苏芸金杆菌的一个新血清型

苏芸金杆菌云南变种(Bacillus thurtngtensts subsp. Yunnanensis)113菌株的H-抗原和 H-抗血清均与已知苏芸金杆菌H一血清型l到19的所有参考标准菌株的H一抗血清和H一抗原不发生交叉凝集反应。113菌株的生化反应结果与所有参考标准菌株也不相同。此外,113菌株对致倦库蚊(Culex pipiens var. quinquefaseiatces)(双翅目)(Bombyx mori) (鳞翅目)幼虫均无毒性。 因此,113菌株是一个新血清型20,即苏芸金杆菌云南变种,血清型20(Bacillus thuringiensis subsp. Yunnanensis H20)。     

苏芸金杆菌的一个新血清型

从土壤中分离出一株产生伴孢晶体的芽孢杆菌。该菌株具有苏芸金杆菌的典型特征,严生不规则型晶体,鞭毛抗原及生化反应与已知的苏芸金杆菌21个血清型不㈤,不产生β-外毒素。对棉铃虫、粘虫、大蜡螟及尖音库蚊幼虫均无毒性,是一个新血清型(H22),定名为苏芸金杆菌山东变种(Bacillus thuringiensis serovar shandongiensis, H22)。     

苏芸金杆菌高毒力菌株筛选方法研究

通过对36株苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株孢晶混合物的蛋白图谱和其对小菜蛾(Plutella xylostella)。致倦库蚊(culex pipens)二十八星瓢虫(Epjlachna vigintioctopunctata)三种昆虫幼虫的致死率研究,我们建立了一套快速高效的苏芸金杆菌内毒素高毒力菌株筛选程序。该程序是将蛋白电泳方法引入苏芸金杆菌菌株筛选,经过一个简单的苏芸金杆菌孢品混合物的蛋白电泳后,可以迅速辩别出对所有试虫毒力均很低的菌株,这一类菌株在苏芸金杆菌分离物中的比例可高达80％以上。除此之外,根据电泳的结果还可以预测该菌株大概的宿主范围和发现新的杀虫晶体蛋白类型。运用该方法,可以大大提高苏芸金杆菌菌株筛选的效率并降低筛选所需的费用。     

苏芸金杆菌两个菌株(青虫菌和HD—1)主要培养性状的研究

苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)工业生产中常用的两株菌种青虫菌(B.t.var.galleriae)和HD—1(B.t.var.kurstaki)的培养性状显著不同.摇瓶培养条件下,后者从菌体细胞开始分化到芽孢及伴孢晶体成熟需要的时间比前者长37小时左右.     

苏芸金杆菌以色列变种产毒条件的研究

产毒条件对苏芸金杆菌以色列变种(Bacillus thurtngiensis var israelensis)产毒能力的影响试验表明:提高该菌产毒能力的各种适宜条件是,氮源以花生蛋白的促进作用最高,蛋白胨次之,尿素有显著的抑制作用;碳源以葡萄糖、麦芽糖,甘油及淀粉有促进作用;所试的6种生长素均能不同程度的提高产毒能力;Mg⁺⁺、Ca⁺⁺有明显的促进作用,Mn⁺⁺则有显著的抑制作用。最适pH为7.0—7.5,最适温度为28—32     

蚊幼虫感染苏云金杆菌以色列变种后病理的研究

本文用电子显微镜、蛋白质凝胶电泳和蛋白水解酶测定的方法,比较研究了三种蚊幼虫在感染苏云金杆菌以色列变种后中肠组织的病变,经苏云金杆菌以色列变种处理10分钟后,中肠细胞的细胞器即呈现病变,最明显的是线粒体呈现极度的电子致密状态,细胞质的粗糙内质网也开始瓦解,处理16小时后,细胞核膨胀,各种细胞器进一步瓦解,而围食膜仍然完好。此时细胞的盐溶性蛋白含量减少,图谱上明显缺少一条蛋白区带。另方面,感染10分钟后,中肠的蛋白水解酶活性便下降,不同蚊种的酶活性相差比较大,幼虫中肠的蛋白水解酶主要为胰蛋白酶。 根据结果分析,我们初步认为,苏云金杆菌以色列变种,对蚊幼虫的毒效是苏云金杆菌以色列变种的毒素对中肠细胞能量代谢和中肠蛋白酶活性产生抑制的结果。     

