漳江口红树林沉积物真菌多样性分析及抗茶叶致病真菌生物活性筛选

以福建漳江口红树林国家级自然保护区红树林沉积物分离的真菌为对象,研究红树林沉积物真菌的多样性和筛选抗茶叶病原真菌活性的菌株。将分离纯化的135株真菌通过形态学和Ribosomal DNA-Internal Transcribed Spacer(rDNAITS)序列测定进行鉴定及多样性分析,归为40个种类型,分别属于17个属,其中青霉属(25%)为优势菌,木霉属(15%)、曲霉属(10%)和镰刀属(10%)次之,表明红树林沉积物真菌具有丰富的多样性;利用平板对峙法对真菌的发酵粗提物抗茶叶病原真菌生物活性研究,结果发现,共有17株(占42.5%)真菌具有抗茶叶病原真菌活性,其中15株能够抑制茶叶轮斑病(Pestalotiopsis theae)LH13,12株能够抑制茶叶炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)LH30,8株能够抑制茶叶溃疡病(Neofusicoccumsp.)LH107,有两株对这三种茶叶致病菌均有较强活性。这些活性菌株分布在6个属中,分别是青霉属(7株)、木霉属(3株)、镰孢属(2株)、枝孢属(2株)、白地霉属(2株)和球腔菌属(1株)。由此可见,红树林沉积物真菌抗菌活性菌株的种属分布具有多样性。     

红壤中VA菌根真菌(球囊霉目)的种类和生态分布

本文报道了发育于第四纪红色粘土母质上的红壤中的4属13种VA菌根真菌(球囊霉目):1.细齿无梗囊霉 Acaulospora denticulata Sieverding & Toro;2.丽孢无梗囊霉Acaulospora elegans Trappe & Gerdemann:3.光壁无梗囊霉Acaulospora laevis Gerdeman D & Trappe:4.巨大巨孢囊霉Gigaspora gigantea(Nicol.& Gerd.)Gerdemann & Trappe;5.珍珠巨孢囊霉Gigaspora margarita Becket & Hall;6.聚球囊霉Glomus aggregatum Schenck & Smith;7.明球囊霉Glomus clarum Nicolson & Schenck;8.集球囊霉Glomus fasiculatum(Thaxter)Gerdemann & Trappe;9.地球囊霉Glomus geosporum(Nicol.& Gerd.)Walker;10.木薯球囊霉Glomus manihot Howeler,Sieverding & Schenck;11.变形球囊霉Glomus versiforme(Karsten)Berch;12.美丽盾孢囊霉Scutellospora calospora(Nicol.& Gerd.)Walker & Sanders;13.异配盾孢囊霉Scutellospora heterogama(Nicol.& Gerd.)Walker & Sanders。其中细齿无梗囊霉(Acaulospora denticulata)、巨大巨孢囊霉(Gigaspora gigantea)、木薯球囊霉(Glomus manihot)和异配盾孢囊霉(Scutellospora heterogama)4种为国内新记录种。对这13种VA菌根真菌的形态进行了描述讨论,并对这些种群的出现频度、不同利用方式     

我国东南沿海地区的VA菌根真菌 Ⅰ.四种硬囊霉

报道了从我国东南沿海地区山东、浙江、福建、广东、广西、海南等省分离的四种VA菌根真菌:枫香硬囊霉Sclerocystis liquidambaris Wu & Chen,台湾硬囊霉Sclerocystis taiwanensis Wu & Chen,悬钩子状硬囊霉Sclerocystis rubiformis Gerdemann & Trappe,弯丝硬囊霉Sclerocystis sinuosa Gerdemann & Bakshi。其中枫香硬囊霉,台湾硬囊霉和悬钩子状硬囊霉在我国大陆初次发现。本文详细记叙了以上四个种的形态特征及生境状况。     

