中国萤火虫云南窗萤荧光素酶cDNA的克隆表达和序列分析

从一种来自中国日行性萤火虫(云南窗萤)发光器官mRNA中克隆、测序并表达了有功能的荧光素酶.云南窗萤荧光素酶的cDNA序列有1647个碱基,编码548个氨基酸残基.从推测得到的氨基酸序列的比对分析得出:云南窗萤的荧光素酶与来自Lampyris noctiluca,L.turkestanicus和Nyctophila cf.caucasica三种萤火虫的荧光素酶有97.8%的序列一致性.从推测得出的氨基酸序列进行系统发育分析,其结果表明:云南窗萤和Lampyris Nyctophila聚在一起,与同属的发光强夜行性的萤火虫不形成的单系.云南窗萤荧光素酶在大肠杆菌中表达的条带大约70kDa,并且在有荧光素存在时发出黄绿色荧光.对荧光素酶的结构模拟和分析表明,云南窗萤荧光素酶基因的氨基端和羧基端结构域之间的裂沟处存在这5个多肽环,这正是从其他荧光素酶推测得到的催化荧光反应时的底物结合位点.云南窗萤和窗萤属的其他3种萤火虫的荧光素酶卡目比,有13个不同氨基酸位点,位于模拟分子结构的表面.对于这些多肽环、不刚氨基酸残基和晶体结构的进一步研究有利于解释日行和夜行性萤火虫荧光素酶的差异.     

中国萤火虫云南窗萤荧光素酶cDNA的克隆表达和序列分析(英文）

从一种来自中国日行性萤火虫（云南窗萤）发光器官mRNA中克隆、测序并表达了有功能的荧光素酶。云南窗萤荧光素酶的cDNA序列有1 647个碱基,编码548个氨基酸残基。从推测得到的氨基酸序列的比对分析得出：云南窗萤的荧光素酶与来自Lampyris noctiluca, L. turkestanicus和Nyctophila cf. caucasica三种萤火虫的荧光素酶有97.8%的序列一致性。从推测得出的氨基酸序列进行系统发育分析,其结果表明：云南窗萤和Lampyris+Nyctophila聚在一起, 与同属的发光强夜行性的萤火虫不形成的单系。云南窗萤荧光素酶在大肠杆菌中表达的条带大约70 kDa,并且在有荧光素存在时发出黄绿色荧光。对荧光素酶的结构模拟和分析表明,云南窗萤荧光素酶基因的氨基端和羧基端结构域之间的裂沟处存在这5个多肽环,这正是从其他荧光素酶推测得到的催化荧光反应时的底物结合位点。云南窗萤和窗萤属的其他3种萤火虫的荧光素酶相比,有13个不同氨基酸位点,位于模拟分子结构的表面。对于这些多肽环、不同氨基酸残基和晶体结构的进一步研究有利于解释日行和夜行性萤火虫荧光素酶的差异。     

三叶虫萤的交配与产卵行为

【目的】研究三叶虫萤Emeia pseudosauteri成虫的交配与产卵行为,丰富三叶虫萤的生物学研究,推动三叶虫萤的人工繁育。【方法】采用室内试验与野外观察相结合、仪器拍摄和人工观察相结合的方法研究三叶虫萤的交配与产卵行为。【结果】本文先描述了三叶虫萤成虫交配前雄雄相遇、雌雌相遇、雌雄相遇分别会发生的情况,然后较为详细地描述了交配的过程。交配姿势有上下体位(或称"∠"型)和尾对尾体位(或称"—"型),后者由前者转换而来。雌雄成虫可以多次交配,雄虫有交配干扰和假交配现象。成虫24 h内均有交配现象,交配高峰出现在20:00-22:00(交配率20.8%)和12:00-14:00(交配率15.1%)。雌虫多数喜将卵产在潮湿的苔藓上,卵常聚集成一丛或成簇排列。雌虫可多次产卵,但初次产卵数量最多(高达67.82%),随后产卵量则随产卵次数增加而减少。雌雄虫多次交配后单只雌虫的第一次产卵量[(45±5)粒]多于单次交配后单只雌虫第一次产卵量[(20±4)粒]。雌虫的产卵次数和产卵量与其体重相关,体重越重则其产卵次数和产卵量越多。【结论】三叶虫萤的交配产卵行为与以往报道的萤火虫交配产卵行为很多相似之处,但也有一些特殊行为或规律。     

