嗜肺巴斯德杆菌选择性培养基研制及应用

目的　研制一种对嗜肺巴斯德杆菌表现出强选择作用的选择性培养基,用于该菌的常规检测。方法　药敏试验及抗生素最小抑菌浓度测定。结果　研制了嗜肺巴氏杆菌选择性培养基(PPSM培养基)及嗜肺巴斯德杆菌增菌液(PP肉汤)。嗜肺巴斯德杆菌在PPSM培养基上,37℃48h培养,形成1mm左右,凸起、湿润、灰黑色并有金属光泽的特殊菌落;对表皮葡萄球菌和大肠埃氏菌的抑制率为100%,对变形杆菌的抑制率为76%,并能抑制其迁徙生长;通过PP肉汤增菌培养,PPSM培养基使SPF小鼠粪便中嗜肺巴斯德杆菌检出率从0增至67.2%;用小鼠咽拭子接种该培养基,其初代培养物几乎为纯培养物。结论　该培养基对嗜肺巴氏杆菌具有较强的选择作用,使用该培养基对嗜肺巴氏杆菌进行检测可以简化检测程序、防止漏检、在不处死动物的情况下对嗜肺巴斯德杆菌进行常规监测。     

星球和鸾凤玉的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　星球 (Astrophytumasterias)园艺种“超兜A” ,鸾凤玉 (A .myriotigma)园艺种“白云鸾凤玉”。2　材料类别　星球和鸾凤玉两年生实生苗 ,供试植株来源于日本カクタヌ专门家联盟。3　培养条件　 (1)启动培养基 :MS +KT 1mg·L- 1(单位下同 ) +2 ,4 D 1;(2 )分化培养基 :MS +6 BA 1+KT 2 ;(3)增殖培养基 :MS +6 BA 0 .5 +KT 0 .5+NAA 0 .1;(4 )复壮与生根培养基 :1/ 2MS +NAA0 .1。以上培养基均加入 3%蔗糖、0 .7%琼脂 ,pH5 .8。培养温度 (2 5± 2 )℃ ,光照 8h·d- 1,光照度为2 0 0 0lx。4　生长与分化情况4 .1…     

枣树叶片的组织培养和植株再生

1　植物名称　赞皇大枣 (Ziziphusjujubacv.Zan huang)。2　材料类别　幼嫩叶片。3　培养条件　 ( 1 )诱导产生不定根培养基 :1 /2MS +IBA 1 .0mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .3。( 2 )诱导不定根产生再生植株培养基 :MS + 6 BA0 .5 +NAA 0 .2。 ( 3)再生植株的壮苗培养基 :1 /2MS +NAA 0 .2。实验中所采用培养基均加入蔗糖 3%、琼脂 0 .6% ,pH值为 6.2。培养条件为 :培养温度 ( 2 5± 2 )℃ ,辅助光照时间 1 0h·d- 1 ,光照度 1 40 0lx。4　生长与分化情况4.1　培养材料来源　无菌组培苗植株上部的幼嫩大叶片 (带叶柄 )。4.2　诱…     

一株地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶的研究I.

从皖北盐碱地土样中分离到 0 1 1菌株 ,对其进行了菌种鉴定以及胞外碱性蛋白酶的初步研究。结果表明 :0 1 1菌株符合地衣芽孢杆菌种的特征 ,但该菌芽孢端生、孢囊膨大、中度耐盐、高度耐碱 ,可在NaCl浓度为 1 3%和pH1 1的培养基中生长 ,这些特征又不同于该种几个模式株 ,因而将 0 1 1菌株鉴定为地衣芽孢杆菌的一个亚种 ,命名为地衣芽孢杆菌砀山亚种(Bacilluslicheniformissubsp .dangshanensis)。该菌在发酵培养基中能产生较高产量的胞外碱性蛋白酶 ( 72 5u/mL)。酶的最适作用条件 :60℃、pH9.0 ,该酶在pH6.0～ 1 1范围内稳定     

嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌共发酵互生机理的研究

目的:对嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌共发酵时两者的互生作用机理进行研究。方法:以质量浓度100gL脱脂乳为培养基,将嗜酸乳杆菌主要代谢产物—氨基酸,如赖氨酸、精氨酸、缬氨酸分别以0.0083mgml、0.0036mgml、0.0053mgml的量加入含嗜热链球菌脱脂乳培养基中,40℃培养,测定凝乳时间;将嗜热链球菌的代谢产物-乳酸、甲酸分别为0.1332mgml和0.075mgml的量加入含嗜酸乳杆菌脱脂乳培养基中,37℃培养,测定其发酵乳的凝乳时间。结果:嗜热链球菌发酵乳凝乳时间由12h缩短到4h,pH为4.52～4.62,吉尔涅尔度为54.23～64.74°T;嗜酸乳杆菌发酵乳的凝乳时间由16h缩短为5h,pH为4.61～4.65;且嗜酸乳杆菌在CO2环境中发酵时,发酵时间明显缩短。结论:嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌共发酵时具有互生关系。     

紫叶稠李的离体快速繁殖

1　植物名称　紫叶稠李 (Prunusvirginiana“Schubert”)。2　材料类别　腋芽 (axillarybud)。3　培养条件　基本培养基为MS。诱导芽培养基 :( 1 ) 1 /2MS + 6 BA 1 .0mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA0 .0 1。丛生芽增殖培养基 :( 2 ) 1 /2MS + 6 BA1 .0 +NAA 0 .1 ;( 3) 1 /2MS + 6 BA 0 .5 +IAA 0 .1。生根培养基 :( 4 ) 1 /2MS +NAA 0 .5 ;( 5 ) 1 /2MS +IBA 0 .7。其中 ,诱导与增殖培养基添加 3%蔗糖 ,生根培养基添加 2 %蔗糖。生根培养基附加少许活性炭。以上培养基均加入 7%琼脂 ,pH 5 .8～ 6.0。培养温度 ( 2 3± 2 )℃ ,…     

一种含血浆沉淀物的新型培养基及其应用

本文以枯草芽孢杆菌为例,应用一种含血浆沉淀物的新型培养基PSM-1培养基和常规培养基(Luria-Bertani培养基,下简称LB培养基),在相同条件下,培养枯草芽孢杆菌进行液体发酵;并分别用PSM-1培养基和LB培养基培养的枯草芽孢杆菌菌液进行几种常见植物病原菌的抑菌实验。结果表明,(1)PSM-1培养基即减少了酵母粉、蛋白胨等昂贵营养物的使用量,实现了废弃物的循环利用,为工业化生产降低了约70%的生产成本;(2)用PSM-1培养基发酵芽孢类细菌时,芽孢率≥90%,而用LB培养基时,芽孢率约为80%,所以用PSM-1培养基发酵芽孢类细菌芽孢率提高了12.5%;(3)通过枯草芽孢杆菌的抑菌实验观察,PSM-1培养基培养出的枯草芽孢杆菌菌液抑菌性能优于LB培养基培养的枯草芽孢杆菌菌液的抑菌性能。50 L及2 t发酵罐生产性实验结果表明,此种含血浆沉淀物的新型培养基(PSM-1)性能可靠,可以用于芽孢类细菌的培养。     

番杏的组织培养与植株再生

1　植物名称　番杏 (Ｔｅｔｒａｇｏｎｉａｅｘｐａｎｓａ)。2　材料类别　顶芽与茎段。3　培养条件　基本培养基为ＭＳ。 (1 )芽分化培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＮＡＡ 0 .1 3 .0 %蔗糖 ;(2 )诱导愈伤组织与分化培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0 2 ,4 Ｄ 0 .5 3 .0 %蔗糖 ;(3 )生根培养基 :3 4ＭＳ ＮＡＡ 0 .1 1 .5 %蔗糖 ;(4)继代培养基 :ＭＳ。以上各培养基均加 0 .7%琼脂 ,ｐＨ 5 .8。培养温度 2 5℃左右 ;日光灯照明 ,每天光照 1 0ｈ ,光照度 1 0 0 0～ 1 5 0 0ｌｘ。4　生长与分化情况4.1　无菌苗的获得　将…     

