胃蛋白酶为什么不水解自身

胃蛋白是胃肠道中重要的蛋白水解酶,在蛋白质的消化中起重要的作用,而胃蛋白酶的化学本质也是蛋白质,为什么胃蛋白酶在水解食物蛋白质的同时不会将自身水解呢？对这个有趣的问题进行探讨与解释。     

木瓜蛋白酶对某些食物蛋白的消化作用

本文就木瓜蛋白酶对某些食物蛋白的消化作用进行了比较系统的研究。选择的食物有瘦猪肉、瘦羊肉、瘦牛肉、花生、黄豆、红豆、绿豆和眉豆等。结果表明,该酶对大部分食物消化的最适pH在7.0附近,但对花生消化的最适PH是8.0,这可能与花生蛋白在碱性溶液中有较大溶解度有关。而木瓜蛋白酶对这些食物蛋白消化的最适温度均为75℃,高于文献报道的活性稳定温度。此外,还测定了酶,食物不同比例的最适消化时间和它对各食物的表观消化率,显示该酶对肉类蛋白具有很高的消化效果,而对植物蛋白则较差。     

CP4-EPSPS蛋白的模拟胃肠液消化稳定性分析

CP4-EPSPS蛋白与草甘膦亲和力低,使草甘膦不能阻断生物体内的莽草酸合成途径,成功用于培育抗草甘膦转基因作物。[目的]为评价CP4-EPSPS蛋白的食用安全性,分析了CP4-EPSPS蛋白在模拟胃肠液消化中的稳定性研究。[方法]根据NCBI公布的基因序列信息,人工合成CP4-EPSPS基因并构建原核表达载体p ET-CP4,转化大肠杆菌菌株Transetta(DE3)并表达CP4-EPSPS蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化蛋白。根据国家标准建立体外模拟胃肠液消化体系,对照和样品蛋白均以5 g/L的浓度进行模拟胃液消化,以2 g/L的浓度进行模拟肠液消化。在消化0 s、15 s、2 min、30 min和60 min后分别进行取样,然后将其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,并进行Western Blot杂交分析。[结果]模拟胃肠液消化实验结果表明,CP4-EPSPS蛋白在模拟胃肠液中均在15 s内即被消化,SDS-PAGE与Western Blot杂交未检测到蛋白残留。[结论]说明CP4-EPSPS蛋白在胃肠液体系中极易被消化。     

AM79 EPSPS蛋白的体外模拟胃肠液消化稳定性研究

AM79 EPSPS基因是从草甘膦高度污染的土壤中克隆的、具有我国自主知识产权的一个新型抗草甘膦基因,在转基因玉米中过表达能显著提高转基因玉米的草甘膦抗性,具有重要应用价值。为了评价AM79 EPSPS蛋白的食用安全性,本研究参考中华人民共和国国家标准,开展了AM79 EPSPS蛋白的消化稳定性研究。将AM79 EPSPS基因构建到原核表达载体pET-30a上,在大肠杆菌中表达了分子量为48.3 kD的可溶性AM79 EPSPS蛋白。通过Ni-NTA亲和层析方法纯化了AM79 EPSPS蛋白用于体外模拟胃肠液实验。结果表明,AM79 EPSPS蛋白在模拟胃肠液中均在15 s内即被消化,SDS-PAGE和Western蛋白免疫印迹均未检测到蛋白残留,表明AM79 EPSPS蛋白在模拟胃肠液体系中极易被消化。     

Cx43 在调节胃肠运动障碍机制中的研究进展

胃肠运动功能障碍是许多胃肠道疾病及其他疾病的重要临床表现,其发病率高达胃肠道疾病的70%以上。缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)是细胞间隙连接通讯中最重要的间隙连接蛋白,对胃肠道动力的形成和调节起着关键性作用。中西医治疗胃肠道疾病临床疗效显著,但其起效的分子机制尚未阐释清楚。本文从Cx43的细胞间隙连接通讯的角度,对Cx43在调节胃肠运动障碍机制中的研究进展作一综述,为进一步探究中西医调节胃肠运动障碍的机制研究奠定基础。     

Cry1Ie蛋白的模拟胃肠液消化稳定性及热稳定性分析

Cry1Ie蛋白对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)具有高毒力,cry1Ie基因已经应用于转基因抗虫玉米的种质创制。为评价Cry1Ie蛋白的食用安全性,开展了Cry1Ie蛋白的消化及热稳定性研究。利用实验室已经构建的表达载体,在大肠杆菌中表达了分子量为81 k D的可溶性Cry1Ie蛋白,经过Ni-NTA亲和层析和Superdex-75分子筛层析获得纯度达91%蛋白。模拟消化液实验结果表明,Cry1Ie蛋白在模拟胃肠液中15 s内即被消化,SDS-PAGE未检测到蛋白残留。热稳定性实验中,Cry1Ie蛋白在玉米粉提取液中不稳定,100℃30 min内蛋白基本降解。对样品进行了生物活性测定发现,经模拟胃肠液消化处理和热处理后的Cry1Ie蛋白对亚洲玉米螟无杀虫活性。Cry1Ie蛋白在胃肠液系统中和热处理条件下均不稳定,并丧失了对亚洲玉米螟的杀虫活性。     