中国大萤叶甲属的研究（鞘翅目：叶甲科：萤叶甲亚科）

大萤叶甲属Meristata 为Chapuis 1875年所建立,是东洋区分布的属,在我国主要分布在云南和西藏两省,中名以其体大型而得。目前全世界已知11种,中国有9种。本文对本属征进行了重新厘订,并对中国种类做了系统的研究及记述,它们是褐大萤叶甲Meristata dohrni (Baly), 长大萤叶甲Meristata elongata (Jacoby), 黑斑大萤叶甲Meristata fallax (Harold), 黑胸大萤叶甲Meristata fraternalis fraternalis (Baly), 黑胸大萤叶甲云南亚种Meristata fraternalis yunnanensis (Laboissiere), 象牙大萤叶甲Meristata pulunini (Bryant), 四带大萤叶甲Meristata quadrifasciata (Hope), 六斑大萤叶甲Meristata sexmaculata (Kollar et Redtenbacher), 黄腹大萤叶甲Meristata spilota (Hope)。亦对Meristata fraternalis yunnanensis 的分类地位进行了探讨,根据其鞘翅斑点及其雄性生殖器形状将原Meristata yunnanensis 降为Meristata fraternalis 的亚种。     

豚草条纹萤叶甲的交配和产卵行为

在我国大陆发现的豚草条纹萤叶甲Ophraella communaLeSage原产于北美洲,取食入侵生物豚草(Ambrosia artemisiifoliaL.)。通过观察该叶甲的交配和产卵行为以及两者之间的相关性,结果表明,豚草条纹萤叶甲一生多次交配,室内观察1次交配时间平均为38.2min,产卵历期平均13.2d,每雌平均产卵312.1粒;但野外产卵量高于室内,平均为553.8粒;卵多聚产在植株幼嫩叶片的背面。雌成虫平均寿命为16.0d。雌成虫随交配次数的增多,产卵量增大、产卵历期和成虫寿命延长,存在显著的直线相关性。     

条背萤的形态和生物学研究

首次在中国大陆发现水栖萤火虫条背萤Luciola substriata。形态观察发现,条背萤成虫橙黄色, 鞘翅末端灰黑色;发光器均为白色,雄虫发光器位于第5、6腹节,位于第5腹节的发光器呈带状,第6腹节的发光器呈“V”字形;雌虫的发光器呈带状,位于第5腹节;卵椭圆形,橙黄色。幼虫有两种形态,1～2龄具有7对呼吸鳃,3～6龄幼虫无呼吸鳃。幼虫具有一对发光器,位于第7腹节腹面;初蛹期仍保留幼虫形态的发光器,后呈现成虫的发光器,两种形态的发光器并存直至羽化。对条背萤生活史及习性调查发现,条背萤生活在水草较多的池塘、湖泊和流速缓慢的河流中。该虫1年发生1代,以幼虫在水中越冬,5月初老熟幼虫开始上岸化蛹。在25℃下,条背萤预蛹期平均为6.17天,蛹期平均为4.43天。成虫5月上旬至9月中旬发生。日落后的1 h内是条背萤成虫闪光求偶的最盛期。卵期平均12.5天。幼虫的猎物为静水椎实螺Lymnaea stagnalis,凸旋螺Gyraulus conwexiusculus等,天敌为克氏原螯虾Procambarus clarkii、中华绒毛蟹Eriocheir sinensis、草鱼Ctenopharyngodonidellus等。利用光谱仪对条背萤的发光光谱进行测定发现,条背萤的萤光光谱为425～603 nm,峰值为504 nm,颜色为黄绿混合色。     

