羟基环氧素：一类新的具有生物活性的花生烯酸代谢物

羟基环氧素是继前列腺素和白三烯等新发现的一类具有广泛生物活性的花生烯酸经１２－脂氧酶的代谢产物，其分子结构中含有１个羟基、１个环氧基和３－４个非共轭双键。已报道的这类物质有：ｈｅｐｏｘｉｌｉｎ Ａ３、Ａ４及ｈｅｐｏｘｉｌｉｎ Ｂ３，Ｂ４。其主要生物活性有：对白细胞的趋化活性及中性白细胞的作用；促胰岛素的分泌；影响体内Ｃａ＾２＋的透膜速度；对中枢神经的调节作用等。     

杀菌/通透性增加蛋白基因的克隆及在CH0细胞中的表达

从一名健康中国人外周血白细胞中克隆出杀菌/通透性增加蛋白(BPI)基因,全长1452bp,编码27个氨基酸的信号肽和456个氨基酸成熟蛋白.序列比较发现,此序列与国外发表的序列有6个核苷酸的差异,编码蛋白有4个氨基酸的差异.构建真核表达质粒,在CHO细胞中实现BPI基因的稳定表达.对重组蛋白初步纯化后进行杀菌实验,结果表明重组蛋白具有与天然蛋白同样的生物活性.     

蕈状芽孢杆菌代谢产物增强小鼠免疫力活性物质的分离、鉴定

本文的目的是对蕈状芽孢杆菌代谢产物中增强小鼠免疫力的物质进行分离、鉴定和免疫增强作用测定。在生物活性追踪的指导下, 本文通过大孔吸附树脂吸附、硅胶柱分离和葡聚糖凝胶柱纯化, 对蕈状芽孢杆菌代谢产物中增强小鼠免疫力的活性成分进行了分离, 得到了具有较强免疫增强作用的化合物(标记为M), 并对化合物M进行了波谱测定, 确定化合物M为环(脯氨酸-甘氨酸)二肽(C7H10O2N2)。以生理盐水为对照, 通过腹腔注射, 对小鼠进行了SOD活性、白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性3个指标测定。结果显示, 在第14天时, SOD活性和白细胞吞噬活性达到了最高值, 且同对照组相比有显著提高; 在第21天时, 白细胞杀菌活性达到了最高值, 且同对照组相比有显著提高。以上结果表明, 蕈状芽孢杆菌代谢产物中的环(脯氨酸-甘氨酸)二肽能够显著增强小鼠免疫力。     

猪IL-18在乳酸乳球菌中的表达及其生物活性的检测

为了在乳酸乳球菌中分泌表达具有生物活性的猪IL-18蛋白,并检测其生物活性,故通过分离猪外周血单核淋巴细胞(PBMC),以其为模板,采用RT-PCR方法扩增猪白细胞介素18(pIL-18)基因,将目的基因与乳酸乳球菌表达载体pAMJ399进行连接,并电转化至乳酸乳球菌MG1363中,通过SDS-PAGE和Western blotting分析检测目的蛋白的表达,并通过脾淋巴细胞增殖试验和细胞病变抑制法对pIL-18的生物活性进行检测。Western blotting分析检测结果与生物活性检测结果显示,在重组菌pAMJ399-pIL18/MG1363的上清和菌体沉淀中19 kDa处均出现pIL-18的特异蛋白反应带,且分泌表达的pIL-18蛋白能明显促进猪脾淋巴细胞的增殖,并对病毒增殖有明显的抑制作用。以上结果表明pIL-18可在乳酸乳球菌分泌表达,且表达产物具有良好的生物活性。     

杀菌通透性增加蛋白基因的克隆及在CHO细胞中的表达

从一名健康中国人外周血白细胞中克隆出杀菌 通透性增加蛋白 (BPI)基因 ,全长1 45 2bp,编码 2 7个氨基酸的信号肽和 45 6个氨基酸成熟蛋白。序列比较发现 ,此序列与国外发表的序列有 6个核苷酸的差异 ,编码蛋白有 4个氨基酸的差异。构建真核表达质粒 ,在CHO细胞中实现BPI基因的稳定表达。对重组蛋白初步纯化后进行杀菌实验 ,结果表明重组蛋白具有与天然蛋白同样的生物活性。     

重组蛋白包涵体的复性研究

重组蛋白在大肠杆菌中的高表达往往形成不可溶、无生物活性的包涵体,需经过变性溶解后,在适当条件下复性形成天然的构象,才可恢复其生物活性．变复性实验是建立在对蛋白质体外折叠机制的了解的基础上．根据近年来对蛋白质折叠机制的认识和重组蛋白包涵体在复性方面的主要进展,论述以下3个方面的内容：1)蛋白质在细胞内的折叠机制;2)蛋白质体外折叠机制;3)蛋白质复性的策略和方法．     

