提高抗体酶催化活性的研究进展

提高抗体酶催化活性的研究进展王俊＊梁世中（华南理工大学生物工程系,广州５１０６４１）＊现工作单位：广州暨南大学生物工程学系（５１０６３２）。关键词抗体酶催化抗体催化活性抗体酶（催化抗体）技术是化学和生物学的研究成果在分子水平交叉渗透的产物,是将抗体的...     

抗体酶研究的新进展

抗体酶研究的新进展冯雁（吉林大学酶工程实验室,长春１３００２３）杨同书（白求恩医科大学应用基础生物研究所,长春１３００２１）抗体酶（Ａｂｚｙｍｅ）或催化抗体（Ｃａｔａｌｙｔｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ）是一种新型人工酶制剂,它是依据对酶分子催化反应机制的理...     

工程抗体酶的研究进展

本文评述了工程抗体酶的研究现状和抗体酶在防化医学研究中的应用。抗体库技术的出现使抗体酶的研究呈现了新的生机。不仅使不具备细胞工程实验条件的实验室能够制备抗体酶,而且实验周期大大缩短,比杂交瘤技术提供多20倍的结合性抗体作为潜在的抗体酶,使抗体酶更易获得。抗体库技术能够容易地评价编码抗体酶的基因,因而可以在分子水平上认识和改造抗体酶。噬菌体抗体库可以不经免疫即可制备抗体的特点,使通过人源性噬菌体抗体库生产的抗体酶能够直接用于临床治疗。随着工程抗体酶研究的不断深入,新颖实用的抗体酶将会被应用于包括军事医学在内的多种领域中。     

催化抗体研究新进展

催化抗体也叫抗体酶,是具有催化活性的免疫球蛋白.由于它兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性,因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的,特别是自然界不存在的高效催化剂,对生物学、化学和医学等多种学科有重要的理论意义和实用价值.综述了催化抗体研究的最新进展,讨论了该领域目前存在的问题,提出了解决这些问题的可能办法.     

抗体酶技术在医学上的应用

抗体酶是一类可变区被赋予了酶催化活性的抗体分子,可以催化许多天然酶无法催化的化学反应,在医学、工业、农业等众多领域具有广泛的应用前景和潜在的应用价值。该文介绍抗体酶及其制备策略和方法;抗体酶技术在医学领域的应用及研究进展。     

百日咳抗体酶联检测试剂盒的研制及其应用

为了研制百日咳抗体酶联检测试剂盒以调查吉林省2~8岁儿童百日咳、白喉及破伤风抗体水平。采用百日咳菌液经硫酸铵盐析、PBS溶液浸提及蔗糖密度梯度离心提取的PT和FHA作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG,作为抗体制备ELISA试剂盒。并经敏感性、特异性、重复性试验考查该试剂盒质量。结果显示,试剂盒敏感性可达0.0036 IU/m l;重复性较好,CV<4%。试剂盒置于37℃3d敏感性无明显变化。吉林省2~8岁儿童白喉、破伤风的抗体水平较高,百日咳的抗体水平相对较低。此方法制备的百日咳抗体酶联检测试剂盒的质量符合要求,可应用于临床检验与流行病学监测。     

抗体酶设计新思想——疏水腔修饰法

提出一种新的抗体酶设计思想———疏水腔修饰法 ,并根据这一思想合成出谷胱甘肽 (GSH)的类似物S 二硝基苯取代的谷胱甘肽二丁酯 (GSH S DNPButyles ter)作为半抗原Hapten 3;将该半抗原连到载体蛋白上进行免疫 ,利用单克隆抗体制备技术得到抗体 1C8,通过 2步化学修饰方法 ,将谷胱甘肽过氧化物酶的催化基团硒代半胱氨酸 (Sec)引入到抗体 1C8可变区中 ,得到转换值即催化中心活力 (kcat)为天然兔肝谷胱甘肽过氧化物酶 1 7倍的抗体酶Se 1C8,是曾经报道抗体酶Se 4A4,Se 4G3的 40倍和 5 3倍 ,是目前与天然酶相比催化效率最高的抗体酶 ,这一结果也验证了提出的抗体酶设计思想     

