骨髓间质干细胞修复受损心肌研究进展

骨髓间充质干细胞是一种多潜能干细胞。在体外培养时,多种诱导因素可使其分化为心肌细胞等。目前进行的动物实验和临床研究表明骨髓间充质干细胞具有促进血管增生以及改善心肌梗死后心脏功能的作用,为受损心肌的治疗提供了广阔前景。但是其修复受损心肌的机制仍具有很大争议。本文就以上内容进行综述。     

电磁脉冲对孕鼠及其胚胎的影响

目的：探讨电磁脉冲（electromagneticpulses,E脚）对孕期小鼠及其胚胎发育的影响。方法：采用不同场强的EMP（分别为0、50、100、200、400kV·m-1）辐照器官形成期的BALB／c孕鼠,于孕18天解剖小鼠,测量孕鼠体重增长值、脏器／体重,胎盘重、胎鼠体重、身长、尾长,并记录吸收胎、死胎、生长发育迟缓及畸胎的数量。结果：各辐照剂量组孕鼠体重增长值、脏器／体重与对照组相比均无显著性差异（P〉0．05）;胎盘重、胎鼠体重、身长、尾长数值明显低于对照组（P〈O．01）。50、400kV·m-1和100、200、400kV·m-1辐照组可分别导致死胎率和生长发育迟缓率增加（P〈0．05）,在400kV·m-1的EMP辐照组中,畸胎数也有升高的趋势,其中,畸胎主要表现为肢体和骨发育异常。结论：本实验条件下,不同场强的EMP辐照可对器官形成期小鼠胚胎的生长发育产生一定的影响,胚胎肢芽及骨发育可能是EMP作用的特殊靶点。     

神经干细胞能修复受损脊髓

美国科学家将人类神经干细胞植入脊髓受损伤的瘫痪实验鼠体内,结果成功修复了实验鼠的脊髓组织,并改善了它们的行动能力。这一最新成果证明,属于成体干细胞的神经干细胞也与胚胎干细胞一样具有修复受损神经组织的功能。在9月20日的美国《国家科学院院刊》网     

神经干细胞能修复受损脊髓

最近,美国加州大学的科学家发明了一种巧妙的方法,使蛋白质练起了瑜伽,并通过实时检测,最终证实在蛋白质折叠过程中存在一种中间过程。这是研究人员首次直接观察蛋白质折叠过程中形成的中间状态,成果发表在9月23日的《科学》杂志上。在此之前,科学家曾     

炎症免疫刺激对孕鼠胚胎基因表达谱影响的研究

目的:探讨妊娠期大鼠经炎症免疫刺激后对胚胎基因表达谱的影响.方法:选取6只孕鼠,分别腹腔注射LPS及Zymosan后,取胚胎抽提总RNA,经纯化反转录等过程合成生物素标记的cRNA,经片断化后与Rat Genome 230 2.0 Array芯片杂交,读取芯片结果并进行分析.结果:LPS组有183个基因上调、270个基因表达下调,Zymosan组有144个基因表达上调、417个基因表达下调.有50个基因在上述两组中均表达上调,其中已知功能的有9个;有173个基因在上述两组中表达均下调,已知功能的有85个.结论:应用全基因组芯片筛选了孕鼠经炎症刺激后胚胎差异表达的基因,为进一步研究孕鼠经炎症刺激后仔鼠血压升高的机制提供了新的思路.     

三聚氰胺对SD孕鼠及胎鼠的毒作用

为阐明三聚氰胺对孕鼠和胎鼠毒性作用,将40只SD孕鼠随机分为高剂量组(Ⅰ)、中剂量组(Ⅱ)、低剂量组(Ⅲ)及空白对照组(Ⅳ),共4组,于妊娠第6~19天,分别经口灌服800 mg/kg·d、200 mg/kg·d、20 mg/kg·d和0 mg/kg·d三聚氰胺混悬液。染毒期间,观察孕鼠中毒表现,以及不同妊娠时间体重变化;于妊娠第20天处死母鼠,检测血清尿素氮、肌酐及尿酸,胎鼠及胎盘重量等指标;观察母鼠和胎儿肾脏、胎盘组织病理变化。结果显示,在染毒期,Ⅰ、Ⅱ组母鼠出现精神差等症状;与Ⅳ组相比,Ⅰ、Ⅱ组母鼠、胎鼠和胎盘重量,血液生化指标有显著或极显著差异(P0.05或P0.01),且Ⅰ、Ⅱ组母鼠、胎鼠肾脏以及胎盘有明显病理变化;但3个剂量水平的三聚氰胺对胚胎的存活无影响,也不产生致畸作用。     

