基于计算机视觉技术的连翘果实性状变化研究

目的：探究连翘果实发育与性状之间的关系,建立基于计算机视觉技术的连翘“辨状论质”方法。方法：采用Python库LabelMe对连翘显微横切图片进行标注,获取连翘果实显微横切各部位的面积占比。采用自制软件Lq＿measure对连翘进行长度、宽度和单果面积的测量,同时称取连翘果皮（含隔膜）和种子的质量,并制作数据集。结果：连翘果实性状差异大,证实了计算机视觉技术筛选优质连翘具有工业化应用的前景,建立了一套以Lq＿measure软件为基础的连翘性状研究实验操作流程,为连翘性状数据库的建立提供了基本方法,为基于连翘果型的中药“辨状论质”理论研究提供可靠技术支撑。结论：连翘种心性状可用于鉴别连翘的果实成熟度,连翘长宽比系数和连翘果皮重占比相关性为0.74,为以后的连翘质量控制提供了理论依据。     

12份连翘种质资源的核型参数分析

采用常规压片法对4个连翘属原种以及6个金钟连翘品种和2个朝鲜连翘品种的核型进行了分析。研究结果发现,除金钟连翘品种Goldrausch为四倍体(2n=4x=56)外,其余11份种质均为二倍体(2n=2x=28),染色体基数为14。连翘、卵叶连翘、东北连翘、朝鲜连翘的核型分别为2A、3B、2B、3B型,6个金钟连翘品种的核型包括2A、2B、3B 3种,2个朝鲜连翘品种的核型包括2B、3B。12份连翘种质的着丝粒指数差异性不大,介于9.65%~50.00%,染色体类型以中部(m)、近中部(sm)以及近端部(st)染色体为主,未发现端部染色体和随体。结果表明,连翘和东北连翘的亲缘关系最近,与卵叶连翘的亲缘关系最远,金钟连翘品种与东北连翘、朝鲜连翘之间亲缘关系较近。研究结果为连翘属种间、品种间杂交育种和亲缘关系研究提供了细胞学基础。     

连翘花中抑制酪氨酸酶活性成分研究

本文首次对连翘花抑制酪氨酸酶活性成分进行了研究。首先,对连翘不同器官[叶、果实(青翘、老翘)、花]抑酶活性进行比较分析,发现连翘花对酪氨酸酶的抑制表现出了浓度依赖性;进而对连翘花不同溶剂提取物进行抑酶活性评价,结果表明95%乙醇提取物抑酶活性最高。然后根据活性导向分离方法,对连翘花95%乙醇提取物进行了化学成分分离,从中分离得到5个化合物,鉴定为:连翘酯苷A(1)、芦丁(2)、(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷(3)、(+)-甲基松脂素-β-D-葡萄糖苷(4)、连翘苷(5),其中化合物4是首次从连翘花中分离得到。酪氨酸酶抑制活性测试表明化合物均显示出一定的抑酶活性,同时各化合物之间表现出明显的协同作用,这表明这些成分可能是连翘花美白作用的物质基础。     

连翘内生真菌的分离鉴定及其发酵液抑菌活性和HPLC测定

为获得能产生抑菌活性物质的连翘内生菌,从连翘新鲜组织中分离纯化内生真菌并进行形态学分析,牛津杯法测定发酵液的抑菌活性,对具有抑菌活性的菌株进行18S rRNA基因序列分析,并以连翘主要活性成分连翘苷和连翘酯苷A、B标准品为对照,HPLC测定发酵上清液中的连翘苷和连翘酯苷A、B含量。结果表明从连翘新鲜组织中获得了5株内生真菌,其中4株菌的发酵上清液对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌有很好的抑菌活性,对这4株菌的分子生物学检测表明3株菌为枝胞菌,另1株菌为曲霉菌,HPLC结果显示这4株菌的发酵上清液中均含有一定浓度的连翘苷和连翘酯苷A、B,发酵液中发挥抑菌活性的成分是否与这三种物质有关需要进一步研究,但连翘内生真菌可以产生抑菌活性物质这一结果为后续利用微生物发酵生产抑菌物质提供了新的途径和新的菌种来源。     

中药连翘及连翘叶中连翘苷含量的比较研究

用高效液相色谱法对不同产地的连翘叶、老翘、青翘中的连翘苷含量进行测定。结果表明：连翘叶中连翘苷含量比老翘高40倍以上,比青翘中连翘苷含量高2～4倍左右,不同产地的连翘叶、老翘及青翘中连翘苷的含量也有较明显的差别。     

