大豆叶片质膜蛋白激酶的自身磷酸化反应

利用Ferrell和Martin（1991）设计的测定印迹在PVDF膜上的蛋白激酶活性方法研究大豆叶片质膜蛋白激酶自身磷酸化反应活性,结果表明：与Mg－ATP相比,Mn－ATP是更有效的57KD蛋白激酶自身磷酸化反应底物;钙离子可以促进该激酶的自身磷酸化反应活性,而且EGTA可以显著降低它在SDS电泳中的迁移率,说明57KD蛋白激酶为依赖于钙的蛋白激酶;预磷酸化反应实验证明57KD蛋白激酶具有多个自身磷酸化反应位点,其分子的自身磷酸化状态可调性暗示这一激酶可能具有重要的生理功能。     

大豆叶片衰老过程中质膜蛋白激酶自磷酸化状态和催化活性的变化

以大豆幼苗初生叶为材料研究了衰老过程中质膜蛋白激酶自磷酸化状态和催化活性的变化,结果发现质膜上一个57kD的蛋白激酶分子上有多个自磷酸化位点,而且自磷酸化反应能提高该酶催化组蛋白H1磷酸化的激酶活力。进一步的研究表明诱导衰老处理造成的57kD蛋白激酶自磷酸化状态的变化,可能对调节它在衰老过程中催化活性的变化起重要作用;而外源6－BA预处理则能够维持57kD蛋白激酶体内高自磷酸化状态,保持该激酶在衰老过程中的催化活力。对衰老和6－BA过程中质膜上39和47kD蛋白激酶自磷酸化状态变化的研究表明,这两种激酶可能参与大豆叶片对6－BA刺激信号的传导和／或应答反应过程。     

大豆叶片衰老过程中质膜蛋白激酶自磷酸化状态和催化活性的变化

以大豆幼苗初生叶为材料研究了衰老过程中质膜蛋白激酶自磷酸化状态和催化活性的变化。结果发现质膜上一个57kD的蛋白激酶分子上有多个自磷酸化位点,而且自磷酸化反应能提高该酶催化组蛋白H1磷酸化的激酶活力。进一步的研究表明诱导衰老处理造成的57kD蛋白激酶自磷酸化状态的变化,可能对调节它在衰老过程中催化活性的变化起重要作用;而外源6-BA预处理则能够维持57kD蛋白激酶体内高自磷酸化状态,保持该激酶在衰老过程中的催化活力。对衰老和6-BA处理过程中质膜上39和47kD蛋白激酶自磷酸化状态变化的研究表明,这两种激酶可能参与大豆叶片对6-BA刺激信号的传导和/或应答反应过程。     

6-BA延缓大豆叶片衰老的作用与膜蛋白磷酸化状态的关系

蛋白激酶（proteinkinase,PK）和蛋白磷酸酯酶（pIDt6inphOSpha～,PP）是生物体内催化蛋白质磷酸化／脱磷酸化过程的两种重要酶类。目前已有越来越多的实验证据表明：这种可逆的磷酸化／脱磷酸化过程所导致的蛋白质（酶）活性的改变是生物体内信号传导过程中的重要环节（Hunter1995）。已有一些实验系统涉及了植物激素对于植物蛋白磷酸化过程的影响（Mi－zogUchi等1994,Sano和Youssefian1994）,并有一些与此相关的蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的基因被克隆（kleber等1993,temp等1994）。细胞分裂素延缓植物叶片衰老的作用早已被各种实…     