系统性红斑狼疮患者血清中CD83与自身抗体的表达及其相互关系

目的：检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者血清中CD83（soluble CD 83,sCD 83）和多种自身抗体的表达水平,并探讨其相互关系。方法：ELISA检测患者可溶性CD 83和AnuA的表达,应用间接免疫荧光的方法检测抗cmDNA抗体,应用乳凝法检测血清中的DNP,采用胶体金标记和快速膜渗滤技术测定血清中的抗dsDNA抗体。结果：对照组患者血清中可溶性CD 83的表达为（0.26±0.10）ng/ml,实验组患者血清中可溶性CD 83的表达为（5.56±0.72）ng/ml。与对照组相比,实验组患者血清中可溶性CD 83的平均浓度明显升高。在抗dsDNA抗体阴性的51例系统性红斑狼疮患者中AnuA的阳性率明显高于抗DNP抗体和抗cmDNA抗体,同样在抗DNP抗体阴性的58例系统性红斑狼疮患者中AnuA的阳性率明显高于dsDNA抗体和抗cmDNA抗体。系统性红斑狼疮患者中可溶性CD83的水平（〈2.68 ng/ml）与各种自身抗体（抗dsDNA抗体、AnuA、抗DNP抗体和抗cmDNA抗体）水平的相关系数分别为（r=0.542,0.613,0.489和0.367）。具有高水平可溶性CD83的系统性红斑狼疮患者（≥2.68 ng/ml）,与各种自身抗体（抗dsDNA抗体,AnuA,抗DNP抗体和抗cmDNA抗体）水平的相关系数分别为（r=0.711,P〈0.05）、（r=0.845,P〈0.01）、（r=0.862,P〈0.01）和（r=0.724,P〈0.051）。结论：可溶性CD83通过活化DC细胞并激活补体系统,参与系统性红斑狼疮的发生发展,联合可溶性CD83和多种自身抗体的检测,能更明确系统性红斑狼疮患者病情的严重程度,有利于SLE的诊断和治疗。     

抗体酶

根据酶活性部位的结构用免疫及其它方法得到的抗体酶具有催化活性,为酶的结构功能研究和抗体与酶的应用等方面开辟了一个新的研究领域。     

抗体酶简介

抗体酶简介陈龙（河南周口师专生物系４６６０００）１９４６年,鲍林（Ｐａｕｌｉｎｇ）用过渡态理论阐明了酶催化的实质,即酶之所以具有催化活力是因为它能特异性结合并稳定化学反应的过渡态（底物激态）,从而降低反应能级。１９６９年杰奈克斯（Ｊｅｎｃｋｓ）在过渡...     

催化性抗体及其研究进展

根据过渡态理论,按特定的化学反应机制确定反应中的可能过渡态结构,选择和该过渡态结构类似的化合物作为半抗原,可诱导机体产生具有催化活性的催化性抗体.文章对诱导催化性抗体中半抗原的选择原则、催化性抗体和非催化性抗体间的联系、催化性抗体和酶促催化反应的比较等方面进行了较为全面的综述,并对催化性抗体在医药科学中的应用前景及限制因素进行了讨论.     

将抗体转成酶

最近两个研究小组应用新的生物工程技术使抗体(“αb”)具有酶的催化性质。得到抗体酶“abzyme”的方法正被美国的IGEN公司研究使其商业化。     

原发性胆汁性肝硬化患者临床指标变化与肝脏病理分期的回顾性分析

目的通过肝活检检测原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者的病理分期,并对比血生化、自身抗体等指标进一步明确各期的生化特点,便于指导临床。方法所有患者采静脉血检查肝功,自身抗体,免疫球蛋白,所有患者进行肝脏活检,分析其肝脏病理分期。结果 43例患者血清抗线粒体抗体（AMA）及AMA-M2阳性为31例（72.1%）。27例（62.8%）ANA阳性,37例（86.1%）患者血清IgM水平升高。均有肝功能指标的明显异常,以GGT及ALP升高最明显。结论对胆酶增高而原因未明的肝病患者,早期自身免疫抗体及肝脏病理检查对原发性胆汁性肝硬化的诊断及治疗具有临床指导意义。     

单链抗体的研究进展

单链抗体（ＳｃＦｖ）是抗原与抗体结合的最小单位,是由连接肽将抗体重链可变区（ＶＨ）与轻链可变区（ＶＬ）连接而成的单链抗体可变区片段,本文从单链抗体的结构、特性、构建、表达方式,用途及研究进展等方面进行了介绍。     

氯沙坦对肾血管性高血压大鼠血清中血管紧张素Ⅱ-1受体自身抗体产生的影响

目的和方法：采用两肾一夹型肾血管性高血压（RVH）模型,以合成的大鼠血管紧张素Ⅱ－1受体（AT1R）细胞外第二环165－191位氨基酸序列作为特异性抗原,用ELISA法检测大鼠血清中血管紧张素Ⅱ－1受体自身抗体,动态观察（13周）氯沙坦（术后第2周开始,5mg/kg dig,连续12周）治疗对模型大鼠AT1R自身抗体产生的影响。结果：RVH组大鼠血清中AT1R自身抗体从术后1周起阳性率、滴度逐渐升高;给予氯沙坦治疗不仅可抑制模型大鼠心脏功能和结构的改变,而且使血清AT1R自身抗体的阳性率和滴度明显低于肾血管性高血压组。结论：氯沙坦有抑制AT1R自身抗体产生而达到降压的作用。     