双斑长跗萤叶甲在玉米田的种群消长规律

【目的】明确双斑长跗萤叶甲Monolepta hieroglyphica(Motschulsky)的发生规律,为双斑长跗萤叶甲的预测预报和综合治理提供科学依据。【方法】2011年通过田间系统调查对山西省忻州市和晋中市玉米田的双斑长跗萤叶甲的种群消长动态进行了系统研究。【结果】在山西省忻州市的玉米田,越冬卵在5月下旬开始孵化,幼虫以玉米根系为食,6月中旬为幼虫的发生高峰期,部分老熟幼虫开始化蛹,6月下旬成虫开始羽化出土,为害玉米叶片,8月初成虫种群数量达到最高峰,8月中旬以后随着玉米花丝大部分萎蔫,叶片开始衰老,玉米田间的成虫种群数量也急剧下降。10月中旬玉米田成虫基本消失,但是在杂草上还能发现少量的成虫。在山西省晋中市,玉米的生育期比忻州市晚10 d左右,双斑长跗萤叶甲的发生期也相对晚一些,但是种群数量的发生发展趋势基本是一样的。双斑长跗萤叶甲成虫在靠近杂草的玉米田边比在玉米田中部的发生更重,而在成虫的发生高峰期,田边和田中间的种群密度无显著性差异。【结论】双斑长跗萤叶甲在山西省1年发生1代,在山西省忻州市的发生期比晋中市的要早10 d左右,这与两地玉米田的不同的土壤性质、灌溉方式、玉米生育期等因素有关。     

端黑萤和边褐端黑萤两性异形和雌性个体生育力

检测了端黑萤(Abscondita chinensis)和边褐端黑萤(Abscondita terminalis)繁殖期个体大小和形态特征的两性异形以及雌性繁殖输出。两因素方差分析表明,端黑萤的全长显著小于边褐端黑萤的全长,雌性个体显著大于雄性个体。以全长为协变量的两因素协方差分析显示,端黑萤的前胸背板宽、鞘翅长、复眼宽、胸长、腹宽、发光器面积及体重均显著小于边褐端黑萤,而腹长显著大于边褐端黑萤,触角长物种间差异不显著;雌性的前胸背板宽、腹长、腹宽及体重均显著大于雄性,而鞘翅长、复眼宽、胸长、触角长、发光器面积均显著小于雄性;物种和性别的交互作用对前胸背板宽、复眼宽、腹长、触角长及发光器面积影响显著,对其余的鞘翅长、胸长、腹宽及体重影响不显著。端黑萤和边褐端黑萤的两性异形指数分别为0.144和0.091。9个形态特征变量的主成分分析(Eigenvalue ≥ 1)发现,前2个主成分共解释56.8%的变异;复眼宽和发光器面积在第一主成分有较高的负负载系数,腹长有较高的正负载系数(解释31.3%变异);前胸背板宽和鞘翅长在第二主成分有较高的负负载系数(解释25.5%变异)。端黑萤和边褐端黑萤的平均窝卵数分别为28.9粒和18粒。线性回归显示,端黑萤和边褐端黑萤的窝卵数均与母体的全长及体重呈显著的正相关。单因素方差分析表明,特定全长的端黑萤的窝卵数显著大于边褐端黑萤。端黑萤和边褐端黑萤均属于雌性偏大的两性异形,是生育力选择、能量分配和运动综合影响的结果。雌萤腹腔容量等关键局部特征的增大是对生育力选择的适应,且生育力大小与两性异形差异程度成正相关。     

胸窗萤的防卫行为：反射性出血及翻缩腺反应

为了探讨胸窗萤Pyrocoelia pectoralis Oliver, 1883的防卫行为, 对成虫的反射性出血行为及幼虫的翻缩腺体形态进行了研究。结果表明： 胸窗萤具有复杂的多重防卫行为策略。成虫利用闪烁、 假死、 反射性流血进行防卫, 幼虫则利用闪烁、 假死和微小的翻缩腺体进行防卫。反射性流血发生在雄成虫的前胸背板和鞘翅边缘, 而雌成虫仅在前胸背板边缘观察到有反射性流血行为。扫描电镜观察到直径大约32 μm的圆坑状结构环绕前胸背板或鞘翅边缘一圈。雌虫鞘翅牙也具有相似的圆坑状结构。幼虫具有9对乳头状的翻缩腺体, 位于中胸、 后胸和第1～7节侧板上。超薄切片发现, 腺体表面的棒状结构内部中空, 棒状结构连接一个发达的分泌细胞。细胞内连接棒状结构的部位着生致密的管状内质网。行为学实验发现, 胸窗萤血液对蚂蚁具有非常有效的拒避作用。     