败血症休克大鼠肝细胞质膜钙ATP酶磷酸化、去磷酸化的改变

本实验观察了早期、晚期败血症休克大鼠肝细胞质膜钙ＡＴＰ酶磷酸化、去磷酸化的改变。败血症休克模型由结扎大鼠盲肠并穿孔（ＣＬＰ）的方法复制,采用蔗糖密度梯度离心法分离肝细胞质膜,由聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＯＳ－ＰＡＧＥ）鉴定肝细胞质膜钙ＡＴＰ酶磷酸化中间产物。结果发现,肝细胞膜钙ＡＴＰ酶磷酸化能力在败血症休克早期降低３２．３％,晚期降低４６．６％（Ｐ＜０．０１）。动力学分析发现,早期、晚期败血症休克时,钙离子使钙ＡＴＰ酶磷酸化的最大反应速度都明显降低,而Ｋｍ值无明显变化。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析证实,肝细胞质膜钙ＡＴＰ酶磷酸化的中间产物是一个分子量为１０７ｋｕ的蛋白质。结论认为：败血症休克时,肝细胞质膜钙ＡＴＰ酶磷酸化能力明显减低,去磷酸化能力无明显变化,可能是败血症休克时肝纳胞钙稳态失衡,进而引起机体代谢改变的重要原因之一。     

盐胁迫对玉米根尖质膜上受钙激活的蛋白激酶的影响

以０．２ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ对玉米根尖进行盐腔迫,导致质膜上一种受钙激活的蛋白激酶的活必迅速增加。盐腔迫至１５ｍｉｎ时激酶的活性达到最大,较对照高３０％,以后逐渐降低,盐胁迫至５０ｍｉｎ时激酶活性仍略高于对照。     

蛋白激酶的相互作用促进τ的阿尔茨海默样磷酸化

cAMP依赖性蛋白激酶（PKA）的预处理可显著增强糖原合成酶激酶-3（GSK-3）对τ蛋白的磷酸化作用.将磷酸化的τ蛋白经胰蛋白酶消化,FeCl₃亲和柱分离及C18反相高压液相层析纯化后,再用高压电泳,手工Edman降解及自动氨基酸序列分析等技术,对其磷酸化位点进行鉴定.结果发现：GSK-3可使PKA预处理的τ至少在丝氨酸(Ser)-195,Ser-198,Ser-199,Ser-202,Ser-235,Ser-262,Ser-356,Ser-404,苏氨酸(Thr)-205和Thr-231等10个位点发生磷酸化.其中Ser-198,Ser-199,Ser-202,Ser-235,Ser-262,Ser-404,Thr205和Thr-231为Alzheimer病（AD）τ蛋白的异常磷酸化位点.上述磷酸化作用高度抑制τ的生物学活性,提示：AD τ的生物学功能的抑制与Ser-198,Ser-199,Ser-202,Ser-235,Ser-262,Thr-205和Thr-231的磷酸化密切相关,PKA和GSK-3的相互作用可能在AD神经原纤维变性中起重要作用.     

蛋白激酶对τ蛋白阿尔茨海默样磷酸化的调节作用

微管相关蛋白τ的异常磷酸化是阿尔茨海默病（AD）神经原纤维退变的重要机制之一.研究发现：酪蛋白激酶-1（CK-1）, cAMP依赖性蛋白激酶（PKA）和糖原合成酶激酶-3（GSK-3）均可不同程度催化重组τ蛋白发生磷酸化,从而不同程度抑制τ蛋白促微管组装的生物学功能.如果先将τ蛋白与PKA预温2 h后再和GSK-3温育,则发现τ蛋白磷酸化程度比单纯用GSK-3处理显著增高,生物学活性则显著降低,电镜检测几乎看不见微管形成.结果提示：PKA和GSK-3在τ蛋白的AD样磷酸化及其功能抑制中具有正性协同作用.     

加压素(4 -8)对大鼠脑内Ca2+/CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ自身磷酸化的影响

大鼠皮下注射加压素（ＡＶＰ）（４－８）１ｈ后,大脑皮层中Ｃａ＾２＋／ＣａＭ依赖的蛋白激酶Ⅱ自身磷酸化程度与对照组比较增高１９２％,Ｐ〈０．００１;海马中增高４０％,Ｐ〈０．０５。ＣａＭＫⅡ的自身磷酸化程度依赖于Ｃａ＾２＋及ＣａＭ浓度。在用抗 ＣａＭＫⅡα单克隆抗体对给药１ｈ组样品和对照组样品进行免疫印迹检测时,发现皮下注射ＡＶＰ（４－８）１ｈ后,大脑皮层中ＣａＭＫⅡα亚基的蛋白量没有明显差异。ＡＶ     

