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相似文献
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1.
利用PCR技术和DNA体外重组方法,把作为导向效应细胞到靶部位的单核细胞趋化激活因子(MCAF)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)进行基因融合,置于pBV220载体的λPRPL串联启动子下游,构建了SD序列与ATG之间含有不同核苷酸组成的重组质粒pMG01、pMG02和pMG03。pMG01、pMG02和pMG03的翻译起始区都不存在稳定的二级结构,但DH5α(pMG02、DH5α(pMG03)的表达水平远远高于DH5α(pMG01),DH5α(PMG01)几乎没有表达。表达产物经Westernblot检测表明,它能分别与MCAF和GM-CSF抗体发生特异反应。生物学活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性和维持hGM-CSF依赖的TF1细胞生长的特性,说明MCAF和GM-CSF的生物学功能是相容的.  相似文献   

2.
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人单核细胞趋化激活因子(MCAF)融合蛋白经SephadexG-75和CM-SepharoseFF两步柱层析,获得了电泳纯的GM-CSF/MCAF融合蛋白。为进一步研究其结构与功能,我们以纯化的该融合蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清。DotELISA和Westernblot试验表明,该抗血清效价高、特异性好,可分别与GM-CSF/MCAF、GM-CSF和MCAF发生反应。  相似文献   

3.
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人单核细胞趋化激活因子(MCAF)融合蛋白经SephadexG-75和CM-SepharoseFF两步柱层析,获得了电泳纯的GM-CSF/MCAF融合蛋白。为进一步研究其结构与功能,我们以纯化的该融合蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清。DotELISA和Westernblot试验表明,该抗血清效价高、特异性好,可分别与GM-CSF/MCAF、GM-CSF和MCAF发生反应。  相似文献   

4.
将人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人血清白蛋白第三功能区(HAS-D3)的基因串联后,在E.coli中获高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%.利用TF-1体外细胞活性测定表明,GM-HSA的活性单位为1.04×10~6U/mg,虽然其比活性低于GM-CSF,但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性.  相似文献   

5.
vMIP-ⅡN端重组肽的表达纯化及活性鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ (viral macrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)由卡波西肉瘤疱疹病毒编码,前期研究证明了vMIP-II N端21肽(NT21MP)选择性的阻断趋化因子CXCR4,从而抑制乳腺癌细胞趋化的活性。通过化学合成法获得编码vMIP-ⅡN末端的基因序列,与pGEX-KG(克隆位点的N 端有谷胱甘肽转移酶GST标签序列)连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中获得表达,免疫印迹显示重组蛋白GST-NT21MP主要在细菌裂解液上清中表达,可溶性部分经亲和层析、超滤、快速蛋白液相色谱(fast protein liquid chromatography,FPLC)纯化获得高纯度的GST-NT21MP蛋白。利用Transwell趋化试验测定GST-NT21MP的活性。结果显示,重组蛋白GST-NT21MP能够抑制乳腺癌细胞SK-BR-3的趋化活性,可作为治疗乳腺癌转移的潜在性靶向药物。  相似文献   

6.
将人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的基因串联后,在E.coli中获高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%。利用TF-1体外细胞活性测定表明,GM-HSA的活性单位为1.04×10^6U/mg,虽然其比活性低于GM-CSF,但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性。  相似文献   

7.
巨噬细胞集落刺激因子与动脉粥样硬化欧阳谦,周玫,陈瑗(第一军医大学自由基医学研究室,广州510515)关键词巨噬细胞集落刺激因子,氧化修饰低密度脂蛋白,动脉粥样硬化巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)是一种多肽类激素样造血生长因子,可由单核细胞、巨噬细胞...  相似文献   

8.
单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1;MCP-1)属于炎症趋化因子CC亚族成员,它能趋化T淋巴细胞、单核细胞,诱导内皮细胞、单核细胞释放黏附因子,使单核/巨噬细胞向病变处聚集。这些免疫及炎症过程有可能导致2型糖尿病大血管病变的发生、发展。本文就单核细胞趋化蛋白-1促使动脉粥样硬化的机制、及其干预治疗,单核细胞趋化蛋白-1表达上调的影响因素,深入了解单核细胞趋化蛋白-1与2型糖尿病大血管病变的关系。  相似文献   