远端缺血预处理对心肌的保护作用

实验发现,局部缺血预处理对远端(未预处理)心肌组织具有保护作用,而且其它器官的短暂缺血也可实现心肌保护作用,这一现象不同于经典的缺血预处理,因此被命名为远端缺血预处理。研究其机制表明,神经反射调节是机体实现远端缺血预处理保护作用的重要方式,心肌组织中蛋白激酶C激活介导了这一作用。     

科研人员成功用胚胎心肌细胞修复受损老鼠心脏

一个国际研究小组日前通过将胚胎心肌细胞植入受损的老鼠心脏．成功使老鼠心脏功能得到恢复。这一成果表明,这种技术未来有望用于医治人类心脏组织。     

三氯乙烯对人胚胎干细胞心肌分化的影响和机制

目的:探讨三氯乙烯(TCE)对人胚胎干细胞心肌发育分化的影响。方法:以人胚胎干细胞H9体外心肌定向分化为模型,分化培养液中添加不同剂量的TCE(分别为处理组100 ppb组,1 ppm组,10 ppm组)以及DMSO(对照组)。对诱导后形成的拟胚体以及不同发育阶段的细胞进行检测,通过MTT法测定细胞的生存能力,统计有自主节律跳动的拟胚体的数量;流式细胞仪计数分析细胞分化比例;荧光定量PCR检测心肌特异性基因表达;并应用基因芯片方法初步筛选检测三氯乙烯对心肌细胞钙离子通道相关的基因表达的影响。结果:TCE的三个浓度处理组均未显示细胞毒性,但高浓度组明显抑制向心肌细胞分化,能产生自主节律搏动的拟胚体比例显著降低,同时心肌特异性标记物c Tn T表达随剂量的增加而显著降低。在具有自主节律性的拟胚体中,钙离子通路的相关基因表达受到影响。结论:推测TCE通过降低成熟心肌的比例,以及影响心肌细胞中钙离子通道相关基因表达来共同导致心脏发育异常。     

血管紧张素Ⅱ在胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用

为检测血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AⅡ）对小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）向心肌细胞方向分化的作用,采用10-4 mol/L维生素C诱导小鼠R1胚胎干细胞分化为心肌细胞. Western印记检测胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中表达血管紧张素Ⅱ1 型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R).诱导分化期间用1 μmol/L AⅡ刺激胚胎干细胞,计数搏动拟胚体的比例;诱导分化第14 d用real-time RT-PCR 和Western 印记检测心肌标志物的表达确定其作用. 结果显示,与对照组相比,1 μmol/L AⅡ处理组可显著增加搏动拟胚体的比例,上调心肌标志物mRNA的表达. 预先用1 μmol/L洛沙坦处理1 h后可显著阻碍这种上调作用. 本实验结果表明,AⅡ通过AT1R可促进小鼠R1胚胎干细胞向心肌细胞分化.     

从早期胚胎多能干细胞生成的嵌合鼠

本文利用囊胚注射法将小鼠胚胎多能干细胞－ＣＣＥ细胞注射到发育３天半的昆明和Ｃ３７ＢＬ／６Ｊ小鼠受体囊胚腔内,经假孕鼠借腹怀胎,获３只ＣＣＥ细胞毛色嵌合鼠。实验共注射胚胎６５４个,经培养其恢复成活率７３．８％,胚胎移植后,假母受孕率及产仔率分别为３２．９％和５３％。在所获３只嵌合鼠中,２只为ＣＣＥ－昆明毛色嵌合鼠,１只为ＣＣＥ－Ｃ３７ＢＬ／６Ｊ毛色嵌合鼠,这是国内首次利用胚胎多能干细胞获得嵌合鼠。为     

雷帕霉素促进胚胎干细胞向心肌细胞分化

目的 雷帕霉素是小分子mTOR抑制剂,可激活细胞自噬.本研究检测了雷帕霉素对胚胎干细胞(ES细胞)向心肌分化的影响.方法 采用拟胚体(embryoid body,EB)加抗坏血酸诱导ES细胞向心肌分化.悬浮诱导阶段添加自噬激动剂雷帕霉素或抑制剂羟氯喹,通过免疫印迹检测LC3蛋白剪切以监测细胞自噬水平,通过检测EB球的心...     

