一品红离体培养诱导体细胞胚的研究（简报）

一品红的嫩茎离体培养在附加不同浓度的２,４－Ｄ和６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,２．４Ｄ浓度为１．０～２．０ ｍｇ· Ｌ~（－１）的愈伤组织生长量最大。这些愈伤组织转移到ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ ｍｇ·Ｌ~（－１）＋ＮＡＡ０．１ ｍｇ·Ｌ~（－１）的分化培养基上后,产生了胚性愈伤组织,观察到大量不同时期体细胞胚。带有体细胞胚的愈伤组织进一步转移到无激素 ＭＳ培养基上,便发育成小植株。     

丁香（Syringa L.）种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究。结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50-60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氮酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长。低浓度（0.01mg·L^-1）BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳。     

向日葵幼胚培养中体细胞胚胎发生的观察

1.向日葵不同品种体细胞胚胎发生的情况不同。2.较高浓度的蔗糖有利于向日葵幼胚的体细胞胚胎发生。3.在同样条件下,2mm长的幼胚较其它时期的幼胚体细胞胚胎发生的频率高。4.在蔗糖浓度为17.5％并分别加入0.5—10.0ppm玉米素的Nitsch培养基中,向日葵幼胚产生体细胞胚胎发生的频率随着玉米素浓度的增高而增加。5. 2,4-D能使体细胞胚胎发生,但不能分化器官。6.切片观察表明:在含玉米素的培养基上,幼胚产生了胚性细胞团和胚状体。并多数发生于子叶与下胚轴的深层。胚性细胞团周围细胞退化,使其与周围组织之间形成间隙。     

影响水稻幼穗培养体细胞胚胎发生因素的研究

用水稻幼穗为外植体进行组织培养,研究了影响其体细胞胚胎发生的有关因素,建立了高频率体细胞胚胎发生的培养程序。结果表明不同基因型之间体细胞胚胎发生率的差异达到61．2％;生长素2,4－D对诱导水稻体细胞胚起重要的调控作用,细胞分裂素BA有一定的协同促进作用。干燥处理可提高愈伤组织体细胞胚胎发生率,愈伤组织含水量在60％～80％范围的培养效果较好;外源DNA溶液浸泡发育早期的心状体细胞胚．其进一步发育时异常胚的频率显著增加．成苗率降低。     

玉米雌穗离体培养诱导孤雌生殖结实

离体条件下,用１６种不同的玉米材料未授粉的雌穗进行整个直插或切段直插培养。培养在２８℃培养箱和室内散射光下,其培养基为：ＭＳ＋０．１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２ｍｇ／ＬＫＴ＋５００ｍｇ／ＬＬＨ＋４％蔗糖＋０．６％琼脂（ＰＨ５．８）和ＭＳ＋０．０５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２ｍｇ／ＬＫＴ＋４％蔗糖＋０．６％琼脂（ＰＨ５．８）。从未授粉的雌穗（成熟胚囊期）获得结实。这些种子萌发     

紫背天葵叶片培养体细胞胚状体发生的研究

SH液体培养基附加2,4－D（0．125mg/l),BA(0.25-0.5mg/l),CM(10%v/v)或CH（0．2%w/v),摇床培养,同一培养基中培养50天后,出现球形,心形,鱼雷,子叶胚,虽然胚状体和不定芽同样来源于叶片的表皮细胞,但它们之间有下列区别;体细胞胚状体发育有4个不同时期,而不定芽没有;球形胚形成后,能脱落分散在培养液中,芽始终和外植体连在一起;鱼雷－子叶胚有明显的苗端和根端之分,苗端有两片子叶,叶间是顶端分生组织,有原形成层结构,而不定芽仅有芽原基。     

不同品种小麦幼穗离体培养一步成全苗的研究

在三种不同培养基但相同的培养环境条件下,离体培养７个不同优良品种小麦的幼穗,其中在ＭＳ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基中,６个品种的小麦幼穗一步再生了全苗。出苗速度和出苗率随品种的不同而异。     

丁香(Syringa L.)种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究.结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50～60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氨酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长.低浓度(0.01mg·L^-1)BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳.     

籼稻幼穗细胞悬浮培养物的胚胎发生和植株再生

籼稻幼穗诱导的愈伤组织,培养在MS基本成分并附加1—7 mg/l 2,4-D和5％椰子汁的液体培养基中,得到胚性小细胞团。这些细胞的特征是:形状小而圆,细胞壁薄,细胞内为稠密的胞质所充满,没有或具小的液泡,具淀粉粒。把它们转移到含1 mg/l BA的琼脂培养基中,在扫描电镜下观察到球形、心形、梨形和成熟胚,两周后萌发成具根、芽的完整植株。10—14天龄的悬浮培养物具有较高的再生植株能力。     

陆地棉胚性愈伤组织的变异及高频胚胎发生

陆地棉（Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｌ．）胚性愈伤组织在两年多的继代培养过程中,由淡绿或灰色疏松状转变成灰黄色致密团块状,胚胎发生能力经历了一个由低到高再到低的过程。培养两年半后,从中分离出３种不同的愈伤组织系。第一种可产生大量的胚状体;第二种可产生少量胚状体;而第三种失去了胚胎发生能力。第一种团块颗粒小,后两种团块颗粒大。通过选择培养第一种愈伤组织系,建立了３ 个陆地棉栽培品种的高频体细胞胚胎发生系。染色体观察显示：其变异频率随愈伤组织培养代数的增加而升高;３ 种不同的愈伤组织系中,二倍体细胞的频率大小依次为：第一种＞ 第二种＞ 第三种。此外,第一种含有较多的超二倍体细胞,而后两种含较多亚二倍体细胞     