9.
目的探索双歧杆菌的LTA激活巨噬细胞产生一氧化氮(NO)的信号途径。方法以LTA刺激大鼠腹腔巨噬细胞,用激光共聚焦显微镜定量测定其诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量,以Griess试剂检测巨噬细胞产生NO的含量。结果LTA刺激组大鼠腹腔巨噬细胞iNOS和NO的含量明显高于对照组(P〈0.01)。以PDTC、Chelerythrine和D609分别预先孵育巨噬细胞,再以LTA刺激巨噬细胞,其产生iNOS和NO的量明显低于LTA刺激组(P〈0.01)。结论双歧杆菌的LTA可通过NF-κB、PKC和PC-PLC激活巨噬细胞,使之产生多量的iNOS以及NO。  相似文献   

10.
科学家发现神经趋化蛋白最近,美国加州大学旧金山分校HowardHughes医学研究所(HHMI)研究人员Tessier-Lavi-gne等报道,已从小鸡脊髓和大脑中发现了两种神经趋化蛋白,分别命名为神经趋化蛋白1和2(netrin-1,2),此种蛋白...  相似文献   

11.
季晓辉 《微生物与感染》1994,17(4):156-158,161
本文综述国外近年来对单核-巨噬细胞受单纯疱诊病毒(HSV)感染的研究成果。单核-巨噬细胞对HSV感染具有天然的内在抗性,这种抗性受遗传基因控制,不依赖于干扰素(IFN)。单核-巨噬细胞的这种抗性因其组织来源和分化状态的不同而有程度上的差异。佛波酯类(PMA),脂多糖(LPS),α-肿瘤坏死因子(TNF-α)等可削弱这种抗性,促进HSV在单核-巨噬细胞中增殖。  相似文献   

12.
热休克反应是机体中一个重要的内源性保护机制,但其对TNF-α诱导的单核/巨噬细胞迁移有无影响目前尚不清楚.采用酶联免疫吸附实验观察TNF-α(20μg/L)刺激RAW264.7巨噬细胞4h后炎症因子IL-1β、IL-6、IL-15的表达情况;Western blot验证热休克预处理诱导热休克蛋白表达的增加;利用细胞趋化实验观察热休克预处理(42℃,1h)对TNF-α所致巨噬细胞迁移的影响.研究发现,TNF-α可明显促进RAW264.7细胞株中IL-1β、IL-6、IL-15等炎症因子的释放;热休克预处理诱导热休克蛋白HSP70、HSP90、HSP25表达增加;细胞趋化实验发现TNF-α处理的RAW264.7细胞迁移能力较正常对照组明显增强,而热休克预处理组巨噬细胞的迁移能力较单纯TNF-α处理组明显减弱.上述结果表明,热休克预处理抑制TNF-α所致巨噬细胞的迁移.  相似文献   

13.
目的:开发一种粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)长效缓释微球剂型。方法:采用S/O/hO法制备了包裹粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子多糖玻璃体颗粒的PLGA微球,考察了微球的表面形态、粒径分布等,并且运用ELISA方法考察了微球的体外释放效果。结果:本方法制备的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子微球光滑圆整,粒径分布均匀,体外可以缓释达32天,累积释放率接近90%。结论:本方法制备的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子微球能有效地保护蛋白活性,同时实现长效缓释的目标,是一种可行的蛋白缓释方案。  相似文献   

14.
本实验应用免疫组织化学方法,检测巨噬细胞相关抗原、巨噬细胞集落刺激因子(M┐CSF)、白细胞介素┐1(IL┐1)和肿瘤坏死因子┐α(TNF┐α)在骨巨细胞瘤(GCT)中的表达,结果表明,在GCT中,M┐CSF主要由纤维母细胞样基质细胞(FC)分泌;巨噬细胞样基质细胞(HC)是单核┐巨噬细胞系早期的未成熟细胞,主要分泌IL┐1和TNF┐α,少数多核巨细胞(MGC)也可产生TNF┐α。本文提示,GCT中的三种主要细胞能分泌M┐CSF、IL┐1和TNF┐α细胞因子,通过自分泌或旁分泌作用相互影响,共同促进GCT的发生、发展及其侵袭性的生物学行为  相似文献   