沙葱萤叶甲核糖体蛋白基因GdRpS3a的克隆、分子特性及表达分析

核糖体蛋白(ribosomal protein,Rp)是一类参与蛋白质合成、细胞代谢、机体免疫及信号传导等重要功能的蛋白质.本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica核糖体蛋白S3a基因cDNA全长序列,分析其分子特性和表达模式,以期为进一步研究其在沙葱萤叶甲生长发育及滞育中的作用提供必要的基础.根据现有的沙葱萤叶甲转录组测序数据,应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得了沙葱萤叶甲RpS3a基因的全长cDNA序列,命名为GdRpS3a(GenBank登录号:MN660144).该基因全长为800 bp,开放阅读框全长为687 bp,编码228个氨基酸,具有核糖体蛋白S3a家族的保守功能域;预测分子量为25.63 kDa,等电点pI为10.53,无信号肽和跨膜结构.同源序列比对和系统发育分析表明,GdRpS3a与玉米根萤叶甲Diabrotica virgifera virgifera RpS3a的亲缘关系最近,其氨基酸序列一致性最高为54.10％.采用qPCR技术检测该基因在沙葱萤叶甲不同发育阶段(卵、1～3龄幼虫、预蛹、蛹及成虫羽化3、7、10、15、25、40、60、80和100 d)和3日龄成虫在不同温度(0、5、10、15、20、25、30、35和40℃)处理1h后的表达谱.结果 表明:GdRpS3a在不同发育阶段的沙葱萤叶甲体内均有表达,在成虫滞育结束后表达量最高,在卵期和成虫滞育期间低表达.温度对GdRpS3a的表达有显著的影响,30℃下最高,0℃下最低.GdRps3a的表达与沙葱萤叶甲生长发育阶段及环境温度有关,可能在沙葱萤叶甲成虫夏滞育中起着重要作用.     

PARENTAL AGE,GAMETIC AGE,AND INBREEDING INTERACT TO MODULATE OFFSPRING VIABILITY IN DROSOPHILA MELANOGASTER

In principle, parental relatedness, parental age, and the age of parental gametes can all influence offspring fitness through inbreeding depression and the parental effects of organismal and postmeiotic gametic senescence. However, little is known about the extent to which these factors interact and contribute to fitness variation. Here, we show that, in Drosophila melanogaster, offspring viability is strongly affected by a three‐way interaction between parental relatedness, parental age, and gametic age at successive developmental stages. Overall egg‐to‐adult viability was lowest for offspring produced with old gametes of related, young parents. This overall effect was largely determined at the pupa–adult stage, although three‐way interactions between parental relatedness, parental age and gametic age also explained variation in egg hatchability and larva‐pupa survival. Controlling for the influence of parental and gametic age, we show that inbreeding depression is negligible for egg hatchability but significant at the larva–pupa and pupa–adult stages. At the pupa–adult stage, where offspring could be sexed, parental relatedness, parental age, and gametic age interacted differently in male and female offspring, with daughters suffering higher inbreeding depression than sons. Collectively, our results demonstrate that the architecture of offspring fitness is strongly influenced by a complex interaction between parental effects, inbreeding depression and offspring sex.     

Anopheles halophylus,a new species of the subgenus Nyssorhynchus (Diptera: Culicidae) from Brazil

Anopheles halophylus n.sp. is described from Central Brazil. It is distinguished from An. triannulatus (Neiva and Pinto) by morphological and morphometric characters, especially in the male genitalia, larva and egg. Illustrations of the male and female genitalia, egg, larva and pupa, and discussion of the status of names associated with An. triannulatus are provided.     

Systematics of Anopheles lanei Galvão and Amaral, a species of the subgenus Nyssorhynchus Blanchard (Diptera: Culicidae)

Anopheles (Nyssorhynchus) lanei Galv?o and Amaral is here redescribed using morphological characteristics of adult, male and female, fourth instar larva and pupa. The larva, pupa, and male genitalia are illustrated. Diagnostic morphological characters of adults, male genitalia, fourth instar larva and pupa are provided to distinguish An. lanei from other species of the Argyritarsis section. Species distribution data are based on the published literature records and bionomics data are based on both literature records and field data.     

