高羊茅的组织培养和植株再生

1　植物名称　高羊茅 (Ｆｅｓｔｕｃａａｒｕｎｄｉｎａｃｅａ) ,又称苇状羊茅。2　材料类别　成熟种子。3　培养条件　胚性愈伤组织诱导培养基 :( 1 )ＭＳ大量及微量元素 (下同 ) 2 ,4 Ｄ 9.0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ;( 2 )ＭＳ 2 ,4 Ｄ 5 .0。分化培养基 ( 3)ＭＳ 6 Ｂ     

芝麻愈伤组织诱导与植株再生体系的建立

以芝麻栽培种(Sesamum indicum, 2n=26)、野生种(S. radiatum, 2n=64; S. schinzianum, 2n=64)及其远源杂交后代(S. schinzianum × S. indicum)为材料, 研究了不同基因型、外植体类型、激素种类及其浓度对芝麻愈伤组织诱导及植株再生的影响, 建立了芝麻愈伤组织诱导及高频植株再生的技术体系。结果表明, 6-BA/NAA激素组合有利于绿色紧密型愈伤组织的形成及分化; 最佳愈伤组织诱导及分化培养基为MS+ 0.1 mg·L^–1NAA + 2.0 mg·L^–16-BA+ 30 g·L^–1蔗糖。在该培养条件下, 野生种下胚轴愈伤组织的诱导率最高为97.50%, 分化率为94.02%; 栽培种下胚轴愈伤组织的诱导率最高为40.60%, 分化率为8.16%; 远缘杂交后代幼胚外植体愈伤组织的诱导率最高为46.67%, 分化率为89.29%。该研究结果为芝麻转基因技术体系的建立及新种质创制奠定了基础。     

陇东地区野生紫花苜蓿植株再生体系的建立

以陇东地区野生紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,MS为基本培养基,研究划破种皮以及不同生长调节物质种类与配比对愈伤组织诱导和分化影响的结果表明：划破种皮可提高种子发芽率;在外植体中下胚轴的愈伤组织诱导率最高,达92.2%;最佳愈伤组织诱导培养基为MS＋2,4-D2.0mg·L^-1（单位下同）＋NAA1.0＋2.5%蔗糖＋0.6%琼脂,最佳分化诱导培养基为MS＋KT0.5＋NAA0.3＋2.5%蔗糖＋0.6%琼脂,成苗培养基为1/2MS＋NAA0.1＋1%蔗糖＋0.6%琼脂。     

草麻黄植株再生体系的建立

目的:以草麻黄的子叶为材料,建立草麻黄植株再生体系.方法:采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织分化和不定芽生根研究.结果:MS+2,4-D 2.0mg/1+6-BA 1.0mg/l为诱导子叶形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;MS+2,4-D 1.5mg/l+6-BA 1.5mg/l是愈伤组织的最佳继代培养基;MS+IAA 0.2mg/l+TDZ 2.0mg/l是愈伤组织不定芽分化的最佳培养基,分化率为75%;试管苗生根培养基为MS+2,4-D 1.0mg/l.结论:建立了草麻黄子叶再生系统,为开发和保护麻黄野生资源提供一定的材料来源和技术方法.     

高羊茅和其他羊茅植株再生与遗传转化研究进展

高羊茅、紫羊茅和草地羊茅均为很重要的多年生冷季型牧草与草坪草,生物技术在其品种改良中具有很大的应用潜力.30年来,三种羊茅的组织培养、胚性培养物的长期保存以及遗传转化等研究取得了较大进展,已建立起多种植株再生体系和遗传转化技术,但作为单子叶植物,这些草种的组织培养和转基因遗传改良也还存在一些问题.本文就以上几方面的内容进行了综述.     

高羊茅和其他羊茅植株再生与遗传转化研究进展

高羊茅、紫羊茅和草地羊茅均为很重要的多年生冷季型牧草与草坪草,生物技术在其品种改良中具有很大的应用潜力。30年来,三种羊茅的组织培养、胚性培养物的长期保存以及遗传转化等研究取得了较大进展,已建立起多种植株再生体系和遗传转化技术,但作为单子叶植物,这些草种的组织培养和转基因遗传改良也还存在一些问题。本文就以上几方面的内容进行了综述。     

