鼠兔核质杂交胚胎早期发育的研究

细胞核移植技术已被证明是研究发育中核质相互关系的非常重要的手段之一,电融合技术也是近十年发展起来的新型细胞融合技术。本实验运用这两项技术,进行了鼠、兔目间核质杂交实验,小鼠8-细胞核在激活的兔去核卵母细胞中,发生了染色体超前凝聚及核膨胀,融合卵移植到小鼠输卵管4.5天后,冲洗出,有5.4%的重构卵发育到囊胚期,通过染色体检查,囊胚细胞中均为小鼠染色体,其中一个囊胚为正常小鼠核型(2 n=40,XX)。通过本实验,我们认为:鼠兔远缘核质杂交胚胎的早期发育是可能的。     

兔核移植胚胎起始发育的超微结构研究

对兔核移植胚胎起始发育的超微结构变化进行电镜观察,并与供体桑椹胚细胞,受体卵母细胞及同期正常受精胚胎的超微结构进行比较,“原核”期兔核移植胚胎的超微结构明显不同于供体桑椹胚细胞及受体卵母细胞的超微结构,而与同期正常受精胚胎相似,但有些核移植胚胎中皮质反应,及核仁和线粒体中出电子致密的网眼结构,与正常受精卵存在差别,分裂至２－细胞期时,与正常２－细胞胚超微结构更相似,结果提示,兔胚胎细胞核移植后,供     

蟾蜍种间核移植胚胎发育早期LDH同工酶的表现

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对中华大蟾蜍(Bufo bufo比gargarizans)与花背蟾蜍(Bufo raddei)种间核移植胚胎发育早期六个不同阶段中全胚胎的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了分析。酶谱比较的结果表明:在正、反种间移核胚胎中,供体核LDH基因的活动开始表现于尾芽胚期;此前,杂种胚胎中LDH同工酶谱类型与受体一致。     

核质杂交试验中用温度控制供体胚胎发育的尝试

以泥鳅为材料,成功地尝试了用温度调节供受精卵的发育速度,以求达到其在核质杂交中与受体在时间上的良好配合,泥鳅的受精卵在１３－３０℃之间的不同温度不发育至囊胚期,所需的时间差异达９小时,但囊胚细胞的成活率均在９０％以上。采用极化注射法将各温度组的囊胚细胞与泥鳅成熟的未受精卵进行核质杂交试验。均得到了成活的核质杂交鱼。从而提示：该方法是一种解决供体与受体时间配合的有效途径。     

人工饲养条件下高原鼠兔生长和发育的初步研究

本文研究了人工饲养条件下高原鼠兔的生长发育情况,并和其他种鼠兔的生长作了比较。室内高原鼠兔比野外的生长快,人工饲养的阿富汗鼠兔和北美鼠兔生长期短,成熟早。     

鼠猪异种细胞核移植

核质关系是细胞生物学和发育生物学研究的核心问题之一。细胞核移植技术是研究发育中核质关系的重要手段。尽管最近哺乳动物的细胞核移植取得了重大突破 (Ｗｉｌｍｕｔ等 ,1997;Ｗａｋａｙａｍａ等 ,1998) ,但这些成功实验是在种内进行的 ,而异种间核移植的研究报道较少 (ＭｃＧｒａｔｈ等 ,1986 ;Ｗｏｌｆｅ等 ,1992 ;梅祺等 ,1993)。最近 ,陈大元等( 1999)报道将大熊猫的子宫上皮细胞、骨骼肌细胞和乳腺上皮细胞的细胞核移入去核的兔卵母细胞后 ,分别有9 9%、6 8%和 11 7%的重构卵发育到囊胚。Ｄｏｍｉｎｋｏ等( 1999)把绵羊、猪、猴或大…     

美味猕猴桃和软枣猕猴桃种间杂交花粉管行为和早期胚胎发生的观察

美味猕猴桃（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｄｅｌｉｃｉｏｓａ Ｎｏ．２６）和软枣猕猴桃（Ａ． ａｒｇｕｔａ）杂交,观察了花粉管在花柱内的行为和早期胚胎发生,结果如下： 花粉粒在柱头的乳突细胞表面萌发,在开放型的Ｖ 形花柱道内生长,生长速度比对照的缓慢, 到达胚珠珠孔处的时间延迟５０ 到６０ ｈ。当花粉管生长到花柱基部时出现波纹状弯曲;顶端膨大或尖细;部分花粉管的直径发生变化;少数花粉管生长极不规则。花粉管中胼胝质沿管壁不规则沉积, 有的不形成胼胝质塞,或整个管壁被胼胝质所覆盖。约有２６．７４％ 的胚珠受精, 并发育成种子,其中正常种子占６８．５０％ ;败育种子占３１．５０％ ,其中约有１１．４１％ 为空瘪种子;未受精胚珠占６１．４５％ 。正常种子及其胚均较对照的小。胚发育为茄型,胚乳为细胞型,合子保持休眠十几天后开始分裂形成胚,传粉后５０ｄ 见到子叶胚     