连翘化学成分及药理研究进展

本文综述了国内外对连翘的化学成分研究和药理作用研究成果,为中药连翘资源的开发利用提供参考。     

河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量比较

测定河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷含量。采用分光光度法测定连翘叶中总木脂素含量,结果显示山西连翘叶高于河南连翘叶总木脂素含量。采用高效液相色谱法(HPLC)测定连翘叶中连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量。连翘酯苷A平均回收率为99.6%,RSD为1.23%;连翘酯苷B平均回收率为101.3%,RSD为1.74%;连翘苷平均回收率为102.3%,RSD为2.58%;连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷的含量较高,并且不同产地连翘叶中连翘苷含量差异较大;另外对于富含连翘酯苷和连翘苷的连翘叶能否代替果实或者与果实合并用药有待于进一步研究。     

河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量比较北大核心CSCD

测定河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷含量。采用分光光度法测定连翘叶中总木脂素含量,结果显示山西连翘叶高于河南连翘叶总木脂素含量。采用高效液相色谱法(HPLC)测定连翘叶中连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量。连翘酯苷A平均回收率为99.6%,RSD为1.23%;连翘酯苷B平均回收率为101.3%,RSD为1.74%;连翘苷平均回收率为102.3%,RSD为2.58%;连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷的含量较高,并且不同产地连翘叶中连翘苷含量差异较大;另外对于富含连翘酯苷和连翘苷的连翘叶能否代替果实或者与果实合并用药有待于进一步研究。     

连翘种子挥发油的化学研究

连翘为木樨科植物(Forsytha suspensa Vahl)的果实,在我国华北、东北、西北各省区均有生长,资源丰富。连翘种子又称连翘心,中医用于清心热、治疗热病、心烦、不寐等症。连翘种子挥发油中含α-蒎烯及β-蒎烯,挥发油有抑制流感病毒作用。由于连翘资源丰富、种子产量较大,有待研究利用。本文首先对连翘种子中挥发油成分进行气相色谱-质谱-计算机联用分析,又用减压分馏、柱层离等方法进行了挥发油中主     

连翘抗炎药效物质基础筛选研究

主要探索连翘几种成分的抗炎活性,并筛选其抗炎药效物质基础,为连翘抗炎新药的开发提供参考依据。建立二甲苯致小鼠耳肿胀模型,计算肿胀度。采用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的含量。对比各组的肿胀度及TNF-α和IL-6的含量。连翘苷对小鼠耳肿胀度及TNF-α和IL-6的生成无明显抑制作用,与空白组相比无显著性差异(P0.05)。连翘脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B均能有效抑制小鼠耳肿胀及TNF-α和IL-6的生成,与空白组相比有显著性差异(P0.05)。由此可见对所筛选的连翘4种成分,通过口服给药的方式,连翘抗炎药效物质有连翘脂素、连翘酯苷A和连翘酯苷B。通过口服给药,尚未发现连翘苷的抗炎活性,而连翘脂素、连翘酯苷A及连翘酯苷B显示较强的抗炎活性。同时推测其抗炎机制可能与抑制TNF-α和IL-6这两种炎症因子的生成和多成分作用有关。     

Analysis of host preference and geographical distribution of Anastrepha suspensa (Diptera: Tephritidae) using phylogenetic analyses of mitochondrial cytochrome oxidase I DNA sequence data

Anastrepha suspensa (Loew) is an economically important pest, restricted to the Greater Antilles and southern Florida. It infests a wide variety of hosts and is of quarantine importance in citrus, a multi-million dollar industry in Florida. The observed recent increase in citrus infested with A. suspensa in Florida has raised questions regarding host-specificity of certain populations and genetic diversity of the pest throughout its geographical distribution. Cytochrome oxidase I (COI) DNA sequence data was used to characterize the genetic diversity of A. suspensa from Florida and Caribbean populations reared from different host plants. Maximum likelihood and Bayesian phylogenetic methods were used to analyse COI data. Sequence variation among mitochondrial COI genes from 107 A. suspensa samples collected throughout Florida and the Caribbean ranged between 0 and 10% and placed all A. suspensa as a monophyletic group that united all A. suspensa in a clade sister to a Central American group of the A. fraterculus paraphyletic species complex. The most likely tree of the COI locus indicated that COI sequence variation was too low to provide resolution at the subspecies level, therefore monophyletic groups based on host-plant use, geography (Florida, Jamaica, Cayman Islands, Puerto Rico or Dominican Republic) or population sampled are not supported. This result indicates that either no population segregation has occurred based on these biological or geographical distinctions and that this is a generalist, polyphagous invasive genotype. Alternatively, if populations are distinct, the segregation event was more recent than can be distinguished based on COI sequence variation.     

