黑果绣球胚的离体培养

通过不同发育时期黑果绣球(Viburnum lantana)胚的离体培养,找到了胚培养发芽率最高的取材时期,在北京地区是8月下旬到9月上旬。使用的基本培养基是MS培养基。使茎段分化的培养基是MS+BA0.5+2ip5.0+zt0.5(单位mg／L下同),培养40天后能得到大量的苗。切取带4片叶以上的苗,转接在大量元素减半的1／2MS+IBA0.2的生根培养基上,10天以后开始生根。15天后经锻炼的小植株可移栽到瓦制花盆或营养钵中,盆土基质为1:3(体积比)的沙与草炭土的混合土,置于全光苗床(自然光照下,自控间歇喷雾保持叶面湿度。),室温18—25℃,生长10天就可以移入冷室,按一般植物管理。成活率80%以上。     

哈蜜瓜幼胚体培养

植物名称:哈蜜瓜(Cucumis melo var Saccharinus Naudin) 材料类别:授粉后10天的幼胚——球形～心形胚期,带三分之一的种体培养。培养条件:诱导幼胚生长及产生愈伤组织的基本培养基为MS附加(单位为mg/1)①KT0.5,BA0.5,IAA1;②KT1,IAA?诱导愈伤组织再分化培养基为改良MS附加不同浓度的激素,其配方为:①改良MS(变有机物为B_5的成分及用量)附加 KT2,硫酸腺嘌呤3,赤霉素 5,②1/2 MS大量元素、微量元素、铁盐,附加BA10。诱导生根培养基为N_6大量、MS微量、铁盐(以上元素都减半),B_5的碘和钼、有机物,MS的肌醇,硝酸铵297,附     

石防风原生质体再生植株

石防风种子幼苗切段,在含有1mg/1 2,4-D 的 MS 固体培养基(大量元素减半)上,产生含有胚性细胞团的愈伤组织。经液体培养,获得含有高比例胚性细胞团的悬浮培养物。在含有1.5%纤维素酶、0.3%果胶酶、0.5%蜗牛酶、5mmol/lCaCl_2、1mmol/lKH_2PO_4、0.6mol/l 甘露酐、pH5.8的混合酶液中,在25℃条件下,经过5小时消化,获得了原生质体。在含有 1mg/12,4-D+0.5mg/l 玉米素的修改的 MS 培养基中,原生质体第4天出现了第一次分裂;约40天后,形成0.5—1mm 的细胞团。把它们转移到含有0.5mg/l 玉米素的液体 MS 培养基(大量元素减半)中,逐步发育成胚状体。在不含激素的 MS 固体培养基(大量元素减半)上,胚状体发育成完整植株。     

鸡蛋参的组织培养和移栽(简报)

通过筛选最适鸡蛋参初代培养基和生根培养基,研究影响试管苗移栽的条件,建立了鸡蛋参无菌培养体系。结果表明,鸡蛋参的初代培养基为：1/2MS + 6-BA 0.5 mg/ L + IBA 0.2 mg/ L;生根培养基为：1 /2MS + IBA 0.5 mg/L + NAA 1 mg/L + 活性碳10 mg/L;移栽混合基质为：粗纤维草碳土90%+蛭石10%,成活率为85%。     

丽格海棠胚性愈伤组织诱导与植株再生

以丽格海棠幼嫩叶柄为外植体,采用培养基④(MS培养基,4.0 mg/L 2,4-D,0.5 mg/L6-BA)为胚性愈伤组织诱导培养基,诱导率达86%;以培养基③(MS培养基,3.0 mg/L 2,4-D,0.2 mg/L 6-BA)为胚性愈伤组织增殖培养基进行扩增;胚状体分化培养基为培养基⑥(MS培养基,2.0 mg/L 6-BA,0.2 mg/L NAA,0.2 mg/L IBA),分化率达100%;对幼根发育不良的胚性植株,在培养基⑩(MS培养基,0.1 mg/L IAA)上进行生根培养,生根率100%,平均根数3~5条,带侧根,长约2~3 cm。试管苗在森林土:蛭石:河沙=1:1:1的基质中生长良好,成活率100%。培养基中均附加3%蔗糖、0.6%琼脂,pH值为5.8~6.0。     

