疫小鼠肠道冲洗液和血清中的抗精子抗体。结果提示,Balb/c和昆明鼠抗精子免疫反应较强,而且雌性强于雄性。免疫部位以小肠及Peyer氏淋巴小结内注射的免疫效果较好,不仅可引起消化道局部免疫反应,而且子宫、附睾等生殖道组织也有淋巴细胞分泌抗精子抗体。     

抗人Leptin单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

本研究用本室制备的重组人Leptin为抗原,以鼠伤寒沙门氏裸菌为佐剂,通过脾内、腹腔、静脉三种途径相结合免疫BALB/c鼠,以PEG为促融剂,将免疫小鼠的脾细胞和SP2/0细胞进行融合,HAT、HT选择性培养基、间接ELISA筛选阳性克隆,有限稀释法进行4次克隆化,获得三株能稳定分泌抗人Leptin单抗的杂交瘤细胞株。对所获得的细胞株及其分泌的单抗特性进行较系统的鉴定显示,获得的单抗特异性高,亲和力强,免疫球蛋白亚类均为IgG3。初步应用的研究显示,获得的单抗不仅可用于体外Leptin的免疫印迹检测,而且可通过免疫组化、免疫荧光等技术用于脂肪组织中Leptin的检测,为Leptin的基础和临床研究奠定了基础。     

免疫组织化学标记新技术的临床病理应用

随着免疫组织化学在肿瘤病理诊断中的应用 ,肿瘤标记物不断推陈出新 ,不仅丰富了肿瘤标记物的内容 ,而且有力地推动了诊断免疫组织化学的深入发展 ;与此同时 ,免疫组织化学标记方法学也取得了可喜的成果 ,由于各种新方法的问世 ,不仅简化了操作步骤 ,缩短了标记时间 ,使工作效率得到显著提高 ,方法的敏感性特异性也得以明显增强 ;自动免疫组织化学染色机的应用 ,它集诸多优点为一体 ,标志着免疫组织化学标记技术已基本实现了规范化操作。现将结合我们体会作如下介绍 :一、微波在免疫组织化学中的应用微波以高频电磁波热效应和化学效果 ,加速…     

临床应用抗蛇毒血清皮试的体会

抗蛇毒血清是马血清制剂 ,异体蛋白对人体有过敏反应 ,传统办法是使用前必须作皮试。但皮试时有的个体会出现假阳性或假阴性反应。对蛇伤患者来说 ,即使是皮试阳性 ,为抢救患者生命 ,必须注射抗蛇毒血清。按传统的脱敏注射法既麻烦又耽误治疗时间。早在 1 973年江苏无锡崇安医院应用分段稀释滴注法治疗蛇伤患者数千例 ,均不采用皮试法 ,却安全有效。作者 1 999年至 2 0 0 0年收治毒蛇咬伤 32 5例 ,其中使用抗蛇毒血清配合中西药物辅助治疗 1 67例 (蝮蛇咬伤 1 5 6例 ,烙铁头蛇咬伤2例 ,眼镜蛇咬伤 7例 ,五步蛇咬伤 2例 ) ,为验证皮试假阳性…     

用体外免疫的人淋巴细胞建立抗破伤风类毒素的杂交瘤克隆

我们应用破伤风类毒素体外免疫的人扁桃体细胞和人-鼠异源骨髓瘤RF 系细胞进行融合,从中筛选到一株杂交瘤细胞89112—50,并通过克隆化筛选获得了两个亚克隆,其分泌的抗体是抗原特异的,和三种抗原(OVA、TC-S、FYG)都不交叉,分泌抗体的功能也比较稳定,在培养瓶内连续扩增传代13次后,仍维持相当高的抗体分泌能力,在常规传代培养过程中所收集的培养物上清液中抗体的含量平均为69.6μg/ml。     

抗人IgM单克隆抗体的研究—脾内免疫建立抗人IgM单克隆抗体杂交瘤细胞株

用多发性骨髓瘤病人血清中提纯的ＩｇＭ抗原,用脾内免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠后与Ｓｐ２／Ｏ骨髓瘤细胞融合,获得了７株分泌人ＩｇＭ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为２５Ｇ１、２５Ｇ３、２５Ｇ４、２５Ｇ５、２５Ｄ２、２５Ｄ３和２５Ｄ５。注射同系小鼠后可诱生含较高效价抗人ＩｇＭ腹水（ＰＨＡ＝１２１２）。该杂交瘤细胞经组织培养传代半年,冻存１４个月后复苏,其分泌ＩｇＭ性能稳定。用ＰＨＡ、ＥＬＩＳＡ做人ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ阻断试验,仅ＩｇＭ可阻断。用琼脂糖双扩散证明其与羊抗人ＩｇＭ有共同沉淀线     

