合成苏氨酸的研究（V）─DL－别苏氨酸的光学拆分

研究了用优先结晶法对ＤＬ－别苏氨酸进行光学活性拆分的问题,在相图基础上选取适当的过饱和度,即配制成原始拆分母液。作为晶种,既可用光活性别苏氨酸,也可用光活性苏氨酸,可用对映的一对光活性晶种,还介绍用单一晶种的拆分方法,提出了Ｌ－别苏氨酸与Ｌ－苏氨酸、Ｄ－别苏氨酸与Ｄ－苏氨酸为“胶着对”,Ｌ－别苏氨酸与Ｄ－苏氨酸,Ｌ－别苏氨酸与Ｄ－苏氨酸为“离散对”的观点。     

合成苏氨酸的研究（Ⅳ）DL—苏氨酸的光学拆分

本文研究了用优先结晶法拆分ＤＬ－苏氨酸的有关问题,诸如（Ｌ－Ｔｈｒ＋Ｄ－Ｔｈｒ＋Ｈ２Ｏ）三元体系溶解度数据、”平液“及”贫液“拆分问题,拆分速度对晶种的依存、过饱和度的选择、连续拆分设想及间歇拆分示例等,为工业化过程提供了重要的实验依据。     

合成苏氨酸的研究（Ⅴ）—DL—别苏氨酸的光学拆分

研究了用优先结晶法对ＤＬ－别苏氨酸进行光学活性拆分的问题，在相图基础上选取适当的过饱和度，即配制成原始拆分母液。作为品种，既可用光活性别苏氨酸，也可用光活性苏氨酸。可用对映的一对光活性晶种，还介绍用单一晶种的拆分方法，提出了Ｌ－别苏氨酸 Ｌ－苏氨酸，Ｄ－别苏氨酸与Ｄ－苏氨酸为“胶着对”Ｌ－别苏氨酸与Ｄ－苏氨酸，Ｌ－别苏氨酸与Ｄ－苏氨酸为“离散对”的观点。     

DL－氨基酸拆分条件的优化

本文利用高效液相色谱,应用两种不同类型的方法拆分Ｄ、Ｌ－氨基酸,对拆分条件进行了优化。当利用脲衍生型手性色谱柱时,流动相组成为：正已烷／二氯乙烷／乙醇＝７５：１８：７拆分迅速、有效;当利用柱前衍生反相色谱拆分时,在甲醇／ＮａＡｃ缓冲溶液流动相中加入适量ＴＨＦ得到很好的分离效果。     

基因工程菌发酵合成L－苏氨酸－N~（15）

采用含有稳定同位素１５Ｎ－硫酸铵为主要氮源的专用发酵培养基配方和提取精制条件,在国内、外首次采用基因工程菌ＡＡ７（ｐＴＨ２）（ＡＨＶｒＡＥＣｒ,Ｔｈｒ－Ｎ－,Ｈｏｍｒ,Ａｐｒ）直接发酵方法研制Ｌ－苏氨酸－Ｎ１５高丰度精制产品。每ｍｏｌ１５Ｎ－硫酸铵实际得到０．６３８ｍｏｌＬ－苏氨酸－Ｎ１５,产品Ｎ１５丰度达９９．０９％,仅比原料１５Ｎ－硫酸铵丰度下降０．４２％,提取精制得率高达９２．８３％。     

苏氨酸的化学合成（Ⅲ）──几种光学活性异构体的基础物性

本文研究了苏氨酸和别苏氨酸的光学活性异构体及混旋体的一些基础物理性质，如溶解度、旋光特性等。     

基因工程菌发酵合成L－苏氨酸－N15

采用含有稳定同位素^１５Ｎ－硫酸铵为主要氮源的专用发酵培养基配方和提取精制条件,在国内、外首次采用基因工程菌ＡＡ_７（ｐ^ＴＨ２）（ＡＨＶ^ｒＡＥＣ^ｒ,Ｔｈ^ｒ－Ｎ^－,Ｈｏｍ^ｒ,Ａｐ^ｒ）直接发酵方法研制Ｌ－苏氨酸－Ｎ^１５高丰度精制产品。每ｍｏｌ^１５Ｎ－硫酸铵实际得到０．６３８ｍ     

