反相高效液相色谱法测定血浆游离氨基酸

本文报告了采用高效液相色谱法反相梯度洗脱,邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生化,荧光检测分血浆游离氨基酸。实验采用线性洗脱,在50分钟内可同时测定18种氨基酸,血浆样品的预处理简单,衍生化反应的时间仅需1分30秒,血浆样品的实际进样量少于1μl。本测定方法的精确度高,各个氨基酸保留时间的变异系数平均为0.89%±0.45%(SD),峰面积的变异系数平均为2.06%±1.76%(SD),各个氨基酸的浓度在15—150μmol/L的范围中,线性关系的相关系数平均为0.985±0.0305(SD)。准确性好,各个氨基酸的回收率平均为97.6%±5.1%(SD)。实验还讨论了氨基酸分离时溶液pH值、柱温、离心速度等因素对分析结果的影响。     

外源氨基酸胁迫下植物体内游离氨基酸的测定

目的：通过检测外源氨基酸胁迫下植物体内的游离氨基酸含量,探讨氨基酸胁迫下植物生长受抑制的机制。方法：小麦胚接种在加入D-丙氨酸、D-丝氨酸和L-缬氨酸等3种外源氨基酸的培养基中,其发芽和生长会受到强烈抑制。取材胁迫植株和对照植株,提取并用HPLC方法检测游离氨基酸含量,分析主要氨基酸特征的改变。结果：作为处理的胁迫氨基酸在体内有数倍到数十倍的增高,其他氨基酸,尤其是同族及相近族氨基酸的量也出现较大改变,有增加也有减少,有些氨基酸甚至检测不出。结论：在外源氨基酸胁迫下,植物可直接吸收这些氨基酸,胁迫氨基酸在体内的积累。至少影响到了部分氨基酸的合成,使细胞内正常游离态氨基酸的数量增加或减少,这些变化引起代谢失调,进而引起生长抑制。     

冬虫夏草鲜品及干品游离氨基酸比较分析

采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法,测定并比较烘干、晒干所得的冬虫夏草干燥样品及未经处理的鲜冬虫夏草样品的游离氨基酸含量。结果表明:3类样品均含有19种游离氨基酸,其中鲜冬虫夏草的游离氨基酸总量、药效氨基酸、呈味氨基酸及必需氨基酸含量均最高,显著高于晒干和烘干冬虫夏草(P0.01),晒干和烘干冬虫夏草之间无显著差异。冬虫夏草的游离氨基酸在晒干、烘干过程中会造成损失。该研究为冬虫夏草加工工艺的提升提供了科学依据。     

鱼腥草游离氨基酸组成及含量的HPLC分析

研究不同鱼腥草材料间及其两个不同采收时期游离氨基酸组成及含量差异 ,筛选游离氨基酸种类较多 ,含量较高的新品系 ,并确定适宜的采收时期。对 1 9份鱼腥草材料阴干地上部分游离氨基酸成分进行了高效液相色谱分析。 6月和 1 0月采收的鱼腥草中分别含有 1 5种和 1 4种氨基酸 ,都不含Cysteine -ss -Cysteine和Lysine,1 0月采收的还不含有Tyrosine。氨基酸中Proline含量最高 ,Glycine含量最低。此外 ,1 0月采收的鱼腥草的游离氨基酸总量高于 6月采收的鱼腥草。供试材料中 6月采收的W0 1 - 86和 1 0月采收的W0 1 - 5多数游离氨基酸含量均为同一采收时期的最高值。分别为 5 894 .76mg/kg和 6 1 6 6 .1 3mg/kg。此外 ,蕺菜与峨眉蕺菜间游离氨基酸成分间无显著差别。因此鱼腥草不同材料间及不同采收时期游离氨基酸含量不尽相同 ,游离氨基酸含量与染色体数目间相关不显著     

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸

用不同浓度的乙醇溶液提取烟样中的游离氨基酸 ,结果显示 ,存在最佳的乙醇溶液浓度 ,使烟样中被提取的游离氨基酸总量最大 ;对比了活性炭、乙醚、5 %磺基水杨酸、阳离子交换柱的纯化效果 ,发现阳离子交换柱的纯化效果较其它三种试剂要好。在提取和纯化之后 ,采用OPA、FMOC联合在线衍生反相高效液相色谱法测定了烟样中的游离氨基酸 ,该方法使烟样中的氨基酸和亚氨基酸能被同时测定 ,并且分析方法的重现性和回收率均令人满意。最后用该方法对云南B2 F98(上部、橘黄、二等烟叶 ,98年产 )烟叶中的游离氨基酸进行了测定 ,有 15种氨基酸被测出 ,其中Pro含量最高 ,约占总量的 2 5 % ,Thr含量最低 ,约占总量的 1%。     

