微囊蛋白基因及其与疾病关系研究进展

微囊蛋白(caveolin)基因家族已鉴定出3个成员:微囊蛋白-1、微囊蛋白-2、微囊蛋白-3,并被定位于抑癌基因位点区域.微囊蛋白-1是细胞质膜微囊的标记蛋白,其中间疏水区域在细胞膜内形成发夹结构,并使其N端区域与C端区域在细胞膜内表面聚合形成支架结构.微囊蛋白-1与微囊蛋白-2以组成异源寡聚体的形式存在,在脂肪细胞、内皮细胞和成纤维细胞中表达最丰富,微囊蛋白-3则特异表达于肌肉.离体与活体研究结果均表明微囊蛋白-1可能具有抑癌功能,并可能在细胞信号传导中起刹车作用.微囊蛋白-1基因敲除小鼠心血管NO与Ca²⁺信号途径受损、功能异常,肺泡上皮细胞出现异常扩增,脂质代谢失衡,身体消瘦.微囊蛋白-2基因敲除小鼠肺功能与耐力均严重受损,与微囊蛋白-1基因敲除小鼠的表型非常相似.微囊蛋白-3为维持心脏正常功能所必需,可能还与一些肌肉营养不良症有关.     

SOS1蛋白病理生理功能研究进展

SOS1(son of sevenless homolog 1)蛋白是一种在细胞中广泛表达的调控蛋白。作为信号通路中的关键蛋白,SOS1在细胞内许多信号转导通路中起着重要的调控作用,例如参与调控Ras和Rac信号通路。SOS1的异常表达或突变与临床疾病的发生密切相关。本文对SOS1的功能及其在生理学、病理生理学中的作用的研究进展进行综述。     

菜豆下胚轴质膜微囊和液泡膜微囊体外热稳定性的研究

从抗热潜势较高的“８５ＣＴ－４９７６２”菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．）的下胚轴分离出微粒体、质膜微囊和液泡膜微囊。通过比较正常细胞的膜微囊、热锻炼细胞的膜微囊以及热锻炼过程中放线菌酮抑制了蛋白质合成的细胞膜微囊的质子泵在体外的热稳定性,发现热锻炼可使细胞膜微囊质子泵体外热稳定性提高,热锻炼过程中合成的蛋白质与此效应有关。进一步分析膜外周蛋白对质子泵体外热稳定性的影响,证明热激蛋白ＨＳＰ７０ 和小分子量热激蛋白（ＬＭＷ ＨＳＰ）对质子泵有热保护功能     

Claudins蛋白在胃癌组织中的表达

紧密连接（tightjunctions,TJs）对于维持上皮细胞或内皮细胞的正常结构和发挥生理功能起着重要作用。Claudins（CLDNs）蛋白是构成细胞膜紧密连接的主要成分之一,其异常表达导致上皮细胞或内皮细胞结构破坏、功能受损,与多种疾病的发生、发展关系密切。近年来,越来越多的文献报道了claudins蛋白在胃癌组织中的异常表达。不同claudin蛋白亚型在胃癌组织中的表达降低或增高所起作用亦不相同。Claudins蛋白与肿瘤形成、癌细胞的增殖、转移、以及预后关系密切。因此,深入研究claudins蛋白与胃癌发生、发展的关系具有重要意义。     

G蛋白偶联受体的双聚化及其对受体介导信号转导的影响

近年来发现一些G蛋白偶联受体（GPCR）能在细胞膜上形成同源或异源双聚体,并证实受体的双聚化为一些有重要生理功能的GPCR在细胞膜上的表达和信号转导的启动所必需,进一步研究表明,一些GPCR的双聚化不仅可以改变受体与配体结合的特异性和亲和力,而且影响GPCR介导的信号转导的调控,这些结果提示,GPCR之间以及GPCR与其它蛋白在细胞膜上的相互作用是调控GPCR转导信号的一个新途径。     

Caveolae及其蛋白质组学研究进展

Caveolae是细胞表面50~100 nm大小的凹陷,它参与细胞的胞吞、胞饮作用、胆固醇的转运和信号转导,是细胞的信号处理中心,具有广泛的抑制信号转导的作用。Caveolae的结构蛋白caveolin-1是胆固醇结合蛋白,参与胆固醇的转运和信号转导。另外,caveolae对血管壁脂质稳态和eNOS功能都起着重要的调节作用,其功能紊乱是动脉粥样硬化发病机制中的重要环节。蛋白质的翻译后修饰及在亚细胞结构内的定位对蛋白质功能的发挥起着重要的作用,而传统的蛋白质组学以研究全细胞总蛋白的变化为主。Caveolae作为细胞表面的一个重要的细胞膜结构受到了人们的普遍关注,因此出现了一系列针对caveolae的功能蛋白质组学的研究。本文结合作者实验室近年来的研究以及国内外的研究现状,从多个角度对caveolae的研究进展进行概要介绍。     