微生物发酵合成L－缬氨酸－~（15）N

采用含有稳定同位素￣（１５）Ｎ－硫铵为主要氮源的专用发酵培养液配方和相应的工艺条件,在国内首次用微生物直接发酵研制成Ｌ－缬氨酸－￣（１５）Ｎ高丰度精制产品。产品￣（１５）Ｎ丰度９７．６８％,反比原料￣（１５）Ｎ－硫铵丰度下降０．５３％,Ｌ－缬氨酸－￣（１５）Ｎ产酸率最高达４％以上（未校正）。每克￣（１５）Ｎ－硫铵可得到１克以上的Ｌ－缬氨酸－￣（１５）Ｎ（分析值）。提取精制收率平均为８０－９０％（单程）,最高达到９５％以上（二次提取）。实际每克￣（１５）Ｎ－硫铵可得０．６克左右的Ｌ－缬氨酸－￣（１５）Ｎ精制产品。     

DL─蛋氨酸的希夫碱的铜（Ⅱ）、锌（Ⅱ）配合物的抑菌作用

合成ＤＬ─蛋氨酸与邻香草醛缩合成铜（Ⅱ）、锌（Ⅱ）配合物,经化学分析、电子、红外光谱、热分析测定,对配合物进行了组成和结构分析。测定了配合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草杆菌的抑制作用。     

单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素初步晶体学研究

用微量气相扩散方法在含酚的柠檬酸缓冲体系中,得到了可供Ｘ射线晶体学分析用的Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶体,晶体衍射能力为２．５Ａ。经Ｘ射线衍射分析确定,该晶体属于单斜晶系,空间群为Ｐ２_１,晶胞参数：ａ＝６１．５Ａ,ｂ＝６２．２Ａ,ｃ＝４８．３Ａ,α＝γ＝９０．０°,β＝１１０．９°。晶胞中每个结晶学不对称单位含有一个Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素六聚体。     

N－（膦羧甲基）α－甘氨酸的合成与应用

叙述了Ｎ－（膦羧甲基）α－甘氨酸的化学合成及其在除草剂方面的应用。该化合物有五条合成路线：曼尼斯反应、加成反应、取代反应、氧化还原反应和其他反应。其中曼尼斯反应较简便,可由甘氨酸、甲醛和亚磷酸酯一步合成标题化合物。Ｎ－（膦羧甲基）α－甘氨酸是一种高效广谱内吸传导型叶片喷药除草剂,它能有效地控制世界上危害最大的７８种恶性杂草中的７６种,还能“斩草除根”。除草机理为竞争性抑制５－烯醇丙酮莽草酸－３－磷酸合成酶（ＥＰＳＰａｓｅ）。     

利用大肠杆菌表达系统进行葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G－6－PD）的生化鉴定

利用大肠杆菌表达系统进行葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）的生化鉴定卢义钦（湖南医科大学生化教研室,长沙４１００７８）关键词葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）,大肠杆菌,表达葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症在各民族人群中均有发现,据估...     

1．9A分辨率Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

使用Ｘ－ＰＬＯＲ及立体化学制约最小二乘精化技术,并结合差值Ｆｏｕｒｉｅｒ图人工分析,测定了１．９　分辨率Ａｌ修饰丙氨酸胰岛素的晶体结构,晶体空间群为Ｒ３,晶胞参数：ａ＝ｂ＝８０．８９,ｃ＝３７．６４。精化后的结构模型最终偏离因子Ｒ＝０．１８５,同理想键长和键角的均方根偏差分别为０．０１８和３．５°,独立区内二个分子的Ａ链Ｎ端Ａｌ－丙氨酸残基清晰可见。     

