miRNA研究方法进展

miRNA（microRNA）是一类长约22个核苷酸的小分子非编码RNA。miRNA可以通过与靶基因mRNA的特定位点结合,抑制该蛋白的合成或诱导该mRNA的降解,从而参与基因的表达调控。miRNA在各种生物中普遍存在,近年来利用直接克隆和生物信息学方法已从动物、植物、培养细胞和病毒中克隆及预测了数百种miRNA,并通过正反向遗传学技术、碱基互补靶标基因鉴定技术等,确定了少数miRNA基因的生理功能：然而在不同生物中仍有大量的miRNA基因尚未鉴定,它们的靶标及功能也有待进一步探索。由于miRNA序列短小,而且与靶标互作机理所知甚少,因此研究难度较大。本文总结了miRNA基因鉴定、功能鉴定等所采用的研究方法和策略,试图为miRNA研究提供一些思路和启发。     

miRNA定量检测方法的研究进展

MicroRNA(miRNA)是广泛存在于真核生物当中的一类长度为18～25个核苷酸的小分子RNA,由DNA转录产生。作为一种内源性非编码小分子RNA, mi RNA在许多生命活动中起着重要作用,如当机体内的某些mi RNA表达下调时,就会更容易罹患癌症和其他一系列疾病。这一现象提示,人们可通过对mi RNA进行定量检测来实现对相关疾病的早期诊断。本文综述了基于杂交、扩增和测序原理的mi RNA检测技术的研究进展,并对mi RNA的研究方法及方向予以了阐述。     

热原质检测进展

本文综述了热原质检测的进展。重点介绍了鲎试剂凝胶法、合成基质鲎三肽显色法和十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电脉银染法检测内毒素或脂多糖的原理和方法的新进展。     

miRNA与肿瘤细胞耐药的关系

化学药物治疗（简称化疗）是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之一,但化学治疗同时受到原发性耐药和获得性耐药的制约.细胞学上的耐药机制包括药物外排泵,如P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白的过表达、药物靶点的突变、细胞修复系统的增强及细胞凋亡的减弱等.这些途径中的关键基因在遗传学水平及表观遗传水平的变异可以导致肿瘤细胞耐药现象的发生.其中,miRNA是这些关键基因的调节方式之一.miRNA参与生命过程中一系列的重要过程,包括动物的生长发育、组织分化和疾病的发生发展等,也参与调节肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.本文简要综述了miRNA与肿瘤细胞耐药性的相关进展.     

miRNA 与胃癌的关系研究进展

微小RNA(miRNA)是长度为22nt左右的非编码RNA,具有转录后调节的功能,对细胞的增殖、凋亡和分化起到重要作用。胃癌是世界第四大常见肿瘤,高居癌症死亡的第二位。越来越多的研究表明miRNA在肿瘤中起着原癌基因或抑癌基因的作用,本文将阐述miRNA与胃癌的关系的研究进展。     

miRNA qPCR检测方法研究进展及其应用

miRNA是目前国际研究的热点领域之一,而miRNA表达检测是miRNA研究的基础内容。针对miRNA序列短小的特点,开发出了多种检测方法,其中miRNA qPCR定量检测是应用最广泛的方法。就miRNA抽提,miRNA qPCR定量检测原理及miRNA qPCR定量检测流程包括引物设计、反应体系设置、内参基因筛选等方面进行了深入探讨,并对miRNA定量检测研究方法的发展趋势进行了展望,以期为研究者进行miRNA qPCR定量检测提供参考。     

miRNA与胃癌的关系研究进展

微小RNA（miRNA）是长度为22nt左右的非编码RNA,具有转录后调节的功能,对细胞的增殖、凋亡和分化起到重要作用。胃癌是世界第四大常见肿瘤,高居癌症死亡的第二位。越来越多的研究表明miRNA在肿瘤中起着原癌基因或抑癌基因的作用,本文将阐述miRNA与胃癌的关系的研究进展。     

基于PCR技术的miRNA定量检测方法

microRNA(miRNA)是一类广泛存在于真核生物中,不编码蛋白质的短序列RNA,它广泛参与真核生物的生长发育、新陈代谢和应激反应等生命活动。但绝大多数miRNA的生物学功能还不清楚,通过灵敏的定量检测方法,了解miRNA在不同组织部位的时空表达,是探究其功能的重要环节。现着重介绍了2类7种基于PCR技术的miRNA定量检测方法的基本原理和实验流程,并分析了这些定量检测技术间的异同和适用范围。     

