人慢性胃炎与神经内分泌G、D细胞关系的研究

探讨神经内分泌G、D细胞与慢性胃炎的关系,用免疫细胞化学方法对52例慢性胃炎及9例对照者进行胃窦粘膜内G、D细胞密度计数。结果显示慢性胃炎病人的G、D细胞数均低于对照组,特别是萎缩性胃炎G、D细胞显著减少,同时还发现不同组别、不同程度的萎缩性胃炎,其G细胞的数量均大于D细胞,G／D细胞的比值在中、重度性胃炎与其它组相比有显著性差异（P＜0.01）。资料还显示G、D细胞的计数不仅可以判断胃窦粘膜的萎缩程度,而且可作为观察临床疗效的一项重要指标。     

幽门螺杆菌感染对慢性胃炎胃窦部EC细胞和CgA细胞的影响

目的探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori Hp）感染与慢性胃炎（CG）患者胃窦粘膜内肠嗜铬细胞（Enterochromaffin,EC细胞）、嗜铬粒素A细胞（CgA细胞）变化的关系。方法采用免疫细胞化学方法,检测Hp相关性慢性胃炎胃窦部粘膜内EC细胞、CgA细胞的分布。结果1．Hp^＋组CgA^＋细胞数低,与Hp^＋组和正常组比较差异显著（P〈0．01）;2.EC细胞数随病理类型加重呈下降趋势,三组间的差异性极显著（P〈0．01）,慢性萎缩性胃炎组（CAG）CgA^＋细胞数与慢性非萎缩性胃炎（CNAG）组和正常组比较,差异极显著（P〈0．01）。结论Hp感染和慢性胃炎胃窦部EC细胞和CgA细胞之间存在密切关系。     

人和大鼠胃窦部神经内分泌细胞分布和形态学的比较研究

目的探讨人和大鼠胃窦部神经内分泌细胞的分布和形态学特征。方法采用免疫细胞化学方法,检测人和大鼠胃窦部粘膜内生长抑素细胞(D细胞)、胃泌素细胞(G细胞)、5-羟色胺细胞(5-HT细胞)、嗜铬粒素A细胞(CgA细胞)的分布。结果人和大鼠的G、D细胞的特征是都具有细胞突起,但是在细胞密度及其分布上是不同的;5-HT细胞的分布在两组稍有不同,在大鼠胃窦部,大多数5-HT细胞位于腺体基部,而人的5-HT细胞主要在间质,少数位于腺上皮内;在两组中,CgA细胞几乎布满整个胃粘膜,其数量也高于其他神经内分泌细胞,CgA细胞形态多样,胞质内充满细小颗粒。结论1)人与大鼠的G、D细胞通常都伴有突起,但其分布不同。2)5-HT细胞形态多样,分布于间质和腺上皮内。3)CgA细胞特征是胞质内充满细小颗粒,细胞形态多样,几乎布满整个粘膜。     

谷氨酸单钠对大鼠胃窦部生长抑素mRNA表达的影响

目的：探讨谷氨酸单钠（MSG）对大鼠胃窦部生长抑素mRNA表达的影响。方法：采用原位杂交技术检测胃窦部生长抑素mRNA的表达并用计算机图象分析系统进行定量分析。结果：谷氨酸单钠可使胃窦部生长抑素mRNA表达增强。以52天（青春期）最为明显,120天（成年期）次之,11天（新生期）最弱,经统计,差异具有显性（P＜0．01）。结论：谷氨酸单钠可使胃窦部D细胞生长抑素mRNA表达增强,这就能是MSG导致神经内分泌紊乱的机制之一。     

胞内钙释放在胃泌素引起胃平滑肌细胞收缩中的作用

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞,观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩,并对胃窦作用最强。在G54×10－8～16×10－8mol／L剂量范围内,呈剂量依赖性。（2）丙谷胺或抗胃泌素血清可以阻断G5对胃肌细胞的收缩反应,而阿托品则不影响G5的作用。（3）G5与乙酸胆碱对平滑肌细胞收缩有相加作用。（4）胞内钙释放阻断剂TMB-8可抑制G5对胃肌细胞的收缩作用。（5）G5作用于胃窦平滑肌细胞后胞内游离Ca2 显著上升。上述结果提示：胃泌素通过特异性受体引起胃平滑肌细胞收缩,其收缩作用通过胞内Ca2 释放介导。     