布鲁诺百合的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　布鲁诺百合 (Liliumbrunello)。2　材料类别　鳞片。3　培养条件　 ( 1 )诱导丛芽培养基 :MS +NAA0 .0 1～ 0 .0 5mg·L- 1 (单位下同 ) + 6 BA 0 .5～ 1 .0 ;( 2 )增殖培养基 :MS + 6 BA 0 .5～ 1 .0 +NAA0 .0 5～ 0 .1 ;( 3)生根培养基 :1 /2MS +IBA 0 .2～0 .5 +活性炭 1 g·L- 1 。以上培养基均添加 0 .8%琼脂和 3%蔗糖 ,pH 5 .8。培养温度为 ( 2 5± 2 )℃ ,光照时间 1 4h·d- 1 。诱导小芽时光照度为 5 0 0lx ,增殖培养时光照度为 2 0 0 0lx。4　生长与分化情况4.1　无菌材料的获得　取百合的鳞茎 ,用自来水冲…     

褐脉少花龙葵毛状根的诱导、培养及其澳洲茄胺的产生

利用发根农杆茵的遗传转化和液体培养技术,研究了褐脉少花龙葵(solanum nigrum L.Var.Dauciforum)毛状根的诱导和离体培养及其澳洲茄胺的产生以及液体培养过程中培养基中N源和钙的消耗变化.结果表明.发根农杆菌ATCC15834感染褐脉少花龙葵叶片外植体5 d后产生毛状根.感染25d后,约90%的叶片外植体产生毛状根.毛状根能在无外源生长调节剂的MS固体和体培养基上自主生长.PCR扩增结果显示发根农杆菌Ri质粒的rilB和rolC基因已在少花龙葵毛状根基因组中整合并得到表达.所产生的毛状根能产生药用次生物质澳洲茄胺,其含量约为非转化植株根的1.3倍,达到582.05μg/g干重.少花龙葵毛状根液体培养0-5 d内处于生长迟滞期、5-15 d为快速生长期、15d后进入生长平台期.培养基的硝态氮和铵态氮在毛状根液体培养过程中被逐渐吸收和消耗,至培养15 d时铵态氮被消耗殆尽.而硝态氮仍剩余44.7%;培养基中钙的浓度在培养过程中虽逐渐降低,但在培养25d时仍未被完全消耗,其浓度约为起始浓度的43.5%.该结果为今后设计合适的培养基来规模培养褐脉少花龙葵毛状根生产药用次生物质澳洲茄胺提供了可能性.     

产碱性纤维素酶嗜碱芽孢杆菌AH-8的研究

从贵州、云南、海南、安徽、四川、辽宁等地采集碱性土样,分离筛选到1株能稳定的产生碱性纤维素酶的嗜碱性芽孢杆菌AH-8。研究表明,该菌株最适产酶温度为37℃,最适发酵时间为36 h;采用均匀设计法对其发酵培养基进行优化,优化培养基配方(%):淀粉3.0,胰蛋白胨1.5,牛肉膏1.5,葡萄糖0.3,KH2PO40.1,初始pH 10.0。在优化培养基条件下,其产酶量提高了120%。碱性纤维素酶最适反应温度为60℃;最适反应pH 10.0;0.01%Co2 对酶活力有一定激活作用。     

嗜酸乳杆菌固态发酵的初步研究

研究了嗜酸乳杆菌在 4种不同固态基质 (豆渣、麦麸、芋艿渣、纤维素 )中的生长情况 ,结果显示 :1)豆渣作为基质时嗜酸乳杆菌生长最佳 ,最高活菌数可达 1.6 45× 10 9cfu/g ,麦麸次之 ,达 3.2× 10 8cfu/g ,纤维素最差 ,仅为 2 .1× 10 7cfu/g ,并且豆渣固态培养基优于对照的 3种液体培养基 ;2 )豆渣的含水量以 75 %左右为宜 ;3)通过加入可中和所产酸量的CaCO3 ,并用缓冲液代替水配制培养基 ,结果发现用pH 6 .0的缓冲液配制的培养基 ,培养后活菌量可达 2 .12 4× 10 9cfu/g ,,比对照用自来水提高了 4.2倍 .     