烟草内生菌根真菌的分离鉴定

本文报道了从烟草(Nicotiana tabacum L.)的根际土壤中分离出内生菌根真菌的孢子,用单孢接种烟苗并在温室内水培条件下培养。选出能在烟草上形成菌根的菌株,经过再次单孢接种确认后,进行种的鉴定。从分离的8个菌株中已鉴定出球囊霉属(Glomus)的3个新记录种:漏斗孢球囊霉[G.mosseae(Nic.& Gerd.)GeM.& Trappe]、根内孢球囊霉(G.intraradics Schenck & Smith)和联结球囊霉(G.constrictum Trappe)。     

我国北部的八种VA菌根真菌

本文为继“我国北部的七种VA菌根真菌”之后的续篇,报道了从北京、新疆和吉林分离的八个种:细凹无梗囊霉Acaulospora scrobiculata Trappe,蜜色无梗囊霉A.mellea Spain& Schenck,稍长无梗囊霉A.longula Spain & Schenck,近明球囊霉Glomus claroideumSchenck & Smith,集球囊霉G.fasciculatum(Thaxter)Gerd.& Trappe,emend.Walker& Koske,地球囊霉G.geosporum(Nicol.& Gerd.)Walker,何氏球囊霉G.hoi Berch &Trappe,根内球囊霉G.intraradix Schenck & Smith。其中,细凹无梗囊霉、蜜色无梗囊霉、稍长无梗囊霉和何氏球囊霉等4个为我国新记录种。本文报道了上述8种的形态特征描述、孢壁组织化学反应及生境状况。     

福建、浙江、江苏、上海疫霉种的研究

1985—1986年,从福建漳州,浙江杭州,上海,江苏南京,苏州,扬州,常州等地采集100多种植物进行分离,在雪松(Cedrus deodara),倒挂仙人鞭(Cereus flagelliformis),冬青卫茅(Euonymus japonieus),构树(Broussonetia papyrifera),蓖麻(Ricinus communis),柑桔(Citrus reticulata),带叶兜兰(Paphiopedilum hirsutissimum),芋(Colocasia esculenta),鳄梨(Persea americana),山茶(Camellia sp.),珊瑚樱(Solanum pseudo-capsicum),百合(Lilium brownii var.viridulum),蔓常春花(Vinca major),西瓜(Citrullus lanatus)等14种寄主植物上分离到51个疫霉菌株,鉴定为9个种:烟草疫霉(=寄生疫霉)Phytophthora nicotianae B.de Haan(=P.parasitica Dast.),掘氏疫霉P.drechsleri Tucker,樟疫霉 P.ciunamomi Rands,棕榈疫霉P.palmivora(Butl.)Butl.,柑桔褐腐疫霉P.citrophthora(R.et E.Smith) Leon.,苎麻疫霉P.bochmeriae Saw.,蜜色疫霉P.meadii McRae,簇囊疫霉P.botryosa Chee,隐地疫霉P.cryptogea Pethyb.et Laff.。其中,烟草疫霉,掘氏疫霉,樟疫霉出现频率较高,分布较广,初步认为是上述地区植物疫病的主要病原菌。簇囊疫霉、蜜色疫霉是国内新记录。     

六种疫霉菌体可溶性蛋白质和酯酶的聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究

本文对槐生疫霉(Phytophthora robinicola)、掘氏疫霉(P.drechsleri)、樟疫霉(P.cinnamomi)、烟草疫霉(P.nicotianae)、棕榈疫霉(P.palmivora)及辣椒疫霉(P.capsici)等6种疫霉81株菌菌体可溶性蛋白质和酯酶进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究。结果指出,种间蛋白质图谱差异明显,种内菌株间基本一致。就酯酶图谱来说,种内菌株间存在一定差异,但种间差异更为显著。因此,本试验进一步支持槐生疫霉新种的建立。同时表明,菌体可溶性蛋白质电泳图谱在疫霉种的鉴定和分类上具有重要意义,而酯酶电泳图谱在一定程度上也有助于疫霉种的研究。     