苏芸金杆菌的抗药性研究

微生物杀虫剂中苏芸金杆菌(简称BT)对某些害虫具有高毒性,它对人类及大多数有益昆虫和其它非目标生物低毒或无毒。通过新菌株的开发和遗传工程技术的促进,以及由于人们环境意识的增强和许多化学农药因连续使用而使害虫产生了抗药性,从而扩大了BT的应用范围,     

诱变剂对苏芸金杆菌的影响

本文研究了五种诱变剂对苏芸金杆菌HD-1菌种的诱变效应,并获得了一些诱变菌。这些诱变菌所产生的伴孢晶体无论在大小,数量或形状比例方面都发生了一些变化。通过对家蚕(Bombyx mori)、菜青虫(Pierts rapae)、稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)的毒力试验,有的诱变菌提高了对某些昆虫的毒力。在五种诱变剂中以亚硝基胍(MNNG)和硫酸二乙酯(DES)的诱变效应最明显,获得的抗噬菌体菌株和产色素菌株都对某些害虫具有较高的杀虫活性     

苏云金杆菌以色列变种的晶体及其对蚊幼虫中肠蛋白酶活性的影响

用国产泛影葡胺介质对苏云金杆菌以色列变种的晶体和芽孢混合物进行密度梯度离心分离,可分别获得纯度98%的晶体和芽孢。经过对致乏库蚊3龄幼虫的毒性测定,结果表明毒杀蚊幼虫主要是晶体,芽孢也有些作用。电镜观察结果表明晶体有球形、卵形、五角形、菱形、长方形、长圆形等多种形态。致乏库蚁和骚扰阿蚊(第2天)取食苏云金杆菌以色列变种菌粉后经过不同时间测定,中肠的胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的活性降低。     

对回春生生产菌种DM8504菌株的研究总结报告

本文对回春生生产菌种双歧杆菌ＤＭ８５０４株的研究作了总结报道。ＤＭ８５０４林是青春型双歧杆菌的一个变种,该菌株具有明显的生态效应,对调整肠道菌群失调有明显的效果。该菌淋经过试管内、动物体内及人体内试验证明是一个理想的微生态调节剂生产菌株。通过实验和临床观察证明,该菌株对降低血内毒素,治疗肝炎等多种疾病均有明显的辅助治疗作用。该菌株是从健康人的大便标本经分离培养并加以驯化等复杂过程而获得的生产菌株。     

苏芸金杆菌抗药性的研究

本文报道了苏芸金杆菌包括30个亚种标准菌株在内的34个菌株对6种抗菌素的抗性研究结果。结果表明所有被试菌株对氨苄青霉素50—200单位/ml表现出较强的抗性,其中有17个菌株对链霉素12.5ug/ml、18个菌株对四环素25单位/ml显示出弱抗性。全部供试菌株对链霉素25—50ug/ml、四环素50单位/ml、红霉素12.5—50ug/ml、氯霉素12.5—100单位及卡那霉素12.5单位/ml均未显示出任何抗性。显微镜检查了部分菌株在含四环素25单位/ml,链霉素12.5ug/ml培养基上形成的抗性菌落的菌体发育情况,在所检查的11株链霉素抗性菌落中,有6个菌株的抗性菌落可形成正常的芽孢和晶体,在10株四环素抗性菌落中,有8个菌株可形成正常的芽孢和晶体。试验还测定了其中5株苏芸金杆菌对四环素25单位/ml的抗性频率为7.7—13.2％。     

苏芸金杆菌感染粘虫后中肠组织学病变的研究

本文描述了Bacillus thuringiensis HD-1纯晶体感染粘虫Mythimna separata 5龄初幼虫后,其中肠肠壁细胞的超微结构变化.电镜观察表明:首先线粒体,发生病变,随后,细胞顶部肿胀、胞质电子密度下降,顶部胞质之下的各种细胞器均受损伤.随着病变加重,柱状细胞基膜内褶及杯状细胞质突起,这两个富含线粒体的区域发生病变最为明显.最终,肠壁细胞解体从基膜脱落.     

