裂褶菌培养、鉴定及氨基酸组成分析

目的:获得裂褶菌的纯培养物,鉴定培养菌丝,并分析子实体及菌丝氨基酸含量.方法:利用孢子分离法、组织分离法培养菌丝,扫描电镜观测其菌丝特征,结合ITS区序列分析,并利用出菇试验分析其菌丝体,全自动氨基酸分析仪分别测定裂褶菌子实体、菌丝体氨基酸组成.结果: 菌丝体ITS区序列与子实体完全一致,出菇试验亦表明裂褶菌菌丝体培养成功,子实体及菌丝体均含有丰富的氨基酸成分,两者氨基酸种类及含量相当,菌丝体总氨基酸含量14.01%,子实体总氨基酸含量15.59%,其中菌丝体必需氨基酸的含量(38.60%)比子实体稍高(37.95%).结论:裂褶菌菌丝亦具有丰富的营养价值,可作为重要的氨基酸来源及功能性食品.     

彩绒革盖菌超微结构的研究

利用电子显微镜对彩绒革盖菌[Coriolus versicolor(L.:Fr.)Quél.],俗名云芝的人工培养的菌丝和野生的子实体进行超微结构的研究。结果表明:子实体由三种类型的菌丝(生殖菌丝、骨架菌丝、联络菌丝)组成。菌丝和子实体菌丝的细胞壁由两层结构组成。担子和担孢子的细胞壁由多层结构组成,至少有三层。菌丝顶端细胞的细胞质中有顶泡复合体(AVC)和顶体。菌丝细胞和子实体菌丝细胞都有桶状隔膜,在细胞质中有丰富的糖原贮存。担孢子与担子的小梗连接处出现初生壁溶化现象。     

鸡腿菇特有病害鸡爪菌生物学研究——危害与形态学研究

鸡爪菌是危害鸡腿菇的一种特有病害,对其危害和形态特征研究结果表明:该菌可使鸡腿菇菌料内菌丝断裂、发黄、消解,菌料松散,子实体畸形、萎缩直至腐烂、死亡。该菌由菌丝体和子座2部分所组成。菌丝无色、有结节、隔膜多、节间长短不一。子座发达,可反复形成分枝;未成熟子座呈灰绿色,表面菌丝顶端专化形成分生孢子梗和圆形分生孢子;成熟子座呈土灰色至黑褐色,表面形成大量梨形子囊壳。子囊圆柱状,内生8个椭圆形子囊孢子。     

黄鳞伞子实体发育

为了丰富大型真菌个体发育学研究数据,并依据个体发育学数据提出分类学建议,通过石蜡切片法对黄鳞伞子实体进行了发育学观察。结果显示:黄鳞伞子实体发育初期原基圆形至卵圆形,具外菌幕原基,内部菌丝弯曲致密,螺旋交织在一起呈束状,随着原基的发育,端向膨大生长,菌盖原基出现,与此同时原基基部在保持伸长生长外,直径也明显增大,菌柄原基由此形成。随后菌褶腔出现,栅栏状细胞的出现表明子实层发育的开始,发育过程中Y型菌褶清晰可见。黄鳞伞的发育属于菌盖菌柄型发育,发育类型是半被果双菌幕发育型。     

伞菌DNA简易序列分析引出的思考

目的:伞菌物种以子实体形态特征为分类依据,研究以菌丝体代替子实体进行种质资源鉴定的遗传证据。方法:以常见的食用伞菌香菇、平菇子实体的不同部位组织及其分离菌丝体为供试材料,制备了12个随机引物介导的RAPD-PCR指纹,把DNA指纹图谱转化为简易的序列数据,经生物信息处理软件比较分析。结果:香菇不同菌株子实体DNA相似性系数在0.886～0.986之间,平菇不同菌株子实体DNA相似系数在0.779～0.976之间。对于供试的单个子实体而言,香菇和平菇子实体的菌盖、菌褶、菌柄及其组织分离菌丝体,与以此为菌种栽培得到的子实体相比较,所获得的有限DNA指纹图谱全部相同。结论:揭示了香菇和平菇不同菌株的遗传多样性,初步反映了伞菌不同发育阶段在分子水平上的遗传变异和亲缘关系,争论了以菌丝体代替子实体使用RAPD手段进行种质资源鉴定与系统发育分析引出的真菌遗传问题。     