4．1B蛋白表达与非小细胞肺癌进展的关系

目的：探讨4．1B蛋白表达与非小细胞肺癌（NSCLC）进展的关系。方法：收集166例临床手术切除、石蜡包埋的原发NSCLC组织,免疫组化检测4．1B蛋白表达,分析其与NSCLC进展的关系。结果：26例4．1B蛋白表达于细胞膜上。69例4．1B蛋白表达缺失,71例胞浆表达。包括胞浆表迭在内,4．1B蛋白异常表达率为84．34％。肿瘤最大直径≤3cm组、未转移组、临床分期I和II期组4．1B蛋白胞膜表达阳性率分别高于肿瘤最大直径〉3cm组、转移组、III和Ⅳ期组,差异有统计学意义（P〈0．0．1）,但4．1B细胞浆表达阳性率在各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：在NSCLC组织内,4．1B蛋白存在表达缺失现象,也存在异常定位现象。表达于细胞膜的4．1B蛋白在NSCLC发展过程中可能发挥抑制作用,其表达缺失可能促进肿瘤进展。     

E1A激活基因阻遏子过表达抑制体外人血管平滑肌细胞凋亡

为探讨E1A激活基因阻遏子（cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG）对人血管平滑肌细胞（vascular smooth muscl ecells,VSMCs）凋亡的影响及调控机制,应用正、反义重组逆转录病毒表达载体pLNCX,（＋）／CREG及pLXSN（-）／CREG制备稳定感染人胸廓内动脉平滑肌细胞克隆株（human internal thoracic artery-Shenyang,HITASY）细胞模型,观察CREG蛋白过表达及表达抑制对平滑肌细胞凋亡的影响。荧光显微镜下观察DAPI染色后凋亡细胞核形态,AnnexinV／PI流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR技术分析凋亡相关基因caspase-9mRNA的表达,蛋白质印迹法分析p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（phosphorylated p38 mitogen-activated proteinkinase,P-p38 MAPK）的表达变化。研究结果显示,CREG蛋白过表达明显抑制血清饥饿诱导的HITASY细胞凋亡的发生;同时细胞中p38MAPK、P-p38MAPK的表达增加。相反,抑制CREG蛋白表达则引起正常血清培养状态下VSMCs的自发凋亡明显增加,同时细胞内p38MAPK、P-p38MAPK表达显著下降。进一步研究发现,预先应用特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号转导通路后,CREG蛋白过表达引起的细胞凋亡抑制作用被明显减弱,血清饥饿后CREG蛋白过表达引起的HITASY细胞凋亡现象明显增加。上述结果提示,CREG蛋白过表达可以抑制体外培养的VSMCs凋亡,p38MAPK信号转导通路可能介导CREG蛋白对VSMCs凋亡的抑制作用。     

GAI/RGA蛋白家族的研究进展

赤霉素(GAs)通过同细胞膜上的受体结合,经过一系列信号分子传递从而调节植物的生长发育。在已发现的植物GA信号传递分子中,有一类重要的组成元件—GAI/RGA家族蛋白,不仅作用于植物的种子萌发、茎的伸长和花的发育等许多方面,而且在GA信号转导途径与其他植物激素信号转导途径的相互作用中起着非常重要的作用。最近几年,对GAI/RGA家族蛋白的研究取得了惊人的进展。现就GAI/RGA家族蛋白的结构、在GA信号转导中的作用、在植物生长发育中的作用以及在激素相互关系中的作用等方面进行综述。     

RhoA和血清反应因子(SRF)介导E1A激活基因阻遏子诱导人血管平滑肌细胞分化

为探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的调控机制,应用重组逆转录病毒表达载体pLNCX2( )/CREG及pLXSN(-)/CREG制备稳定感染HITASY细胞模型,观察CREG蛋白过表达及表达抑制对人VSMCs分化的影响并探讨其调控机制.结果显示:pLNCX2( )/CREG稳定感染细胞呈分化表型,细胞细长变成组织样聚集生长趋势,细胞中CREG蛋白和平滑肌分化标志蛋白平滑肌α-肌动蛋白(SMα-actin)表达显著增加,同时SMα-actin相关调控因子——血清反应因子(SRF)入核转位,RhoA总蛋白表达上调,以Rho激酶特异性抑制剂Y-27632作用后,CREG诱导的SMα-actin表达下调的同时SRF出核转位;pLXSN(-)/CREG稳定感染的细胞体积变大,细胞极性消失,呈无序生长,细胞中CREG和SMα-actin蛋白表达显著降低,同时伴有SRF出核转位及RhoA总蛋白表达下调.免疫共沉淀分析发现,CREG蛋白能被分泌到VSMCs培养基中表达,并可与细胞膜受体6-磷酸甘露糖/胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(M6P/IGF2R)发生直接相互作用.用蛋白磷酸酶PP2A特异性抑制剂okadaicacid减少M6P/IGF2R在细胞膜表面分布,可明显抑制CREG过表达引起的RhoA、SRF和SMα-actin表达.上述结果提示,在体外培养的人VSMCs中,CREG可能作为一种分泌型蛋白质通过与细胞膜受体M6P/IGF2R相互作用,依次激活SMα-actin蛋白相关调控因子RhoA和SRF引起SMα-actin表达增加,促进VSMCs向分化表型转换.