口腔厌氧螺旋体培养条件的研究

口腔厌氧螺旋体的分离培养在国内尚属还未解决的问题,本研究对培养口腔厌氧螺旋体的培养基,培养条件及与梭形杆菌的共生关系进行了探索,制备出适宜于口腔各类厌氧螺旋体生长的“螺旋体大豆消化液选择培养基”(简称SSSM),使用本培养基从40例青少年牙周炎患者牙周袋分泌物标本分离出小齿密螺旋体19株,大齿密螺旋体4株,疏螺旋体4株,另分离出梭形杆菌21株,其结果显示出患者牙周袋及健康人龈沟标本中厌氧螺旋体及梭形杆菌培养阳性率二者之间有高度显著性差异(P<0.001),进一步揭示出牙周炎与口腔厌氧螺旋体之间关系密切。并对分离出的菌株做了常用抗菌素的药敏试验。     

一种嗜热厌氧纤维素降解细菌的分离纯化方法

根据纤维素降解细菌对不溶性纤维素底部的粘附作用,利用Ｈｕｎｇａｔｅ厌氧操作技术直接以不溶性纤维素粉为基质进行滚管,分离和纯化获得嗜热厌氧纤维素降解细菌。     

一种分离培养和观察微生物的简易方法

本文介绍了一种简易的分离、培养和观察微生物的方法（双载片法）,适用于好氧菌及耐氧性厌氧菌。试验表明,此法的优点是：适于连续地观察和研究微生物的个体生长,了解其生活史;能快速简便地测定微生物的死亡率;能有效地分离纯种;为耐氧性厌氧菌的研究提供了一种便利的方法。     

一种简便的小鼠精原干细胞分离培养方法

采用一步酶消化法分离小鼠精原干细胞,比较α-MEM、DMEM培养基对体外培养的精原干细胞生长状态的影响,对精原干细胞集落进行形态观察、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色和免疫组化鉴定,并诱导精原干细胞向精子细胞分化。结果显示,以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,用α-MEM培养的精原干细胞集落较大且呈葡萄串状或念珠状,细胞状态较好;小鼠精原干细胞集落的AKP染色阳性呈紫红色;在红色荧光下精原干细胞集落的Oct-4核蛋白表达为阳性、膜蛋白c-Kit、β_1-integrin和Gfrα-1表达为阳性;精原干细胞经维甲酸(all-trans-retinoic-acid,RA)诱导可初步分化成精子样细胞。因此,采用一步酶消化法能够分离小鼠精原干细胞,α-MEM更适合小鼠精原干细胞体外培养。     

一种有效地提高银杉人工菌根苗诱导率的方法

 银杉（Cathaya argyrophylla）是一种极其珍稀的濒危松科植物。该研究建立了一种有效的银杉人工菌根诱导技术。通过将银杉种子播种于琼脂培养基7 d后,切除1/5～1/3的 种皮以及胚乳,从而使银杉种子的发芽率达到60％以上;同时筛选出既适合外生菌根菌土生空团菌（Cenococcum geophilum）平铺扩展生长的要求,又能满足银杉幼苗生长的培养基 RM, 使银杉的侧根能最大程度地与菌丝接触,确保了菌根的诱导率;通过紫外线照射加70％酒精 或0.05%NaOCl的表面消毒的双重处理,使不能高压灭菌的容器达到表面消毒效果,同时验证了用该灭菌法既能达到完全的灭菌效果又不会对植物的生长产生不良影响,而且银杉小苗的菌根形成率达到87.5%。该方法对于银杉的菌根学研究以及其它基础研究具有实际应用价值     

一种简单的人脐带间充质干细胞分离培养方法

目的 建立一种简单的人脐带间充质干细胞分离培养方法.方法 取新鲜脐带,剪成5 cm长的小段,直接剪碎为糊状,加入含10％胎牛血清的DMEM/F12在培养瓶中培养,光学显微镜下观察细胞的生长特征,运用流式细胞仪检测分析细胞的抗原标志表达,并检测其体外多向分化潜能.结果 运用不剥离血管组织、不用酶消化的组织贴块培养法可以从...     

一种简易分离胞二磷胆碱的方法

胞嘧啶核苷二磷酸胆碱(简称胞二磷胆碱)是磷脂合成代谢的重要中间体,实验室利用这一核苷酸衍生物研究磷脂代谢。在医药上,胞二磷胆碱作为生化药物,治疗脑外伤、脑震荡后遗症、神经官能症、脂肪肝等疾病,效果良好。用合成方法制备胞二磷胆碱时,以往的分离方法     

厌氧培养皿及厌氧培养管的临床应用——对传统的厌氧菌分离培养及鉴定方法的简化

利用我们研制的厌氧培养皿及管,共检验了39份牙髓炎及牙周炎标本,分离出厌氧菌59株,标本中厌氧菌分离的阳性率为100％。其中类杆菌28株,消化链球菌9株,消化球菌7株,韦荣氏球菌5株,真杆菌2株,梭形杆菌8株。在类杆菌中产黑素类杆菌21株,占类杆菌总数的75％。结果表明使用厌氧培养皿及管研究厌氧菌简便、有效、经济,适于基层单位应用。     