谈谈子座和子实体

子座是某些高等真菌（主要是高等的子囊菌）的子实体下面或周围菌丝组成的紧密组织。也就是说,子座是容纳子实体的褥座（子座,名称stroma,希脂文,为褥垫、床之意）,常从菌核上发生,是真菌从营养阶段到繁殖阶段的一种过渡形式。而子实体是高等真菌产生抱子的结构。子囊果就是子囊菌的子实体,通常有子囊壳（如麦角病菌ClavicePsPurPurea）、子囊盘（如葱类小菌核病菌Sclerotiniaallii）、闭囊壳（如麦类白粉病菌Erysiphegraminis）3种类型。当菌核萌发时,首先形成子座（也有形成菌丝的,如丝核菌Rhizoctoniasolani）,在子座内着生…     

灵芝的培养

灵芝(Ganoderma lucidum)是担子菌纲,多孔菌目,多孔菌科的一种高等真菌。60年以前,我们对灵芝的生态习性还了解甚少。进入七十年代,经过科技工作者的努力,逐步揭开了灵芝神秘的面纱,并广为人工培植。灵芝由菌丝体和子实体组成。菌丝无色透明,直径约1—3微米,子实体又分化为菌柄和菌盖。长成后的灵芝,子实体木质化,皮壳革质化,呈现漆色光泽,经久不腐,但极易遭虫蛀食,丧失药用价值。灵芝种类较多,培植种有黄芝、赤芝、紫芝、     

发网菌目黏菌子实体微量元素的初步分析

运用能散X-射线微区分析技术研究了发网菌目黏菌代表种的子实体的微量元素组成,结果表明:分属于7属的7种供试发网黏菌子实体囊被上的微量元素组成存在差异。尽管在显微镜下观察不到可见的如绒泡菌目黏菌子实体中存在的石灰质颗粒,但其中的钙元素所占比例均仍较高。同时,元素组成上的差异与子实体的颜色没有相关性。     

毛木耳‘昊阳黄背2号’的选育报告

毛木耳新品种‘昊阳黄背2号’是以采自什邡市龙泉山的野生毛木耳子实体经系统选育而成,适宜四川省成都市、德阳市等种植毛木耳的区域栽培。菌丝生长最适温度为24-30 ℃,子实体最适生长温度为25-28 ℃。耳片呈耳形或不规则形,子实体丛生;耳片边缘光滑,颜色深红褐色。平均每袋干耳产量为203 g。     

榆耳有性结构及生活史的研究

本文通过电镜扫描、石腊切片及用苏木精染色法和DAPI荧光染色,对榆耳子实体有性结构进行观察,证实榆耳子实体菌盖结构分三层:上表层为毛层,表面着生有排列较密集顶端游离的菌丝,它们相互粘连呈菌丝束;中间层为髓部,由较疏松而相互交织在一起的薄壁菌丝组成,菌丝间充满胶质物质;下表层为子实层,表面起伏不平,呈不规则的疣状突起,上面着生担子和囊状体,担子无隔膜棍棒形,外表有不规则的网状纹饰,其顶部着生4个瓶梗状小梗,每个小梗上着生1个椭圆形或腊肠形担孢子,大小为2.5—3.0×6.0—6.5μm,担孢子表面有不规则的网状纹饰结构。在担子间的囊状体为长圆柱形或圆锥形,表面有较密的不规则的网状纹饰。 榆耳有性生殖为异宗配合。绝大多数担孢子含一个细胞核,很少数担孢子含两个细胞核。孢子萌发为一端萌发,也有少数为两端萌发。初生菌丝单核,不能形成子实体,当两种不同遗传性的交配型的初生菌丝结合后,形成具有锁状联合结构的双核菌丝,并可发育成子实体。榆耳具有典型减数分裂过程,不具有减数分裂后核分裂行为,四个子核分别进入四个担孢子内。 在初生菌丝或次生菌丝上,均可产生间生的或顶生的厚垣孢子。经过温度、光照和紫外线照射的诱发,均未发现有其它类型的无性孢子产生。因此,榆耳菌的生活史和大多数担子     