大鼠实验性脾虚证胃粘膜内分泌细胞变化的免疫组织化学研究

用正常成年雄性Wistar大鼠53只,体重100～150g,分为正常对照组、实验性脾虚组、自然恢复组和四君子汤治疗组。取胃,固定于Bouin液。制成石蜡切片,进行(1)HE染色;(2)免疫组织化学染色,按Sternberger PAP法显示胃泌素细胞(G细胞)、生长抑素细胞(D细胞)和5-HT细胞。根据细胞的免疫反应程度,将细胞分为强阳性、中等阳性和弱阳性三级,每例动物计数三种细胞各1,000个,并计算各级细胞占的百分比;(3)从正常对照组,脾虚组随机选择各5例动物,对D细胞和G细胞进行显微分光光度计的定量测定;(4)由四组动物随机选择各5例,进行G细胞和D细胞密度及G/D细胞比值的测定。本文的观察表明:(1)脾虚组胃粘膜未见明显的组织学变化;(2)内分泌细胞:与对照组相比,脾虚组G细胞和5-HT细胞中,弱阳性细胞增多,表明分泌活动增强;D细胞弱阳性和中等阳性细胞减少,强阳性细胞增多,表明分泌释放减弱,合成增强。与自然恢复组比较,治疗组G细胞和D细胞的分泌活动接近于对照组;5-HT细胞无明显的恢复;(3)显微分光光度计的测定结果与光镜观察一致,脾虚组G细胞胃泌素反应物的含量低于对照组,D细胞内生长抑素反应物的含量高于对照组;(4)脾虚组G细胞密度低于对照组(P<0.01),D细胞密度略高于对照组,G/D细胞比值也低于对照组(P<0.01)。本文结果提示,脾虚证这些内分泌细胞的分泌活动出现异常,可能是导致消化功能紊乱的原因之一。经四君子汤治疗后,内分泌细胞的分泌活动接近于对照组,说明此药对脾虚证有一定的治疗作用。     

Gαq／11介导的细胞信号转导在两肾一夹肾性高血压大鼠主动脉中的变化

实验以两肾一夹肾性高血压大鼠为模型,研究主动脉Gαq/11倡导 的细胞信号转导的变化及其意义。制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型,分别于术后第1、2、4和8周测定动脉血压,用免疫印迹法检测主动脉组织中Gαq/11亚单位和细胞个信号调节激酶1／2（ERK1／2）含量,测定磷脂酶C（phospholipase C,PLC)活性。结果显示高血压组大鼠于术后第2周血压开始升高;主动脉Gαq/11和ERK1／2含量于术后第1周增加（分别为57.53%和40.16%）,并维持在高水平（P＜0.01）;术后主动脉PLC活性亦增加（P＜0.05）。实验表明,肾素依赖性高血压能引起大鼠主动脉Gαq/11介导的细胞信号转导系统激活,并参与高血压的发生和发展。     

溃疡病胃窦幽门腺β-内啡肽样免疫反应细胞体视学分析

应用真彩色图象分析仪,对１５例ＤＵ、ＧＵ和Ｃｏｎ组患者,非病变区胃窦粘膜幽门腺,１５１个β－内啡肽样免疫反应细胞（β－ＥＰ细胞）的１２个参数进行检测及每组７５个单位面积（５０００μｍ２）的β－ＥＰ细胞进行计数。β－ＥＰ细胞的周长、面积、长径、短径和平均体积数值是ＤＵ组＜ＧＵ组＜Ｃｏｎ组,各组间两两相比,均呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。在ＤＵ与Ｃｏｎ组、或ＧＵ与Ｃｏｎ组之间,比表面、平均截距、平均表面积和平均直径数值相比,亦呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。ＤＵ组β－ＥＰ细胞数增高,与ＧＵ或Ｃｏｎ组分别相比,均呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。在三组中,β－ＥＰ细胞的比表面积、平均截距、平均表面积、平均直径数值和细胞数的显著性差异率在６０％以上,周长、面积、长径、短径和平均体积数值达１００％。本文首次建立了ＤＵ、ＧＵ和Ｃｏｎ组非病变区胃窦粘膜幽门腺β－内啡肽细胞的二维和三维形态计量学参数数据,提示β－ＥＰ细胞参与了溃疡病的内分泌调控活动。     