小热应激蛋白与动物繁殖机能的关系研究进展

热应激是指机体受到超过本身体温调节能力的高温刺激而产生的非特异性防御反应,热应激蛋白是机体热应激反应发生后细胞新合成或合成数量增加的一类蛋白质,小分子热应激蛋白是热应激蛋白家族中重要的一类成员,作为分子伴侣在细胞的正常代谢和生理条件下表达和发挥作用。目前已证实小热应激蛋白还参与调控细胞增殖和凋亡、生物膜膜脂的流动性、核质穿梭作用、免疫应答和疾病治疗等。本综述分别就小热应激蛋白在雄性动物生精细胞发育过程中参与的增殖、分化及凋亡调控作用以及在雌性动物卵母细胞发育、成熟、妊娠维持和生育调节功能的研究进展做一概述,旨在为小热应激蛋白生物学功能深入研究提供参考。     

糖皮质激素与miRNA关系的研究现状

糖皮质激素(glucocorticoid,GC)因具有抗炎、抑制免疫反应、调节能量代谢和细胞增殖凋亡等作用而广泛使用于临床。作为非编码RNA,内源性miRNA通过影响靶基因的表达水平在机体发育和疾病发生中发挥广泛的调控作用。目前研究发现,糖皮质激素能通过糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)介导调节miRNA的表达,而miRNA也能通过影响糖皮质激素受体的表达水平调节细胞对糖皮质激素的反应性。在许多疾病模型中,miRNA和糖皮质激素受体之间通过密切互作关系共同影响疾病的发生发展。     

阿霉素损伤心肌细胞miRNA378与网腔钙结合蛋白、内质网应激的关系

目的：研究阿霉素损伤心肌细胞miRNA378与网腔钙结合蛋白（calumenin）、内质网应激相关性。方法：原代培养乳鼠心肌细胞分为6组：对照组、阿霉素组、miRNA378过表达对照组、miRNA378过表达组、miRNA378沉默对照组、miRNA378沉默组,采用免疫组化法检测细胞α-SMA蛋白;慢病毒质粒转染心室肌细胞,实时荧光定量PCR技术检测各组心肌细胞miRNA378、calumenin及葡萄糖调节蛋白78（GRP78） mRNA表达。结果：与阿霉素组相比较,miRNA378过表达组心肌细胞calumenin mRNA表达增加（P<0.01）,而GRP78 mRNA表达减少（P<0.01）;与阿霉素组相比较,miRNA378沉默组calumenin及GRP78 mRNA表达无统计学差异。结论：阿霉素损伤乳鼠心肌细胞是通过减少calumenin蛋白表达进而引起内质网应激,该作用通过上调miRNA378得到缓解。     

miRNA与siRNA胃癌相关研究的现状及进展

RNA干扰是表观遗传学的研究热点,它参与基因复制后表达调控,并与肿瘤发生密切相关。近年对RNA干扰研究较多的是微小RNA和小干扰RNA。文章概述了微小RNA和小干扰RNA的基本理论,并综述它们在胃癌研究中的现状及进展。认为RNA干扰分析和应用是研究胃癌相关基因功能及作用机制的有效方法,并将对胃癌的诊治产生巨大影响。     

雌激素及应激与人类认知功能的关系

以当前生理学、医学等相关学科研究的最新成果为例介绍了雌激素、应激和人类认知功能三者之间的关系。说明雌激素与应激均可影响人类情绪、中枢学习和记忆功能,不利应激降低雌激素水平,而雌激素又可减少不利应激带来的损害,最后指出雌激素替代治疗的广阔临床应用前景。     

