时间分辨荧光光谱测量结果的一种数据处理改进方法

在综合矩方法和拉普拉斯变换方法原理的基础上,本文报道一种时间相关单光子计数测出的荧光衰变动力学曲线的数据处理的改进方法.此方法使我们能在花费时间较少的条件下得出和用最小二乘法拟合相比拟的准确分析结果.这一方法的优点已被用于分析香豆素102+DCM和香豆素102+PBBO激光染料乙醇溶液的双指数荧光衰变过程的结果所证实,此外,本文也讨论了仪器时间漂移校正及拉普拉斯变换的数据截取问题.     

血卟啉及其衍生物在水溶液和细胞内的时间分辨荧光的研究

本文报道了血叶啉衍生物(Hpd)及其由高压液相色谱法分离制备的4种主要成分以及血叶啉,血叶啉二盐酸盐和原叶啉(Ⅸ)二钠盐等8种叶啉衍生物分别在水溶液和CHO细胞内的荧光衰变动力学的研究,实验表明,除Hpd分离组分d的荧光寿命略短外,其余7种在水落液里的荧光寺命均在15ns左右,并发现它们的荧光态在细胞内衰变加快,然而,分离组分d在细胞内的荧光寿命却明显加长.根据实验结果,本文对叶啉衍生物的最低激发单线态在细胞内的驰豫过程提出了一种可能的模式,它反映了叶啉衍生物在细胞内与某种细胞组分的结合以及它们之间的能量传递.分析表明,荧光寿命的缩短意味着光敏效率的降低.     

小麦叶綠体的熒光强度变化和光合磷酸化的关系

用小麦叶绿体作为材料,测定叶绿素荧光685的时间进程中荧光强度变化,结果证明荧光强度变化与各种不同的光合磷酸化系统的辅助因素有关。光合作用放氧抑制剂对荧光衰变有抑制作用。磷酸化解偶联剂对第二波有抑制作用。在非循环的磷酸化系统中加入循环磷酸化的辅助因素后,所表现的荧光强度变化亦可转变。试验结果说明荧光衰变与放氧反应有联系。而第二波与循环或假循环磷酸化的偶联时能量转移有关系。     

拉普拉斯变换在药物动力学中的应用

举例说明了拉普拉斯变换在药物动力学中的应用,提示了拉普拉斯变换求解微分方程初值问题的优越性。     

阿达玛变换显微图象法测定乳腺癌DNA含量

以吖啶橙为细胞DNA荧光探针,用阿达玛(Hadamard)变换显微图象分析仪和显微荧光光度计分别测定了4例乳腺肿瘤的细胞DNA含量(倍性),并对分析结果进行了比较,二者的分析结果均与病理学诊断结论相吻合.阿达玛变换显微图象分析仪作为一种新的细胞定量分析仪器,其分析结果的准确度可与显微荧光光度计相媲美,而且阿达玛变换显微图象分析仪还具有其独特的优点,如信噪比高、具有同时分析多个细胞和同步扣除背景信号的能力等.     

利用正交法确定测定意大利蜜蜂幼虫细胞色素P4500-脱乙基活性最佳反应条件

荧光分光光度法检测意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinal细胞色素P450 O-脱乙基活性方便快捷、较灵敏,以7-乙氧基香豆素为底物.通过测定其产物7-羟基香豆素的荧光变化来确定细胞色素P450 O-脱乙基的活性.在利用荧光分光光度法检测意大利蜜蜂幼虫细胞色素P450 O-脱乙基活性过程...     