Comparative analysis of sequences expressed during the liquid-cultured mycelia and fruit body stages of Pleurotus ostreatus

To characterize genes involved in fruit body development, two complementary DNA (cDNA) libraries were constructed from RNA isolated from liquid-cultured mycelia and fruit bodies of Pleurotus ostreatus. Using single-pass sequencing of cDNA clones, 952 and 1069 expressed sequence tags (ESTs) were generated from liquid-cultured mycelia and fruit body cDNA library, respectively. A BLASTX search revealed that 390 of the liquid-cultured mycelia ESTs (41%) and 531 of the fruit body ESTs (50%) showed significant similarity to protein sequences described in the nonredudant database (E values < or =1 x 10(-5)). When liquid-cultured mycelia and fruit body ESTs were compared by the SeqMan II program, among the total of 2021 ESTs, 1256 ESTs were unigenes, and 66 unigenes (5.3%) were commonly expressed during both stages. The functional catalogs of the ESTs were made by comparison with functionally identified Saccharomyces cerevisiae genes. Liquid-cultured mycelium ESTs were compared with fruit body ESTs and changes of the expressed genes during fruit body development were analyzed.     

松口蘑菌丝体的分离和RAPD-PCR分析

针对松口蘑 [Tricholomamatsutake(S .ItoetImai)Sing .]菌丝体分离培养困难和各种相关分离物目前难以用出菇试验鉴定的现实 ,采用 8种培养基配方 ,对 9个不同来源的松口蘑子实体的不同部位及菌根、菌土进行组织分离 ,计接种试管 81 0多支 ,结果从菌褶部位获得 94支慢生型的菌丝体分离菌株 ,从菌柄部位仅获得 1支快生型的菌丝体分离菌株。以马铃薯葡萄糖土壤滤液培养基 (PDAS)、马铃薯葡萄糖麦麸滤液培养基 (PDAW )、BM培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA)对菌褶进行组织分离 ,获慢生型菌丝体的成功率依次为 74.4%、35.5%、156%和 8.9%。以各分离菌株的来源松口蘑子实体和中日两国松口蘑研究者提供的分离菌株作为DNA参照样品 ,对从供试子实体、菌根、菌土进行组织分离获得的各种相关纯培养物进行亲菌鉴定。采用筛选的 1 7个随机引物介导 2 5个供试松口蘑子实体及其分离菌体的RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) PCR反应 ,全部获得了清晰而稳定的DNA指纹图谱 ,结果一致表明 :每个松口蘑子实体的菌盖 (含菌褶…     

进境美国加州脐橙中丁香疫霉Phytophthora syringae的截获

从产自美国加利福尼亚州的新鲜脐橙样品中发现多个腐烂病果,通过分离培养得到3个疑似丁香疫霉Phytophthora syringae菌株,对3个菌株进行形态学研究、致病性测定和分子序列比对分析。结果表明病菌在V8A培养基上菌落稀疏、平铺,呈星状,菌丝紧贴培养基生长或埋于基质内生长;在PDA培养基上菌落呈菊花花瓣状,菌丝致密,乳白色;游动孢子囊和菌丝膨大体在无菌水和土壤浸出液中黑暗条件下48h后产生;菌株为同宗配合,卵孢子在带有新鲜脐橙果实组织或杜鹃叶片的V8A培养基中大量产生;创伤接种脐橙果实,7d后接种脐橙出现典型的褐腐症状;通用引物ITS1/ITS4扩增测序,Blastn分析表明序列与GenBank中P. syringae序列相似性为99%。依据上述研究结果,将分离获得的3株菌鉴定为丁香疫霉Phytophthora syringae,系国内首次截获的一种植物检疫性真菌病害。     