苗龄与红光对向日葵原生质体分离和培养的影响

用1.0—1.5%(W/V)纤维素酶(Onozuka R-10)和0.3—0.5%(W/V)果胶酶[Pectinasc (Serva)]配合分离到大量有活力的向日葵下胚轴原生质体,经液体浅层培养或琼脂糖小块培养7—10天后,均能持续分裂到细胞团或体细胞胚,至14—21天形成大量肉眼可见的小愈伤组织(直径0.5—2.0mm)。比较试验表明:(1)影响向日葵下胚轴原生质体分裂生长的首要因素是起始材料无菌苗的生理状态。用红光照射无菌苗,能明显地促使下胚轴原生质体在较低密度(1×10~4/ml)培养时,也能持续分裂,再生小愈伤组织;(2)在MS培养基上添加5mmol/L谷氨酰胺或以7.5mmol/L谷氨酰胺代替原培养基中的无机氮,能促使原生质体高频率(44.4%左右)分裂,再生愈伤组织。     

防风悬浮细胞的原生质体再生植株

防风(Saposhnikovia divaricata(Turcz.)Schischk)试管苗的根尖,下胚轴或叶柄切段在含有1mg/l 2,4-D 的 MS 固体培养基上,形成含有胚性细胞团的愈伤组织。愈伤组织经液体振荡培养,形成含有大量胚性细胞团的悬浮培养物。用含有 Onozuka R-10 1.5%、Mace-rozyme R-10 0.3%、蜗牛酶0.5%、CaCl_2 5mmol/l 和甘露醇0.6 mol/l(pH=5.8)的酶液从胚性细胞团游离得到原生质体。原生质体在培养的第4天出现第一次分裂,50天左右形成的细胞团大小为1—2mm。这些细胞团在含有0.5 mg/l 2,4-D 的 MS 固体培养基上形成愈伤组织。在含有0.1 mg/l 6-BA 或0.1 mg/l 2,4-D+0.5mg/l 6-BA 的 MS 固体培养基上,原生质体再生的愈伤组织分化出胚状体。胚状体在不含任何生长调节剂的 MS 固体培养基上发育成完整的原生质体再生植株。     

提高成年云南山楂树试管培养苗生根率的方法

用成年云南山楂(Crataegus scabrifolia(Franch)Rehd.树的无菌增殖芽苗作为生根试验材料。结果表明：接种在含生长素(IBA、NAA)0.01-1.0mg/1的MS/2培养基中,芽苗的平均生根率为50.4%;在高浓度(150-250mg/1)生长素溶液中浸泡芽苗基部30分钟,然后接种到无生长素的MS/2培养基中,其生根率为60.1%;用高浓度生长素液蘸芽苗基部的生根率为83.5%;芽苗在含IBA1-5mg/1的培养基中培养2-4天,然后转入MS/2培养基中诱导生根,生根率可达92%以上,根伸长正常。黑暗条件明显抑制生根,每日16小时至24小时光照对芽苗生根有益。     

云南大叶茶体细胞胚发生及体细胞胚苗形成体系的建立

利用云南大叶茶(Camellia sinensis var.assamica Kitamura)胚性细胞系(CL_1)中悬浮培养物,建立了高频率同步化体细胞胚发生及体胚苗形成体系。以改良的MS为基本培养基,将CL_1中培养物由液体保持培养基(0.1mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA)继代转入液体诱导培养基(0.05mg/L 2,4-D 0.50mg/L6-BA),暗培养诱导28d,转入不含任何激素的液体分化培养基中再培养28d,获得了不同发育时期的体细胞胚,其发生频率为81.5％。不同发育时期的体细胞胚用不同目的细胞筛收集,在液体生长培养基(1/2 MS 1.0mg/L GA_3 0.5mg/L 6-BA)中培养发育成熟。ABA有利于高质量体细胞胚的形成。20～70月大小的体细胞胚在固体生长培养基中成苗转换率为75％。在液体悬浮培养条件下观察记录了体细胞胚发育过程,证实其过程与合子胚的形态发生过程相似。     