太岳林区连翘灌丛群落特征的研究

根据野外调查的样地资料,本文分析了分布于山西太岳山林区的连翘灌丛群落的种类组成、区系成分、外貌特征、垂直结构等基本生态学特征,并将连翘样方以及上层无乔木覆盖灌木为建群层的连翘样方归为9个群系,对连翘群落的特征以及连翘株高随海拔梯度的变化作出相应分析．结果表明：该群落种类组成丰富,区系成分以北温带分布为主,生活型以高位芽占优势。垂直分化明显,一般分为乔木层、灌木层、草本层3层,9个群系由于地理位置不同、生境特点各异,因而种类组成不同,连翘在群系中的地位也不同,各群系中主要灌木种群的分布格局一般为集群型,少数随机型,随着海拔的逐渐上升,连翘平均株高先升后降。     

Toxicity of imidacloprid-treated spheres to Caribbean fruit fly, Anastrepha suspensa (Diptera: Tephritidae) and its parasitoid Diachasmimorpha longicaudata (Hymenoptera: Braconidae) in the laboratory

No-choice cage tests were used to study the toxicity of imidacloprid-treated spheres to Caribbean fruit fly, Anastrepha suspensa (Loew), and its associated parasitoid, Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead), in the laboratory. Three imidacloprid sphere treatments (2, 4, and 8% active ingredient [AI] Provado 1.6 F) and an untreated control sphere (no toxicant) were evaluated against A. suspensa. Throughout the observation period (2-72 h), all concentrations of imidacloprid-treated spheres killed significantly more A. suspensa compared with control spheres. After 4 h of exposure to imidacloprid-treated spheres, significantly more A. suspensa were killed on spheres treated with 8% compared with 2% (AI). At 48 and 72 h, there were no significant differences in the mean number of A. suspensa killed at 2, 4, and 8% (AI), potentially indicating that a period of 24 h was sufficient for flies to ingest a lethal dose of the pesticide. Overall, significantly more A. suspensa males were killed after 72 h of exposure to imidacloprid-treated spheres compared with females. For D. longicaudata, only two imidacloprid sphere treatments, 2 and 4% (AI), and an untreated sphere (control) were evaluated for mortality in cage tests. There were no significant differences in mortality of D. longicaudata between the 2 and 4% (AI) imidacloprid-treated spheres. Both rates killed significantly more D. longicaudata compared with the control. However, after 24, 48, and 72 h of exposure to imidacloprid-treated spheres, significantly more D. longicaudata were killed in cages containing 4% compared with 2% (AI) and untreated control spheres. The study demonstrates the potential use of imidacloprid-treated spheres for control of A. suspensa in areas where it may be difficult to apply broad-spectrum insecticides.     

内生真菌Ⅷ.中国药用植物内生真菌两个新记录种

<正>In a survey of endophytic fungi associated with medicinal plants in Beijing, two new records, Phoma jolyana and Microsphaeropsis conielloides, were isolated from Eucommia ulmoides Oliv., Forsythia giraldiana     

基于RNA-Seq技术的连翘转录组组装与分析及SSR分子标记的开发

连翘既是传统的中药材,又是优良的城市绿化树种,具有重要的经济价值和生态价值.但是连翘基因资料非常匮乏,限制了其分子生物学和基因功能的研究.本研究以连翘根、茎、叶、花和果实等器官的混合样品作为材料,利用Illumina Hi SeqTM 2500测序平台对其进行转录组测序.共获得23164327条干净数据(clean reads),总碱基数为4678791021 bp.Clean reads经de novo组装后获得45112条unigenes.进一步利用五大公共数据库进行同源比对,注释了28699条unigenes.其中,473个基因参与了连翘次生物质的合成和代谢,包括81个与苯丙氨酸和苯丙烷代谢相关的基因.对这81个基因的分析表明,有4个基因编码苯丙氨酸脱氨酶,1个基因编码肉桂酸4-羟化酶,2个基因编码4-香豆酰:辅酶A连接酶.这3个酶催化了连翘中主要药用活性物质苯乙醇苷和木脂素前体肉桂酸衍生物的生物合成.此外,还发现了2个松脂醇-落叶松树脂醇还原酶和1个开环异落叶松脂醇脱氢酶编码基因,这2个酶是木脂素合成的关键酶.最后,分析了长度在1 kb以上的12721个unigenes的基因结构,检测到3199个SSR位点,并对其中40个位点进行了验证.本研究不仅为连翘基因克隆和分子生物学研究提供了丰富的基础数据信息,而且为连翘遗传多样性研究、指纹图谱构建和分子标记辅助选育奠定了分子基础.     