六种疫霉菌体可溶性蛋白质和酯酶的聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究*

本文对槐生疫霉(Phytophthora robinicola)、掘氏疫霉(P.drechsleri)、樟疫霉(P.cinnamomi)、烟草疫霉(P.nicotianae)、棕榈疫霉(P.palmivora)及辣椒疫霉(P.capsici)等6种疫霉81株菌菌体可溶性蛋白质和酯酶进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究。结果指出,种间蛋白质图谱差异明显,种内菌株间基本一致。就酯酶图谱来说,种内菌株间存在一定差异,但种间差异更为显著。因此,本试验进一步支持槐生疫霉新种的建立。同时表明,菌体可溶性蛋白质电泳图谱在疫霉种的鉴定和分类上具有重要意义,而酯酶电泳图谱在一定程度上也有助于疫霉种的研究。     

云南金顶铅锌矿区丛枝菌根真菌多样性的研究

对云南金顶铅锌矿区丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)资源进行了调查,从32种植物的83个根际土壤样本中分离鉴定出5属36种丛枝菌根真菌,其中无梗囊霉属Acaulospora 5种、内养囊霉属Entrophospora 2种、巨孢囊霉属Gigaspora 1种、球囊霉属Glomus 24种及盾巨孢囊霉属Scutellospora 4种。球囊霉属和无梗囊霉属为金顶铅锌矿区中丛枝菌根真菌的优势属,沃克球囊霉Glomus walkeri是我国的新记录种。近明球囊霉Glomus claroideum、明球囊霉G.clarum、缩球囊霉G.constrictium、地球囊霉G.geosporum、摩西球囊霉G.mossaea、膨胀球囊霉G.pansihalos和疣突球囊霉G.verruculosum是金顶铅锌矿区的优势种;金顶铅锌矿区土壤中丛枝菌根真菌的孢子密度为495-11175个/100g土,平均3368±291(SE,标准误差)个/100g土,每种植物根际土壤中丛枝菌根真菌的物种丰富度为2-20种,平均11.5种;金顶铅锌矿区植物根际土壤中较高的AMF孢子密度和物种丰富度说明AMF对重金属污染具有较强的抗(耐受)性。     

林火对植物根围丛枝菌根真菌多样性的影响

林火是森林生态系统的一种主要干扰因子,以青岛市三标山林火迹地为研究对象,采集荆条(Vitex negundo)、胡枝子(Lespedeza bicolor)、花木蓝(Indigofera kirilowii)、青花椒(Zanthoxylum schinifolium)和野青茅(Deyeuxia arundinacea)5种优势植物根围土壤,研究不同林火强度对丛枝菌根(AM)真菌多样性的影响。结果表明,AM真菌侵染率和孢子密度随火灾强度的加强而降低;非过火区植物根围土壤中,分离鉴定出AM真菌3属11种,轻度过火区分离鉴定出AM真菌3属10种,中度过火区分离鉴定出AM真菌3属9种,重度过火区分离鉴定出AM真菌3属8种。过火区AM真菌种丰度低于非过火区。过火区和非过火区AM真菌的重要值和优势种不同,非过火区植物根围的优势种是地球囊霉(Glomus geosporum)、台湾球囊霉(G.taiwanensis)、分支巨孢囊霉(Gigaspora ramisporophora)、极大巨孢囊霉(Gi.gigantean)、福摩萨球囊霉(G.formosanum)、悬钩子球囊霉(G.rubiforme)、柯氏无梗囊霉(Acaulospora koskei)和松蜜无梗囊霉(A.thomii);轻度过火区植物根围的优势种是地球囊霉和台湾球囊霉;中度过火区的是台湾球囊霉和地球囊霉(野青茅除外);重度过火区植物根围的优势种是地球囊霉。不同强度的过火区对AM真菌群落组成有不同程度的影响。认为林火降低植物根围土壤中AM真菌多样性。     