峨参原生质体的体细胞胚同步化发生及植株再生

用峨参茎节来源的胚性愈伤组织,在含1.5%纤维素酶Onozuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+0.5%蜗牛酶+5mmol/L CaCl_2+0.6mol/L甘露醇+0.3%葡聚糖硫酸钾,pH5.8的酶液中游离原生质体,培养在改良MS培养基中,内含激素1mg/L2,4-D+0.5mg/L玉米素,并附加0.3%琼脂糖。第10天分裂频率达40—50%。此后振荡培养1个月,细胞团移至含0.5mg/L 2,4-D及渗透压降低的MS培养基中大量繁殖,然后再移至无激素或含0.1mg/L玉米素的MS培养基中进行分化,得到大量的球形胚,并且同步化达90%,70%的球形胚在10—15天后同步发育为心形胚,以后继续发育为鱼雷胚及子叶胚,最后形成完整植株。并讨论了获得大量同步化发生的体细胞胚的原因。     

新疆天山雪莲体胚诱导与分化研究

以新疆天山雪莲的叶片为外植体,分别用不同配方培养基诱导愈伤组织,后进行体胚诱导和分化培养形成再生雪莲植株.结果表明,诱导愈伤组织的最适培养基为MS 2,4-D 0.5 mg/L BA 1.5 mg/L,诱导率可达到100%;愈伤组织转移至MS 2,4-D 0.5 mg/L BA 1.5 mg/L培养基进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到MS 2,4-D 0.2 mg/L的液体培养基后成功诱导出雪莲体胚,出胚率达40%;将体胚接至MS ABA 0.5 mg/L培养基后,结果分化生长出大量的再生雪莲幼苗.     

Micropropagation of sweet orange, Citrus sinensis Osbeck. for the development of nucellar seedlings

Protocol for micropropagation of elite plants of sweet orange (Citrus sinensis) through nucellar embryo culture has been standardized. Three to four nucellar embryos and a zygotic embryo could be excised from a single mature seed and successfully generated as healthy plants in basal MS medium. MS medium supplemented with NAA (1 mg/L) or 2, 4.D (1 mg/L) promoted callus development in both nucellar and zygotic embryos. GA3 (1 mg/L) enriched medium induced plantlets initiation but their growth was very poor. No significant differences were observed between initial growth patterns of nucellar and zygotic seedlings developing from the same ovule. Five to six shoots were obtained from collar region of both category of embryos in MS medium supplemented with BAP (1 mg/L) within 60 days of inoculation. The number of plantlets were almost doubled after their transfer in the same medium and culture for another 30 days. Higher doses of BAP resulted in initiation of callus directly from the embryos. The regenerated shoots (2-3 cm) could be rooted in MS medium supplemented with either only NAA (0.75 mg/L) or NAA (0.50 mg/L) and IBA (2.0 mg/L). A number of plantlets could be obtained from a nucellar embryo grown shoot within a limited time period.     

Somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf callus of Ocimum basilicum L

A effective protocol for complete plant regeneration via somatic embryogenesis has been developed for Ocimum basilicum L. Callus was initiated from leaf explant of young plant on supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) 1.0 mg l(-1), 3% sucrose and 0.9% agar. The calli showed differentiation of globular structure embryos when transferred to MS medium containing 2,4-D 0.5 mg l(-1) and BAP 1.0 mg l(-1). The maximum globular structure embryos were further enlarged and produced somatic embryos in MS basal medium supplemented with BAP 1.0 mg l(-1)+NAA 1.0 mg l(-1) + KN 0.5 mg l(-1). Continued formation of globular embryo and germination of embryos occurred in this medium. Complete plantlets were transferred onto specially made plastic cup containing soilrite followed by their transfer to the garden soil. Survival rate of the plantlets under ex vitro condition was 80%.     

白Pian体细胞胚悬浮培养的动力学研究

白(ＰｉｃｅａｍｅｙｅｒｉＲｅｈｄ.ｅｔＷｉｌｓ.)是我国特有的云杉属树种,在林业生产和环境绿化中均具有重要地位。其体细胞胚胎发生的研究,一方面可用于优良种质的大规模快速繁殖,为植树造林和园林绿化提供优质苗木;另一方面可作为遗传转化的再生系统,进行树种遗传...     

