心脏晶体停搏液和冷血停搏液不同灌注方法对心肌保护的评价

目的：评估二种心脏停搏液不同灌注方法对心肌保护作用。方法：30例双瓣患者随机分为冷晶体停搏液间断灌注组(n=10),冷血停搏液间断灌注组(n=10),冷血停搏液持续灌注组(n=10),观察血浆心肌肌钙蛋白T(CnT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK—MB)。结果：体外循环后冷晶体停搏液间断灌注组血浆心肌肌钙蛋白T和肌酸激酶、肌酶激酶同工酶较其他2组明显增高;冷血停搏液间断灌注组和冷血停搏液持续灌注组血浆心肌肌钙蛋白T、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶无明显差异。结论：冷血停搏液的心肌保护优于冷晶体停搏液,冷血停搏液间断灌注与持续灌注没有明显差异。     

肌酸激酶同工酶MB的原核表达、纯化及冻干品制备

目的:制备稳定性好、特异性强、灵敏度高的肌酸激酶同工酶质控品。方法:将密码子优化后的肌酸激酶M亚基和B亚基序列合成后构建表达载体PET28-M、PET28a-B;将其分别转入BL21(DE3)后,用0.5 mmol/L IPTG 37℃诱导表达得到肌酸激酶同工酶MM和BB;MM和BB分别经Ni2+纯化后按一定比例混合处理、完成后期折叠得到MB;研究蛋白MB最佳冻干工艺,并跟踪冻干品稳定性。结果:目的蛋白M亚基和B亚基分子量大小均为45 kD左右,1:1混合25℃静置16 h后具有较高的灵敏度和较强的特异性。蛋白冻干后形态良好,37℃可以稳定保存11d;25℃、4℃可以稳定保存4个月以上。结论:该蛋白的冻干制品成本低、稳定性好、特异性强、灵敏度高,可用于定性定量肌酸激酶同工酶CK-MB检测试剂盒的质控品。     

鳜肌酸激酶M-CK cDNA的克隆与组织表达分析

利用RT–PCR和cDNA末端快速扩增法（RACE）克隆了鳜（Siniperca chuatsi）肌酸激酶（creatine kinase,CK）cDNA序列,并分析了该基因的结构特征和系统关系。鳜CK cDNA序列全长1586 bp,包括5′端非翻译区92 bp,3′端非翻译区348 bp和开放阅读框（ORF）1 146 bp,共编码381个氨基酸。鳜CK具有脊椎动物CK共有的保守结构域和肌型肌酸激酶（M-CK）同工酶的特异识别位点;氨基酸序列与M-CK型的相似度最高,而与脑型肌酸激酶（B-CK）和线粒体型肌酸激酶（Mi-CKs）的相似度较低;在CK系统关系树中鳜CK与M-CK群聚类。这些均表明,鳜CK属脊椎动物M-CK型。RT-PCR分析表明,鳜M-CK在成体不同组织中的表达量不同,其中,在皮肤、卵巢、肾脏、胃、肌肉和心脏中表达较强;而在眼和脑、肝胰脏中表达较弱。     

白杄体细胞胚胎发生过程中过氧化物酶及酯酶同工酶的研究

同工酶的多种分子形式的时间特异性和组织特异性在植物中普遍存在,植物体内各种酶的同工酶酶谱随着细胞分化、组织器官及植株的生长、成熟而发生规律性的变化。这种变化在一定程度上反映了植物在发育过程中基因表达的时空顺序性,因而同工酶的酶谱特征可以作为植物组织培...     