人组织性纤溶酶原激活物衍生物在大肠杆菌硫氧化还原蛋白融合表达系统中的表达

目的:克隆含tPA中355个氨基酸密码子(1-3和176-527氨基酸)的cDNA序列(tPA355),将其在大肠杆菌融合蛋白表达系统中表达,并在体外复性使其具有激活纤溶酶原的生物活性。方法:采用RT-PCR技术从人黑色素瘤细胞Bowes中克隆出tPA355cDNA,然后在pET32a(+)BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中表达,将表达出的融合蛋白Trx-tPA355(Thioredoxin,Trx)包涵体在体外进行变性、复性和纯化以使其具有激活纤溶酶原的生物活性。结果:测序结果表明本研究克隆的编码tPA中355个氨基酸密码子的cDNA序列与美国专利(公开号:5,587,159)中对应的序列完全一致,将其在pET32a(+)/BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中表达可获得稳定表达的融合蛋白Trx-tPA355包涵体,该包涵体占菌体总蛋白的30%左右,此融合蛋白经变性、复性后具有激活纤溶酶原的生物活性。结论:含tPA中355个氨基酸密码子(1-3和176-527氨基酸)的cDNA在大肠杆菌Trx融合蛋白表达系统中可获得稳定表达,表达的融合蛋白产物在体外经变性、复性后具有激活纤溶酶原的生物活性。     

白细胞介素-6与肝纤维化的关系

肝纤维化是肝纤维结缔组织异常增殖的一个重要病理变化,也是形成肝硬化的必要条件。白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是一种具有多效生物活性的炎性细胞因子,其在肝纤维化形成过程中起着关键性的作用。大量研究表明IL-6与肝纤维化的发生发展密切相关。本文就IL-6与病毒、药物、毒物、肥胖、酒精、胆汁淤积性及自身免疫等原因所致肝纤维化的相关性做简要阐述,以期能为肝纤维化的诊断及其预后提供一种新的非侵入性标志物。     

藜芦杀虫剂

藜芦(Veratrum)系百合科(Liliaceae)植物,其制剂可用来治疗循环系统紊乱及杀虫剂。藜芦的生物活性主要归功于其独特的C—正—D—高甾化合生物碱结构。其生物碱主要是高度羟基化了的酯类物,并在A、B两个环之间有一个半缩醛桥。对于苍蝇,芳香酯1比脂族酯2更具有毒性。而对于马利筋虫,效果却恰恰相反。     

融合蛋白pIL6-IL2在E.coli中的表达及活性鉴定

白细胞介素 2 (interleukin 2 ,IL-2 )与白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)能分别刺激T淋巴细胞增殖与B淋巴细胞分泌免疫球蛋白 ,从而促进动物机体的细胞免疫与体液免疫 ;另外IL2与IL6在发挥生物学活性时还有相互协同作用。因此 ,将去除信号肽的猪白细胞介素 6(pIL-6)与猪白细胞介素 2 (pIL-2 )cDNAs序列通过一段Linker相连 ,克隆到E .coli表达载体pPET-2 8a中。该融合蛋白IL6-IL2在E .coli表达菌BL2 1 (DE3)中获得成功表达 ,SDS-PAGE分析分子量约为40kDa ,表达量达到总菌体的 66.26%。用IL6依赖的B9细胞与IL2依赖的CTLL细胞增殖试验进行融合蛋白IL6 IL2的生物活性检测 ,其活性可分别达到 0.8× 10³U /mg和 6.4× 10³ U/mg。     

人基因组的结构(续)

A.干扰素 已发现有三类主要的人干扰素,即白细胞干扰素(IFN-α)、成纤维细胞干扰素(IFN-β)和免疫干扰素(IFN-γ),(Stewart et al,1980)。按其生化和抗原特性对它们进行分类,人的所有三个干扰索的结构基因已经被分离,而且用以说明大基因组中这些家族的特点,白细胞干扰素家族至少有10个分开的基因。     

IL-17与肺部感染性疾病的相关性研究进展

白细胞介入17(Interleukin17,IL-17)是CD4+的T细胞亚群Th17细胞所产生的一种炎症细胞因子,由于其具有强大的募集粒细胞以及促进各种炎症细胞因子释放的作用,其与哮喘、肺部感染等疾病有密切相关性,其在肺部感染疾病中发挥重要作用,如:IL-17在气道炎症疾病中的机制等,鉴于IL-17的生物活性较多,而参加各种肺部疾病有明显的相关性.现就IL-17与肺部感染性疾病的相关性做一综述.     

