酿酒酵母发酵与自然发酵过程中霍山石斛酵素的代谢物及抗氧化变化*

为实现霍山石斛的全质利用和高值化利用,以接种酿酒酵母发酵与自然发酵两种工艺制备霍山石斛酵素,研究不同工艺发酵过程中代谢物(有机酸、总酚、总糖等)和抗氧化活性(OH·清除率、ABTS·清除率、还原力)的变化趋势,并结合多元统计分析,建立综合评价指标。结果表明,酿酒酵母发酵组的酵母菌数量高于自然发酵组;自然发酵组检测到的4种有机酸的含量均高于酿酒酵母发酵组,其中乳酸和乙酸含量均呈上升趋势;酿酒酵母发酵组的草酸含量明显下降,而自然发酵组的草酸含量没有明显变化。酿酒酵母发酵组与自然发酵组的总酚含量分别下降了24.02%、24.98%;总糖含量分别下降了64.21%、22.89%;pH值分别下降了0.12和0.24,总酸含量分别增加了62.98%、70.98%;糖酸比分别降低了80.13%、59.47%,酿酒酵母生产的酵素口感以酸甜为主,自然发酵的酵素口感以甜为主。在抗氧化方面,酿酒酵母发酵组显著高于自然发酵组,OH·清除能力分别提高了42.57%和40.67%;ABTS·清除能力分别提高了55.36%和30.06%;还原力无显著变化。相关性分析和主成分分析结果表明乳酸、乙酸等有机酸具有一定的抗氧化性。酵母菌发酵第 14 d的综合评价指标达到阶段高点,酵母菌生长数量在14 d后趋于稳定,进入生长稳定期,可作为最佳发酵节点。综上结果表明酿酒酵母发酵相较于自然发酵霍山石斛提高了抗氧化活性,丰富了酵素口感,缩短了发酵时间,酵素品质较好。     

琥珀酸发酵研究进展*

琥珀酸在化工和食品行业应用广泛。与传统化学方法相比,微生物发酵法生产琥珀酸具有诸多优点：生产成本具有竞争力;利用可再生的农业资源包括二氧化碳作为原料,避免了对石化原料的依赖;减少了化学合成工艺对环境的污染。主要介绍产琥珀酸微生物的来源和育种,代谢途径和发酵调控机制以及产品回收工艺的进展。     

乳糖发酵短杆菌色氨酸营养缺陷株的诱变*

用亚硝基胍(NTG)诱变乳糖发酵短杆菌(Breevibacterium lactofermentum)ATCC-13869得到34株氨基酸营养缺陷突变株。经添加生物合成代谢途径中的不同底物鉴定,突变株33为色氨酸酶基因(tnA)缺陷,突变株34为色氨酸合成酶基因(trpB trpA)缺陷。     

酿酒酵母单倍体与双倍体原生质体的融合*

本文报道用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)原生质体融合,得到营养互补的融合子为三倍体,其生长速度、发酵速率均较亲株提高1—2倍。部分融合子酒精的产量高于亲株,同时高于目前使用的酒精发酵生产菌株。     

呼吸缺陷型耐糖耐高温酒精酵母菌种的筛选

采用紫外诱变和2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)鉴别性培养基,从市售酒精活性酵母粉中分离出13株呼吸缺陷型突变株.通过进一步筛选,最终筛选出一株呼吸缺陷型耐糖、耐高温的高效酒精酵母菌株,编号为T11.该菌株菌落表面湿润,乳白色,小且圆;细胞椭圆形(2.5～5.0μ×3.75～6.25μ),出芽繁殖,在25%(W/V)葡萄糖发酵液,起始pH 5.5,40℃条件下发酵,酒精发酵产酒精率和糖利用率分别可达45.54%和98.01%.     

