循环表皮细胞的检测

事实上,很早以前——早在1869年——科学家就发现癌症细胞可以在血液中消失。20世纪50年代中期,一些研究者认为这些所谓的循环肿瘤细胞（CTC）可以帮助临床学家更早的捕获癌症或者检测治疗的效果。一些研究人员更专业的倾向于称之为循环表皮细胞——而不一定是循环肿瘤细胞本身——然而CTC的称谓仍然广泛使用。抛开这些术语不管,     

BRG1在肺癌组织和肿瘤细胞系中表达下调原因初探

前期的研究表明：在肺癌及多种肿瘤细胞系中,BRG1（brahma-related gene 1）的mRNA和蛋白质表达下调或缺失,但影响BRG1表达下调的原因并不清楚.因此,用PCR-SSCP（single strand conformation polymor-phism）方法检测18例肺癌组织和15株肿瘤细胞系DNA,并经测序证实：其中有1例肺癌组织的BRG1外显子25第3590位碱基存在T→C的点突变,其编码的BRG1蛋白第1171位氨基酸相应地由Val（缬氨酸）→Ala（丙氨酸）,该突变位于BRG1蛋白最重要的功能区（依赖DNA的ATP酶区）,提示BRG1突变在肺癌发生中可能起一定的作用.同时,对未检测到BRG1mRNA表达的6例肺癌组织和9株肿瘤细胞系还进行了DNA甲基化分析,结果发现：这些肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1启动子区均无异常甲基化.这说明BRG1在肺癌中表达下调的机制尚需进一步研究.     

肿瘤细胞抗药性的分子机理

肿瘤细胞抗药性的分子机理周剑涛（湖北省黄冈地区卫校,４３６１００）关键词肿瘤细胞,抗药性,分子机理化疗是治疗肿瘤的重要方法之一。但肿瘤细胞对化疗药物易产生抗药性,成为临床一大难题。近年来,对肿瘤细胞产生抗药性的分子机理进行了大量研究,并取得如下一些进...     

Bmi-1在丁酸钠诱导肿瘤细胞凋亡过程中的作用机制

丁酸钠（Sodium butyrate,NaB）是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors,HDACi）,通过增加组蛋白的乙酰化,使染色质处于开放状态,便于基因转录与表达。多梳基因家族（Polycomb group genes,PcG）的成员Bmi-1蛋白可以对染色体组蛋白进行修饰,使一些抑癌基因如p14、P16和P21基因等表达沉默,同时Bmi-1蛋白通过Wnt信号通路激活原癌基因c-Myc,使Bmi-1、Wnt信号通路、c-Myc组成一个正反馈循环,还可以上调端粒酶的表达,导致肿瘤的发生。HDACi可以下调Bmi-1蛋白的表达,并通过上调p14、p16和p2l等的表达以及线粒体通路和Wnt信号通路抑制肿瘤细胞的增殖、分化,诱导肿瘤细胞凋亡。HDACi将可能为肿瘤的治疗提供一个广阔的前景,本研究将对Bmi-1在丁酸钠诱导肿瘤细胞凋亡过程中的作用机制作一综述。     

信号转导与转录活化蛋白STAT3在肿瘤发生中的作用

STAT3是信号转导与转录活化蛋白（STAT）家族的一个重要成员,也是一个可以被多种调控细胞增殖、分化、发育、存活和炎症的细胞因子、生长因子及肿瘤蛋白所激活的关键信号转导蛋白。在多种肿瘤细胞、细胞性状转化过程和肿瘤形成过程中可以检测到组成性激活的STAT3。我们从STAT3在肿瘤细胞中组成性激活的机制、STAT3作为转录因子对肿瘤细胞调控的机制等方面对STAT3在肿瘤发生中的作用进行简要综述。     

移植物抗宿主病和移植物抗白血病相关细胞因子的研究进展

异基因造血干细胞移植（allogeneic hemotoic stem cell transplantation,allo-HSCT）是治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法,治疗效果主要依赖于移植物抗白血病效应（graft-versus-leukemia,GVL）,可以清除残存肿瘤细胞,达到完全治愈恶性血液病的目的。然而,GVL与allo-HSCT的并发症移植物抗宿主病（graft-versus-host disease,GVHD）紧密相连。通过合理调节一些细胞因子的作用可以达到降低GVHD、保留GVL的目的。该文就GVHD与GVL发生机制中相关细胞因子作用的研究进展做一综述。     