花叶如意的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　花叶如意 (Farfugium japonicavar.auseomaculata)。2　材料类别　茎尖。3　培养条件　 ( 1 )分化培养基 :MS + 6 BA 1 .0～ 2 .0mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .2 ;( 2 )增殖培养基 :MS + 6 BA 0 .5 +IBA 0 .2 ;( 3)生根培养基 :1 /2MS+IBA 1 .0或NAA 0 .5。以上培养基均添加 3%蔗糖、0 .8%琼脂。培养温度 2 5～ 2 8℃ ,每天光照 1 0h,光照度 1 0 0 0～ 1 5 0 0lx。移栽用营养液 1 /4MS。4　生长与分化情况4.1　茎尖的切取与分化　将地栽花叶如意去叶 ,清洗干净后置于自来水下冲洗 30min ,用 75 %酒精漂洗 30s,3%漂…     

哈密瓜组织培养和离体快繁

1　植物名称　哈密瓜 (Cucumismelovar.sacchar inus)品种金皇后。2　材料类别　子叶。3　培养条件　以MS为基本培养基。 ( 1 )种子发芽培养基 :1 /2MS ;( 2 )愈伤组织诱导培养基 :MS + 6 BA 0 .5mg·L- 1 (单位下同 ) +IBA 0 .1 ;( 3)不定芽诱导培养基 :MS + 6 BA 1 .0 ;( 4 )不定芽伸长培养基 :MS + 6 BA 1 .0 +GA30 .5 ;( 5 )生根培养基 :1 /2MS +IBA 2 .0。以上培养基均附加 0 .8%琼脂、3%蔗糖 ,pH 5 .8。培养温度( 2 6± 1 )℃ ,光照 1 6h·d- 1 ,光照度 2 0 0 0lx。4　生长与分化情况4.1　无菌材料的获得　金皇后种子去皮…     

西南金丝桃茎段的离体培养和植株再生

1　植物名称　西南金丝桃 (Hypericumhenryi)。2　材料类别　当年生茎段。3　培养条件　以MS为基本培养基。 ( 1 )腋芽诱导培养基 :MS + 6 BA 1 .0mg·L- 1 (单位下同 ) ;( 2 )芽增殖培养基 :MS + 6 BA 1 .0 +KT 1 .0 ;( 3)生根培养基 :1 /2MS。上述培养基均添加 3%蔗糖、0 .65 %琼脂 ,pH 5 .8～ 6.0。培养温度为 2 4℃ ,每日光照1 2～ 1 4h ,光照度 1 5 0 0lx。4　生长与分化情况4.1　芽的诱导　野外采集的茎段用常规法灭菌后 ,切成 2cm长的小段 (带 1个节 ) ,基部向下直插于 ( 1 )号培养基上。培养 5d后 ,腋芽开始萌动生长 ;1 5d后…     

自然光照下普陀水仙的组织培养

1　植物名称　水仙 (Narcissustazettavar.chi nensis)品种普陀水仙。2　材料类别　带鳞茎盘的双鳞片 (twinscale)。3　培养条件　以MS为基本培养基。 ( 1 )诱导小鳞茎培养基 :MS + 6 BA 5mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .2 5～ 0 .5 ;( 2 )生根培养基 :1 /2MS(大量元素减半 ) +NAA 0 .0 5。培养基均加 0 .8%琼脂 (a gar) ,( 1 )加0 .5 %活性炭 (activatedcharcoal)和 4%蔗糖 (sucrose) ,( 2 )加 3%蔗糖 ,pH 5 .6～ 5 .8。培养温度 ( 2 5± 2 )℃ ,置于培养室自然光线下 ,不用灯光照明。4　生长与分化情况4.1　无菌材料的获得　 5、6月…     