小麦腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶同工酶类型及时空表达分析

以9个小麦品种为材料,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGP)同工酶类型、表达数量及亚基组成,分析AGP同工酶空间分布特点和器官表达特异性。结果表明:(1)小麦植株中共表达6种AGP同工酶,即AGPp、AGPs、AGPe1、AGPe2、AGPe3和AGPe4。(2)AGPp分布在种皮中,AGPs分布在种皮与叶片中,而AGPe1、AGPe2、AGPe3和AGPe4专一在胚乳中表达;在小麦籽粒灌浆过程中,AGPe1首先表达,AGPe2和AGPe3紧随其后,AGPe4最后表达。(3)AGP各同工酶均由大、小2个亚基组成,小亚基分子量为50kD左右,大亚基分子量在51~54kD之间。(4)AGP同工酶空间分布具有器官特异性,并在籽粒发育进程中顺序表达;AGPe3、AGPe1和AGPe2是占主导地位的AGP同工酶,且可能是决定AGP总酶活性的主效应酶,在灌浆后期籽粒淀粉合成中起关键作用。     

可口革囊星虫不同组织同工酶的比较

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,研究了可口革囊星虫5种组织(收吻肌、吻、肠、肾管及体壁)10种同工酶(ADH、GCDH、SDH、EST、LDH、ME、POD、SOD、MDH、CAT)的表达。结果表明:除CAT外,其余9种同工酶均得到了较为清晰的酶谱,除SOD和MDH在5种组织中表型相同外,其它7种同工酶的表达均具有明显的组织特异性。SDH-2、EST-1、LDH-1和POD-1为收吻肌所特有;ADH-3、ADH-4、GCDH-2、GCDH-4、GCDH-5、EST-10和LDH-6均为吻所特有;EST-4为肾管所特有。在肠中,ADH和GCDH均没有检测到活性。初步探讨了5种组织中各种同工酶的分布与活性及其与各组织生理功能的关系。     

鲇鱼不同组织同工酶的组织特异性的初步研究

采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳法(PAGE)对鲇鱼的9种组织的5种同工酶(LDH、MDH、ADH、SUDH和EST)进行了分析,结果表明:5种同工酶在各种组织均有不同的表达程度:在心、肝、卵巢和肌肉中的表达频率最高,在脑和眼中最低。LDH和MDH在各个组织中均为强表达,与以往研究结果比较,认为鲇鱼LDH同工酶不存在C位点。鲇鱼同工酶组织特异性较明显。     

团头鲂的胚胎及成体组织中八种同工酶系统的研究

用垂直的淀粉凝胶电泳方法分析了胚胎发育阶段(0—105小时)和成体6种组织中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G6PD)、醇脱氢酶(ADH)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、酯酶(EST)和碱性磷酸酶(AKP)等8种同工酶系统的酶带。共约有23个基因座位在其胚胎发育期和成体组织中表达。所分析的大多数同工酶在团头鲂个体发生过程中表达的情况大致可分为3种类型：①胚胎发育期间持续存在的同工酶类,它们在成体组织中无特异性分布;②到胚胎发育后期才开始表达的同工酶类,它们往往和特定的组织或器官的形态发生或机能分化紧密相关,并在成体组织中呈特异性分布;③在成体组织中都没有被发现而只在胚胎发育期所特有的同工酶。团头鲂的MDH同工酶类之间以及它们和G6PD同工酶活性变化之间存在着相关性,二者可能存在共同的调控机制。与许多其他鱼类不同,团头鲂的GDH同工酶在整个胚胎发育过程中都有活性,但在其成体组织中无特异性分布。基因调控系统的时空精确性是保证团头鲂胚胎发育正常代谢活动的必要条件。     

CKMBmass/总CK比值在缺血性心血管疾病的应用价值

[目的]探讨胶乳免疫比浊法测肌酸激酶同工酶(CKMBmass)/总肌酸激酶(CK)比值在缺血性心血管疾病中的应用价值.[方法]选取笔者单位360例缺血性心血管疾病患者作为研究组,同期纳入60例健康体检者作为对照组.分析血清总CK、CKMBmass/总CK比值对缺血性心血管疾病诊断价值及其与预后关系.[结果]研究组血清总...     

