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胞内抗体技术及医学应用 总被引:1,自引:0,他引:1
胞内抗体技术是近年来随抗体工程技术发展起来的一项新型基因治疗方法.它将单链抗体表达于非淋巴细胞内,并使之定向分布于细胞核、细胞浆或内质网等部位,特异性阻断、干扰分布于该部位的大分子物质生物活性或加工分泌过程.实验证明该技术能抑制生长因子受体的表达,灭活原癌基因蛋白,抑制病毒复制.在生物科学及医学研究中具有很大应用潜力. 相似文献
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内抗体——一种新的基因功能研究工具 总被引:1,自引:0,他引:1
细胞内抗体是指能够在细胞内特定区域特异性中和靶蛋白功能的抗体.内抗体技术是一种翻译后水平上抑制靶蛋白质功能的技术,已经成为一种功能基因组学研究的重要工具.本文综述了细胞内抗体转运和作用机制,分析了细胞内抗体技术和其他靶向敲除技术的优、缺点,以及细胞内抗体技术存在的问题及解决途径. 相似文献
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单链抗体的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
杨银辉 《微生物学免疫学进展》1996,24(3):52-57
单链抗体(ScFv)是抗原与抗体结合的最小单位,是由连接肽将抗体重链可变区(VH)与轻链可变区(VL)连接而成的单链抗体可变区片段,本文从单链抗体的结构、特性、构建、表达方式,用途及研究进展等方面进行了介绍。 相似文献
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以Ⅳ型胶原酶为靶点的细胞内表达单链抗体的抗肿瘤作用 总被引:5,自引:0,他引:5
Ⅳ型胶原酶(包括MMP-2和MMP-9)与肿瘤的侵袭转移和恶性进展密切相关. 通过构建可在真核细胞内质网表达抗Ⅳ型胶原酶scFv M97抗体基因的真核表达载体, 应用脂质体LipofectAMINE法对人高转移性肺巨细胞癌PG细胞系进行基因治疗. 研究结果表明, 细胞内表达scFv M97对PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌、PG细胞生长及体外侵袭能力具有显著的抑制作用, 并能明显降低PG细胞裸鼠体内成瘤性, 延长动物存活时间. 以上结果提示胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键步骤从根本上抑制Ⅳ型胶原酶的活性, 在肿瘤基因治疗中具有重要的应用前景. 相似文献
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单链抗体的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
兰州生物制品研究所 《现代生物医学进展》2011,11(4):795-797
单链抗体即单链抗体可变区片段(single-chain antibody variable fragment,or ScFv)是由抗体重链可变区和轻链可变区通过一段10-25个氨基酸的连接肽连接而成,其分子质量小,穿透力强,特异性好,免疫原性低,在免疫学和医学方面得到了广泛应用。本文就单链抗体的结构设计、展示系统、表达和应用方面做一综述。 相似文献
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单链抗体的生物学特性及应用前景 总被引:1,自引:0,他引:1
自从 70年代德国学者克勒 (Kohler)和英国学者米尔斯坦 (Milstein)利用细胞融合技术首次成功制备单克隆抗体 ,并制备杂交瘤技术以来 ,不仅促进了整个生命科学基础研究领域的发展 ,而且给抗体研究及应用带来了突破。单克隆抗体在许多疾病临床诊断、治疗、预防和蛋白提纯等方面日益显示出重要作用和广阔的应用前景 ,特别是众多选择良好的抗各种肿瘤单抗体的制备 ,使导向药物的研究领域重新受到人们的重视。据估计到本世纪末以抗体为基础的诊断和治疗试剂在全世界的销售额可高达60亿美元。然而 ,传统的单克隆抗体由于其分子本身的结构问题在肿… 相似文献
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噬菌体抗体库技术 总被引:3,自引:0,他引:3
徐伟文 《国外医学:分子生物学分册》1998,20(5):218-222
噬菌体抗体库技术用PCR扩增出抗体的全套可变区基因,通过噬菌体表面表达技术,把Fab段或单链抗体表达在噬菌体表面,经过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体。 相似文献
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田锋 《国外医学:分子生物学分册》2007,4(5):455-458
单链抗体(single-chain antibody fragment, scFv)保持了亲本抗体的抗原识别特异性及亲和活性的最小功能性抗体片段,其良好的可塑性及广泛作用已使之成为研究的热点。scFv相关的研究成果不仅改进了已有的肿瘤和病毒感染诊治方法,还提出了新颖的抗肿瘤、抗感染思路,如靶向肿瘤新生血管及细胞外基质相关蛋白的提出改变了以往仅针对肿瘤细胞的狭隘治疗思维。文章综述了scFv在抗肿瘤和抗感染方面的研究及应用。 相似文献
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噬菌体呈示单链抗体表达载体及小鼠非特异抗体库的构建 总被引:4,自引:0,他引:4
用大肠杆菌丝状噬菌体表面呈示技术构建抗体库的方法,为从抗原出发获得特异抗体提供了新的途径。报道的是,首先构建了一个用于噬菌体呈示抗体的噬粒表达载体pFUW80,它具有既可以进行外分明表达,又可进行附着表达的特点。然后利用设计的一套扩增小鼠抗体重链和轻链可变区基因片段的PCR引物,从未免疫小鼠脾细胞中扩增出了抗体重、轻链可变区基因,构建了一个1.2×106库容的小鼠非特异性单链抗体库。从这个抗体库中,筛选出了针对人IgG的单链抗体噬菌体,并进行了ELISA检测和部分序列分析。这一初步结果为今后继续利用这一系统进行研究奠定了基础。 相似文献
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胞内蛋白的选择性提取 总被引:2,自引:0,他引:2
生物技术如DNA重组、细胞融合技术,已使应用微生物廉价地大规模生产有价值的生物产品如:胰岛素、葡萄糖苷酶等成为可能。但很多基因重组蛋白是以胞内包涵体形式存在的,这些胞内蛋白制品在纯化过程中,由于步骤多、最终收率低,极大提高了生产成本。据统计,在蛋白制品生产中,分离和纯化费用占总生产费用的80%以上[1]。因而开发新型生化分离技术,生产胞内蛋白质已成为工业生产的核心问题。 减轻蛋白质后处理工艺的负荷最根本的方法是尽量减少目标蛋白提取时非目标杂质的混入。传统胞内产物分离纯化的第一步是细胞破碎,破碎方… 相似文献
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单链抗体(single-chain fragment variable, scFv)是由可变重链(VH)和可变轻链(VL)通过柔性肽接头连接在一起的小分子重组抗体。从杂交瘤中分离单链抗体的mRNA,逆转录成cDNA作为单链抗体基因扩增的模板,可得到包含大量不同VH和VL片段的单链抗体的基因文库。利用展示技术完成单链抗体亲和力和特异性筛选及鉴定,得到的单链抗体可通过各种表达系统成功表达单链抗体的蛋白质。虽然单链抗体分子量小,但已包含了完整抗体的抗原结合域,对抗原具有高特异性、高亲和力及低免疫原性,还具有较好的肿瘤组织穿透和扩散能力。因此,单链抗体已成为肿瘤诊疗方法开发中的研究热点。详细介绍了单链抗体的制备方法和问题,重点阐述了单链抗体在肿瘤诊断和治疗中的研究进展,以期为单链抗体制备及其治疗和诊断肿瘤提供理论依据。 相似文献