同时携带blaKPC和blaOXA-10基因的亚胺培南耐药阴沟肠杆菌的研究

目的研究宁波地区临床分离的亚胺培南耐药的阴沟肠杆菌所携带的β-内酰胺酶耐药基因,以确定本地区亚胺培南耐药的阴沟肠杆菌的主要基因型别及其流行情况,指导临床合理用药。方法收集2010年1月1日至2011年4月30日临床分离的阴沟肠杆菌,筛选出亚胺培南耐药菌株用PCR法进行blaOXA-10、blaOXA-2、blaOXA-1、blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaNDM-1、blaIMI-1、blaSME、blaSHV-38等多种基因的同时检测。结果共收集到阴沟肠杆菌311株,筛选出对亚胺培南耐药的6株(编号为37号、60号、89号、90号、92号、120号),占1.92%;PCR检测结果显示60号、89号、92号、120号菌株同时产blaKPC型碳青霉烯酶和OXA-10型广谱β-内酰胺酶。结论首次在亚胺培南耐药的阴沟肠杆菌中发现了blaKPC与blaOXA-10同时存在的菌株;亚胺培南耐药的阴沟肠杆菌其耐药机制复杂,且多种耐药机制共存,亟待我们积极深入的探索研究。     

28 179例血培养病原菌分布及耐药性分析

了解2009年至2012年中国医科大学附属第一医院血培养标本常见病原菌的分布和耐药性。采用美国BD公司BACTEC9240型全自动血培养仪及其配套血培养瓶,所有分离病原菌采用法国生物梅里埃公司Vitek-2或BD Phonenix 100进行细菌鉴定和药敏试验,应用WHONET5．6软件进行细菌菌谱和耐药性分析。28179例血培养标本共分离出3295株病原菌,阳性率为11．69％,其中革兰阳性球菌1649株,占50．05％;革兰阴性杆菌1331株,占40．39％;真菌112株,占3．4％。分离率最高的细菌是凝固酶阴性葡萄球菌（34．26％）,其次是大肠埃希菌（10．44％）、肺炎克雷伯菌（8．22％）、鲍氏不动杆菌（5．13％）、金黄色葡萄球菌（4．8％）、铜绿假单胞菌（3．28％）、屎肠球菌（3．28％）;葡萄球菌属对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁高度敏感,金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占46．20％,凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占85．74％;革兰阴性杆菌（除鲍氏不动杆菌）对碳青霉烯类药物敏感性较好,对头孢菌素类和喹诺酮类耐药率较高;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶株分别占57．56％、36．9％。引起菌血症的病原菌种类复杂,多种菌株耐药率较高,临床应根据病原菌变化及耐药性及时调整抗菌药物用药。     

Aβ_(25～35)和人参皂苷Rb1对鼠神经干细胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表达的影响

目的:研究大鼠神经干细胞诱导分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A的表达以及Aβ25～35和人参皂苷Rb1的调节作用。方法:取新生SD大鼠的海马组织体外培养获得NSCs,诱导第3代的NSCs向神经细胞分化1周后,免疫荧光细胞化学染色检测活化型GSK-3β(pTyr279,216)和蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)的表达及Aβ25～35和人参皂苷Rb1对它们的影响;RT-PCR分析糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、细胞周期依赖性蛋白激酶-5(CDK-5)和蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)的mRNA表达以及Aβ25～35和人参皂苷Rb1的影响。结果:免疫荧光细胞化学染色显示:NSCs诱导分化1周后有活化型GSK-3β(pTyr279,216)和PP2A的表达,Aβ25～35能增强GSK-3β(pTyr279,216)的表达同时抑制PP2A的表达,而人参皂苷Rb1则能逆转Aβ25～35的作用;RT-PCR检测发现:NSCs诱导分化1周后表达GSK-3β、CDK-5和PP2A的mRNA,使用Aβ25～35处理后GSK-3β、CDK-5的表达增强而PP2A的表达减弱,用人参皂苷Rb1预处理神经干细胞后Aβ25～35的作用受到抑制。结论:体外培养的神经干细胞分化后表达GSK-3β、CDK-5和PP2A,并受Aβ25～35和人参皂苷Rb1的调节,提示在体外由神经干细胞分化的细胞具备正常神经细胞的蛋白磷酸化调节系统。     