转Bt基因抗虫棉对亚洲玉米螟抗性的研究

对转Bt抗虫棉苏抗103与GK—22对玉米螟抗性的研究结果显示：(1)用苏抗103嫩叶、簧,花、蕾饲曩第三代玉米螟幼虫,最终幼虫校正死亡率分别达100％、95．83％、83．33％与100％。校正化蛹下降率分别达100％、92．31％、50．07％与100％,校正幼虫成蛾减退率分别达100％、90．92％、0％与100％。(2)人工饲料中加入5个不同浓度苏抗103嫩叶饲喂第二代幼虫,除0．4％浓度,幼虫校正死亡率与成蛹下降率均为100％,0．4％浓度的幼虫期延长20．68％,蛹重下降18．24％,蛹期延长19．79％。(3)人工饲料中加入5个浓度的苏抗103或GK22嫩叶分别饲喂第三代幼虫,苏抗103上幼虫校正死亡率较第二代有所下降,分别为3．04％、-16．68％、28．2％、33．33和75％。GK22上幼虫校正死亡率分别为3．13％、26．89％、45．69％、70．816％和68．09％。其幼虫校正死亡率及幼虫期、蛹期、成虫校正减退率均有随浓度增加而上升的趋势。较亲本棚,对蛹重、雌成虫寿命、单雌产卵量、卵孵化率也有一定程度的影响。上述研究结果表明,苏抗103与GK22影响棉田玉米螟幼虫与蛹的存活与生命力,进而影响其成虫繁殖力而表现出良好抗性。     

Morphology of the adult and juvenile stages of Microtendipes rydalensis (Edw.) comb. nov. (Diptera,Chironomidae)

The adult male of Polypedilum rydalensis (Edw.) is described in greater detail than hitherto and the female, pupa and larva are all described for the first time. On the basis of the morphology of the adult and immature stages rydalensis is placed in the genus Microtendipes Kieffer.     

水菖蒲活性物质β-细辛醚对玉米象不同虫态的熏蒸作用

为了确定水菖蒲(Acorus calamus)活性成分β-细辛醚对玉米象Sitophilus zeamais Motschulsky的熏蒸活性,研究β-细辛醚对玉米象不同虫态的熏蒸作用。结果表明:β-细辛醚对玉米象4种虫态都有一定的熏蒸作用,其中对成虫的熏蒸效果最好,其次是卵,幼虫和蛹对β-细辛醚具有较高的耐药性。以质量浓度为200μL/L熏蒸卵120h后,卵的死亡率达到了99.09%。对幼虫和蛹的熏蒸作用不明显。对成虫熏蒸120h后,LC50为17.82μL/L。     

利用柞蚕卵繁殖的松毛虫赤眼蜂的适宜冷贮虫期和温度

我国普遍利用柞蚕Antheraea pernyi卵大量繁殖和释放赤眼蜂防治多种农林害虫。对赤眼蜂进行冷贮有助于其商品化生产、运输和释放应用。为了全面评价冷贮对柞蚕卵繁殖赤眼蜂的影响,作者采用柞蚕卵为寄主,以贮存温度（4℃、7℃、10℃和13℃）、贮存虫期（卵、幼虫、预蛹和蛹期）和贮存时间（2周、4周、6周和8周）为参试因子,研究了冷贮对松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi羽化出蜂率、单卵出蜂数、单卵雌蜂比的影响。结果表明,3个因素均可单独或互作显著影响羽化出蜂率和单卵出蜂数,尤以贮存虫期的影响更为明显;但3个因素对单卵出蜂性比影响不大。综合各冷贮虫期对低温的反应,松毛虫赤眼蜂对10℃反应最敏感,各虫期羽化出蜂率和单卵出蜂数明显降低,不适宜长期冷贮;对7℃反应相对较不敏感,最适宜长期贮存。在适宜长期冷贮温度（4℃和7℃）条件下,适宜贮存虫期有所不同,4℃下为幼虫期和蛹期,7℃下为卵期和蛹期,在这些虫期和贮存温度条件组合下羽化出峰率和单卵出蜂数相对于其他虫期受冷贮的不利影响较小。从对羽化出蜂率的影响来看,于卵期7℃下冷贮为最适宜;从对单卵出蜂数的影响来看,于蛹期在4℃和7℃冷贮为适宜。     

福建引种天蚕生物学特性的研究

天蚕是一种资源昆虫,该虫自浙江引种,在福建一年发生一代,以卵越冬。翌年4月上旬孵化,幼虫5龄,幼虫期34—40天,5月中旬化蛹,蛹期21—32天,成虫671中旬羽化,成虫寿命4—7天。