对mTOR的双重冲击

雷帕酶素可以抑止淋巴瘤的生长，但对实体肿瘤无效。雷帕酶素可以激活Akt（mTOR蛋白上游的一种酶，对细胞生存至关重要）。2006年．Neal Rosen与同事报道了在人肿瘤细胞中．抑制mTOR确实可以激活Akt。进而．他们发现在抑制mTOR的同时．抑制其上游的胰岛素样生长因子-1（IGF-1），可以缩短Akt介导的细胞生存的路径．并改善雷帕酶素的抗癌效果。     

卡介苗作用大鼠膀胱肿瘤细胞／正常移行上皮细胞后TNF—α．、IL-10、IFN-γ的检测及意义

目的：观察卡介苗（BCG）单独作用膀胱肿瘤细胞、正常膀胱移行上皮细胞及其代谢产物作用上述细胞后细胞生长情况及各自细胞培养液上清液中细胞因子（TNF-α．、IL-10、IFN-γ）浓度的变化,探讨其在卡介苗治疗膀胱肿瘤中可能的作用机制。方法：构建大鼠膀胱肿瘤模型,并原代培养大鼠膀胱肿瘤细胞及正常膀胱移行上皮细胞。分别用BCG,普通培养液和细胞培养的代谢产物作用上述细胞。酶联接免疫吸附剂测定法（ELISA法）检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）、干扰素-γ（IFN-γ）的浓度。结果：ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-10的浓度改变有显著差异,而IFN-γ的浓度无显著差异。结论：BCG可以直接刺激肿瘤细胞自身分泌细胞因子（TNF-α、IL-10）参与调节抑制肿瘤细胞的生长。     

胸腔积液中肺腺癌细胞发生胶原化的形态观察与研究

目的胶原蛋白是细胞外基质的主要成分之一,我们在临床数千例恶性胸水转移的非小细胞肺癌细胞胞浆中常见到围绕细胞核或局灶状葱皮排列的纤维样结构,由此我们假设肺腺癌细胞在侵袭转移形成胸腔积液过程中发生与细胞外基质相同的结构变化,即肿瘤细胞胶原化形成“盔甲”式保护膜起到对肿瘤细胞结构及功能的支撑,达到抵御化疗药物、毒素的穿透和放射线的轰击,提高了自我保护能力,适应新的肿瘤细胞增生微环境。方法TCT方法选取224例肺腺癌细胞学标本,其中胸腔积液标本144例,肺泡灌洗液40例,痰液标本40例,24例为良性胸腔积液作为对照。常规制成细胞包埋块,切片、HE染色及CK7、TTF-l、vimintin的免疫细胞化学染色。透射电镜观察肿瘤细胞内部结构。Masson特殊染色,胶原蛋白工、Ⅱ、Ⅲ亚型染色,Western-blot蛋白检测。观察肺腺癌细胞是否存在胶原蛋白亚型及肺腺癌不同标本的表达情况。结果Masson细胞化学染色显示胶原纤维在恶性胸腔积液、支气管肺泡灌洗液及痰肺腺癌标本中的表达率分别为59．7％（sG／144）、0％（0／40）、o％（0／40）,在良性标本中不表达均为阴性（0／24）。免疫细胞化学结果显示：COLlAl、COL2Al和COL3Al在肺腺癌细胞中的阳性表达率分别为22．6％（38／1G8）,5．4％（9／1G8）,22．6％（38／168）,阳性表达主要定位于胞浆,而在增生的上皮细胞中不表达,统计学分析结果显示COLlAl、COL3Al的表达率要显著高于COL2Al的表达率（P=0．024）,并且我们发现COLlAl与COL3A1的表达成正相关性（r=0．886,P=0．000）。透射电镜可观察到在肿瘤细胞胞浆中可见多量纤维状物质。结论本研究从形态学上观察到在转移的肺腺癌细胞胞浆内有一些围绕胞核呈葱皮样改变的纤维样结构,结果表明肺腺癌细胞可以产生胶原蛋白,     

用磷光探针测定肿瘤细胞

用磷光探针测定肿瘤细胞马贵斌（山西大学化学系,太原０３０００６）关键词磷光探针,肿瘤细胞磷光是三重态蜕变到基态的辐射过程。它需要改变电子的自旋,因此是一种“禁止”跃迁。这就使磷光成为一种不可几的过程,所以在液态溶液中很少观察到磷光。但是在低温下（例如...     

