铅、铬胁迫对大弹涂鱼血细胞遗传损伤的彗星实验检测

通过彗星实验研究重金属Pb、Cr对大弹涂鱼的外周血细胞的影响。用不同浓度的Pb、Cr对大弹涂鱼外周血细胞进行1 h的染毒后通过单细胞凝聚电泳检测DNA损伤情况。结果表明国标浓度的Pb（0.005 mg/L）、Cr（0.05 mg/L）对大弹涂鱼外周血细胞均无明显影响;而国标10倍、100倍和1000倍浓度的Pb或Cr胁迫均会造成血细胞DNA损伤,且离子浓度与血细胞DNA的损伤程度间均存在＂剂量-效应＂,即浓度越高,DNA损伤越严重。因此大弹涂鱼血细胞可作为评价重金属遗传损伤毒性效应的敏感性生物标志物。     

镉胁迫对大弹涂鱼肝脏黄螵呤氧化酶和抗氧化酶活性的影响

研究了不同浓度镉离子对大弹涂鱼肝脏黄嘌呤氧化酶（XOD）、抗氧化酶（超氧化物岐化酶SOD、过氧化氢酶CAT）活性和丙二醛（MDA）含量的影响,以探讨其用于污染暴露的生物标记的可行性.结果表明,低浓度Cd²⁺（0.05 mg·L^-1）暴露使大弹涂鱼肝脏XOD和SOD活性随时间延长升高,第10天达到最大值,中高浓度暴露（0.5 和5 mg·L^-1 Cd²⁺）XOD和SOD活性显著或极显著升高;低和高浓度镉胁迫处理的CAT活性在12 h显著降低,随时间的延长低浓度组CAT活性恢复正常,高浓度组在第7天降到最低值, 并在恢复期的5 d中高浓度组CAT活性却极显著升高;低和中浓度镉胁迫处理的MDA含量12 h极显著升高,而高浓度却极显著下降,随时间延长低浓度恢复正常, 中浓度先上升后下降并到第5天达到最大值,而中高浓度在恢复5 d后MDA含量都极显著降低.     

SCGE技术检测镉对背角无齿蚌血细胞DNA的损伤

以背角无齿蚌(Anodonta woodiana woodiana)为研究对象,利用单细胞凝胶电泳技术检测不同浓度及不同染毒时间氯化镉对背角无齿蚌血细胞DNA的损伤作用。结果显示,染毒后的背角无齿蚌血细胞均出现了拖尾现象,各染毒组与对照组相比,拖尾增长明显。剂量效应组中,蚌暴露在不同浓度(0、1、10、50mg·L^-1)的氯化镉中72 h,各组蚌血细胞DNA平均迁移长度及彗尾DNA含量均明显增加,与阴性对照组比较差异显著(p<0.01),存在显著的剂量-效应关系;在时间效应组中,蚌暴露在10mg·L^-1的氯化镉中分别24、48、72、96 h,随着氯化镉染毒时间的延长,各染毒组细胞DNA平均迁移长度及彗尾DNA含量与0时间组比较差异显著(p<0.01),但时间-效应关系不明显。     

Aroclor 1248对大弹涂鱼的毒性与氧化胁迫

<正>多氯联苯(PCBs)是典型的持久性有机污染物(POPs),具有难降解性、生物毒性、生物蓄积性、远距离迁移性,因此可通过食物链而富集并直接危害人类健康,已成为全球性的重要污染物之一。近20年来,虽然在多数工业化     

牛蛙外周血细胞的形态学特点

本研究对雌雄牛蛙(Rana catesbeiana)外周血细胞的组成、形态、大小和数量进行了观察和统计。牛蛙外周血细胞由红细胞、白细胞以及血栓细胞组成,其中红细胞体积最大,平均大小(长径×短径)为(25.68±1.88)μm×(16.49±1.53)μm,扫描电镜下发现红细胞表面光滑;血栓细胞呈卵圆形或纺锤形,其体积最小,平均大小为(8.62±1.04)μm×(7.47±1.11)μm;白细胞由淋巴细胞、单核细胞、浆细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞组成,扫描电镜下白细胞表面粗糙不平,有许多不规则的凸起。白细胞中淋巴细胞最多,其中小淋巴细胞约占白细胞的32.66%±4.29%,大淋巴细胞约占6.03%±1.54%;嗜碱性粒细胞最少,只占4.78%±0.83%;浆细胞胞体大小不一,常呈椭圆形,平均大小为(23.51±0.59)μm×(22.86±0.67)μm;此外,牛蛙外周血细胞中单核细胞、淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的数量比例以及淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的大小均有性别的差异(P0.05)。     

SCGE法检测敌敌畏对大鳞副泥鳅DNA损伤的研究

目的 采用SCGE技术检测敌敌畏对大鳞副泥鳅DNA的损伤效应.方法 设置敌敌畏0.64 μg/L、1.28μg./L、1.92μg/L、2.56μg/L、3.20μg/L 5个浓度组和一个空白对照组(15尾大鳞副泥鳅/组),通过单细胞凝胶电泳技术(scGE)研究各浓度敌敌畏处理组在分别处理l d、2 d、3 d后对大鳞...     