硫辛酸-香豆素偶联物合成及抗肿瘤活性研究

硫辛酸为一内源性二硫化物,通过线粒体途径抑制多种肿瘤细胞的增殖,而对正常细胞影响甚微;香豆素为一具有荧光的天然产物,广泛应用于生物成像。本实验设计合成了一个新颖的硫辛酸-香豆素偶联物,该偶联物具有多功能。香豆素作为荧光报告器,硫辛酸作为活性药物。当该偶联物进入肿瘤细胞,由于肿瘤细胞中的水解酶把偶联物中的酯键水解,释放出硫辛酸和荧光分子香豆素而发出荧光。采用噻唑兰(MTT)法评价其对肿瘤细胞的增殖抑制活性,活性氧检测试剂盒(DCFH-DA)检测其对活性氧的清除作用,流式细胞术检测其诱导的细胞凋亡及荧光显微检测细胞内成像。实验结果发现该偶联物的细胞毒性相比于母体化合物硫辛酸提高了一个数量级,进一步研究发现该偶联物可清除肿瘤细胞增殖与生长所需的活性氧,同时该偶联物诱导的凋亡显著高于其他组药物。荧光显微镜监测该偶联物在给药6 h后发出的荧光最强,说明该偶联物具有示踪药物水解释放的功能。     

线性时频分析在ECG信号分析中的应用

目的:心电信号(Electrocardio-signal,ECG)是人体中最重要的生物信号之一,是一种具有非平稳性和非线性特性的信号.分析ECG信号是诊断心脏疾病的有利工具,近年来国内外很多学者致力于这方面的研究.本文探讨短时Fourier变换(STFT)和离散小波变换(DWT)这两种时频分析方法在ECG信号分析中的应用.方法:本文采用麻省理工学院的MIT-BIH数据库中提供的数据,运用MATLAB软件编程,讨论短时Fourier变换和离散小波变换在ECG信号分析中的应用.结果:通过编程,做出了正常ECG信号和失常ECG信号的短时Fourier变换的时域图和频谱图以及正常ECG信号和失常ECG信号的单级离散小波变换的结果.结论:正常ECG信号和失常ECG信号的STFT变换的时域图和频谱图都能反应出信号的频率和时间的变化关系.但是,正常信号和失常信号的频率和时间有明显不同,正常信号的能量随时间和频率的变化关系有序整齐,而且周围有较少的杂波;失常信号的能量随时间和频率的变化关系杂乱,而且周围存在较多的杂波.通过离散小波变化后,正常信号和失常信号均产生了不同的离散小波系数,根据不同的离散小波系数,可以很容易判断正常信号和失常信号的区别.     

小波变换及滚球算法在单分子荧光能量共振转移图像分析中的应用（英文）

单分子荧光共振能量转移技术是通过检测单个分子内的荧光供体及受体间荧光能量转移的效率来研究分子构象的变化.要得到这些生物大分子的信息就需要对大量的单分子信号进行统计分析,人工分析这些信息,既费时费力又不具备客观性和可重复性,因此本文将小波变换及滚球算法应用到单分子荧光能量共振转移图像中对单分子信号进行统计分析.在保证准确检测到单分子信号的前提下,文章对滚球算法和小波变换算法处理图像后的线性进行了分析,结果表明,滚球算法和小波变换算法不但能够很好地去除单分子FRET图像的背景噪声,同时还能很好地保持单分子荧光信号的线性.最后本文还利用滚球算法处理单分子FRET图像及统计15 bp DNA的FRET效率的直方图,通过计算得到了15 bp DNA的FRET效率值.     

海马神经元ROS和Ca2+对极低频电磁场实时响应的方法研究

现有极低频电磁场(extremely low frequency-electromagnetic fields,ELF-EMFs)生物效应的研究方法是非实时组间对照,这种方法无法排除细胞对电磁场反应个体敏感性的差异,以及实验过程中条件变化的差异.本文提出一种对同一个细胞在同一条件下的前后对照实时观察ELF-EMFs反应的方法.采用稳定域鉴别ELF-EMFs暴露前海马神经元的稳定性,在电磁场加入时刻(t=60 s)分别用0、0.09、0.38、0.76、7.33、14.78 mT的ELF-EMFs作用于海马神经元,实时记录海马神经元活性氧(reactive oxygen species,ROS)和Ca²⁺荧光响应曲线,建立ELF-EMFs与ROS和Ca²⁺的自相关函数.结果表明:a.在ROS暴发时间和Ca²⁺暴发时间,ROS和Ca²⁺荧光响应具有阶跃性,这是判断实时响应的重要标志;b. ROS和Ca²⁺对ELF-EMFs响应时间具有延时性,并且不一致;c. ROS和Ca^...     