大蒜油抗肿瘤作用的流式细胞光度术分析

用流式细胞光度术（ｆｌｏｗｅｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）+Ｓ０．２ｍｌ／日。吐温对照组ｌＰ吐温８００．２ｍｌ／日,以排除大蒜油制剂中溶剂（吐温８０）的影响。实验组ｌＰＧＯ１００ｍｇ／ｋｇ／．日。于连续４次注射后的６ｈ,２、３、５、１０天及１０次注射ＧＯ后７天取材,行ＦＣＭ样品制备。三、ＦＣＭ样品制备与测定中国中医研究院基础所腹水癌细胞用ＰＢＳ洗涤,７０％酒精固定,ＲＮａｓｅ消化细胞中的ＲＮＡ,ＰＩ染色。用腹腔内淋巴细胞作标准二倍体细胞。用４２０型荧光激活细胞分选仪（美国Ｂｅｃｔｏ－Ｄｉｃｋｓｏｎ公司产品）测单个肿瘤细胞的ＤＮＡ含量,用组方图显示肿瘤细胞ＤＮＡ倍体性质。图中第一个是ＤＮＡ二倍体（ＺＣ）峰,处于该峰的细胞为Ｇ;／Ｇ。期细胞,第二个峰为４ＣＤＮＡ峰,该处细胞为Ｇ。－Ｉ－－Ｍ期细胞,从２。到４。之间的细胞为Ｓ期细胞。大于４。ＤＮＡ峰细胞为高倍体细胞‘’：。根据不同峰值大小判定用药后肿瘤细胞倍体性质的变化。结果ＮＳ与吐温对照组肿瘤细胞都为非整倍体性,且呈多倍体性（图１,２）。连续４次给药后６ｈ,绝大部分多倍体肿瘤细胞被杀伤,残存肿瘤细胞以二倍体为主,多倍体肿瘤细胞峰值显著下降,甚至在组方图上几乎显不出多倍     

研究报告: 基于AS1411适配体的DNA-RNA杂交载体的抗肿瘤研究

目的 研究连接适配体的DNA-RNA分子作为杂交载体靶向肿瘤细胞并导入功能性RNA分子进入细胞的有效性，以及对肿瘤细胞的影响。方法 设计合成短的互补DNA、RNA分子，组装成DNA-RNA杂合链；连接AS1411适配体为靶向分子，再分别连接p21 saRNA和TIGIT siRNA作为药物分子，记为P21 saRNA和TIGIT siRNA，构成杂交载体，通用结构式为AS1411-DNA/RNA-sxRNA；检测AS1411-DNA/RNA-sxRNA能否靶向结合并进入肿瘤细胞及其对瘤细胞生存、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果 将设计的杂交载体各部分等摩尔加入杂交缓冲体系并于特定温度条件下孵育，TBM聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到AS1411-DNA/RNA-sxRNA成功组装；AS1411-DNA/RNA-sxRNA杂交载体在10%血清条件下也显示出良好的抗降解稳定性；荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察，SKOV3细胞表面及胞内存在绿色大量荧光信号，杂交载体成功进入肿瘤细胞。杂交载体孵育后：在mRNA水平上，p21基因表达（2.14±0.25）是对照组（1.02±0.10）2倍以上，P<0.05；TIGIT基因表达（0.63±0.09）低于对照组（1.09±0.15），P<0.05；在蛋白质水平上，p21基因表达（1.57±0.16）是对照组（1.10±0.09）1.5倍以上，P<0.05；TIGIT基因表达（0.61±0.12）低于对照组（1.01±0.07），P<0.05。CCK-8实验显示，P21 saRNA（3.10±0.13）和TIGIT siRNA（2.91±0.13）杂交载体孵育组与空白对照组（3.67±0.15）相比，卵巢癌细胞增殖能力显著下降（P<0.05）；划痕实验结果显示，P21 saRNA孵育组愈合率（42.53±2.90）%、TIGIT siRNA孵育组愈合率（36.23±3.43）%，明显低于空白对照组（76.47±3.64）%，P<0.05；Transwell检测迁移能力发现：P21 saRNA孵育组（128.25±5.36）、TIGIT siRNA孵育组（119.50±8.79）低于对照组（186.5±8.56）；侵袭能力：P21 saRNA孵育组（145.5±9.45）、TIGIT siRNA孵育组（112.25±5.63）也显著低于对照组（202.50±10.12），P<0.05；细胞凋亡率：P21 saRNA孵育组（11.74%±2.47%）、TIGIT siRNA孵育组（17.12%±2.04%）明显高于对照组（5.66%±1.44%），P<0.05。结论 所制备的AS1411-DNA/RNA-sxRNA杂交载体能够有效靶向肿瘤细胞，携带功能性小RNA靶向导入肿瘤细胞并调控目的基因表达，使肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力受到抑制；该结果为利用DNA-RNA偶联AS1411适配体作为靶向工具的杂交载体，靶向杀伤表面表达NCL蛋白的肿瘤细胞提供了实验基础。     