从棒头草(Polypogon fugax Nees ex Steud)幼穗培养获得体细胞胚和再生植株

棒头草幼穗在含2,4-D的MS培养基上诱导出了胚性、非胚性和中间型愈伤组织。根据形态、淀粉粒等指标可将组成这些愈伤组织的细胞分为三类。改变培养基中2,4-D的浓度,能诱导三类愈伤组织相互转变。从胚性愈伤组织中诱导形成了大量体细胞胚;体细胞胚是从单个原胚细胞直接发育而来,它们能正常萌发、再生小植株。这种再生能力现已保持了34个月。小植株移植在土壤中可以正常生长、分蘖、开花和结实。     

防风悬浮培养中的体细胞胚发生

将防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ （Ｔｕｒｃｚ．） Ｓｃｈｉｓｃｈｋ．）试管苗幼根接种在含０．５ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ 的ＭＳ培养基上诱导出愈伤组织,继而在含１０％ 椰子乳和０．５ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的ＭＳ液体培养基中振荡分散建立了细胞悬浮物。至胚性细胞团产生后转至无激素培养基中形成体细胞胚。观察了从单细胞直到球形胚发生的显微及超微结构的变化。在胚性细胞团阶段细胞内出现周质内质网,它的出现可能与细胞团向原胚过渡时的特殊代谢相联系。从单细胞至原胚各阶段细胞内均含有圆球体,到原胚时数量大增,而且其中央电子致密的基质变小变浅,周边部分扩大并更加透明,暗示圆球体在胚胎发生早期起着贮藏蛋白或脂蛋白的作用,后来消耗于原胚的建成而衍生为脂滴。球形胚阶段,在很多细胞的液泡中出现团块状的液泡蛋白。此外还观察到,悬浮培养时单细胞的聚集能促进体细胞胚的发生     

石刁柏组织培养中体细胞胚发生的组织细胞学观察

以石刁柏(Asparagus officinalis)无菌苗的嫩茎切段为外植体,在含有1 mg/LNAA+0.5 mg/L BA的MS培养基上可100%地被诱导形成愈伤组织,在此条件下可长期继代,将继代的愈伤组织转入含有2 mg/L 2,4-D 0.5mg/L NAA的MS培养基上后,约有70%的愈伤组织块转变为胚性愈伤组织,这些胚性愈伤组织在3,4-D浓度进一步降低为0.5mg/L的条件下发育形成体细胞胚。切片观察表明:这些胚性愈伤组织是从愈伤组织的表层或近表层产生的。这些细胞核大,多核仁,细胞质浓、染色深的胚性细胞中的一些单个细胞处于与邻近细胞隔离状态,细胞壁也明显加厚。这些单细胞开始分裂,第一次分裂多为不均等分裂,形成一个大的基细胞和一个小的顶细胞,进一步分裂形成三细胞、四细胞、五细胞和具胚柄的多细胞原胚。原胚发育形成球形胚、梨形胚、香蕉形胚,由于在胚的一侧细胞分裂旺盛形成单子叶突起,最后形成子叶胚。其发育过程类似于单子叶植物合子胚的发育过程。     

黄连体细胞胚胎发生的同步控制

本文采用物理、化学方法以及生长调节剂与过筛相结合的综合法,对黄连体细胞胚胎发生进行了同步控制。结果发现:综合法效果最理想,经2,4-D诱导形成体胚后,转到ABA+NAA的MS培养基上培养,然后分级过筛,再继代培养,可使体胚同步率明显增高,达到60—85%,体胚发育也正常。由此我们认为:体细胞胚胎发生同步控制的关键问题,是用植物生长调节剂的种类与浓度的配合使用来调节体胚发育,分级过筛只是一种获得体积大小一致的体胚的方法。     

糜子离体体细胞胚胎发生的组织学研究

利用组织学连续石腊切片的研究方法,观察了糜子组织培养中植株再生的过程,从而证明了植株再生是通过体细胞胚胎发生途径的。结果表明:(1) 糜子成熟胚培养首先从下胚轴及胚根区愈伤组织化;(2) 体细胞胚起源于下胚轴及胚根维管束周围愈伤组织中单个离散的胚性细胞;(3) 糜子离体体细胞胚有与典型禾谷类作物合子胚大致相似的发育过程。     

金花茶子叶在离体培养中胚状体的发生和小植株的形成

研究了金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)子叶在离体培养中体细胞胚状体发生的条件。在MS基本培养基中附加苄基嘌呤(BA)或苄基嘌呤与萘乙酸(NAA)组合,诱导了胚状体发生。组织学观察表明,胚状体起源于子叶的表皮细胞。在增添细胞分裂素和生长素的MS或改良B_5液体培养基里振荡培养,明显地促进了胚状体根的生长和茎的发育。胚状体在继代培养中能保持旺盛的再生能力。已得到两个繁殖率较高的胚状体无性系。在合适的条件下,胚状体能长成正常的小植株。