一种从感染的培养细胞中分离细菌RNA的方法

病原菌全基因组表达谱研究是阐明其致病机理的必要的基础 ,已经成为当前生命科学领域的热点和重点 ;然而由于难于从感染的组织中快速固定并分离细菌RNA ,从而极大的制约了该研究的进展。介绍一种从感染的细胞中分离细菌RNA的方法———冷酸酚法 ,其主要特点是 :(1)使用可以破碎真核细胞但不影响细菌细胞完整性的SDS浓度 ,实现了从感染的细胞中快速分离完整的细菌 ,减少了宿主细胞RNA的污染 ;(2 )在将细菌从细胞中分离的同时即利用苯酚 乙醇混合液将其总RNA快速固定 ,既减少了RNA的降解 ,又最大限度地保持了细菌在哺乳细胞内原有的表达模式 ;(3)可以从 10 8个菌体中提取到至少 30 μg的总RNA ,足够用于反转录等其他研究。该方法将为利用DNAMicroarray技术进行的病原菌表达谱研究提供有益的借鉴。     

一种青虾的培养方法

一种青虾的培养方法林荣坤（福建省连城县第一中学,３６６２００）九年义务教育《生物》第一册（下）ｇ３９—４０页介绍了沼虾（又名青虾）的生活环境、结构和功能。如果在讲解这部分内容时给每位学生分发一只青虾,让他们边观察过理解。这对提高课堂教学效率和激发学生...     

日本弓背蚁消化道厌氧细菌的分离培养

【目的】采用自行设置的厌氧装置,分离培养日本弓背蚁Camponotus japonicus消化道厌氧细菌。【方法】改进了一种简易的厌氧装置——平皿夹层法,利用4种培养基对日本弓背蚁消化道内厌氧或兼性厌氧菌进行分离培养。【结果】从日本弓背蚁消化道共分离到22个不同的菌株,隶属于厚壁菌门、放线菌门和变形菌门3大类群的17个属;4种培养基分离到的细菌种类存在明显差异,选择性较强,其中从LB和牛肉膏蛋白胨培养基上分离到的细菌种类较多,分别为10种和8种;从MRS和LBS培养基上分离到的细菌较少,分别为3种和1种;大工蚁和小工蚁的消化道细菌组成也存在差异,可能与其在巢群中担负的功能和职责有关,还有待于进一步研究分析。【结论】利用平皿夹层法可以成功分离到日本弓背蚁肠道的厌氧细菌,该种方法对于其他昆虫消化道厌氧菌的分离培养具有一定的参考价值。     

一种嗜热厌氧纤维素降解细菌的分离纯化方法*

根据纤维素降解细菌对不溶性纤维素底物的粘附作用,利用Hungate厌氧操作技术直接以不溶性纤维素粉为基质进行滚管,分离和纯化获得嗜热厌氧纤维素降解细菌。     

介绍一种从蔬菜中培养和分离变形虫的简易方法

变形虫是寄生虫学及生物学教学中不可缺少的实验材料,为了让学生在实验中随时能见到变形虫的运动,二十多年来,我们花了不少人力物力,使用过不同方法培养变形虫,但都未能获得满意结果。近年来,经过反复实践,我们从小白菜、蕹菜、苋菜、莴苣叶及豆芽、冬瓜等十五种蔬菜中培养出自由生活的变形虫,并进行了分离,得到了变形虫的纯培养。较以往报导的方法更为简便易行,所得的纯培养变形虫密度高而稳定,可以长期保种,便于随时为教学提供变形虫滋养体的活标本。一、培养材料及用具:洁净的小烧杯、载玻片、冷开水、米粉及蔬菜。二、培养方法:1.原培养…     

厌氧菌的两种简易培养方法——铁丝圈厌氧法与催化剂厌氧法

现在临床标本中的厌氧菌主要是革兰氏阴性杆菌、阳性球菌和阳性无芽孢杆菌等。为解决这些菌分离培养的难题,我们参考国外资料,发展出两种简单有效的厌氧培养法,现报告如下。一、铁丝圈厌氧法     

一种从培养细胞中分离高分子量DNA的有效方法

简便快速地分离高分子量DNA技术,无论对核酸分子生物学基础研究还是对重组DNA研究都是十分必需的。Blin和Stafford报道了从组织培养细胞中分离高分子量DNA的方法,此方法步骤繁杂,包括酚、氯仿等有毒溶剂抽提、RNase处理、较长时间反复透析乃至长时间氯化铯梯度离心等,所得样品经乙醇沉淀后往往溶解度偏低。但由于此法确能得到较高分子量的DNA制品,所以沿用至今。近年来由于     

Frankia内生菌的一种分离方法

1978年,Callaham等人用酶解法首次从香蕨木中分离出Frankia sp.CpI_1菌株,非豆科根瘤内生菌的分离工作进入了一个新阶段,形成纯培养的菌株日渐增加,分离方法日趋多样。目前,比较成功的方法有蔗糖梯度法、系列稀释法、选择培养法及四氧化锇法。我国杜大至,     

一种分离免疫血清球蛋白的简单方法

<正> 自从低温乙醇法发展将血浆分离成为五种主要成分以来,Cohn第6和第9法独特地在美国和世界许多地区用作分离供临床用白蛋白和免疫血清球蛋白(ISG)。虽然原始的分离流程已被修改,但随后的这些改良方法均遵循原Cohn法的相同步骤,按其溶解度的增加用一系列沉淀步骤沉淀各种蛋白质。即使白蛋白是唯一所要提取的产品,它总是最后从血浆乙醇混合物中被提取。结果白蛋白的产量低,由于涉及很多沉淀步骤,不可避免地发生载留或共沉。     

介绍一种植物染色质分离的方法

植物染色质分离的研究工作在国内目前开展得很少,这在植物细胞生物学和遗传学研究领域是一大缺憾.