植物细胞Ca2+荧光蛋白指示剂研究进展

Ca2+作为第二信使参与了植物生长和发育过程的调控,不同生物和非生物胁迫信号均可诱导胞内Ca2+变化.对Ca2+在信号转导作用中的认识主要来自于细胞内Ca2+浓度测定.水母发光蛋白和基于荧光蛋白的Ca2+荧光指示剂作为检测细胞Ca2+信号的手段是近年发展起来的新方法.本文综述了水母发光蛋白和基于荧光蛋白的Ca2+荧光指示剂的发展、测量原理、优点与不足及其在细胞Ca2+信号转导中的应用研究进展.     

小波分析在生态环境研究中的应用初探

小波分析(Wavelet Analysis)是时间-频率分析领域近年来迅速发展的一种新技术,具有多时间尺度,多层次和多分辨的特性,已被广泛地应用在信号分析、信息分析和地球科学研究上.本文以大亚湾大鹏澳水域2002年春秋两季浮游植物30d连续观测资料为例,首次运用小波技术分析浮游植物对生境变化的响应特征.结果表明,通过小波变换的浮游植物数量(细胞密度)的时间序列,存在各自的优势周期和多时间尺度结构特征,而春秋两季浮游植物细胞密度的优势周期和多时间尺度结构,在大尺度上大致相同,但在小尺度结构上稍有差别;使用不同小波变换(如Mexh小波变换和Morlet小波变换)可以取得各自不同特点的结果.本文对小波分析技术在生态环境研究的初步应用说明,小波分析技术可以对生态系统中浮游植物的动态变化进行多时间尺度,多层次和多分辨的分析,为深入研究和预测浮游植物的动态变化提供一种新的分析手段.     

补骨脂中呋喃香豆素类物质的积累规律及组织定位

应用高效液相色谱技术,分析了补骨脂(Psoralea corylifolia)不同器官、不同发育时期补骨脂素和异补骨脂素的含量变化规律。2种呋喃香豆素类物质在补骨脂的根、茎、叶、花、果实和种子中均有积累,其含量在果实中最高,根中最低,幼嫩茎叶高于成熟茎叶,成熟期果实高于幼嫩期果实。通过组织化学和荧光显微技术对呋喃香豆素类物质的定位研究,同时结合分泌腔的系数与2种呋喃香豆素的含量相关性分析,证明补骨脂中分泌腔是2种呋喃香豆素积累的主要场所。     

固相时间分辨荧光免疫螯合剂 BCPDA 的制备及其标记技术

报道了固相时间分辨荧光免疫螫合剂4,7-二氯磺基苯-1,10-菲罗啉-2,9-二羧酸(BCPDA)的制备方法,BCPDA 标记蛋白质及螫合 Eu³⁺方法,BCPDA-Eu³⁺标记物荧光光谱研究以及固相时间分辨荧光免疫分析法检测甲胎蛋白异质体(AFP-R-LCA)方法的建立.结果表明 BCPDA 能在温合条件下与蛋白质氨基结合并与 Eu³⁺螯合,BCPDA-Eu³⁺蛋白质标记物荧光特性、标记比度、生物结合活性与国外同类产品一致,所建立的检测 AFP-R-LCA 免疫分析法最小检测值0.6ng/ml,为提高我国非放射性同位素标记技术水平奠定了基础.     

时间分辨荧光免疫分析技术研究现状及进展

时间分辨荧光免疫分析是一种新型的超微量的免疫标记分析方法,集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身,且无放射性污染等.本文主要介绍了时间分辨荧光免疫分析的原理、优点,螯合剂的种类,以及各种分析技术及其应用现状和进展.     