东北虎幼体消化系统蛋白水解酶的初步研究

蛋白水解酶在许多生命活动中是必需的物质(Vassalli and Pepper,1994)。蛋白质的酶解修饰(Xuet al.,1999)、细胞迁移、组织再生与修复、消化系统对蛋白质的消化等均与蛋白水解酶有关(Baimbridgeet al.,1992),且蛋白水解酶功能失调会导致许多疾病(Teichertet al.,1989)。东北虎(     

酶消化对肿瘤浸润淋巴细胞活力影响的研究

本文系统地研究了酶消化(胶原酶Ⅳ、胶原酶Ⅱ,透明质酸酶和胰蛋白酶)对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)活力、增殖力等影响,并用单个酶消化法与Rosenberg法比较。结果提示:胶原酶Ⅳ或胶原酶Ⅱ消化肿瘤组织块时对TIL细胞活力、增殖力损伤小;透明质酸酶与胰蛋白酶消化对TIL细胞活力,增殖力损伤大。在37℃,1h消化组与4℃,24h消化组对同一来源肿瘤组织酶消化配对比较中,结果提示同一酶4℃,24h消化比37℃1h消化对TIL细胞增殖力损伤小,与Rosenberg方法比较中也发现单一胶原酶消化比三酶联合消化影响小。配对各实验组TIL细胞~3H-TdR掺入率分析中,也反映了类似变化。本文经4℃,24h胶原酶Ⅳ消化后培养的TIL细胞在60天和75天仍对自身靶细胞有杀伤力。     

NIF3类超家族蛋白

NIF3(NGG1p interacting factor 3)类超家族蛋白是一个含有NIF3结构域的超家族,从细菌到哺乳动物存在着较高的保守性。编码该家族蛋白质的mRNA广泛存在于生物的各种组织中。该家族蛋白属于α/β蛋白,该类蛋白质通过自身形成二聚体或与其他蛋白质结合形成复合物发挥生物学功能。现已证明该家族蛋白多与基因的转录有关,在一些哺乳动物中还在神经分化中起关键作用。最近研究表明它还和一些人类疾病有关。虽然该家族蛋白数量众多,广泛存在,但多数为假想蛋白,对其相关功能的研究较少,被归属为"未知功能蛋白质"。也正是因为该家族蛋白数量众多,广泛存在,功能未知,它们已经引起了人们越来越大的研究兴趣。     

高原鼢鼠的消化对策

动物面临不同的生活环境及生活方式,往往采取不同的消化对策,而消化道结构在动物的消化对策中起关键作用。为进一步了解高原鼢鼠的生存对策,比较了高原鼢鼠与大白鼠消化道形态结构与食物摄入量、食物吸收量及食物消化率的差异。结果表明:高原鼢鼠的食物摄入量及食物吸收量显著低于大白鼠,食物消化率、蛋白质消化率及粗纤维消化率显著高于大白鼠。而两种动物的蛋白质吸收量及粗纤维吸收量差异不显著。高原鼢鼠的胃、小肠、大肠、盲肠干重及大肠长度与盲肠长度显著高于大白鼠,小肠长度差异不显著。可见,动物的消化率及能量需求与其消化道形态相适应。高原鼢鼠采取摄取少量的食物、增加消化道长度或重量、提高食物消化率的消化对策。     

胃肠道的消化间期综合肌电

胃肠道的消化间期综合肌电作为其平滑肌活动的主要指标是近年来比较活跃的研究领域,这种肌电是指在空腹、清醒情况下,反复发生于胃肠道并能向小肠下端缓慢扩布或秽行的周期性综合电变化,具有明显的时相性特征,能规律地从胃、十二指肠和空肠上部开始,向下扩布到回肠末端。消化间期综合肌电各时相的产生,与血浆中胃动素浓度周期性变化的水平有一定的依从关系。植物神经系统和胃肠道的一些激素以及进食,都能影响这种综合肌电,但切除外来神经后,一般都不能使这种综合肌电的规律活动完全消失。     