酿酒酵母220菌株对铅的生物吸附研究*

在含铅培养基中培养酿酒酵母220,发现该菌对铅有一定的抗性。将培养好的酿酒酵母220接入含铅培养基中并对该菌吸附铅的能力进行研究,结果表明,在30℃时,该菌对6mg/L的含铅溶液有最大的吸附率,吸附率为96．6％,吸附平衡时间为25～30min,吸附的动力学方程为q=26．318C／(1 0．437C),乙酸对吸附后的酿酒酵母220有良好的解吸作用,葡萄糖和KH2PO4可以提高酿酒酵母220对铅的吸附率。     

mel基因在酿酒酵母菌中的克隆和表达*

构建了含mel基因的重组质粒pAJM,并转化到酿酒酵母菌中,获得了在平板上产生黑色表型的转化重组子,为酵母菌的遗传操作提供了一种新的选择标记。由于mel基因经酪氨酸产生的黑色素无毒、无害,安全稳定,无需另外加显色化合物或使用特殊的仪器设备,直接在平板上观察结果。因此,是一种便捷、价廉、无污染的新型报告基因。此外,实验中还发现含mel基因的酵母菌生长迅速,这不仅作为报告基因更能显示其优势,而且也为进一步研究其在酵母菌中的功能提出了新的内容。     

酿酒酵母木糖发酵酒精途径工程的研究进展

途径工程(Pathway engineering),被称为第三代基因工程,改变代谢流向,开辟新的代谢途径是途径工程的主要目的。利用途径工程理念,对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）代谢途径进行理性设计,以拓展这一传统酒精生产菌的底物范围,使其充分利用可再生纤维质水解物中的各种糖分,是酿酒酵母酒精途径工程的研究热点之一。这里介绍了近年来酿酒酵母以木糖为底物的酒精途径工程的研究进展。     

黑曲霉蛋白酶缺陷突变体的分离和鉴定

对黑曲霉(Aspergillus niger)3.795进行紫外诱变和筛选,获得了胞外蛋白酶缺失的菌株。其中突变株37951、3795123和3795130的生长特性与原株基本相同,胞外蛋白酶的活性明显低于原株,葡萄糖淀粉酶的活性与原株基本相同。突变株3795123和3795130的胞外蛋白酶活性分别为原株的54%和84%,可作为外源基因高效分泌表达的宿主菌。     

外加肌醇和钙离子对酿酒酵母乙醇发酵的影响

酒精发酵是重要的发酵工业之一,在传统的酒精发酵过程中,菌种的酒精发酵浓度低,原料的利用率和酒精的转化率也低,能量消耗大,导致生产效率较差［１］。近年来国内外许多研究者致力于筛选和构建能产高浓度酒精和耐高浓度酒精的菌种,并把这些酿酒酵母应用于浓醪发酵生...     

酿酒酵母BD101诱导产生的金属硫蛋白的分离纯化及鉴定

从酵母菌中分离出拮抗重金属、经铜诱导产生金属硫蛋白的酿酒酵母（Saccharo－mycescerevisiae）BD101。无细胞抽提液经SephadexG－50、DEAESepharoseCL－4B、SephadexG-25三次凝胶及阴离子交换柱层析分离纯化得到两个金属硫蛋白亚型。Mr约为7kD,由60个氨基酸组成,其中半胱氨酸含量占10％,每分子金属硫蛋白（Cu-MT）含6个分子Cys,可结合4个铜原子。     

酿酒酵母和粟酒裂殖酵母属间融合和融合子特性

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)PW218和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe Lindn)PW232的原生质体用20mmol/L CaCl_2和30％PEG(MW6000)处理进行属间融合,获得了10多株融合子,融合率为0.65～1.96×10~(-5)。对F_2和F_(10)两株融合子进行了葡萄糖、木糖及葡萄糖和木糖混合液的摇瓶实验结果表明F_(10)融合子利用葡萄糖、木糖及两种糖混合液产乙醇的能力大大高于两亲株。F_2融合子对木糖以及葡萄糖和木糖混合液的发酵能力亦较两亲株高,其中利用木糖产乙醇的量分别比PW218和PW232提高1.38倍和2.65倍。     