巨桉的组织培养与植株再生

1　植物名称　巨桉 (Eucalyptusgrandis)。2　材料类别　三～五年生优树萌芽枝带芽茎段。3　培养条件　 ( 1 )启动培养基 :S + 6 BA 0 .5mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .0 5 + 3%蔗糖 ;( 2 )丛生芽诱导培养基 :S + 6 BA 1 .0 +NAA 0 .0 5 + 3%蔗糖 ;( 3)增殖培养基 :S + 6 BA 0 .5 +NAA 0 .1 +生物素2 + 4 %蔗糖 ;( 4 )壮苗培养基 :MS(铁盐和有机物 1 .5倍 ,其余全量 ) + 4 %蔗糖 ;( 5 )生根培养基 :1 /2MS+ABT生根粉 1号 1 .0 + 2 %蔗糖。S培养基是对MS培养基下列组分作了调整的培养基 :KNO311 40 ,NH4NO391 0 ,KH2 PO42 1…     

水曲柳下胚轴的组织培养和植株再生

1　植物名称　水曲柳 (Fraxinusmandshurica)。2　材料类别　成熟种子的下胚轴。3　培养条件　诱导培养基 :MS +TDZ 0 .3mg·L- 1 (单位下同 ) +IBA 0 .1 ;伸长培养基 :MS + 6 BA 1 .0 +IBA 0 .5 ;增殖培养基 :MS + 6 BA 2 .0 +IBA 0 .0 5 ;生根培养基 :MS +IBA 0 .5。所有培养基均加 2 %蔗糖、0 .5 %琼脂 ,pH调至 5 .8,1 2 1℃高温、高压灭菌 2 0min。培养温度为 ( 2 5± 1 )℃ ,湿度为 60 %～ 70 % ,光照度为 1 5 0 0～ 2 0 0 0lx ,光照时间为 1 6h·d- 1 。4　生长与分化情况4.1　无菌材料的获得　秋季选取水曲柳饱满种子 ,…     

杂种鸢尾的组织培养和植株再生

1　植物名称　杂种鸢尾 (Irishybrids)。2　材料类别　茎尖 (stemapex)。3　培养条件　基本培养基为MS培养基。 ( 1 )诱导愈伤组织培养基 :MS + 6 BA 1 .5mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .1 ;( 2 )诱导分化培养基 :MS + 6 BA1 .0 +NAA 0 .5 ;( 3)丛芽增殖培养基 ) :MS + 6 BA1 .0 +KT 2 .0 +NAA 0 .1 ;( 4 )生根培养基 :MS +6 BA 0 .1 +NAA 0 .5。以上培养基均加 0 .7%琼脂、3%蔗糖 ,pH5 .8。培养温度为 ( 2 5± 1 )℃ ,光照度2 0 0 0lx ,光照 1 2h·d- 1 。4　生长与分化情况4.1　愈伤组织的诱导　取生长旺盛、无病虫害的幼小…     

从长寿花嫩叶直接诱导体细胞胚和出芽

1　植物名称　长寿花 (Kalanchoeblossfeldiana) ,又名寿星花、矮生伽蓝菜。2　材料类别　盆栽植物的嫩叶片。3　培养条件　基本培养基为MS。诱导培养基 :( 1 )MS +NAA 1 .0mg·L- 1 (单位下同 ) + 6 BA1 .0 ;( 2 )MS +NAA 1 .0 ;( 3)MS + 6 BA 1 .0。生根培养基为 :( 4 ) 1 /2MS不加任何生长调节剂。以上培养基含 2 %蔗糖、0 .6%琼脂 ,pH 5 .8。培养温度( 2 5± 2 )℃。4　生长与分化情况　嫩叶外植体经 70 %酒精消毒 1 5s和 0 .1 %升汞消毒 8min后 ,以无菌水清洗。切成 1cm× 1cm大小的切段 ,接种于诱导培养基上培养。嫩叶外植…