磁珠富集法筛选大弹涂鱼CA微卫星序列

以大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)基因组DNApool为材料,构建基因组PCR文库,采用链霉亲和素包被的磁珠富集法筛选目的片段.目的片段经克隆、测序验证后获得大弹涂鱼微卫星序列.在筛选的409个菌落中共获得209个阳性克隆,其中具有144个微卫星序列(GenBank登录号为HQ852252 - HQ852395),除去重复测序和侧翼链不足的序列,可以设计引物的微卫星序列有117条.     

大弹涂鱼性腺发育的组织学观察

于光镜下对大弹涂鱼性腺切片作了组织学观察,对大弹涂鱼卵细胞和精子发育规律进行研究。结果表明:大弹涂鱼在一个生殖季节中只能产卵1次,大弹涂鱼属于一次性产卵类型。大弹涂鱼3月卵母细胞进入大生长期发育阶段,4—6月为繁殖盛期,7—8月为繁殖末期。10月卵巢基本修整完毕,进入Ⅱ′恢复期。卵细胞发育可分为6个时相:卵原细胞、卵母细胞单层滤泡、卵母细胞出现脂滴和卵黄、卵母细胞卵黄充满、卵母细胞核极化、卵母细胞退化时相。卵母细胞膜单层,由具有辐射纹的放射带构成,滤泡膜细胞分泌而成的次级卵膜成为成熟卵子的附着丝。大弹涂鱼2月精巢开始发育,5月GSI值达最高值,平均成熟系数达0.70%,排精量最旺盛,出现高峰。7—9月GSI值明显下降。11月至翌年2月GSI值波动于0.08%—0.20%之间,变辐小,此期间精巢处于静止发育状态。大弹涂鱼的精巢属于小叶型结构。精子发育分为6个时期:精原细胞期、精原细胞增殖期、精母细胞生长成熟期、精子细胞变态期、精子成熟期和退化吸收期。繁殖季节精小叶内充满精子,精小囊消失。       

藏酋猴外周血细胞及血清生化指标测定与分析

目的 通过对原代藏酋猴进行外周血细胞及血液生化指标测定,了解不同年龄段藏酋猴的生理指标差异.方法 在清醒状态下采集30只藏酋猴后肢静脉血,检测血液学和血液生化指标.结果 与同属灵长类动物检测结果比较,具有较高的一致性,但也存在种属特点.结论 藏酋猴随着体重和年龄增大,血糖有增高的趋势.     

苯并（a）芘对大弹涂鱼肝细胞超微结构的影响

在实验生态条件下,研究不同浓度苯并(a)芘(BaP)暴露下大弹涂鱼肝脏细胞超微结构的变化。结果表明,暴露于低浓度(0．5mg·L^-1)BaP 7d,大弹涂鱼肝脏细胞内的细胞器受到不同程度的损伤,其中线粒体和内质网是受BaP暴露影响最明显的细胞器,细胞核也受到不同程度的影响,细胞质中脂滴也增加;而暴露于高浓度(5mg·L^-1)BaP 2h,不仅是线粒体和内质网,几乎所有细胞器都受到严重影响,细胞器严重退化,细胞结构遭到严重破坏。研究结果证实,BaP可对大弹涂鱼肝细胞内多种细胞器造成损伤,并且BaP浓度越高,损伤程度越严重。     

黑鲷精子的超低温冻存及DNA损伤的SCGE检测

以0.5 mL的麦细管为冻存管和DMSO为抗冻剂进行超低温冷冻黑鲷精子,对冻精核DNA的损伤情况进行单细胞凝胶电泳（SCGE）检测,其结果表明,以Cortland溶液为稀释液,5%、10%、15%及20%DMSO为抗冻剂的超低温冻存的黑鲷精子活力、受精率与鲜精无显著差异。其中以10%DMSO为抗冻剂的冻存效果最佳,冻精的激活率、运动时间、寿命及受精率分别达（92.91±1.25）%、（39.90±2.70）min、（53.82±2.84）min及（89.35±1.99）%;而以25%及30%DMSO为抗冻剂时,冻精活力及受精率显著下降。SCGE检测结果显示,DMSO浓度为5%、10%、15%及20%时,黑鲷冻精与鲜精的彗星率及损伤系数差异不显著;DMSO浓度为25%及30%时,冻精与鲜精的彗星率及损伤系数差异显著;冻精的彗星率与抗冻剂DMSO浓度成正相关。黑鲷鲜精及冻精核的DNA损伤主要为轻度和中度损伤,重度损伤比例较低,完全损伤仅存在于25%及30%DMSO为抗冻剂的冻精中,且比例低。分析认为,较高浓度的DMSO是引起冻精核DNA损伤的主要原因。     