人参对大鼠胃G细胞、D细胞影响的免疫组织化学观察

本文应用免疫组织化学PAP方法观察大鼠胃G细胞、D细胞的分布和形态特征,以及人参对胃G细胞、D细胞免疫细胞化学活性的影响。用细胞显微分光光度计检测了服用人参的G细胞、D细胞免疫反应阳性面积及光密度。检测结果表明,人参能使大鼠胃G细胞、D细胞增大,增加G细胞中胃泌素的含量和D细胞中生长抑素的含量。本文的结果提示,人参对大鼠胃G细胞和D细胞的形态及分泌活动有调节性影响。     

雌、孕激素对贝美格致痫大鼠大脑皮层、海马Glu和GABA免疫反应细胞的影响

采用免疫细胞化学双PAP法,观察雌二醇（E2）、孕酮（P）对贝美格（Bemegride,Be）腹腔致痫大鼠顶叶大脑皮层、海马CA1、CA3区Glu和GABA免疫反应细胞的影响。图像分析结果显示：Be致痫组皮层、海马Glu免疫反应平均阳性细胞数及光密度较正常组明显增加（P＜0.01）;CABA细胞数及光密度减少（P＜0.01）。给予E2后,Be致痫大鼠大脑皮层、海马Glu阳性细胞数目增多,光密度增高（P＜0.01）,GABA阳性细胞数目减少、光密度降低（P＜0.05,P＜0.01）而给予P后,致痫组GABA阳性细胞数目增多、光密度增高（P＜0.01）,Glu阳性细胞数目减少、光密度减低（P＜0.01）。提示雌、孕激素的致痫、抗痫作用与其调节脑内GABA和Glu系统的兴奋性有关。     

鼠脑微血管内皮细胞的分离与长期培养

采用胶原酶消化、差速离心、尼龙网滤过技术分离和获取鼠脑微血管内皮细胞,接种后4h换液使获得的内皮细胞纯化,体外进行长期培养。细胞在体外生长176天,传至30代,细胞初期成活率为92％,纯度近90％。经形态学、超微结构和免疫组化鉴定,培养细胞为血管内皮细胞。培养至第30代的细胞仍能合成和分泌PGI2、ACE等,ⅧF:Ag阳性表达,染色体为二倍体(2n=42),基本保持着细胞的主要特征。该分离和培养方法的建立,将为研究与脑血管相关疾病提供有用工具。     

几种不同进化程度动物细胞内质网超微结构的比较研究

应用稼射电镜技术,高锰酸钾固定扫描电镜技术及生化分离技术,比较研究了家兔、家鸽、蟾蜍,鲤鱼、脉红螺肝细胞和眼虫的内质网超微结构及含量。透射电镜观察结果显示：在高等哺乳动物肝细胞内质网丰富,以扁囊结构为主,在整个细胞质内均有分布,主要存在于核周围,并伴有伴随线粒体分布的特征;蟾蜍肝细胞内质网稀少,以长管状平行排列,分布在细胞质的局部,鲤鱼肝细胞内质网呈小泡状均匀分布在细胞质中,脉红螺肝细胞及眼虫细胞     

天花粉蛋白诱发白血病细胞K562凋亡的研究

天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS),是一种从栝楼块根内提取的核糖体失活蛋白,具有流产、抗肿瘤和抗HIV等多种生物活性。本文利用FACS检测到天花粉蛋白可使K562白血病细胞产生明显的凋亡小峰、DNA区带电泳成典型的“梯状”条带,电镜检测可观察到明显的细胞凋亡形态。这些结果表明天花粉蛋白可以诱发K562白血病细胞产生凋亡。     

中国荷斯坦奶牛卵巢卵泡细胞的免疫组织化学研究

目的和方法应用七种特异性抗体(sGCα、sGCβ、nNOS、FOXO1、PDE4、PKB/Akt和Inhibinα)对中国荷斯坦奶牛卵巢卵泡细胞进行免疫组织化学定位。结果表明PKB主要存在于原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡颗粒细胞,黄体细胞中没有检测到;FoxO1主要位于原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡颗粒细胞;PDE4仅位于部分有腔卵泡的颗粒细胞;抑制素α、nNOS、sGCα和β存在于各级卵泡的颗粒细胞层,其中sGCα和β主要存在于原始卵泡和腔前卵泡的颗粒细胞。结论这七种蛋白的阶段和细胞特异性表达表明它们与中国荷斯坦卵巢卵泡的发育、闭锁和黄体化过程有着密切的关系。     