草鱼同工酶发育遗传学研究——Ⅱ.早期发育过程中的同工酶分析

采用淀粉凝胶电泳技术研究了草鱼早期发育过程中(受精后0—200小时)6种同工酶系统(LDH、MDH、GDH、ADH、IDH、EST)的表达谱式。除了ADH以外,其余5种同工酶系统均具有明显的发育变化谱式。根据早期发育过程中同工酶的变化谱式及其组织分布,草鱼的同工酶可分为三大类型:(1)在未受精卵及早期发育过程中一直存在,并常有较广泛的组织分布;(2)未受精卵及早期发育过程中均不存在,一般仅分布于少数几种组织中;(3)未受精卵及胚胎发育早期不存在,直到早期发育过程中某一特定时期才开始出现。     

心里美萝卜营养生长期肉质根过氧化物酶同工酶谱及组化分析

过氧化物酶［peroxidase,POD,EC 1. 11. 1. 7 (X)］为一类多基因家族的同工酶,其聚合形式对其功能具有重要影响．心里美萝卜(Raphanus sativus var.L) 肉质根富含花青素和POD等．本文采用不同的电泳技术、组化定位和活性测定研究了心里美萝卜营养生长期肉质根中POD在不同时期和不同组织中的表达、分布特点及同工酶的组成和性质．结果显示,心里美萝卜营养生长期肉质根的皮和肉中POD活性均先升高后降低,分别在播种后第40 d和60 d出现峰值,30 d时皮中POD活性高于肉,之后则相反,酶活性最高时同工酶数目也最多,不同时期,皮和肉中同工酶种类不同;皮中POD同工酶由5个单体和4个二聚体组成,而肉中由5个二聚体或2个单体、2个二聚体和1个四聚体组成,均以酸性同工酶为主;组化定位显示POD主要分布在肉质根的周皮、形成层、木射线、木质部导管和肉的初生木质部等的细胞壁附近．从上述结果得出结论： 酸性POD同工酶在植物体中以多种形式存在．     

社鼠组织器官同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法,分析了社鼠的肝、肾、心肌、骨骼肌、肺、脾和脑等多种组织器官的ＬＤＨ、ＡＤＨ、ＥＳＴ、和ＳＯＤ４种同工酶,对各组织器官的酶带数目和分布,以及酶活性进行了比较研究。结果表明,社鼠的ＬＤＨ同工酶、ＡＤＨ同工酶和ＥＳＴ同工酶具有比较明显的组织特异性,而ＳＯＤ同工酶的组织特异性较低。肺和脾除ＥＳＴ同工酶活性较高外,脑除ＬＤＨ同工酶活性较高外,其它３种同工酶的活性均较低;而肝和肾中４种同工酶的活性普遍很高。心肌和骨骼肌因氧张力不同而使ＬＤＨ同工酶酶谱存在明显差异,但其它３种同工酶酶谱却非常相似。同工酶的组织特异性与各组织器官所执行的生理功能是相一致的     

云南高背鲫鱼不同组织同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了滇池中云南高背鲫鱼(Carassius auratus)的脑、眼睛、肝脏、心脏、肌肉5种组织中的酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)3种同工酶的表达模式,并对各种酶的同工酶酶谱表型进行了分析。结果表明,云南高背鲫鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性,且同工酶的种类与活性变化与其功能相适应。     

蛋白激酶C及其在缺血／低氧预适应机制方面的研究

蛋白激酶C(PKCs)最早是由Nishizuka等人于1977年在鼠脑中发现。迄今为止,人们通过分子克隆及酶学分析等已发现了14种PKCs同工酶(亚型),它们广泛地分布于生物体内的各种组织,其中以神经组织含量最为丰富。PKCs不同亚型可使不同的底物蛋白磷酸化和     

二棱大麦和杂种的β-淀粉酶同工酶研究

用水和木瓜蛋白酶提取的两种大麦β-淀粉酶同工酶在薄层等电聚焦电泳中能分辨出30条酶带,它们的pI在4.4—6.5之间,可以分成3个区(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区)。水提取的游离态β-淀粉酶同工酶主要集中在Ⅰ区。而用木瓜蛋白酶提取的总β-淀粉酶同工酶主要分布在Ⅱ、Ⅲ区,Ⅰ区较少,它的分布区域与游离态酶的活性有关。37个二棱大麦品种的β-淀粉酶活性差异较大,但根据同工酶的电泳图谱可以分成两种类型,即Ⅰ型和Ⅱ型,两者在酶带数和分布上都有差异。 同一类型的不同品种之间杂交后,酶活性出现明显的杂种优势,但其同工酶的电泳图谱不发生改变。 对β-淀粉酶同工酶电泳类型的多型性及高β-淀粉酶活性在育种上的应用作了简要讨论。     