Somatic embryogenesis from leaf derived callus of Tylophora indica (Burm. f.) Merrill

Mature leaf explant derived callus of Tylophora indica (Burm. f.) Merrill yielded somatic embryos on MS medium supplied with BA(1-2 mg/L) or kinetin(1-5 mg/L) or kinetin/BA (1-2 mg/L) used along with IAA(0.1-1 mg/L). Maximum somatic embryos (30) could be recovered from 100 mg of embryogenic callus within 60 days at an optimum concentration of 2 mg/L of BA which was also best suited for providing the maximum conversion rate (90%) of embryoids to plantlets. Kinetin (1-5 mg/L), used as the sole growth hormone, induced the development of embryoids showing either shoot or root primordia in 30% of the cultures. However, embryoids with shoot primordia developed roots upon transfer to medium containing IAA(0.1 mg/L) and kinetin(2 mg/L). Embryoids from all cultures germinated in the initiation medium and were transplanted to sterile vermiculite for hardening. After two weeks of hardening, the plantlets were transferred to the green house where they grew and established well showing a high rate of survival (90%).     

花生体细胞胚的诱导及其植株再生

采用不同成熟度的花生胚轴为外植体进行体细胞胚诱导及植株再生研究,结果表明,成熟胚轴在高浓度2,4－D的MS培养基中,经过30d左右的培养,可直接诱导产生出大量的体细胞胚,含40mgL~－12,4－D的培养基中体细胞胚的诱导率达100％,平均每个外植体产生11．58个体细胞胚．体细胞胚的继代培养需降低2,4－D的浓度（1－20mgL~－1）．未成熟胚轴的体细胞胚诱导及继代培养的2,4－D浓度宜为10mgL~－1．将诱导的体细胞胚转接到合5－10mgL~－1BA的MS培养基中,体细胞胚能够萌发再生成无根小植株,将其转接到生根培养基中可获得完整小植株．     

人工合成冬性六倍体小麦的研究

以冬性四倍体硬粒小麦(Triticum durum,2n=28,AABB)为母本与粗山羊草(Aegilops tauschii,2n=14,DD)杂交,得到的单倍体幼胚(n=21,ABD)经组织培养拯救,获得的幼苗经染色体加倍而成为合成小麦(AABBDD)。从中鉴定、筛选出冬性的合成小麦。幼胚仅在1/2 MS培养基上培养,成苗率为75.81%;根据幼胚的发育状态,将发育较完善的幼胚直接接种在1/2 MS培养基上,将发育不良的幼胚先接种于1/2 MS+2 mg/L 2,4-D培养基上进一步养育幼胚,之后视幼胚发育状况再将其转入1/2 MS培养基中培养成苗,此方法的成苗率为92.44%,较前者的成苗率提高了16.63%。染色体加倍在冬季塑膜拱棚内用0.05%秋水仙素进行半根法处理,较容易获得健壮苗,并且分蘖多。     

水母雪莲体细胞胚胎发生及其植株再生

水母雪莲（Saussurea medusa Maxim.)茎和叶片的切段接种于MS＋2mg/L NAA 0.5mmg/L 6-BA的培养基上,20d后产生黄褐色的愈伤组织,经过几个月的继代培养,愈伤组织仍保持旺盛的增殖能力,但部分由黄褐色逐渐变为红色,将红色愈伤组织转到MS＋0．1mg/L NAA＋0．2mg/L 6-BA 5mg/L GA3的培养基上,30d后可分化出大量的体细胞胚,体细胞胚成熟后转到1／2MS＋0．2mg/L IAA 0.5%活性炭的培养基上,30d后可长出2－4cm的根,带根的小苗经锻炼后移栽到土壤中,成活率达76％,细胞组织学观察表明,发育成熟的体细胞胚具有胚根,胚轴和胚芽的完整结构,具有独立的维管系统。     

药用植物红根草种质资源的离体保存

以红根草试管苗为材料,研究了不同培养基(MS、1/2MS、1/4MS)、蔗糖浓度和植物生长抑制剂(CCC、PP333、ABA、MH)在红根草试管苗保存中的作用。结果表明:培养基1/2MS对红根草保存最好,保存270d后存活率最高。培养基中不添加蔗糖较添加一定浓度蔗糖时植株的形态和色泽差,但保存时间更长,转继代后能正常恢复生长。添加生长抑制剂能减缓生长速度,延长保存时间,最佳浓度分别为:CCC1.2～1.6mg/L;PP3331.6mg/L;ABA0.5～4.0mg/L;MH0.5mg/L。其中,ABA0.5～4.0mg/L对植株的生长最好,CCC浓度为1.2mg/L和1.6mg/L时,保存时间长,360d时,存活率达90%。