癫痫患者血浆中游离氨基酸水平分析

对７１例癫痫患者血浆中１８种游离氢基酸与３６例正常人血浆中游离氨基酸的水平对照。分析表明,抑制性氨基酸（γ－氨基丁酸、甘氨酸）水平明显升高的癫痫患者,其它氨基酸水平绝大多数低于正常人;兴奋性氨基酸（谷氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺）水平明显升高的癫痫患者,其它氨基酸水平低于正常人。     

支链氨基酸对运动大鼠氨基酸代谢和运动能力的影响

观察了支链氨基酸(BCAA)对大鼠运动能力和血清游离氨基酸代谢的影响。实验用21只雄性wistar大鼠,随机分为3组:正常组、游泳对照组和游泳补充BCAA组。2个运动组每天游泳训练1h,10天后游泳6h,观察补充BCAA对大鼠游泳运动能力和血清游离氨基酸水平的影响。实验结果表明,补充BCAA可明显提高大鼠游泳存活率,抑制血清中必需氨基酸、非必需氨基酸和总氨基酸水平升高,游泳运动后大鼠的血清中乳酸和LDH的升高幅度有所降低,抑制骨骼肌LDH活力的下降。说明补充BCAA可明显提高大鼠的运动能力,减少运动造成的蛋白质分解     

常用口服营养液中游离氨基酸的测定与分析

我科实验室于９５年对全国市售的８种富含氨基酸成份的口服液进行了游离氨基酸测定,结果显示：１号液总量为８８９０．９８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．６６;２号液总量为４２９５．９６μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．９９;３号液总量为１０４４５．８８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．１０;４号液总量为２５８２０．５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．８１;５号液总量为５５３．５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．７０;６号液总量为１１６８．５６μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值１．３８;７号液总量为３３９１．７１μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．４９;８号液总量为２８５１．１４μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值０．２２。正常人血清中游离氨基酸总量为２９６２．８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．２７±０．５８。     

肾小球疾病儿童体内游离氨基酸含量的研究

为了研究小儿肾小球病变时体内游离氨基酸的代谢变化,采用丹酰氯聚酰胺薄层分析法研究了原发性肾病综合症（ＩＮＳ）８例、急性肾小球肾炎（ＡＧＮ）１２例、过敏性紫癜肾炎（ＡＰＮ）７例与正常对照组２９例的血清及红细胞内游离氨基酸含量的变化。结果表明：（１）此三种肾小球疾病,血清中苯丙氨酸（Ｐｈｅ）、脯氨酸（Ｐｒｏ）、色氨酸（Ｔａｐ）、赖氨酸（Ｌｙｓ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）明显高于正常,导致酪／苯丙（Ｔｙｒ／Ｐｈｅ）、缬／甘（Ｖａｌ／Ｇｌｙ）等分子比降低,提示肾功能受损。（２）血清支链氨基酸（ＢＣＡＡ）的含量在ＩＮＳ中低于正常组（ｔ＝３．４８;Ｐ＜０．０１）,而在ＡＧＮ、ＡＰＮ中却高于正常组（ｔ分别为２．３３,２．３９,Ｐ＜０．０５）。（３）红细胞中丝氨酸（Ｓｒｅ）、苯丙氨酸（Ｐｈｅ）、色氨酸（Ｔｒｐ）、胱氨酸＋半胱氨酸（Ｃｙｓ）、天冬氨酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）的含量ＡＰＮ组高于ＩＮＳ及ＡＧＮ,提示ＡＰＮ患儿中肾功能损害没有ＩＮＳ及ＡＧＮ严重。     

某些内科系统疾病患者血浆游离氨基酸的变化及意义

为了解某些内科系统疾病的血氨基酸代谢特点。测定１７０例９种内科系统急慢性疾病患者血浆游离氨基酸浓度,并分别与５８例健康人血浆氨基酸浓度作对比分析。９种疾病的血浆胱氨基酸浓度不同程度升高,以尿毒症病人最为显著,炎症性病人血浆苯丙、蛋、赖氨酸和苯丙／酪比值显著升高,丙、组、精、脯氨酸和支／芳比值显著降低;糖尿病和甲亢病人血浆总游离氨基酸、谷、丙、酪、赖和支链氨酸显著升高;糠尿病病人支／芳比值显著升高,表明不同疾病的血氨基酸浓度有特征性变化,炎症是导致血氨基酸代谢紊乱的重要因素     

实验动物血及组织游离氨基酸含量

本文报告实验动物血及组织游离氨基酸含量,结果表明,实验狗和Wistar大鼠血游离氨基酸含量比较恒定。实验兔组织游离氨基酸含量普遍高于血。     

各型肝病患者红细胞内氨基酸检测的临床研究

本文对３０例正常人和１０８例各型肝病患者红细胞内氨基酸进行检测,结果显示,各型肝炎与正常人比较红细胞内氨基酸均表现不同程度的增高和降低。如正常人红细胞内１７种氨基酸的总量为３５５４．４７μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．０６±０．４０;急性肝炎总量３４２３．２５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．４８±０．３０;慢性肝炎（轻度）总量３３２９．３３μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．３９±０．２２;慢性肝炎（中度）总量３２１９．３２μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值１．８３±０．４０;肝硬化总量３７６２．３３μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值１．３６±０．４１。     