肌酸激酶同工酶电泳对窒息新生儿心肌脑组织损伤的意义

目的:探讨血清肌酸激酶同工酶电泳对于新生儿窒息后发生心肌、脑组织损伤中的应用价值。方法:回顾性分析2009年1月至12月我院儿科ICU送检的CK同工酶电泳检测结果,并按不同疾病诊断进行分组统计。结果:在HIE、新生儿窒息患儿血清中CK-BB分别占总CK的13.9±16.8%、2.6±3.1%,CK-MB分别占总CK的2.5±2.0%、8.2±7.5%;CK-MM分别占总CK的91.4±14.1%、94.0±5.8%。新生儿窒息组可见CK-MB增加,显著高于对照及HIE组(P<0.01);HIE组患儿血清中可见CK-BB增加,与对照组、新生儿窒息组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:CK同工酶电泳对诊断新生儿窒息后引起的心脑损伤有重要价值。     

红花品种资源的同工酶遗传多样性及分类研究

本研究采用同工酶遗传标记对89份红花品种的遗传多样性进行了评价和分类研究。在4种酶,即酯酶(EST)、乙醇脱氢酶(ADH)、酸性磷酸酶(APC)和莽草酸脱氢酶(SKDH)的分析中,共解释出8个同工酶基因位点,包括25个等位基因。在8个同工酶位点即ESTl、EST2、ADH1、ADH2、APCI、APC2、APC3和SKDH1中,7个呈现多态性,占87．5％,只有ADH2在所有材料中出现一致性。在25个等位基因中,15个表现出多样性,占60％。这些等位基因的平均分布频率在东亚材料中最高,为0．013。分布频率最低的是中东和土耳其的材料,只有0．009。同工酶位点杂合性平均为0．54,但位点间有很大差异,从0．16～0．87不等。利用聚类分析对89份红花品种进行了分类,形成4个组群。分类结果表明,印度材料多样性丰富,各组群均有分布。土耳其的材料与中东国家的材料关系密切;未知来源材料可能主要来自印度、土耳其和中东国家。     

青鱼不同组织中同工酶的表达模式

采用聚丙烯酰胺垂直板状连续电泳的方法对青鱼（Mylopharyngodonpiceus）的脑、晶体、心脏、肾脏、肝脏、肌肉等六种组织进行了十种同工酶（α－AMY、EST、GOT、C6PDH、TDH、LDHMDH、ME、POX、SOD）的电泳研究,并对各种酶的同工酶位点表达及酶谱表型进行了分析。结果表明α－AMY、EST、TDH、LDH、MDH、ME、POX、SOD、C6PDH存在不同程度的组织特异性,COT无明显组织差异．并对同工酶的组织分布特异性的生理意义进行了讨论。     

心室肌肌球蛋白ATP酶同工酶在心肌生理及病理性肥大时的改变及其意义

心室肌肌球蛋白ATP酶具有三种同工酶形式V_1、V_2、V_3,其中V_1酶活性最高,V_2次之,V_3最低。三种同工酶在心肌中的分布决定了心肌肌球蛋白ATP酶活性的高低。不同种属、年龄的动物以及某些生理、病理变化,可以影响心室肌肌球蛋白ATP酶同工酶的分布,从而使心肌作功与耗能的方式发生具有重要意义的改变。     

福建杉木王与杉木优树无性系过氧化物酶同工酶活性比较

同工酶普遍存在于生物体中,它是催化各种生化反应的重要物质。近十多年来同工酶分析应用于树木遗传育种方面日见增多,且取得了一定的进展,成为林木遗传育种的一种重要研究方法。但用同工酶分析法研究杉木的遗传变异至今报道尚少。