何首乌愈伤组织诱导和植株再生

1　植物名称　何首乌 (Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ)。2　材料类别　蒙山阳坡路旁野生植株上的嫩芽。3　培养条件　诱导愈伤组织培养基 :(1 )ＭＳ 6 ＢＡ 1ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＮＡＡ 1 ;(2 )ＭＳ 6 ＢＡ 2 ＮＡＡ 1 ;(3) 1 /2ＭＳ ＮＡＡ 0 .3;(4) 1 /2ＭＳ 2 ,4 Ｄ 0 .1 ;(5 ) 1 /2ＭＳ 2 ,4 Ｄ0 .3;(6 ) 1 /2ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1 ;(7)ＭＳ 6 ＢＡ 3 2 ,4 Ｄ 1。芽分化培养基 :(8)ＭＳ 6 ＢＡ 1 ;(9)ＭＳ 6 ＢＡ 2 ;(1 0 )ＭＳ 6 ＢＡ 5 ＮＡＡ 0 .1 ;(1 1 )ＭＳ 6 ＢＡ 2 ＮＡＡ 0 .4;(1 2 …     

骨干玉米自交系丹598遗传再生体系的建立

目的:以玉米骨干自交系丹598的幼胚为外植体,诱导愈伤组织建立遗传再生体系。方法:探讨胚龄、培养基种类、2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响。结果:在授粉后16～18 d,2,4-D浓度为2.0 mg/L时诱导最佳;设置N6、NB、改良NB、MS、MB等5种培养基,筛选出改良NB培养基为最佳诱导培养基;分化培养基中添加1 mg/L激动素、0.5 mg/L 6-卞基嘌呤和0.5 mg/L萘乙酸能促进绿苗分化和根系生长。结论:建立了玉米自交系丹598的优良再生体系,为以后的基因转化工作打下了良好基础。     

大果良种沙棘愈伤组织诱导及植株再生的研究

大果良种沙棘的幼嫩茎尖,茎段外植体接种在MS,1／2MS附加不同浓度配比的IAA,IBA,BA,NAA培养基上可诱导茎尖及腋芽生长,将诱导产生的无性系芽接种在MS或1／2MS附加BA0．3－0．5mg/L,NAA0．05mg/L的培养基上可形成丛生芽,同时在小叶片和嫩茎上诱导产生愈伤组织,继续培养愈伤组织表面形成大量的绿色突起,进一步分化成不定芽,在相同培养基上,不定芽上可直接产生不定芽,从而形成多达数百个的不定芽族,不定芽长至3cm时切下转至1／2MS附加IAA或IBA 0．2mg/L的培养基上可生根而形成完整 的再生植株。     

莲胚愈伤组织诱导及植株再生的研究

关于莲胚组织培养国内外有过研究,但迄今利用组织培养技术从莲胚诱导愈伤组织形成再生植株的成功例子尚未见有报道。     

高羊茅转基因研究进展

高羊茅为很重要的多年生冷季型草坪草,生物技术在其品种改良中具有很大的应用潜力。本文对高羊茅植株再生体系的建立及遗传转化方面的研究进展进行了综述。同时,对高羊茅转基因研究中存在的问题和前景作了讨论。     

欧洲百合愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

以欧洲百合(Lilium martagon)无菌苗鳞片为外植体, 探讨不同植物激素组合及光暗培养条件对愈伤组织诱导、增殖和再生不定芽的影响, 进而建立欧洲百合高效再生体系。结果显示, 诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.2 mg?L^-1 TDZ+0.5 mg?L^-1 NAA, 诱导率为77.14%。在添加TDZ和NAA组合的培养基中进行继代培养, 愈伤组织极易褐化, 胚性活性下降; 采用添加6-BA和NAA组合的培养基可改善愈伤组织的褐化现象, MS+0.5 mg?L^-1 6-BA+0.1 mg?L^-1 NAA是愈伤组织增殖的最佳培养基, 增殖指数为2.93, 表明6-BA在愈伤组织状态维持中起关键作用。暗培养条件下愈伤组织的诱导率、增殖指数和芽再生系数最高, 分别可达77.14%、2.93和5.43, 且愈伤组织生长状态较好, 不定芽生根正常。研究建立的欧洲百合高效再生体系对于百合种质资源保存、基因工程育种及在国内的推广应用具有重要意义。     

药用植物金荞麦愈伤组织诱导与植株再生

目前转基因技术已成为植物定向遗传改良的重要手段,而建立稳定高频的离体再生系统是实现遗传转化的基础和前提.本试验以25 ～30 d苗龄的金养麦(Fagopyrum dibotrys)无菌苗叶片、茎节间、叶柄为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究.结果表明:叶片在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 1.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率达到89％.茎节间在MS +2,4-D 2.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率为87％.叶柄在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L培养基上的最高诱导率仅为54％.愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +6- BA2.0 mg/L +TDZ0.2 mg/L +NAA0.2 mg/L;金荞麦不定芽在1/2 MS +NAA 0.5 mg/L的培养基上生根效果最好.组培再生植株经炼苗后移栽到田间成活率达80％以上,且生长表现正常.高频完整再生体系的建立,为金荞麦进一步遗传操作和扩大药材资源奠定了基础.     