15.
糖尿病肾病是多因素引起的复杂性疾病,近年研究发现炎症反应参与了该病的发生与发展.单核细胞趋化蛋白-1是趋化因子CC亚家族的一员,在募集巨噬细胞等炎性细胞参与炎症反应中扮演着重要的角色.其趋化单核巨噬细胞于糖尿病肾组织中,可介导溶酶体释放,产生氧自由基,促进单核巨噬细胞表达β1-转化生长因子(transforming growth factor β1,TGF-β1),而广泛浸润臣噬细胞加剧了肾小球基底膜增厚、细胞外基质堆积,进而发展为肾小球硬化和间质纤维化.深入研究单核细胞趋化蛋白-1在糖尿病肾病中的作用,可望为糖尿病肾病的预防和治疗提供新的思路和途径.  相似文献   

16.
人巨噬细胞集落刺激因子在家蚕中的高效表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
人巨噬细胞集落刺激因子在家蚕中的高效表达秦浚川,邱平,施晓青,朱洁,朱德煦(南京大学生物化学系,国家医药生物技术重点实验室,210008)关键词人巨噬细胞集落刺激因子;家蚕;基因表达人巨噬细胞集落刺激因子(hM-OSF)是一种重要的血细胞生长因子,它...  相似文献   

17.
卵巢激素对肺泡巨洚细胞趋化活性的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
为探讨卵巢激素对非性器官肺脏的防御功能有无影响,本研究以肺泡巨噬细胞(AM)趋化活必来指标,观察了卵巢激素对成年雄性大鼠离体AM趋化活性的作用。结果显示:不良浓度的酵母多糖激活血清与AM在体外培养3.5h,对AM趋化性有良好的线性关系。雌二醇能抑制AM的趋化活性,量效关系显著(r=-0.9280,P<0.01);而孕酮则促进AM的趋化活性,亦具有剂量依从性(r=0.9975,P<0.01).rjf  相似文献   

18.
肝刺激因子对肝癌细胞增殖的调节作用   总被引:4,自引:1,他引:3  
Liu XJ  An W  Lei TG  Rong Y  Du GG 《生理学报》1998,50(5):543-550
初断乳雄性SD大鼠的肝匀浆以超速离心和柱层析法分离纯化肝刺激因子(HSS),观察其对肝癌细胞增殖、细胞表皮生长因子(EGF)受体表达及受体磷酸化的影响。结果表明,HSS具有明显的促肝癌细胞分裂增殖能力,提高细胞周期中S期细胞所占比例。HSS促肝癌细胞增殖作用与其促EGF受体表达有关,表现为:(1)HSS上调70kD EGF受体蛋白表达,此作用与EGF合用后明显加强,即呈协同效应;(2)HSS上调E  相似文献   

19.
目的探讨双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对巨噬细胞缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)的影响。方法首先分离培养昆明小鼠腹腔巨噬细胞,然后以WPG刺激巨噬细胞,再用脂荧光探针标记细胞,最后采用激光共聚焦显微镜结合激光漂白后荧光恢复技术检测反映GJIC变化的荧光恢复程度。结果和对照组相比,以WPG刺激巨噬细胞后,其GJIC的平均荧光恢复率明显增加(P〈0.01)。结论双歧杆菌的WPG可提高巨噬细胞的缝隙连接介导的细胞间通讯。  相似文献   

20.
目的探讨分叉双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对巨噬细胞膜脂流动性的影响。方法首先分离培养昆明小鼠腹腔巨噬细胞,然后以WPG刺激巨噬细胞,再用细胞膜磷脂荧光探针标记细胞,最后采用激光共聚焦显微镜结合激光漂白后荧光恢复技术检测巨噬细胞的膜脂流动性。结果WPG刺激组反映小鼠腹腔巨噬细胞膜脂流动性的平均荧光恢复率明显高于对照组(P〈0.01)。结论分叉双歧杆菌的完整肽聚糖可提高巨噬细胞膜脂流动性。  相似文献   

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