锌对染汞孕鼠胚胎毒性的影响及其机理研究

目的:探讨妊娠期补锌对染汞孕鼠胚胎发育毒性的保护作用.方法:建立孕鼠动物模型,应用不同剂量的氯化甲基汞(0.01、0.05、2.00mg/kg·d)及5.00mg/kg·d硫酸锌于妊娠6～9天连续灌胃.蒸馏水灌胃为对照组,观察孕鼠及胚胎的汞毒性及硫酸锌的影响.应用ICP-MS法测定各组胎鼠脑组织汞含量;Western blot法检测各组胎鼠脑bcl-2蛋白表达情况;TUNEL法检测各组胎鼠脑细胞凋亡情况.结果:各组均未发现死胎、吸收胎及畸形胎;0.01、0.05mg/kg·d氯化甲基汞对孕鼠及胎鼠生长发育没有明显的抑制作用;2.00mg/kg·d氯化甲基汞可以明显抑制孕鼠体重增长及胎鼠身长、体重及尾长的增长(P＜0.05),但对孕鼠产仔数、胎窝总重及胎盘总重没有明显的影响,0.05mg/kg·d、2.00mg/kg·d 氯化甲基汞组胎鼠脑组织汞含量较对照组明显升高(P＜0.05),bcl一2蛋白表达明显下降(P＜0.05),脑细胞凋亡较对照组明显升高(P＜0.05);应用硫酸锌预处理后,氯化甲基汞对孕鼠及胚胎的毒性作用明显降低(P＜0.05),胎鼠脑组织汞含量较染汞组明显降低(P＜0.05),bcl-2蛋白表达明显升高(P＜0.05),胎鼠脑细胞凋亡明显降低(P＜0.05).结论:孕期补锌可以降低氯化甲基汞对孕鼠胚胎的毒性作用,其机制与锌通过升高bel-2蛋白的表达而抑制细胞凋亡有关.     

培养于生物降解支架膜内的胚胎干细胞可修复小鼠的梗塞心肌

我们以往的研究表明,直接在心肌梗塞（myocardial infarction,MI）动物的心脏缺血区注射胚胎干细胞（embryonic stemceils,ESCs）可以提高其心肌功能,干细胞组织工程学可以使组织再生、修复。本研究旨在观察将ESCs接种到生物降解膜内并移植到梗塞部位的效果。通过结扎小鼠左冠状动脉制作MI模型,将培养3d的带有小鼠ESCs的聚羟基乙酸膜（polyglycolicacid,PGA）移植到心肌缺血及边缘区表面。实验小鼠分成4组：假手术组、MI组、MI＋PGA组、MI＋ESC组,移植操作8周后检测血流动力学和心肌功能。MI组的血压和左心室功能显著降低。与MI组和MI＋PGA组相比,MI＋ESC组的血压和心室功能显著改善,存活率也显著增高,在梗塞区检测到GFP阳性组织,表明ESCs存活,并可能有心肌再生。以上结果表明,移植生物降解膜内的ESCs可修复小鼠梗塞区心肌细胞并提高心脏功能。将ESCs和生物降解材料联合运用可能为修复受损心脏提供一个新的治疗方法。     

干细胞来源外泌体在心肌损伤修复中的作用

目前普遍认为干细胞在心肌损伤修复中的旁分泌作用是其发挥疗效的重要途径之一。外泌体是旁分泌的重要介质,是由细胞分泌的具有磷脂双分子层结构的囊性小泡,可以转运蛋白质、脂质和核酸分子到受体细胞,介导生理和病理条件下细胞间通讯。多种干细胞,包括胚胎干细胞、诱导多能干细胞、心脏祖细胞、间充质干细胞和心肌球细胞等来源的外泌体对受损心脏的保护作用已被广泛证实,其在心肌损伤修复中的治疗效果备受关注。本综述总结了目前关于不同干细胞来源的外泌体在心肌损伤修复研究中的最新进展,包括治疗潜力和作用机制。     

胚胎干细胞在体外模拟心肌生长环境中向心肌分化

目的:探讨获得大量成熟同质有功能的心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)的方法.方法:胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)经悬滴培养法形成拟胚体(embryoid bodies,EBs),将EBs用抗坏血酸处理后与天然心肌细胞共培养诱导ESCs的分化,采用免疫组化、流式细胞技术、RT-PCR、超微分析等方法分析分化细胞(ESC-derived CMs,ESCMs)的结构和功能.结果:共培养组,常规组和对照组中有(90.1±3.40)%,(29.6±6.03)%和(20.1±3.82)%的EBs表现节律性收缩,差异有统计学意义(P＜0.05).在体外模拟的心脏微环境中,不但跳动EBs的数目明显增加,且单个跳动EBs中含有功能CMs的百分比也明显增加.兴奋收缩的自律性能维持更长时间,在后期分化得到的有功能ESCMs在细胞形态上接近于天然的心肌细胞.结论:心脏微环境是促使ESCs特定地分化为CMs的关键因素,抗坏血酸处理和共培养诱导策略可使ESCs定向分化为CMs.     