ENHANCEMENT OF ETHANOL PRODUCTION BY SIMULTANEOUS SACCHARIFICATION AND FERMENTATION (SSF) OF RICE STRAW USING ETHOXYLATED SPAN 20

In this work, four nonionic surfactants based on sorbitan monolaurate (Span 20) were synthesized by introducing ethylene oxide gas (n = 20, 40, 60, 80 ethylene oxide units) into Span 20 to give four new surfactants with different hydrophilic–lipophilic balance (HLB), namely, E(20), E(40), E(60), and E(80). The structures of the prepared nonionic surfactants were elucidated using Fourier-transform infrared (FT-IR) and ¹H-nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. The surface-tension measurements were recorded. The effects of the prepared nonionic surfactants on the simultaneous saccharification and fermentation (SSF) of microwave/alkali-pretreated rice straw to produce ethanol were investigated. From the obtained data, it was found that the addition of the nonionic surfactants at 2.5 g/L had a positive effect on SSF. The maximum ethanol yield (76 and 55%) was obtained after 72 hr for rice straw using Kluyveromyces marxianus and Saccharomyces cerevisiae, respectively. Also, it was found that the ethanol yield increases with increasing HLB of the prepared nonionic surfactants by increasing ethylene oxide units. The adsorption of nonionic surfactants on lignocelluloses is proposed to be due to hydrophobic and hydrogen bonding interactions between nonionic surfactants and the lignin part in the lignocelulose. It can be concluded that additions of surface-active compounds, such as nonionic surfactants, increase enzymatic conversion of rice straw for bioethanol purposes.     

发酵五碳糖和六碳糖产乙醇的细菌研究进展*

农作物废弃物中含有大量木质纤维素,经预处理或水解后能得到各种糖类的混合物,这些糖包括五碳糖和六碳糖(混合糖)。中报道了国内外近20年来在利用细菌发酵混合糖产乙醇方面的研究进展。重点介绍了几种重组大肠杆菌Escherichia coli和运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis利用混合糖产乙醇的特性。     

胶胨状芽孢杆菌拮抗菌株活性物质形成条件及其性质初步研究

探索了培养基组分和培养条件对胶胨状芽孢杆菌拮抗菌株抗菌活性形成的影响。确定了菌株的最适发酵条件 :即以 1 %麦芽糖为碳源 ,以 0 1 % (NH4 ) 2 SO4 为氮源 ,32℃～ 37℃摇瓶培养 ,在培养过程中保持pH近中性有利于菌株生长和积累活性产物。从发酵液中获得抗生物质粗品 ,该物质对G+ 的蜡样芽孢杆菌 ,金黄色葡萄球菌和G- 的大肠杆菌等均有较强抗菌活性。经热处理、酶处理和生化定性分析 ,表明此活性产物为肽类化合物     

酿酒酵母和产朊假丝酵母原生质体的形成、再生及属间融合

使用由亚硝基胍诱变所得到的营养缺陷型作为单倍体融合亲株的核基因标记,同时也采用线粒体球红霉素抗性突变株的小菌落形式作为融合亲株的线粒体基因标记。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和产朊假丝酵母(Candida utilis)两亲株原生质体的制备是用对数生长早期的细胞在蜗牛酶和0.7M KCl及β-巯基乙醇或二巯基苏糖醇的作用下完成的。二者的原生质体的形成率在30—60分钟内达到90—99％。原生质体再生率,酿酒酵母最高为29—35％,产朊假丝酵母为7.5％。两亲株的原生质体在35％PEG(M.W.6,000),10mM CaCl_2条件下被诱导融合。在基础培养基上,长出以营养互补为标记的融合菌株。融合频率为10~(-5)—10~(-6)。试验表明,这些融合菌株具有杂种的性质。其中一株杂合子在同化D-木糖、纤维二糖等的能力上比亲株明显增强。