影响口腔鳞状细胞癌患者预后的临床病理因素分析

目的：研究影响口腔鳞状细胞癌（Oral squamous cellcar cinoma,OSCC）术后患者预后的临床病理因素。方法：回顾性研究55例手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌患者与预后相关的因素：年龄、性别、发病部位、颈部淋巴结转移情况、肿瘤细胞分化程度等。结果：平均发病年龄为57.35±12.02岁,牙龈鳞癌的复发转移率最高（45.5%）,舌部第二（44%）,颊部第三（37.5%）,唇癌预后最好（0.0%）。术前颈部淋巴结转移情况、肿瘤细胞分化程度与预后有关。肿瘤细胞的分化程度与术前淋巴结转移无显著相关性。术前有颈部淋巴结转移合并中低分化与预后差相关。结论：口腔鳞状细胞癌的预后与发病部位无显著相关性。肿瘤中低分化及术前有淋巴结转移者易出现术后复发转移。     

肿瘤淋巴管生成

相对于肿瘤的血管生成（angiogenesis）而言,肿瘤中的淋巴管生成（lymphangiogenesis）是一个长期受到争议和忽视的问题。但近来的实验证明：肿瘤细胞可以通过表达淋巴管生成的调控因子VEGF-C和VEGF-D诱导淋巴管生成,并且促进肿瘤细胞的淋巴道转移。这些发现使得淋巴管生成开始成为研究肿瘤淋巴道转移的焦点,并有可能成为治疗肿瘤淋巴道转移的靶点。     

血吸虫抗原肽对某些肿瘤细胞的抑制作用

抗肿瘤活性测定实验表明，血吸虫谷胱甘肽S-转移酶（GST）的抗原位点肽对人的某些肿瘤细胞株的繁殖具有一定的抑制作用，四噁唑盐MTT法比色测定表明，对四种人的肿瘤细胞具有满意的抑制摔。     

人胰腺癌裸鼠异种移植瘤模型的生物发光成像和超声成像比较

目的利用荧光素酶基因标记的人胰腺癌细胞株Capan-2建立胰腺癌裸鼠移植模型,评价生物发光和小动物超声成像在移植瘤模型建立中的作用。方法将表达荧光素酶基因的真核表达载体转入人胰腺癌细胞Capan-2,将1×106人胰腺癌细胞悬液分别接种于裸鼠胰腺和右后肢皮下,使其成瘤。生物发光成像和小动物超声成像系统观察肿瘤的生长情况。结果肿瘤细胞原位移植成功率为75%,皮下移植成功率为100%。生物发光成像系统在肿瘤细胞原位接种第7天,可以观察到肿瘤发光;小动物超声成像系统在肿瘤细胞皮下接种第7天,可以测量肿瘤的大小,但在肿瘤细胞原位接种的第7天不能测量肿瘤的大小。另外肿瘤细胞在裸鼠皮下生长的速度比原位生长速度快3倍左右。结论生物发光成像系统更适用于肿瘤早期监测,为深入研究胰腺癌的发生发展、侵袭转移机制提供理想工具。     