针刺对缺血缺氧性脑瘫乳鼠的治疗作用

目的:探讨针刺治疗促进脑瘫乳鼠运动功能恢复的作用机制。方法:采用改良的缺氧缺血性脑病(HIE)造模方法建立脑瘫乳鼠模型,将60只乳鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组(n=20),观察各组乳鼠运动功能情况并评分,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量,检测大脑病变区域的突触素(SYP)和神经生长相关蛋白(GAP-43)的表达。结果:针刺治疗组运动功能评分较模型组运动功能评分显著增加(P0.05);血清SOD活性较模型组显著增加(P0.01);血清MDA含量较模型组MDA含量明显降低(P0.01);脑组织SYP和GAP-43的表达较模型组SYP和GAP-43活性的表达明显增加(P0.05)。结论:针刺疗法能通过降低MDA的活性、升高SOD的含量、进一步上调病变部位的大脑皮质区的SYP及GAP-43的表达从而改善缺血缺氧性脑瘫乳鼠的运动功能。     

孕康口服液对胚胎着床障碍大鼠的安胎作用

目的：通过建立胚胎着床障碍致流产模型,探讨已上市中成药孕康口服液的安胎作用。方法：将妊娠大鼠分为6组：正常对照组（NC）,模型组（MG）,地屈孕酮组（DT）,孕康口服液低、中、高3个剂量组（YK-L、YK-M、YK-H）,每组11只。自妊娠第1日起,每天灌胃给药,DT组灌胃剂量为3.02 mg/kg,孕康口服液各组灌胃剂量分别为4、6、9 ml/kg,NC组、MG组给予等体积的纯化水,连续10 d。妊娠第3日,除NC组外,其余各组按5 mg/kg体质量颈背部皮下注射米非司酮造成胚胎着床障碍模型。妊娠第10日,各组腹主动脉采血,酶联免疫法测定血清卵泡刺激素（FSH）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素（IL-4）;取连胎子宫观察胚胎着床数目,HE染色观察子宫病理变化。结果：与NC组相比,MG组胚胎着床数目和血清FSH、IL-4水平均显著降低（P<0.05,0.01）,并出现子宫腺上皮增生、腺腔内炎性细胞浸润等病理变化。与MG组相比,YK-M、YK-H组均能显著性升高胚胎着床数目和血清FSH、IL-4水平（P<0.05,0.01）;孕康口服液各剂量组均能明显改善模型大鼠子宫腺上皮增生、腺腔内炎性细胞浸润等病理变化。各组间血清IFN-γ水平无明显差异。结论：孕康口服液可能通过升高胚胎着床障碍大鼠血清性激素FSH和免疫细胞因子IL-4水平,改善子宫内膜病理变化,提高胚胎着床数目,从而发挥安胎作用。     

离体缺血再灌注鼠心肌钙离子的变化

用液体闪烁计数法测定离体再灌注鼠心肌肌质网(SR)和线粒体(Mit)内 ⁴⁵Ca²⁺放射性强度(cpm),比较能量制剂ATP-MgCl₂,活性氧自由基清除剂SOD和钙阻滞剂Verapamil对离体缺血再灌注鼠心肌细胞SR和Mit钙离子浓度的影响.结果表明,SR内ATp-MgCl₂,SOD和Verapamil组 ⁴⁵Ca²⁺的cpm均高于对照组(P<0.0l或P<0.05),而Mit内均低于对照组(P<0.01).此三种药均能提高离体大鼠心肌细胞内SR ⁴⁵Ca²⁺和降低Mit ⁴⁵Ca²⁺积聚,从而保护了心肌细胞,防止缺血再灌注损伤.     

胚胎干细胞及诱导多能干细胞向心肌细胞分化和调控的研究进展

胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）具有自我更新、无限增殖和多向分化的特性,包括分化成心脏组织的多种类型细胞。经体细胞重编程产生的诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPS）也被证明有类似胚胎干细胞的特性。但这些多能干细胞向心肌细胞自发分化的效率非常低,因此,如何有效地诱导这些多能干细胞向心肌细胞的定向分化对深入认识心肌发生发育的关键调控机制和实现其在药物发现和再生医学,如心肌梗塞、心力衰竭的细胞治疗以及心肌组织工程中的应用均具有非常重要的意义。该文重点综述了近年来胚胎干细胞及诱导多能干细胞向心肌细胞分化和调控的研究进展,并探讨了这一研究领域亟待解决的关键问题和这些多能干细胞的应用前景。