中国鲎胚胎血细胞生成的初步电镜观察

人工孵育的鲎胚,以光镜和电镜观察其血细胞发生过程。血细胞包括变形细胞和蓝细胞二系列,均可分为原始、幼稚和成熟三阶段。血细胞生成开始于胚胎的附肢原基形成阶段,变形细胞最早见于胚区,蓝细胞先出现于胚外部分。鲎胚中未发现具备组织结构的造血器官,造血系在结缔组织和血腔中进行。     

大蒜油不同给药途径对癌细胞周期移行过程的影响

本研究采用流式细胞光度术(FCM)分析癌灶局部及肌注大蒜油(GO)后,S180腹水癌细胞周期移行过程的变化。实验结果表明癌灶局部注射 GO 后,组方图上高倍体 DNA 峰值减少,癌细胞由 G_1期向 S 期运行受阻,S 期细胞显著减少,G_1期与 Go 期细胞积累。肌注 Go 对癌细胞周期影响远不如癌灶局部给药明显。Go 与 G_1期癌细胞积累的原因可能与 GO 对癌细胞周期活动选择性的抑制,或特异性杀伤 S 期或 G_2+M 期癌细胞有关。     

ANTIGENE PROPERTY OF PNA CONJUGATED TO THE NUCLEAR LOCALIZATION SIGNAL PEPTIDE

Peptide nucleic acid (PNA) is a DNA mimic with antigene properties. To enhance its capacity to enter in the cell and internalize in the nucleus, PNA has been conjugated to the nuclear localization signal (NLS) peptide, PKKKRKV. PNA-NLS conjugates form stable hybrids with complementary DNA strands and poorly tolerate mismatched base pairing. Employed against cancer-associated genes, PNA-NLS exhibited a potent and specific antigene activity, suggesting exciting therapeutic approaches to cancer.     

玉米根冠脱落细胞中微丝分布的荧光显微观察(简报)

在对玉米等主要农作物进行病理及致病毒素毒理分析时,经常选用根冠脱落细胞作为试材。许多学眷认为这些脱落的细胞处于垂死状态,然而,后来的一些研究肯定了Knudson的脱落根冠细胞具有活力的观点。Copoorali无菌培养玉米根冠脱落细胞,发现它们可以分裂;Vermeer等提出存活于玉米根际周围的根冠脱落细胞是根系统范围的扩展,它们在土壤中的作用应予以特别注意;Hawes不仅认为它们为活细胞,而且以它们做实验材料用于毒理分析;Guinal对玉米根冠脱落细胞的来源、细胞结构及生理特性进行了详细研究,肯定了细胞     

Identification and Isolation of Slow-Dividing Cells in Human Glioblastoma Using Carboxy Fluorescein Succinimidyl Ester (CFSE)

Tumor heterogeneity represents a fundamental feature supporting tumor robustness and presents a central obstacle to the development of therapeutic strategies¹. To overcome the issue of tumor heterogeneity, it is essential to develop assays and tools enabling phenotypic, (epi)genetic and functional identification and characterization of tumor subpopulations that drive specific disease pathologies and represent clinically relevant targets. It is now well established that tumors exhibit distinct sub-fractions of cells with different frequencies of cell division, and that the functional criteria of being slow cycling is positively associated with tumor formation ability in several cancers including those of the brain, breast, skin and pancreas as well as leukemia^2-8. The fluorescent dye carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) has been used for tracking the division frequency of cells in vitro and in vivo in blood-borne tumors and solid tumors such as glioblastoma^2,7,8. The cell-permeant non-fluorescent pro-drug of CFSE is converted by intracellular esterases into a fluorescent compound, which is retained within cells by covalently binding to proteins through reaction of its succinimidyl moiety with intracellular amine groups to form stable amide bonds⁹. The fluorescent dye is equally distributed between daughter cells upon divisions, leading to the halving of the fluorescence intensity with every cell division. This enables tracking of cell cycle frequency up to eight to ten rounds of division¹⁰. CFSE retention capacity was used with brain tumor cells to identify and isolate a slow cycling subpopulation (top 5% dye-retaining cells) demonstrated to be enriched in cancer stem cell activity². This protocol describes the technique of staining cells with CFSE and the isolation of individual populations within a culture of human glioblastoma (GBM)-derived cells possessing differing division rates using flow cytometry². The technique has served to identify and isolate a brain tumor slow-cycling population of cells by virtue of their ability to retain the CFSE labeling.