美国微生物学会杂志摘要（2006.2 Microbes）

1．加拿大学者Patrik Lee在研究呼肠病毒（reovims）的细胞受体时,发现该病毒可在肿瘤细胞中阻断癌基因Fas的信号传导途径,并利用肿瘤细胞产生病毒的蛋白。由于约2／3人的肿瘤有Fas被激活的信号传导途径,这一作用具有用呼肠病毒治疗肿瘤的潜在功能。在正常生长的细胞中有一种RNA-激活的蛋白激酶（PKR）可以阻止呼肠病毒的复制,但在肿瘤细胞中,活化的Fas途径缺少PKR活性,从而呼肠病毒可以在肿瘤细胞中增殖。自1998年开始Lee等开展了用呼肠病毒作为一种抗肿瘤制剂的研究,发现当呼肠病毒在肿瘤细胞中增殖后,细胞出现了凋亡或坏死。临床研究中,发现当有1亿病毒颗粒直接注入固体肿瘤中,病人无不良反应。     

苯胺嘧啶衍生物X-9通过下调整合素β1表达抑制肝细胞癌迁移侵袭

整合素在许多肿瘤细胞中高表达,并且参与肿瘤细胞的侵袭转移。在肝细胞癌中,整合素β1被报导高表达,并促进肿瘤细胞的侵袭。目前,对于整合素的表达调控癌细胞机制以及干预其表达进而抑制肿瘤细胞转移的研究较少。本研究探讨利用小分子化合物抑制整合素表达来抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的可能。首先,对临床肝癌细胞患者癌组织和癌旁组织中的整合素β1的表达进行检测,发现其在癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P<0.05）。对TCGA肿瘤数据库的生物信息学分析结果同样显示,整合素β1的高表达与肝癌的分期（P=0.019）和预后（P=0.013）相关。通过筛选发现,苯胺嘧啶衍生物X09可以抑制肝癌细胞中整合素β1的mRNA和蛋白质的表达（P<0.01）。细胞划痕愈合实验和细胞穿孔实验结果显示,苯胺嘧啶衍生物X-9能够抑制肝癌细胞的迁移和侵袭（P<0.01）。进一步的研究证实,在肝癌细胞中外源表达整合素β1可以逆转X-9对肝癌细胞迁移和侵袭的抑制;而在敲低整合素β1的细胞中,X-9对细胞的迁移和侵袭的抑制被消除。因此,鉴定出苯胺嘧啶衍生物X-9可以通过下调整合素β1表达,进而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。     

千金藤素抗肿瘤药理作用机制研究进展

千金藤素（Cepharanthine）是从头花千金藤（Stephania cepharantha Hayata）这种防己科植物中提取和分离得到的活性成分。作为一种双苯并异喹啉生物碱，千金藤素具有多种药理学特性，包括抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤和抗病毒等效果。临床上，它被用于治疗蛇咬伤、脱发、疟疾和放射性白细胞减少。现代药理研究表明，千金藤素可以通过多种机制发挥潜在的抗肿瘤作用，包括诱导肿瘤细胞凋亡和自噬，抑制癌细胞迁移，逆转多药耐药性，以及预防抗肿瘤药物引起的白细胞数量减少等。针对近年来千金藤素在不同肿瘤细胞中的作用机制进行总结，以供后续基于千金藤素的抗肿瘤新药研究参考。     

腺病毒介导的uPAR反义核酸转移抑制肿瘤细胞的侵袭

为了观察尿激酶受体(uPAR)反义核酸对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用,用PCR方法扩增uPAR cDNA 5′端－46 bp～＋454 bp一段长500 bp的序列,利用DNA重组技术将其克隆到病毒载体pAdeno-X中, 构建出重组腺病毒载体pAdeno-X-uPAR(－)和pAdeno-X-uPAR(+).线性化后的重组腺病毒载体转染HEK293细胞7天后,可以获得滴度分别为1.5×10⁸ pfu/ml和0.5×10⁸ pfu/ml的uPAR反义和正义核酸表达重组腺病毒,分别命名为Ad-uPAR(－)和Ad-uPAR(+).以不同的病毒感染指数（MOI）感染人肺巨细胞癌高转移株95D肿瘤细胞,3天后用RNA印迹法可以检测肿瘤细胞uPAR正义和反义核酸表达水平,随着MOI的升高,Ad-uPAR(－)感染的肿瘤细胞uPAR蛋白水平逐渐下降,肿瘤细胞的体外侵袭能力也明显下降,而感染Ad-uPAR(+)的肿瘤细胞无明显变化.结果表明,重组腺病毒可以表达uPAR正义和反义核酸,uPAR反义核酸可以明显抑制人肺巨细胞癌高转移株95D肿瘤细胞在体外的侵袭能力.