山西南部脱皮榆种群生态位的研究

在山西省脱皮榆分布比较集中的霍山设置 4个样地 ,中条山设置 3个样地 ,采用样方法对脱皮榆种群进行调查 ,共作 5 85个样方 .将土壤含水量、土壤有机质含量和土壤全氮含量分别作为反映脱皮榆生长环境的资源轴 ,选择该区 2 2种灌木 ,5 3种草本 ,计测其在 3条资源轴上的资源选择性系数 L 、生态位宽度 B 、脱皮榆与其下灌木的生态位重叠 O .结果表明 :脱皮榆在 3条资源轴上生态位宽度值大小为 :B w >B n >B o ,其资源选择性系数则相反 ;连翘、3裂绣线菊在生态适应上与脱皮榆具有一致性 ;与脱皮榆生态位重叠值较大的连翘、虎榛子等是脱皮榆种群不同的生态种组 ;用土壤含水量、土壤有机质含量和土壤全氮含量作为资源轴研究脱皮榆种群生态位宽度和生态位重叠是可行的     

土壤干旱对黄土高原3个常见树种幼苗水分代谢及生长的影响

应用盆栽试验,在人工控制土壤水分条件下对黄土高原3个常见树种丁香(Syringa oblata)、杠柳(Perip-loca sepium)和连翘(Forsythia suspensa)幼苗的生长及水分生理代谢进行了研究.结果表明,随干旱胁迫程度加剧,各树种耗水量明显减少;不同树种单株耗水量差异明显,表现为:连翘>杠柳>丁香.3树种新生枝条生长和叶面积扩展速率明显受土壤含水量影响,均表现为适宜水分>中度干旱>严重干旱,且在同一胁迫水平下,连翘>杠柳>丁香.随干旱胁迫程度的加剧和干旱时间的延长,丁香、杠柳和连翘叶片的含水量、游离脯氨酸以及叶绿素含量均有不同程度的变化,连翘和杠柳的叶片含水量在3种水分条件下均明显高于丁香,杠柳叶片游离脯氨酸含量明显高于丁香和连翘,连翘体内脯氨酸含量最低,丁香和连翘的叶绿素a/b值随土壤含水量的减少逐渐降低,杠柳则表现出相反趋势.不同树种对土壤干旱和高温的响应机制不同,但它们都具有较强的抗旱能力,适应黄土高原干旱的自然条件.     

连翘的二型花柱

报道了连翘中的二型花柱(长花柱和短花柱)。长花柱的柱头和雄蕊高度分别为6.12±0.05 mm和2.35±0.04mm,短花柱则为2.23±0.04mm和6.02±0.06mm。短花柱花的花冠大小明显超过长花柱。开放授粉条件下,长短花柱花的座果率分别为9.11 %±0.04%和8.93 %±0.07%。人工异交的座果率在长-短(36.8%±0.04%)与短-长(36.2%±0.07%)组合间无明显差异(F(1,39)=1 .38,P=0.14)。人工异交实验表明,传粉者限制可能发生在生长于中国东北部的人工连翘种群中,这可能是因为该地区早春的低温和多风气候条件影响传粉者的种类和活动。     

外源性糖对四种木本观赏植物花粉离体培养的影响

分别以单、双、多糖作用于紫荆、紫丁香、桃、连翘四种木本观赏植物花粉的离体培养,检测其对花粉萌发、花粉管生长及花粉管胼胝体形成的影响,结果表明糖的类型和浓度对花粉萌发有较大影响,同时不同植物的花粉对糖的敏感性也存在差异;花粉管长度明显受蔗糖浓度的影响,尤其是连翘的花粉管长度,与蔗糖浓度成反比;在四种植物的花粉管生长中后期,均观察到胼胝体的形成,胼胝体形成的数量与蔗糖浓度及花粉管长度存在一定的联系;在花粉管中胼胝体的形成没有特定位点。