迷迭香植物精油对白纹伊蚊的驱避作用及其化学成分

应用水蒸气蒸溜法和超临界二氧化碳萃取法提取生长于云南的迷迭香茎叶植物精油,测试2种精油对白纹伊蚊Aedes albopictus Skuse的驱避作用,并利用GC/MS联用仪分析2种精油的化学成分。结果表明:超临界二氧化碳提取的迷迭香精油对白纹伊蚊的驱避时间是(5.82±1.13)h,达到国标驱避剂评价的B级标准。2种精油化学成分中都含有驱纹活性物质:柠檬烯、樟脑、Eucalyptol、(+)-4-Carene、1-methyl-4-(1-methyle thylidene)-cyclohexene、Beta-pinene等,且驱蚊活性成分在挥发油中占有较高比例,显示该植物精油在驱蚊方面有一定开发价值。     

Immature B cells can pass through a VHDJH/germ line state in the Ig H chain gene rearrangements

SPL2-1-2, an Ig- murine immature B cell line, was established by the infection of immature B cells with tsOS-59, a temperature-sensitive mutant of Abelson murine leukemia virus. Southern blot and DNA cloning and sequencing analysis showed that SPL2-1-2 had a nonproductive VHQ52.DSP2.JH3 and a germ line (G) allele (VHDJH-/G), and that D to JH joinings followed by VH to DJH joinings progressed on the G allele during culture. These results indicated the existence of novel pathway of IgH gene rearrangements: G/G----DJH/G----VHDJH/G----VHDJH/DJH----VHDJH /VHDJH. This also implied that whether DJH/G state progressed to DJH/DJH or VHDJH/G state was stochastically determined, but not strictly controlled in an ordered fashion, although DJH/G state progressed more preferentially to DJH/DJH state than to VHDJH/G state.     

ISEcp1B介导铜绿假单胞菌CTX—M型ESBLs传播的分子机制研究

目的了解CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在铜绿假单胞菌传播的分子机制。方法用Kirby-Bauer（K-B）药敏法分析26株铜绿假单胞菌的耐药性;用多重聚合酶链式反应（PCR）扩增ESBLs、ISEcp1B插入序列及Ⅰ类整合子;用套式PCR在Ⅰ类整合子寻找β-内酰胺酶基因盒。结果26株多重耐药铜绿假单胞菌对下列抗生素的耐药率为：（1）头孢噻肟（69．23％）、哌拉西林（65．38％）、替卡西林／克拉维酸（65．38％）、头孢他啶（57．69％）、头孢吡肟（46．15％）、环丙沙星（50．00％）、氨曲南（46．15％）、阿米卡星（34．62％）、亚胺培南（30．77％）、头孢哌酮／舒巴坦（23．08％）;（2）11株铜绿假单胞菌中检出CTX-M-G1,其中4株同时检出TEM、SHV、CTX-M-G1、ISEcp1B及Ⅰ类整合子,Ⅰ类整合子内未扩增出β-内酰胺酶;（3）ISEcp1B下游均连接CTX-M型ESBLs,ISEcp1B右端有一个反向重复序列,为转位酶提供作用位点;-35及-10位点各有一个启动子,对下游不同的CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。结论ISEcp1B可能对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。     

大蒜素体外抗白念珠菌生物膜作用的初步研究

目的研究大蒜素对体外白念珠菌生物膜的影响。方法 MTT法评价大蒜素对白念珠菌生物膜形成及细胞黏附的影响;血清芽管计数法评价大蒜素对白念珠菌芽管形成的影响。结果低浓度(4μg/mL)和高浓度(64μg/mL)大蒜素对白念珠菌生物膜形成的抑制率分别为(23.0±1.1)%和(95.6±0.3)%;32μg/mL大蒜素对早期(0h)、中期(12h)及成熟期(48h)生物膜的抑制率分别为(88.5±0.5)%、(63.3±0.8)%和(52.3±1.1)%;与空白对照组相比,不同浓度大蒜素(4～32μg/mL)对培养30min、60min、90min、120min的白念珠菌细胞黏附均有显著抑制作用(P0.05);空白对照组芽管形成率为(91.2±1.6)%,64μg/mL大蒜素组为(2.2±1.2)%。结论大蒜素对体外白念珠菌生物膜有较明显的抑制作用。     