L－亮氨酸Schiff碱Cu（Ⅱ）、Ni（Ⅱ）配合物的合成及抑菌活性

合成了Ｌ－亮氨酸Ｓｃｈｉｆｆ碱的Ｃｕ（Ⅱ）、Ｎｉ（Ⅱ）配合物,其化学结构由红外光谱、元素分析、热重分析及摩尔电导等证实。对配合物进行了抑菌测试。     

L－亮氨酸Schiff碱Cu（Ⅱ）、Ni（Ⅱ）配合物的合成及抑菌活性

合成了Ｌ－亮氨酸Ｓｃｈｉｆｆ碱的Ｃｕ（Ⅱ）、Ｎｉ（Ⅱ）配合物,其化学结构由红外光谱、元素分析、热重分析及摩尔电导等证实。对配合物进行了抑菌测试。     

2．5分辨率单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

空间群为Ｐ２１的Ａ１－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶胞内,一个不对称单位含有一个六聚体,应用差值Ｆｏｕｒｉｅｒ技术,立体化学制最小二来技术和Ｘ—ＰＬＯＲ程序并辅以电子密度图的人工拟合,解析了分辨率ＡＩ—（Ｌ－丙氨酸）胰岛素（Ａｌ－Ｌ－ＡｌａⅠ）的晶体结构。最终Ｒ因子为２０．６％,与标准键长与键角的均方根偏差分别为和４．１９°,从电子密度图与模型的拟合来看,六聚体中每条Ａ链的Ａｌ位置替换的Ｌ—Ａｌａ清晰可见,每条Ｂ链Ｎ端Ｂ１—Ｂ８伏段都为α螺旋构象,形成了Ｂ１—Ｂ１９的连续α螺旋段。     

Streptomyces coelicolorA3（2）M145中丝／苏氨酸蛋白激酶基因prkC的功能初探

目的对Streptomyces coelicolorA3（2）M145中编码丝／苏氨酸蛋白激酶PrkC的基因SC03848进行功能初探。方法对PrkC蛋白序列进行生物信息学分析,在S．coelicolorA3（2）M145中敲除prkC基因,并进行互补、和过表达实验,对比突变菌株生长、次生代谢物产量、孢子萌发效率等。结果prkC基因在S．coelicolorA3（2）M145孢子萌发、生长、次生代谢等方面均起重要作用。结论prkC是一个多效调节基因,其具体生理功能和作用机制有待深入研究。     

Mg~（2＋）促进线粒体H~＋－ATP酶的重建机理──H~＋－ATP酶复合体亚基水平的研究

用专一性标记蛋白质巯基（－ＳＨ）的荧光探剂ａｃｒｙｌｏｄａｎ测定含Ｍｇ２＋的Ｆ０－ＡＴＰ酶或Ｆ０－ＯＳＣＰ－Ｆ１－ＡＴＰ酶的脂酶体的构象与无Ｍｇ２＋者明显不同,前者的蛋白质的－ＳＨ基团处于疏水性更强的微环境中;在有Ｍｇ２＋和ＯＳＣＰ同时存在下重建的Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶脂酶体较无ＯＳＣＰ者表现更高的水解活力或膜电位,表明ＯＳＣＰ增强Ｍｇ２＋的促进作用,这进一步提示Ｍｇ２＋通过改变膜脂的物理状态促进线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶重建的间接作用。这些实验结果,从线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体的亚基水平的相关性上,对于我们提出的Ｍｇ２＋通过改变膜脂的物理状态使之具有合适的流动性,诱导嵌入脂双层的Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体的Ｆ０的构象发生变化并传递至复合体的催化中心Ｆ１,从而使重建Ｆ１－Ｆ０－ＡＴＰ酶具有较适合的蛋白构象,表现较高的重建酶活性的假设提供了直接的实验证据,精确地阐明了Ｍｇ２＋促进线粒体Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶重建作用的分子机理。     

（－）SPD和（－）THP对蓝斑核去甲肾上腺素能神经元自发放电的影响

利用在体记录大鼠蓝斑核神经元单位放电,研究了（－）ＳＰＤ和（－）ＴＨＰ对其放电活动的影响。结果表明：（－）ＳＰＤ通过去甲肾上腺素α２受体,以剂量依赖方式增强蓝斑核神经元放电,但较大剂量却对神经元放电有一定抑制。然而（－）ＴＨＰ可使蓝斑核去甲肾上腺素能神经元出现可逆性放电抑制。