红色诺卡氏菌的生物活性

为了考察红色诺卡氏菌菌体(NC)的生物活性, 通过一定浓度的NC对小鼠灌胃给药, 检测其毒性及对免疫器官、巨噬细胞(MΦ)吞噬功能的影响和对肉瘤S180抑制作用。结果表明小鼠口服NC, LD50>10 g/kg; NC明显增加小鼠胸腺脾脏重量、提升白细胞数量和提高小鼠MΦ的吞噬活性; 对小鼠腹腔MΦ具有明显的激活作用, 激活了的MΦ能增强抑杀白色念珠菌作用, 正常的小鼠MΦ也有一定的杀菌作用, 两者差异显著; 对小鼠S180腹水型转实体瘤具有明显的抑制作用。由此得出的结论是, NC毒性低, 能显著增强机体     

地胆草属药用植物研究进展

菊科地胆草属植物被广泛用于多个国家或地区的传统医药中,该属中的地胆草(Elephantopus scaber)具有清热、凉血、利湿的功效;我国多个民族也用来治疗感冒、肾炎、肝炎以及虫蛇咬伤等多种伤病。该属植物含有多种化学成分,按结构类型主要有倍半萜烯内酯、三萜、甾体、黄酮等化合物。现代药理研究证明该属药用植物粗提物及单体具有抗菌消炎、抗病毒、抗原虫以及抗肿瘤等多种生物活性。本文系统综述了该属药用植物传统知识、化学成分及生物活性的研究进展,可为该属植物的进一步开发利用提供参考。     

深海来源真菌次级代谢产物研究进展

深海环境复杂多样,微生物为了适应这种极端环境往往会形成独特的代谢途径,进而产生一些具有某种生理活性的结构新颖的次级代谢产物。真菌作为深海环境中的重要微生物类群之一,因其次级代谢产物出新率高、生物活性显著,近年来成为海洋天然产物研究的焦点,倍受研究者关注。本文综述了2004-2017年间发表的217个深海(50 m)真菌来源的新颖次级代谢产物,其来源菌株广泛分布在真菌18个属,主要集中在Penicillium属(30%)、Aspergillus属(24%)、Spiromastix属(13%)和Acremonium属(7%);其结构类型包括聚酮类(99个)、生物碱类(54个)、萜类(50个)、肽类(11个)、其他类(3个);活性研究主要集中在细胞毒性、抗菌、抗病毒、抗污损等方面。     

细胞松弛素D用于鉴别正常细胞与肿瘤细胞的初步探讨

细胞松弛素(Cytochalasin)是一类真菌的代谢产物,迄今已发现有十余种。由于它们具有广泛的细胞生物学效应,颇为人们所重视。在殊多的生物活性中,细胞松弛素B(Cytochalasin B,简称CB)可诱发恶性细胞形成多核细胞,而不诱发正常细胞形成多核细胞这一特     

荚迷属植物化学成分及生物活性研究进展

不少荚迷属植物有悠久的药用历史,从该属植物中分离到的化学成分有二萜、三萜、环烯醚萜苷、黄酮类、木脂素及酚苷.二萜类化合物主要是vibsane型化合物,某些具有生物活性;三萜类化合物主要是齐墩果烷型和重排达玛烷型;环烯迷醚萜苷类其糖苷的连接位置主要在环烯迷醚的C11位上,C1位连有异戊烯基.生物活性研究发现一些提取物具有抗氧化作用,对A549、HT-29和PC-3和NUGC癌细胞有毒性.本文对国内外有.关荚迷属植物化学成分和生物活性的研究作一综述,为开发利用荚迷属植物资源提供科学依据.     

雷公藤二萜类化合物精细立体结构研究

雷公藤二萜内酯类化合物在结构上有一定的相似性:它们均含有3个六元环、1个五元内酯环和1～3个二元氧环,并且具有多种生物活性。本文选择了7个具有代表性的雷公藤二萜内酯化合物并通过X衍射分析获得其三维结构数据,以已有的药理实验数据为基础,对其精细立体结构变化和生物活性关系进行了探讨。研究结果表明:雷公藤萜内酯类化合物中的A、B、C三个六元环是其活性骨架的几何依托;18位上的羰基和7～8位上的三元氧环是其活性的可能结合部位;而该类化合物的活性部位则集中在C环的取代位置上;D环不是该类化合物具有生物活性的必需骨架部分。     

雌马酚的生物活性和临床应用

雌马酚是大豆异黄酮(SI)的主要组分之一——大豆素(Dai)的代谢产物。雌马酚较其原型具有更为有效的生物学作用,虽其作用及机制还存在争议,但很多研究表明雌马酚的生物学作用以及在适用人群显然都优于SI,并受到普遍关注。研究和开发雌马酚的生物活性,在多种常见慢性病的预防与控制中有重要的理论和实际意义。     

芸香精油的化学成分和杀虫活性初探

生物活性筛选试验表明,芸香科植物芸香(Ruta graveolens Linn.)全草精油对储粮害虫具有较强的生物活性。在0.1％(W/W)的用药量下,对赤拟谷盗(Tribolium castaneumLinn.)和谷蠢(Rhizopertha dominica Fabricius)的种群繁殖抑制率均达到了100％,对赤谷盗成虫还具有较强的熏蒸毒杀作用。采用GC—MS方法分析了芸香精油的化学成分,共检出了64个成分,鉴定出其中39个成分,占精油总量的90.04％。其主要成分为2-十一酮、2-壬酮和乙酸-2-壬醇酯,相对百分含量分别为36.82％、24.12％和16.71％。