热应激抑制神经元凋亡与核因子kappaB活性之间的关系

实验采用低钾诱导大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型,观察核因子kappaB(NF-kappaB)活性与热应激抑制神经元凋亡之间的关系,迁移率改变法（EMSA）检测结果显示：神经元经低钾处理16h可见NF－kappaB活性明显升高,热应激处理可减弱低钾诱发的NF－kappaB激活,并呈时间依赖性,Hoechst33258荧光素核染色,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞（FCM）检测均发现低钾16h可诱发神经元凋亡,预先用热处理60或90min可明显减弱低钾诱发的神经元凋亡,用佛波酯（PMA）激活NF－kappaB,可进一步增强60min热应激抑制精经元凋亡的作用,而用吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）选择性阻断NF－kappaB活性后,热应激抑制神经元凋亡的作用明显减弱。上述结果提示,热应激的神经保护作用与减弱NF－kappaB活性无关,而NF－ksppaB激活可能参与热应激抑制神经元凋亡的作用。     

幽门螺杆菌相关miRNA与胃癌关系的研究进展

微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一种由内源基因编码长度约为22个核苷酸的非编码RNA,其能抑制靶基因蛋白质表达,有多种生物学功能。越来越多的研究表明,miRNA在多种肿瘤中异常表达,参与肿瘤发生、发展过程。幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)作为胃癌的主要致病因素,可通过调节miRNA的表达,在胃癌中起促进或抑制作用。现就Hp相关miRNA在胃癌中的作用作一概述。     

生物技术药物检测方法进展

生物技术药物的研发已成为现代药学热点,而生物技术药物的分析技术也随之不断提高。本文针对生物技术药物的分析方法进展及其前景趋势进行简要介绍和总结。     

DMD携带者检测方法的进展

探索更直接、简便、准确的携带者检测技术是目前人们对ＤＭＤ的研究热点。较之传统的家系分析和血清学检测，人们探讨了各种现代分子生物学技术对ＤＭＤ致病基因携带者检出的优势与不利，同时也探讨了其他如视觉电生理技术在携带者检测中的意义。     

烟曲霉pbs2基因在热应激与胞壁应激的双重应激中的作用

目的 通过研究烟曲霉对细胞壁合成干扰物质及棘白菌素类药物的敏感性、烟曲霉在受热应激后HOG通路成分的表达变化探讨pbs2基因在热应激和胞壁应激的双重应激中的作用.方法 烟曲霉野生株AF293和pbs2突变株在含钙荧光白(Calcofluor white,CFW),刚果红(Congo red,CR)和十二烷基硫酸钠(So...     

自由基与应激性溃疡形成的关系

应激性溃疡是一种临床上常见的疾病,死亡率很高。其病因包括烧伤、中枢神经系统损伤、感染、败血症、创伤、手术、休克以及心、肺、肝、肾衰竭等多种疾病。研究其发生机制具有重要的理论意义和临床意义。生物氧化可为机体的代谢提供能量,因此,需氧生物离不开氧。但在生物氧化过程中,机体也可产生一些与氧有关的自由基。如超氧自由基(superoxide free radical,O_2)氢氧自由基(hy-droxyi free radical,OH)等。而这些自由基对机体往往是有害的。如自由基可与生物膜磷脂分子中的多不饱和脂肪酸发生过氧化作用,从而破坏     

应激性与反射关系辨析

在高中课本中,应激性是指生物体对外界刺激能够产生一定反应的特性,反射是指在中枢神经系统的参与下,人和动物体对体内和外界环境的各种刺激所发生的规律性的反应。从这两个概念可以看出．应激性的内涵是对外界刺激的反应,刺激来自生物体外：反射的内涵是通过神经系统对内、外刺激作出的反应。刺激既有外界环境的,又有内部环境的．反应的发生需要通过反射弧来完成,二者内涵是不相同的．自然其外延也不相同。应激性的外延涉及到一切生物体,既包括植物也包括原核生物、原生生物、真菌、动物和人,它是生物的基本特征。而反射的外延仅是具有神经系统的人和动物,比应激性要窄。那么能否说反射是应激性的一种表现形式即反射属于应激性呢？不能,人和动物对外界环境刺激作出的反应属于反射也属于应激性,人和动物对内部环境刺激作出的反应,属于反射但不属于应激性。例如：颈动脉窦和主动脉弓压力感受性反射（又称减压反射）,颈动脉体和主动脉体化学感受性反射（又称加压反射）,都是由内部环境变化引起的反射,依照概念都不属于应激性,这样应激性与反射之间既有交叉重叠的地方．又有不相同的地方,用下图表示。