沙葱叶基愈伤组织原生质体再生体系的建立

沙葱是一种具有抗旱抗寒、抗病性和适应性强等生理特性的荒漠植物.为开发利用其固有的遗传资源,本研究利用细胞工程技术建立了沙葱(Allium mongolicum Regel)叶基愈伤组织原生质体的分离、培养和植株再生实验体系.研究结果表明,酶法分离原生质体的产率和分裂频率明显取决于用于制各原生质体的愈伤组织的状态.转代培养7～10d的松软愈伤组织可分离出大量有活性的.在附加2.0mg/L2,4-D、0.2mg/L激动素、500 mg/L水解乳蛋白、0.4 mol/L甘露醇和2%蔗糖的MS培养基中进行液体浅层培养,4～5 d后出现第一次原生质体分裂;7～10d出现第二次分裂.结果显示原生质体的分裂频率大约为5%;4周后,可见到小愈伤组织.当将原生质体分裂形成的愈伤组织转移到附加2.0mg/L6-苄氨基嘌呤(或激动素)和0.4mg/L萘乙酸(NAA)的MS固体培养基上,并在低光照条件下培养后,从愈伤组织上分化出了不定芽,进而发展成小植株,并移栽成活.本研究对沙葱抗逆遗传品质用于经济植物遗传改良的研究奠定了可行的实验基础.     

剪股颖愈伤组织诱导与植株再生

以匍匐剪股颖的成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及再生体系进行了研究。结果表明:愈伤组织诱导合适的培养基为MS 6mg.L-1 2,4-D 0.2mg.L-1 TDZ 500mg.L-1 CH,诱导率达到68.1%;MS 5mg.L-1 2,4-D 0.1 mg.L-1TDZ 500mg.L-1 CH为愈伤组织继代较合适的培养基;愈伤组织分化的合适培养基为MS 0.3mg.L-1 TDZ 0.5mg.L-1 6-BA,分化率达到52.7%。随着愈伤组织继代次数的增加,胚性愈伤组织的分化能力没有明显的降低,这可为后续的遗传转化长期提供受体材料。     

西兰花再生体系的建立与优化

目的:以西兰花无菌苗为材料,对影响西兰花再生的各种素进行研究,建立并优化西兰花的再生体系.方法:用组织培养法,对西兰花的外植体进行诱导生芽、生根.结果:不同品种的再生率差别较大,珠绿和青秀两个品种的再生率达91%以上,而鼎丰一号仅为80.3%;培养6 d 的下胚轴分化能力最强;当培养基中添加3 mg/L 6-BA 和0.2 mg/L IAA 时,下胚轴的分化率最高,玻璃化程度也降到最低;当培养基中添加0.2 mg/L IBA 或0.2 mg/L NAA时,可成功诱导不定芽生根.结论:建立并优化了西兰花再生体系,为西兰花遗传转化体系的建立奠定了基础.     

农杆菌介导的高羊茅高效遗传转化和转基因植株再生

用带有质粒pDBA121(含hpt基因和bar基因)的农杆菌EHA 105转化高羊茅(Festucaarundinacea Schreb.)胚性悬浮细胞,建立了可重复的、高效的农杆菌介导的高羊茅遗传转化系统.商业用的除草剂Basta直接用于转化细胞的筛选.基因型、受体材料的类型、培养基成分和筛选剂影响农杆菌介导的转化频率.悬浮细胞的农杆菌转化效率为每克悬浮细胞再生2.85～10.9株转基因植株,大大高于基因枪法的高羊茅转化效率(2～5株).经PCR分析和Southern杂交检测表明,bar基因已整合进入高羊茅基因组,转基因植株Basta喷洒试验表明bar基因已成功地实现高水平的表达.此转化系统的建立为高效地将外源有用基因导入高羊茅并高效稳定地表达奠定了基础.     

草坪草-高羊茅遗传育种研究进展

随着我国草坪业的快速发展 ,草坪草遗传育种工作越来越受到人们的关注。简要介绍了高羊茅的育种历史和现状 ,并对高羊茅植株再生体系的建立及遗传转化方面的研究进展进行了综述。此外 ,还提出了我国高羊茅育种的几点建议。