桑黄液体发酵工艺的研究

通过对桑黄液体发酵培养基、培养条件优化实验研究,以获得具有与桑黄子实体相似功效成分的桑黄菌丝体液体发酵工艺。以菌丝体收率为主要考察指标,采用单因子及L9(34)正交实验的方法,对桑黄液体发酵培养基及培养条件进行优化,确定桑黄液体发酵工艺条件。桑黄液体发酵最佳培养基及培养条件:玉米粉2%,葡萄糖3%,酵母膏0.5%,蛋白胨0.5%,KH2PO40.3%,Mg SO4·7H2O 0.15%,VB120μg/100 m L,p H5.5,接种量8%,培养温度28℃,摇床转数180 r/min,培养周期82 h。优化条件下所获得桑黄菌丝体粉为土黄色,菌丝体平均得率为1.67%,菌丝体黄酮含量(0.84%)与桑黄子实体(0.88%)相当,菌丝体多糖含量(5.15%)是子实体(1.71%)的3倍。可见,该桑黄液体发酵工艺具有较大的推广应用价值。     

凤眼果的生药学研究

凤眼果具有温胃、杀虫等功效,其名称和性状易与苹婆属其他物种混淆,然而其相关研究基础比较薄弱。该研究对凤眼果性状、微性状、种子横切面及粉末显微特征进行观察; 利用双向测序获取凤眼果DNA条形码序列ITS2、psbA-trnH、matK、rbcL,计算Kimura 2-Parameter(K2P)遗传距离,建立邻接系统进化树并进行聚类分析。结果表明:(1)凤眼果性状特征为外被深红色果皮,种子表面红褐色或暗栗色,质硬,内含浅黄色肥厚胚乳2片。(2)微性状特征为外种皮红褐色,极薄,质脆; 中种皮黑褐色,较厚,质硬; 内种皮浅黄色,质软。(3)显微特征为外种皮石细胞结构和排列方式、中种皮栅状细胞结构、内种皮细胞壁呈连珠状增厚、草酸钙簇晶。(4)基于ITS2序列可将凤眼果与苹婆属其他植物有效区分,matK序列可将假苹婆与苹婆属其他植物有效区分。该研究获取的凤眼果性状、微性状及显微特征数据,结合ITS2条形码序列可有效鉴别凤眼果,为其资源开发及质量标准制定提供了科学依据。     

Combining high-throughput sequencing with fruit body surveys reveals contrasting life-history strategies in fungi

Before the recent revolution in molecular biology, field studies on fungal communities were mostly confined to fruit bodies, whereas mycelial interactions were studied in the laboratory. Here we combine high-throughput sequencing with a fruit body inventory to study simultaneously mycelial and fruit body occurrences in a community of fungi inhabiting dead wood of Norway spruce. We studied mycelial occurrence by extracting DNA from wood samples followed by 454-sequencing of the ITS1 and ITS2 regions and an automated procedure for species identification. In total, we detected 198 species as mycelia and 137 species as fruit bodies. The correlation between mycelial and fruit body occurrences was high for the majority of the species, suggesting that high-throughput sequencing can successfully characterize the dominating fungal communities, despite possible biases related to sampling, PCR, sequencing and molecular identification. We used the fruit body and molecular data to test hypothesized links between life history and population dynamic parameters. We show that the species that have on average a high mycelial abundance also have a high fruiting rate and produce large fruit bodies, leading to a positive feedback loop in their population dynamics. Earlier studies have shown that species with specialized resource requirements are rarely seen fruiting, for which reason they are often classified as red-listed. We show with the help of high-throughput sequencing that some of these species are more abundant as mycelium in wood than what could be expected from their occurrence as fruit bodies.     