烧伤患者血浆和红细胞游离氨基酸变化及输注氨基酸对其变化的影响

动态测定烧伤患者血浆及红细胞内游离氨基酸的含量 ,探讨输入外源性氨基酸后对血及红细胞内游离氨基酸的影响。以日立 835— 5 0型氨基酸自动分析仪测定烧伤患者血浆及红细胞内游离氨基酸含量。结果发现烧伤患者血浆总游离氨基酸浓度从伤后到 2 1天均显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;赖、苯丙和苯丙 酪氨酸比值显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;色、组、精、丙、甘、苏、脯和丝氨酸比值显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;缬、亮、异亮、酪、胱和支链氨基酸伤后早期降低。烧伤患者红细胞内总游离氨基酸含量不同程度降低 ,其中 1、3、7天降低显著 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;红细胞内苯丙和苯丙 酪氨酸比值未见显著性升高 ;色、蛋、精、脯氨酸含量很低或基本未测出。输注复合氨基酸注射液后未能显著改善患者血及红细胞内游离氨基酸含量。结果提示烧伤患者红细胞内游离氨基酸含量的变化趋势与血浆游离氨基酸变化趋势基本一致 ;烧伤后红细胞内苯丙氨酸及苯丙 酪氨酸比值有别于血浆变化。本研究条件下补充外源性氨基酸未能显著改变烧伤患者血浆及红细胞内游离氨基酸的含量     

Plasma and Cerebrospinal Fluid Amino Acids in Epileptic Patients

Altered plasma and cerebrospinal fluid amino acid levels may be associated with human epilepsy. We studied three groups of patients, those with a generalized epileptic syndrome, juvenile myoclonic epilepsy, patients with refractory localization-related epilepsies, and patients with acute seizures (within 24 h). Plasma levels of amino acids were studied in all patient groups, as were those in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with acute seizures. After acute seizures, the amino acid changes in the CSF were limited to a reduction in the level of taurine, whereas the levels of most amino acids in plasma were decreased. On the other hand, levels of the excitatory amino acids glutamate and aspartate were increased. The most notable finding in the juvenile myoclonic epilepsy patients was an increase in glutamate level in the plasma. Our study supports the conception of an altered metabolism of glutamate in generalized epilepsies.     

Quantification of Free Fatty Acids in Human Cerebrospinal Fluid

Free fatty acids (FFA) in cerebrospinal fluid (CSF) are well-recognized markers of brain damage in animal studies. Information is limited regarding human CSF in both normal and pathological conditions. Samples of CSF from 73 patients, who had undergone lumbar puncture for medically indicated reasons, came from a core laboratory upon completion of ordered tests. Using high performance liquid chromatography, mean FFA concentrations (g/L ± SEM) were: arachidonic 26.14 ± 3.44; docosahexaenoic 60.74 ± 5.70; linoleic 105.07 ± 10.98; myristic 160.38 ± 16.17; oleic 127.91 ± 10.13; and palmitic 638.34 ± 37.27. No differences in FFA concentrations were seen with gender, race, age, and/or indication for lumbar puncture. This is the first study to document normal human CSF FFA concentrations in a large series. Further characterization of FFA in pathological conditions may provide markers for evaluating clinical treatments and assisting in prognostication of neurological disease.     

休克期切痂猪血浆氨基酸的变化

观察烧伤休克期切痂后猪血浆游离氨基酸的变化规律 ,探讨焦痂毒素对全血氨基酸浓度的影响。以日历83 5 5 0型氨基酸自动分析仪 ,测定TBSA3 5 %Ⅲ度实验用小型猪血浆游离氨基酸 ,同时分析相关指标 (血LPS、GPT和TNF)的变化 ,结果显示休克期切痂组血浆游离氨基酸 (除个别氨基酸的个别时间点有变化外 )无显著性变化 ;在伤后 6d和 1 0d苯丙氨酸显著降低 ,血LPS、GPT和TNF也较对照组低 ,提示焦痂的存在对肝脏代谢有一定的影响     

新生儿缺氧缺血脑病体液中游离氨基酸的改变

新生儿缺氧缺血脑病 ( hypoxic- ischem ic encephalapothy,HIE)是引起新生儿死亡及影响新生儿发育成长的一种常见病。使用丹酰氯反应 ,聚酰胺薄层析方法 ,分析了新生儿 HIE体液 (脑脊液及血液 )中 9种游离氨基酸水平的改变 ,以此探讨新生儿 HIE的发病机理 ,诊断依据以及治疗效果