裂解气液色谱法对苏芸金杆菌晶体蛋白的表征分析

本研究用有PYR-2A管式炉裂解器和CR2A计算机的GC-9A气相色谱仪,对3种标准蛋白和8个变种的11株苏芸金杆菌的晶体蛋白进行了表征,通过指纹图的分析,表明苏芸金杆菌不同亚种的晶体蛋白,既有峰群的特异性,亦有峰高比值的特异性,揭示了伴孢晶体在分子组成和构象上的多样性。同时,证明了PGLC分析鉴别伴孢晶体的可行性。     

苏芸金杆菌广谱杀虫Tm13－14菌株晶体毒素及毒力特性

以新筛选的对鞘翅目、鳞翅目、双翅目均具毒性的Ｂ．ｔ．Ｔｍ１３－１４菌株为材料,用ＨＤ－１、３３７０－１为参考菌株,比较了伴孢晶体蛋白的多肽组成,以及经三种昆虫肠道酶降解产生的抗酶多肽组分。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：Ｔｍ１３－１４晶体蛋白含１３８ｋＤ、１３２ｋＤ主要成分和６５ｋＤ次要成分。其晶体分别由三种昆虫肠道酶消化产生绚毒性多肽,经生物测定,杀家蚕的毒性成分为６８．５ｋＤ、５９ｋＤ多肽;杀斜纹夜蛾毒性成分为７１ｋＤ,６７ｋＤ和５９．６ｋＤ多肽杀马铃薯瓢虫毒性成分为６９ｋＤ、６５ｋＤ多肽。它与ＨＤ－１、３３７０－１晶体均有明显差异。     

对金龟甲幼虫高毒的苏芸金杆菌日本变种

从日本土壤中分离到一株形成芽孢的细菌,属于苏芸金杆菌日本变种(鞭毛抗原H_(23))。该菌伴孢内容物呈球形到卵形,对鞘翅目金龟甲铜黄异丽金龟、大绿金龟甲、大豆金龟、日本金龟的幼虫显示高毒,而对鳞翅目、双翅目、直翅目的幼虫和鞘翅目叶甲成虫无毒。目前,生态学研究证明,苏芸金杆菌(Bt)广泛存在于世界各地的土壤中,并具有不同的杀虫特性。这些报道认为,土     

中国Btken-Ag的特性及其杀虫毒肽的研究

苏芸金芽孢杆菌肯尼亚亚种Ag株(Bacillus thuringiensis serovar.kenyae strainAg,以下简称为Btken-Ag)是血清型H4a-4c中对棉铃虫、粘虫等多种夜蛾科害虫具有高毒力的优良品系,经生理生化、H抗原、酯酶谱、抗生谱和质粒谱等性状比较分析,与标准株肯尼亚亚种023大体相同,但其质粒谱及伴孢晶体多肽组分与023明显有别.该菌株伴孢晶体多形,其主要杀虫成分为61000多肽,经ELISA同源分析,此毒肽与同血清型中的023、7501晶体蛋白高度同源,与商品生产株H3a-3b—HD-1株部分同源,与对蚊虫高效的H14-1897及球形芽孢杆菌Ts-1无同源性.此外,对H4中10株相关株、H7-5、HD-1及1897共13株进行了对棉铃虫、粘虫及蚊虫的杀虫毒力比较测定,其中Btken-Ag的优选株H4-1及b1-4对棉铃虫的毒力高于023株及HD-1株.     

苏芸金杆菌广谱杀虫Tml3—14菌株晶体毒素及毒力特性

以新筛选的对鞘翅目,鳞翊目、双翅目均具毒性的B.t.Tml3-14菌株为材料,用HD-1、3370-1为参考菌株,比较了伴孢晶体蛋白的多肽组成,以及经三种昆虫肠道酶降解产生的抗酶多肽组分。SDS-PAGE分析表明：Tml3-14晶体蛋白含1 38kD、l 32kD主要成分和65kD次要我分。其晶体分别由三种昆虫肠道酶消化产生的毒性多肽,经生物测定,杀家蚕的毒性成分为68.5kD、59kD多肽;杀斜纹夜蛾毒性成分为71kD,67kD和59.6kD多肽;杀马铃薯瓢虫毒性成分为69kD、65kD多肽。它与HD01、3370-1晶体均有明显差异。