灵芝子实体和菌丝体的提取物及其各纯化组份生物活性的比较

从不同品种的灵芝中筛选出了多糖含量最高的菌株GL2为材料,利用柱层析技术从子实体和菌丝体提取物中分离得到多个组分。实验发现子实体组分P3,P31及P32对人白血病细胞株K562的生长有明显地抑制作用,这三个组分中只有P32对另一白血病细胞株HL-60有抑制作用。免疫活性测试的结果显示子实体各组分在刺激小鼠脾淋巴细胞,T和B细胞的增殖,提高人外周血中NK细胞杀伤活性方面比菌丝体的作用强;进一步的实验发现子实体与菌丝体相应组分在刺激人外周血中的T和B淋巴细胞增殖方面的活性差异不大。子实体和菌丝体提取物各组份均可剂量依赖型的促进PBMC分泌TNF-α。菌丝体提取物各组分对TNF-释放量的影响在低浓度时与子实体各组份相当,在高浓度时要明显好于赤芝子实体提取物各组分。     

中国核盘菌科分类研究概况

本文简要回顾我国核盘菌科真菌的研究历史,尤其是最近十年的进展,更正了过去此科分类和命名中的一些问题,列出我国目前已知核盘菌科12属42种,并提供属的检索表;其中美洲杯盘菌(Ciboria americana Durand)为我国新记录。同时,指出对此科进一步深入探讨的方向。描述了新种贵州杯盘菌(Ciboria guizhouensis w.-y.Zhuang),模式保存在中国科学院微生物研究所真菌标本室。     

猴头菌子实体和固体培养菌丝体提取物化学组成及生物活性的比较

比较了猴头菌子实体和固体培养菌丝体的提取物化学成分的组成和含量的差异。研究结果表明,猴头菌子实体和培养菌丝体提取物的单糖含量分别为6.67%和6.68%,基本一致;蛋白质含量分别为12.73%和13.91%,比较接近;多糖的含量相差较大,分别为26.63%和18.71%,子实体提取物的多糖含量比培养菌丝体提取物高7.92%;而培养菌丝体中重金属的含量比子实体中的高;红外光谱分析子实体提取物的特征吸收峰显示二者在多糖构型上有差异;动物实验表明在等生药量时,猴头菌子实体提取物对大鼠胃粘膜损伤的保护作用优于培养菌丝体的提取物。研究结果表明,猴头菌子实体较培养菌丝体更合适于相应功能食品的开发。     

马尾松内生真菌产油脂菌株的分离、筛选和鉴定

采用组织块法从马尾松(Pinus massoniana Lamb.)根、茎和叶片中分离获得内生真菌,初步筛选出产油脂菌株且对其油脂含量进行了分析;并采用形态学及分子生物学方法对产油脂菌株进行了分类鉴定。结果显示:从马尾松植株中共获得21株内生真菌菌株,其中分离自根、茎和叶片的菌株分别为4株、6株和11株。有14株菌株的菌丝中有油滴;其中,分离自叶片的菌株ZP-1、分离自根的菌株ZP-2和分离自茎的菌株ZP-3的菌丝内油滴较多且油脂含量较高,平均油脂含量分别达到29.12%、25.03%和30.56%,差异极显著(P<0.01)。不同菌株的菌落颜色、菌丝和分生孢子形态特征明显不同,菌株ZP-1、ZP-2和ZP-3的形态分别与拟青霉属(Paecilomyces Bainier)、生赤壳菌属(Bionectria Speg.)和镰刀菌属(Fusarium Link)菌种的形态相似。与GenBank中相关真菌ITS序列的比对以及NJ系统树分析结果显示:菌株ZP-1与拟青霉属、菌株ZP-2与生赤壳菌属、菌株ZP-3与镰刀菌属间的ITS片段序列相似性均达到99%,在各自的NJ系统树上它们也分别聚在一起。初步确定菌株ZP-1、ZP-2和ZP-3分别属于拟青霉属、生赤壳菌属和镰刀菌属。