假酸浆中新的醉茄内酯类化合物

从假酸浆（Nicandra physaloides）全草中分离得到12个化合物,其中两个为新的醉茄内酯类化合物,经波谱学方法将其结构鉴定为nicandrenone methyl ether （1） 和26S-nicandrenone methyl ether （2）;已知化合物为三个醉茄内酯,nicandrenone （3）,Nic-7 （4）,nicaphysalin E （5）,以及pinosylvin monomethyl ether （6）,2S-pinocembrin （7）,（1S, 2R）-1, 2-bis （4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1, 3-propanediol （8）,vanillin （9）,indole-3-carboxylic acid （10）,vanillic acid （11） 和drummondol （12）。     

思茅松中幼人工林的生物量碳计量参数

通过开展思茅松中幼人工林样地调查,基于实测数据计算了相关碳计量参数并研究了碳计量参数与相关林分因子的关系.结果表明:1)思茅松中幼人工林生物量转化与扩展因子(BCEF)的平均值为0.5483 Mg·m~(-3)(n=30,95%置信区间:0.5357～0.5609),低于政府间气候变化专门委员会(IPCC)的缺省值.BCEF和平均树高(H)、林分形高(FH)、蓄积量(V)和林龄(A)存在显著负相关(P<0.05).BCEF和平均胸径(D)负相关,但相关不显著(P>0.05).BCEF和N(林分密度)正相关,但相关不显著(P>0.05).BCEF值与林分因子的关系函数拟合效果不佳.2)思茅松中幼人工林生物量扩展因子(BEF)的均值为1.78378(n=30,95%置信区间:1.71714～1.85043),高于IPCC缺省值.BEF和D、H、FH、V和A存在极显著的负相关(P<0.01),与N存在显著的正相关(P<0.05).BEF与A和V的关系以二次曲线函数形式拟合效果较好,与N的关系则以双曲线形式较好,与FH、H和D的关系以幂函数较好.3)思茅松中幼人工林的根茎比(R)均值为0.2400(n=30,95%置信区间:0.2194～0.2606),与IPCC缺省值基本一致.R与D、H、FH、V和A有极显著的负相关关系,与N有显著的正相关关系.R与D、H、FH、V和A的关系以二次曲线的形式拟合效果较好,与N的关系则以双曲线形式拟合较好.     

幼虫密度对马铃薯块茎蛾生长发育及繁殖的影响

室内观察了块茎中不同虫口密度(5、10、15、20、25、30头/块茎)对马铃薯块茎蛾Phthorimaea operculella(Zeller)生长发育、后代发育和繁殖的影响。结果显示:幼虫密度显著影响马铃薯块茎蛾的生长发育及繁殖。对其生长发育影响的结果表明:幼虫的发育历期(7.1～9.1d)、蛹的历期(8.8～9.9d)、雌雄成虫的历期(分别为6.4～12.9d,6.7～11.6d)随幼虫密度的增加而延长;幼虫存活率(70.3%～93.3%)、蛹的羽化率(69.8%～91.7%)随幼虫密度的增加显著下降;单头蛹重(9.2～11.4mg)、单雌产卵量(136.8～166.0粒)、成虫的雌∶雄比(0.54～2.17)随幼虫密度的增加而下降。对其后代发育及繁殖的影响的结果表明:卵的发育历期(3.0～4.4d)、幼虫的发育历期(6.2～10.8d)、蛹的历期(8.1～10.0d)、雌雄成虫的历期(分别为7.4～11.8d,6.6～10.5d)、世代发育历期(24.4～36.1d)随幼虫密度的增加而从延长;卵的孵化率(73.1%～79.0%)、幼虫存活率(55.0%～96.8%)、蛹的羽化率(63.3%～93.3%)、世代的存活率(25.6%～71.5%)随虫口密度的增加而下降;单头蛹重(8.9～9.9mg)、单雌产卵量(93.5～155.6粒)、成虫的雌∶雄比(0.45～2.20)随虫口密度的增加而下降;种群趋势指数(I)(7.44～76.43)随幼虫密度的增加而下降。马铃薯块茎蛾的饲养密度建议以1头/13.0～26.0g块茎为宜。