草原兔尾鼠的生长发育

在人工饲养条件下，对初生至１００日龄的草原兔尾鼠进行逐日观察，并测量其个体的体重、体长、尾长、、后足长、记录其生长发育特征。幼鼠睁眼期为１０－１２日龄；自由采食期为１５－１８日龄；断奶期为１９－２０日龄；性成熟期为４５－６０日龄。生长发育大致分为四个阶段；乳鼠阶段，初生至１５日龄，体长７０毫米以下；幼鼠阶段，１６－３０日龄，体长７０－８４毫米；亚成体阶段，３０－６０龄，体长８５－９２毫米；成体阶段     

家兔早期胚胎细胞发育能力的研究

The developmental potential of rabbit embryonic cells was studied through making chimera by separate introduction of inner cell mass from 96-h-old p. c., 120-h-old p. c., and 144-h-old p. c. of grey rabbits into 96-h-old p. c. blastocysts of New Zealand white rabbits. A total of five overt chimeras were obtained including two fertile males, two fertile females and one sterile male, from the ICM cells of 96-h-old and 120-h-old embryos but none was obtained from 144-h-old cells. Histological examination of the gonad showed that the sterile chimera derived from 120-h-old ICM cells with an ovotestis on both sides. Follicles and seminiferous tubules developed in the cortex and medulla of the gonad, respectively. Neither of them developed into functional germ cells. Analysis of karyotypes of peripheral blood showed that both XX and XY coexisted in lymphocytes. These results indicated that the sterile male chimera was a XX/XY sex chimera derived from ICM cells of donor and recipients with different sex, so as to the chimera with XX and XY genotypic cells. From the results mentioned above we may conclude that the ICM cells at 120-h-old p. c. are still pluripotential, they can not only participate in development into somatic components but also develop into germ cells. The potential of 144-h-old p. c. ICM cells seems to be rather restricted.     

蛋白质组技术在鼠胚胎早期发育研究中的应用

人类基因组大规模测序,揭示基因组精细结构的同时,还显示出基因数量的有限性和结构的相对稳定。随分析仪器和生物技术的飞速发展,创立了与基因组相对应的蛋白质组学,将精力集中于从生命功能的执行体---蛋白质水平研究基因的表达及功能。生殖技术的研究已取得了惊人的进展,但人们对生殖尤其是人类生殖的分子机制了解仍很贫乏。鼠胚胎发育过程蛋白质组的研究,为了解人类生殖健康和疾病发生的机制提供了有意义的资料 。     

高原鼠兔与达乌尔鼠兔食物资源维生态位的研究

作者于１９９３年在青海省刚察县年诺索玛地区发现高原鼠兔（Ｏｃｈｏｔｏｎａ ｃｕｒｚｏｎｉａｅ）和达乌尔鼠兔（０．ｄａｕｒｉｃａ）在布哈河谷二阶同域且重叠分布之现象,并从这两种鼠兔的食物资源利用出发,研究了其生态位关系问题。在食物资源维上的生态位宽度（ＰＳ）,高原鼠兔为０．４７４４,达乌尔鼠兔为０．４９６４,即它们具有相近似的生态位宽度。这两种动物的生态位在食物资源谱维上的重叠值（ＦＴ）为０．８０９     

兔输卵管上皮细胞解除大鼠早期胚胎发育阻滞的研究

本研究利用兔输卵管上皮细胞,与异种动物大鼠的受精卵共培养,结果大量出现突破２细胞发育阻滞的现象。体外受精卵和体内受精卵的２细胞发育阻滞突破率分６２％和７３％;利用ＲＯＥＣ条件培养液培养大鼠的体外受精卵,２细胞发育阻滞的突破率达６８％,且能顺利发育至桑椹胚和囊胚。将ＲＯＥＣ直接培养在含＾３５Ｓ－甲硫氨酸的ＣＺＢ培养液中,经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影,发现在该条件培液中出现了分子量分别为１     

从早期胚胎多能干细胞生成的嵌合鼠

本文利用囊胚注射法将小鼠胚胎多能干细胞－ＣＣＥ细胞注射到发育３天半的昆明和Ｃ３７ＢＬ／６Ｊ小鼠受体囊胚腔内,经假孕鼠借腹怀胎,获３只ＣＣＥ细胞毛色嵌合鼠。实验共注射胚胎６５４个,经培养其恢复成活率７３．８％,胚胎移植后,假母受孕率及产仔率分别为３２．９％和５３％。在所获３只嵌合鼠中,２只为ＣＣＥ－昆明毛色嵌合鼠,１只为ＣＣＥ－Ｃ３７ＢＬ／６Ｊ毛色嵌合鼠,这是国内首次利用胚胎多能干细胞获得嵌合鼠。为     