不同采收期珊瑚菜中香豆素含量的比较

应用高效液相色谱技术,分析了当年生珊瑚菜栽培后期4个采收时期的根、叶以及采后根去皮处理对香豆素含量的影响.结果显示:(1)珊瑚菜的根中,香豆素的含量和产量在10月15日均达到最高,分别为0.077 2 mg*g-1和1.087 8 mg/株,且显著高于其他采收期,其中,补骨脂素在栽培后期含量相差不大,欧前胡素和异欧前胡素均在10月15日含量最高.(2)珊瑚菜的叶中,不同采收期均有一定量的香豆素存在,其中在9月15日采收时,香豆素的含量和产量均极显著高于其他采收期,分别达到0.206 5 mg*g-1和1.317 5 mg/株,为同期根中香豆素含量和产量的4.4倍和2.0倍.(3)珊瑚菜根经水烫去皮处理后香豆素总量急剧下降到0.008 1 mg*g-1,与同期采收未去皮处理的根相比,去皮后根内香豆素总含量、补骨脂素、欧前胡素、异欧前胡素含量分别下降了87.7%、100%、82.76%、85.25%.(4)9月15日采收的珊瑚菜单株(根+叶)香豆素总产量(根+叶)极显著高于其他采收期,达1.980 2 mg/株,其次为10月15日1.157 5 mg/株.研究表明:珊瑚菜叶应作为提取香豆素的重要原材料,采收时应一起收获;对珊瑚菜根去皮处理会导致根的药用质量大幅度下降,生产中应明确禁止; 珊瑚菜的采收期应依据其用途决定,以根直接入药应选择10月15日采收,作为提取香豆素生产原料应选择9月15日采收.     

单细胞内Ca2+时空变化的激光共聚焦显微测定

应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术, 测定了单个活细胞胞内游离Ca²⁺的动态变化与立体分布影像. 结果显示, 在37℃, Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下, C57BL/6J小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获得良好的标记效果. 相反, 若探剂浓度太高或负载时间太长, 胞内荧光强度太强, 影响在共聚焦显微镜镜下分辨细胞内结构. 因此用LSCM研究细胞内游离Ca²⁺变化时, 荧光探剂的负载应以获得最适荧光信号而不是以最大荧光强度为标准. 上述方法在其他如平滑肌细胞、卵母细胞中的测定亦获得满意的结果, 这对进一步研究各种生理和病理条件下细胞内Ca²⁺信号的动态变化、与跨膜Ca²⁺梯差的关系及对活细胞功能活动的调节提供了一种可行的、直观的研究手段.     

心音信号奇异点的小波分析方法

本文利用小波变换方法,提出以确定奇异点的位置以及幅值的变化对心音信号进行参数估计.通过PhysioBank数据库中的相关数据,运用Madab对正常心音和病理性心音信号进行小波变换分析,对奇异点做了检测.并与傅里叶变换结果作对比分析.通过对变换后的心音信号进行分析,研究结果表明:利用小波变换技术分析与处理心音信号是一种新的有效和实用的方法.可以为心音信号的分析或医学诊断提供有价值的信息.     

2种罗丹明-多环芳烃聚苯乙烯固相传感器检测Hg2+的荧光差异

合成了2种用于Hg2+检测的新型罗丹明-聚苯乙烯固相荧光传感器PS-RB-2和PS-R6G-2,并对其荧光传感特性进行了详细的研究。通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和扫描电子显微照片(SEM)对其进行表征。PS-RB-2传感器对Hg2+表现出更高的选择性、灵敏度以及更低的检测限(0. 065μmol/L)。基于晶体结构,从理论层面提出并探讨了由Hg2+螯合诱导的罗丹明螺环开环的检测机制。值得关注的是,该传感器可以回收利用,并将环境友好的传感器PS-RB-2成功用于荧光检测实际水和鱼类样品中的Hg2+。在加标回收实验中,相对误差均低于10%,表明该传感器为实际食品样品中Hg2+检测提供了一种简单、有效且具有潜力的方法。同时开发了一种可通过肉眼观察颜色变化进行快速检测Hg2+的固相萃取柱。     

珊瑚菜中香豆素的组织化学定位

利用冷冻切片技术和常规石蜡制片技术,分别通过荧光显微镜和光学显微镜对珊瑚菜的根、叶片、叶柄等部位中的香豆素进行了组织化学定位。研究表明:香豆素存在于珊瑚菜的分泌道中,在荧光显微镜下发蓝色荧光;分泌道广泛分布于植物体中,在根中,分布在次生韧皮部中;在叶片中,分布在叶脉的薄壁组织中;在叶柄中,分布在维管束周围以及厚角组织内侧的薄壁组织中。