评价抗SSA、抗SSB和抗α-胞衬蛋白抗体在诊断干燥综合征中的价值

目的：评价SSA、SSB和胞衬蛋白在诊断干燥综合征（SS）中的价值。方法：用酶联免疫吸附试验（ELIsA）检测47例确诊为SS患者、20例其它自身免疫病（类风湿关节炎7例、SLE6例、自身免疫性肌炎7例）和20例体检健康者血清抗SSA、SSB和α-胞衬蛋白抗体,分析三种自身抗体阳性率。结果：抗SSA抗体、抗SSB抗体和抗仅．胞衬蛋白抗体敏感性分别为76．6％、38．3％、42．6％;特异性分别为72．5％、95．0％、82．5％;三种抗体联合检测后敏感性为89．4％,特异性50．0％。结论：抗仪．胞衬蛋白抗体与抗SSA、SSB抗体联合检测时可提高阳性率,对症状不典型的SS患者诊断有一定的补充意义。     

一株乙酰胆碱受体单克隆抗体的序列分析

探讨重症肌无力自身抗体分子结构及其在发病机制中的作用。利用PCR从分泌乙酰胆碱受体（AChR）单抗A49的杂交瘤细胞株扩增抗体可变区（V）基因,经转化大肠杆菌DH5α克隆后,进行核苷酸序列分析。A49的重性V区基因由小鼠VHNP族基因编码,轻链V区基因由小鼠VK2组基因编码。与致病性AChR抗体V区比较,其同源性均在70％以下。A49的分子结构与致病性AChR抗体不同。     

抗中性粒细胞胞浆抗体、抗核抗体联合检测对类风湿关节炎的诊断价值

目的：探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）与抗核抗体（ANA）联合检测对类风湿关节炎的临床意义。方法：采用IIF法对82例RA患者（RA组）、74例非RA自身免疫疾病患者（非RA组）和52例健康体检者（正常对照组）的血清ANCA和ANA谱进行了检测分析,并用ELISA法进行抗丝氨酸蛋白酶3（PR3）、抗髓过氧化物酶（MPO）、ANA谱的定量检测。结果：RA组82例患者中,64例ANCA阳性,阳性率为78．08％,其中核周型（PANCA）37例,阳性率为45．1％,胞浆型（CANCA）27例,阳性率为32．9％;非RA组74例患者中有7例ANCA阳性率分别为9．4％;正常对照组50例中没有一例ANCA阳性。利用Elisa法对患者血清进行检测,分别能够特异的检测到PR3、MPO、抗双链DNA抗体（抗ds—DNA抗体）、抗SS—A等抗体、抗ss—A抗体、抗PM—SCL抗体的存在。结论：联合ANCA、ANA检测有助于提高类风湿关节炎的诊断。     

碳酸酐酶IV自身抗体在慢性心力衰竭患者中的测定

目的：对慢性心力衰竭（CHF）患者血清中的抗碳酸酐酶IV自身抗体、抗氧化物及细胞因子的水平进行检测。方法：选取CHF患者共73例,测定其血清抗碳酸酐酶IV自身抗体、血沉、SOD等6种抗氧化物和IL-6等4种细胞因子的水平。结果：CHF患者血清抗碳酸酐酶IV自身抗体水平显著高于健康对照组（P〈0．05）,SOD、GPx、CAT和TAC水平显著低于健康对照组（P〈0．05）,MDA水平显著高于对照组（P〈0．05）。CHF患者血清的IL-2水平较健康对照组显著升高（P〈0．05）,IL-3、IL-17、IFN-α和IFN-γ与健康对照组无显著性差异（P〉0．05）。结论：CHF患者血清抗氧化物水平和几．2的变化可能参与了其体内碳酸酐酶Ⅳ抗体的产生。     

抗体酶研究进展

本文回顾了抗体酶的研究历史,讨论了诱导法、基因工程法、拷贝法和化学修饰法等制备抗体酶的方法,并重点论述了生物筛选法和纯化学筛选法等抗体酶的筛选方法。对抗体酶研究的应用性前景,抗体酶催化效率的理论基础和天然抗体酶作了探讨。对抗体酶研究取得的成果作了介绍。