小鼠电融合四倍体胚胎早期发育的研究

多倍体发育现象在低等动物,尤其是在无脊椎动物中比较普遍,在哺乳动物中多倍体往往发育到胚胎早期就死亡,因而在自然界中不能存活。探讨哺乳类四倍体不能存活的原因是当今生物学研究的热点问题之一。目前,电融合技术是大量获得四倍体胚胎的主要手段。本以8－12周龄昆明小白鼠为实验对象,取其2－细胞胚胎于Whitten氏液中进行电融合,再移入CZB液中培养。电刺激的条件分别为：1．0kv/cm,40μs,和0．8kv/cm,80μs。对融合胚发育的状态、细胞数目及染色体组成等进行观察的结果表明,融合胚培养24小时后发育到4－细胞期,并发生致密化（Tab.1)。融合胚的囊胚形成时间与体内发育的同期胚胎及体外培养的同期二倍体胚胎基本一致（Tab,2;Fig.1)。融合囊胚的细胞数平均为13．0±4．95,显（P＜0．01）少于体外发育囊胚（37．0±5．92）和体内发育囊胚（41．6±2．4）的细胞数（Tab.3)。融合胚各个分裂相的染色体数目分布情况见Fig.2,其四倍体（4n＝80）率为42．86％,非整倍体率达57．14％。而对照组的体内发育囊胚的非整倍体率仅为11．54％;（Tab.4),与Kaufman的结果（12．4％）很接近,说明本实验中的染色体制备技术和分析方法是可行的。融合囊胚的细胞数目减少和高发的非整倍体率可能是四倍体胚胎发育能力差的原因。     

高原鼠兔松果腺褪黑激素含量昼夜节律的研究

自然光照条件下,高原鼠兔（Ｏｃｈｏｔｏｎａｃｕｒｚｏｎｉａｅ）松果腺褪黑激素（Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ,ＭＬＴ）含量呈现明显的昼夜节律（Ｐ＜０．００１,夜间组含量均值与白天组含量均值差异显著性比较）。在２月份的实验中,对１８只鼠兔（体重１２２—１６４克）松果腺的采样时间分别为０２．００,０９．００,１２．００,１８．００,２２．００和２４．００时。白天ＭＬＴ含量波动为５６—６４微微克／松果腺,夜间波动为１１３—１７０微微克／松果腺。夜间ＭＬＴ含量高峰值出现在２４．００时。在１０月份的实验中,对６０只鼠兔（体重１０２—１５３克）松果腺的采样时间分别为０３．００,０６．００,０９．００,１２．００,１５．００,１８．００,２１．００和２４．００时。白天ＭＬＴ含量波动为７７—１１９微微克／松果腺,夜间波动为１３９—５０５微微克／松果腺。夜间ＭＬＴ含量高峰值出现在０３．００时。将２月份和１０月份高原鼠兔松果腺ＭＬＴ含量进行差异显著性比较,１０月组显著高于２月组（Ｐ＜０．０５）。结果表明,该动物的松果腺本身对光周期具有敏感性,它能够感知环境光周期的变化,成功地完成神经内分泌的转换。     

高原鼠兔种群敏殖生态的研究

1985-1988年,在青海湖黑马河地区以耳标法对高原鼠兔的繁殖生态进行了研究。在繁殖群体中主要是来自上年出生的第1、2胎的鼠兔（82.85%）,第3胎和老体占少数。成年雌鼠兔100%参加繁殖,通常年产3胎,有的年份可产4胎或5胎。产仔数1-8只（平均为4.52±0.12）,1只雌鼠兔终生可产2-29只。妊娠期为22.2±0.13天。洞内哺乳期为11.65±0.01天。有的年份当年出生的少数雌鼠兔到36.8±3.05日龄可达到性成熟并参加繁殖,生1-2胎,雄鼠兔性成熟较晚。     

兔2—细胞胚胎电融合及其融合胚体外发育的研究

本文对兔２－细胞胚胎卵裂球电融合制作四倍体胚胎的适宜条件进行了研究。电场强度为２．０千伏／厘米,脉冲时程为４０微秒时,可获得最好的融合率（６８．９－１００％,平均为７７．３％）及融合胚发育率（７４．５％）,该发育率与受精卵体外囊胚发育率（７９．３％）相似。对于电融合及融合胚发育,非电解质溶液（０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋０．１ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钙＋０．１ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸镁）优于电解质溶液。融合后,７２．     

高原鼠兔红细胞免疫功能的研究

本文应用免疫花环试验法测定了封闭群中高原鼠兔红细胞Ｃ３ｂ受体和红细胞免疫复合物的花环率,并比较了不同年龄高原鼠兔红细胞的免疫功能。研究结果表明,高原鼠兔红细胞在自身免疫系统中具有重要的免疫功能;随年龄增长,其红细胞免疫功能逐渐减弱。与人、兔和大白鼠等动物相比,高原鼠兔红细胞免疫粘附活性高,因此适宜作红细胞免疫实验的动物模型。