CaMBP—10介导的质膜H^＋—ATP酶磷酸化对该酶活性的调节

ＣａＭＢＰ－１０在活体处理条件下,抑制ＩＡＡ诱导的质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰ酶活性及其磷酸化,抑制作用可被ＩＡＡ逆转并在外加ＣａＭ时被消除,与前期ＢＰ－１０对ＩＡＡ生理应答的调节效应相吻合。并且在各项处理中,质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰ酶活性与其磷酸化水平呈现极显著的正相关。     

种子萌发与休眠的自磷酸化蛋白激酶控制机制的数学模型及其分析

自磷酸化蛋白激酶对代谢的开关作用可能控制着种子的萌发与休眠。本文提出了自磷酸化蛋白激酶控制机理的数学模型。通过对该模型定性分析指出，自磷酸化蛋白激酶对种子萌发与休眠的控制机理具有双稳态的突变性质，得出了产生双稳态的临界条件。     

大豆叶片结构对CO2浓度升高的反应

应用光学显微镜和扫描电镜研究了ＣＯ２浓度对大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ）叶片形态和解剖特征的影响。结果表明,叶片外部形态没有显变化,而叶片气孔密度随ＣＯ２浓度升高呈下降趋势。对照组叶片上下表面和处理组的上表面均无表面角质蜡层,而处理组的下表面覆盖有大量星状的表面角质蜡层,它们在气孔区和非气孔区的数量基本差不多。此外,还发现叶肉中增加了一层栅栏组织,从而使叶片明显增厚,结果证实,ＣＯ２浓度增加将促     

两个大豆类受体蛋白激酶基因的克隆及其结构和功能的初步分析

利用高等植物类受体蛋白激酶基因的保守域设计简并引物的通过RT-PCR方法,从大豆叶片中克隆到两个新的,可能的类受体蛋白激酶基因的部分cDNA片段。对其基因结构的分析表明：在RLPK2的激酶保守域Vib与Ⅸ之间有一个407bp长的内含子。利用RT-PCR方法对它们的表达特性进行初步研究。发现这两个基因可能参与了对大豆叶片衰老和/或细胞分裂素延缓衰老过程的调节机制。     

脑缺血诱导Ca~（2＋）／CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ自身磷酸化的抑制作用

脑缺血诱导Ｃａ~（２＋）／ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ自身磷酸化的抑制作用张光毅,唐放鸣,赵昇皓（徐州医学院生化教研室,２２１００２）关键词脑缺血;Ｃａ~（２＋）／ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ;自身磷酸化兴奋住氨基酸通过其突触后膜受体导致ｏｄｅ内流,不仅具有诱导和...     

叶片衰老过程中的蛋白激酶和蛋白磷酸酶

衰老是受遗传程序严格控制的植物个体发育过程中的一个必经阶段,由特殊发育信号通过一定的信号传导路径来启动和控制。研究发现,蛋白激酶和蛋白磷酸酶所介导的可逆磷酸化反应在叶片衰老信号传递和衰老的启动和进程控制过程中发挥了重要作用。本文对近年参与叶片衰老调控的蛋白激酶和蛋白磷酸酶基因的分离鉴定及功能研究进行了综述。     

CaMBP-10介导的质膜H~ -ATP酶磷酸化对该酶活性的调节

CaMBP－10在活体处理条件下,抑制IAA诱导的质膜H －ATh酶活性及其磷酸化,抑制作用可被IAA逆转并在外加CaM时被消除,与前期BP－10对IAA生理应答的调节效应相吻合。并且在各项处理中,质膜H -ATh酶活性与其磷酸化水平呈现极显著的正相关。结果表明,质膜H －ATh酶活性受其磷酸化的调节,CaMBP－10参与了这一调节过程,它通过介导该酶磷酸化调节其活性,在IAA应答反应中发挥调节功能。     

蛋白激酶的研究 (综述)

近年来,蛋白激酶研究进展较快,本文综述蛋白激酶的种类、结构、细胞定位,讨论几种植物蛋白激酶及其与信号转导的关系。