应用SCGE技术研究细胞DNA损伤的原理与方法

对单细胞微凝胶电泳（ＳＣＧＥ）技术的操作过程,技术原理以及实验操作过程中应注意的事项,进行了详细介绍和讨论;并应用ＳＣＧＥ技术研究了γ射线照射对人血淋巴细胞ＤＮＡ的损伤效应．结果表明,γ射线照射能引起细胞ＤＮＡ迁移长度增加,且呈显著地剂量效应关系．     

5-氮胞苷对贵州小型猪淋巴细胞DNA损伤及修复的影响

目的　研究贵州小型猪淋巴细胞对化学物或药物引起的DNA损伤及修复影响的反应。方法　用单细胞凝胶电泳技术检测比较 5 氮胞苷对PHA刺激和未刺激淋巴细胞的DNA损伤及其修复过程。结果　 5 氮胞苷引起未刺激淋巴细胞明显的DNA泳动 (彗星尾 ) ,经修复孵育 2h后 ,DNA泳动与孵育前比较无显著差异 ,而 5 氮胞苷引起的刺激细胞DNA泳动经 2h修复孵育后与孵育前比较显著减少。结论　 5 氮胞苷引起贵州小型猪未刺激淋巴细胞DNA损伤经 2h孵育未能修复 ,而刺激细胞的DNA损伤明显修复。     

单克隆抗体ELISA测定UVB诱导的DNA损伤(英文)

本文采用单克隆抗体酶联免疫吸附分析法测定了ＵＶＢ诱导ＤＮＡ产生的ＣＰＤ和６４ＰＰ。经０．５ｍＷ／ｃｍ２ＵＶＢ处理１５ｍｉｎ的小牛胸腺和鲱鱼精ＤＮＡ,ＣＰＤ和６４ＰＰ含量显著增加,而未经ＵＶＢ处理的对照ＤＮＡ则没有二聚体形成。     

单克隆抗体ELISA测定UVB诱导的DNA损伤

本文采用单克隆抗体酶联免疫吸附分析法测定了ＵＶ－Ｂ诱导ＤＮＡ产生的ＣＰＤ和６－４ＰＰ。经０．５ｍＷ／ｃｍ＾２ＵＶ－Ｂ处理１５ｍｉｎ的小牛胸物鲱鱼精ＤＮＡ,ＣＰＤ和６－４ＰＰ含量显著增加,而未经ＵＶ－Ｂ处理的对照ＤＮＡ则没有二聚体形成。     

Detection of DNA Damage in Cultured Human Fibroblasts Induced by Methyl Linoleate Hydroperoxide

To establish a strategy to generate N-acylated proteins modified with fatty acids having a specific chain length, tGelsolin-streptag, an epitope-tagged model protein having an N-myristoylation motif, was synthesized using an insect cell-free protein synthesis system in the presence of acyl-CoA with various fatty acid chain lengths. It was found that the fatty acid species attached to the N-termini fully depended on the acyl-CoA species added to the reaction mixture. N-Acylated proteins with fatty acid chain lengths of 8, 10, 12, and 14 were generated successfully.     

脂质过氧化引起的DNA损伤研究进展

脂质过氧化可以引起各种碱基损伤、DNA链断裂和各种荧光产物生成,并对DNA分子鸟嘌呤碱基具有选择性损伤.过渡金属离子可以明显加深脂质过氧化对DNA的损伤程度.多种抗氧化剂、活性氧自由基清除剂对脂质过氧化引起的DNA损伤有一定程度的保护作用.具有致突、致癌作用的8－羟基鸟嘌呤已经观察到．脂质过氧化的致突变、致癌变作用机制引起了人们的极大兴趣．     

An Effective Method for Detection and Analysis of DNA Damage Induced by Heavy-Ion Beams

We have developed an efficient system to detect and analyze DNA mutations induced by heavy-ion beams in Arabiopsis thaliana. In this system, a stable transgenic Arabidopsis line that constitutively expresses a yellow fluorescent protein (YFP) by a single-copy gene at a genomic locus was constructed and irradiated with heavy-ion beams. The YFP gene is a target of mutagenesis, and its loss of function or expression can easily be detected by the disappearance of YFP signals in planta under microscopy. With this system, a ¹²C⁶⁺-induced mutant with single deletion and multiple base changes was isolated.