HIV/HCV共感染者抗逆转录病毒治疗后免疫恢复情况

由于具有相同的传播途径,人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)和丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)共感染非常普遍,但是关于合并感染的程度,两种病毒之间的相互关系,在艾滋病抗逆转录病毒治疗(Antiretroviral therapy,ART)前后,HCV合并感染对HIV患者免疫细胞恢复的影响仍不明确。为了通过分析CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞数的变化,以了解辽宁省HIV/HCV共感染者ART后免疫恢复的情况,本研究从辽宁省艾滋病抗病毒治疗数据库中筛选符合要求的HIV感染者和HIV/HCV共感染者,收集感染者基本人口学资料及HCV抗体检测结果、HIV/HCV共感染途径等资料。采用t检验或卡方检验进行组间比较,采用Kaplan-Meier乘积极限法绘制生存分析函数图。结果显示,本研究共纳入HIV感染者12742人,HIV/HCV共感染者340人。HIV感染者和HIV/HCV共感染者的不同人口学特征均差异显著(P<0.001)。HIV感染和HIV/HCV共感染者ART治疗后CD4⁺细胞数和CD4⁺/CD8⁺比值显著升高(P<0.05),CD8⁺细胞数比ART前显著下降(P<0.05)。HIV/HCV共感染者随着ART时长,CD4⁺T淋巴细胞数恢复情况始终显著低于HIV感染者(P<0.05)。生存分析曲线表明,HCV/HIV共感染者从艾滋病诊断开始随着ART的治疗CD4⁺细胞恢复情况显著低于HIV感染者,Log-Rank检验统计量为4.483(P=0.034)。本研究揭示,HCV感染对ART患者CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞的恢复有影响。ART后HIV/HCV共感染者中CD4⁺T淋巴细胞计数的改善低于HIV单一感染者,并且单一感染患者对ART的反应比合并感染患者更好。因此,建议在启动ART之前,对每个感染HIV的患者进行HCV抗体筛查。     

抗蝮蛇毒血清的质量提高和临床应用

精制抗蝮蛇毒血清问世后,我国蝮蛇伤死亡率大为降低,随着抗血清工艺的不断改进和临床医生的积极配合,经近万例蛇伤患者治疗统计,死亡率可达0%,过敏反应率可降为0.3%以下,而且对竹叶青蛇伤及烙铁头蛇伤均有效。     

人淋巴细胞的体外抗体诱发及其在杂交瘤中的应用

本文应用手术切除的人扁桃体或外伤脾为材料,在体外诱发了针对不同类型抗原的抗体应答,其中包括羊红细胞、卵白蛋白、破伤风类毒素和乙肝病毒表面抗原的抗体应答,并应用破伤风类毒素体外激活的人B淋巴细胞制作杂交瘤。根据多次融合的结果表明其融合率平均为52.1%,抗体阳性率为15.6%,分泌IgM和IgG抗体的阳性集落孔的比例接近1∶1。我们还研究了体外诱发人淋巴细胞产生抗体的条件,发现细胞类群(在本研究中是采用不同的细胞分离方法)是主要的影响因素,值得进一步研究。目前所建立的体外免疫实验系统,主要是应用尼龙毛柱法富集B细胞,在96孔培养板上加上一定剂量范围的抗原刺激。为了协助淋巴细胞反应,可再加10%的T细胞条件培液或少量丝裂原混合物(LPS0.1μg/ml+PWM1μg/ml)。     

人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104抗癌细胞活性的检测

检测人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104对癌细胞的杀伤活性以及此杀伤活性对白细胞介素-2的依赖性,动态观察其体外增殖能力.用台盼兰拒染法计算细胞扩增倍数;用MTT法检测细胞毒杀伤活性,实时观察细胞的杀伤过程.结果表明, 在200 IU/ml IL-2刺激下,TALL-104细胞增殖能力较强;在效靶比5∶ 1,作用时间为24 h,TALL-104细胞表现出对癌细胞MCF-7和A-431较高的杀伤率分别为50.4%和69.5%;当作用时间在72 h以内,效靶比不高于10∶ 1时,杀伤率随作用时间和效靶比的增加而明显升高(P<0.05);最大杀伤率分别为79.8%(MCF-7细胞)和90.4%(A431细胞).因此,TALL-104细胞体外增殖能力较强,其细胞毒活性不严格依赖于IL-2的存在.     

抗蛇毒血清的研究和临床应用概述

抗蛇毒血清是用蛇毒作为抗原 ,给实验动物反复进行注射免疫 ,一定时间后使实验动物产生一定要求量的抗体 ,然后采血分离提纯而成 ,是专供治疗毒蛇咬伤的特异性生物制品 ,同时为蛇伤患者提供速效、高效、特效的药物。注射抗蛇毒血清使人体立即获得对相应蛇毒的抵抗力 ,以中和蛇毒的毒性作用 ,这就是蛇伤的人工被动免疫。抗蛇毒血清的疗效 ,虽然各国报道不一 ,但有一点是共同的 ,即无论是动物试验还是临床疗效 ,在现有的蛇伤药物中 ,还没有一种药物的疗效能超过它 ,其它药物目前还只能作为抗蛇毒血清的辅助治疗。1　抗蛇毒血清的种类及其特点…     

抗蛇毒血清的临床应用

１９９５年３月至１９９８年８月,梅州市蛇伤防治网络共收治毒蛇咬伤患者２７１例,均采用抗蛇毒血清治疗,效果满意,现报告如下。１临床资料１．１一般资料本组蛇伤患者２７１例,其中男１８３例,女８８例;年龄最小２岁,最大６９岁,平均年龄３１岁;农民２２１例,...