模拟胃肠消化过程中猴头菌多酚类物质及其抗氧化活性的变化规律

本研究采用体外模拟胃肠消化模型,分析了猴头菌子实体多酚类物质(polyphenol compounds from fruiting bodies of Hericium erinaceus,HEP)在模拟胃肠道消化(gastrointestinal digestion, GD)过程中总多酚和总黄酮的含量变化规律,并对其酚酸和黄酮类物质的释放量及其体外抗氧化活性进行了比较,采用H₂O₂诱导RAW 264.7细胞氧化损伤模型,研究了HEP及其胃与肠消化产物对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明：经胃消化的猴头菌子实体多酚类物质产物(HEP-S)与HEP相比,其总多酚和总黄酮含量分别上升了11.66%和27.33%,DPPH、ABTS和·OH自由基清除能力分别升高了10.33%、17.52%和2.22%。肠消化产物(HEP-I)与HEP相比,总多酚和总黄酮分别降低了35.82%和46.67%,DPPH、ABTS和·OH自由基清除能力分别降低了60.02%、50.13%和46.43%。液质联用(UPLC-MS/MS)的检测结果显示,HEP、HEP-S和H...     

日本消化生理学界见闻

我有机会到日本学习消化生理学,着重研究消化道的运动。现对近一年来在这一领域里的所见所闻做一简要介绍。在日本,系统地研究消化系统的功能已有较长的历史,对消化生理学的发展做出了积极的贡献。仅在消化道的运动方面就有《消化管运动的机理》、《胃肠道运动的基础与临床》、《消化管运动》等三本专著。可以认为,这三本书总结了近50年来日本消化道运动生理学的主要研究成果。日本平滑肌学会,是以研究消化道运动的研究者(包括基础与临床)为主体,也有研究泌尿系统等其他系统平滑肌特性的学者参加的学术性组织。每年召开一次学术年会,发行其机关刊物——日本平滑肌学会     

南方大口鲇消化道细菌群落结构与其胃肠分化的关系

以肉食性南方大口鲇(Silurus soldatovi meridonalis Chen)为对象, 研究采用PCR-DGGE指纹技术对其仔稚鱼胃肠道分化过程及细菌群落结构进行了对比分析, 进而探讨了细菌群落与胃肠道分化的关系。消化道外部形态和胃肠切片显示13日龄样品起, 胃肠在结构上出现较大的分化。DGGE分析结果显示胃肠道细菌群落的分化始于18日龄:从18日龄样品起, 肠内细菌群落明显开始分化, 但在随后的1833日龄期间细菌群落结构相对稳定, 而胃内细菌群落则一直处于动态变化中。这说明, 南方大口鲇仔稚鱼的个体发育过程中, 随着胃肠在组织结构上的分化, 其消化道细菌群落结构也出现了明显分化, 并且胃和肠内细菌群落结构的分化在时间上存在差异。该研究结果将为深入研究胃和肠内细菌群落的功能差异提供基础资料。       

牛血清蛋白对胰蛋白酶消化叶绿体膜的修补作用

1.牛血清蛋白对被胰蛋白酶消化过的叶绿体光还原 DCIP 的活性有恢复作用。洗涤对经牛血清蛋白修补的胰蛋白酶消化叶绿体的 DCIP 光还原没有影响。说明胰蛋白酶消化后,DCIP 还原位置的蛋白质受损,牛血清蛋白有修补作用。2.CCCP 对胰蛋白酶诱导产生的抑制特性变化可以被牛血清蛋白所逆转。3.牛血清蛋白对胰蛋白酶诱导的叶绿体基粒片层松散现象有部分恢复作用。4.牛血清蛋白对胰蛋白酶诱导的叶绿体光谱在500—640毫微米处吸收下降没有恢复作用。本文提出两个假设:(1)叶绿体膜上的蛋白质存在有微区域性的差异;(2)在类囊体膜上存在有由蛋白质构成的“门”和“通道”的组织。     

消化性溃疡与胃肠道激素研究的进展

一九七九年七月下旬美国洛杉矶加利福尼亚大学溃疡病研究教育中心主任Morton I.Grossman教授应邀来我国访问并作了学术报告。Grossman是著名的胃肠生理及胃肠疾病专家,在胃肠道激素方面也进行了大量深入的研究,在国际上享有声誉。现将他的两篇报告摘要介绍以供交流参考。     

消化性溃疡浅析

消化性溃疡主要是指发生在胃及十二指肠的慢性溃疡,是常见的全身性疾病.溃疡的形成是由胃酸和胃蛋白酶的自身消化作用而致,因此,称为消化性溃疡,是一种常见病.     

中国大鲵消化系统13种器官的蛋白水解酶种类和活性分析

蛋白水解对生命活动是必不可少的(Vassali et al., 1994),蛋白质的酶解修饰(Xu et al.,1999)、细胞的迁移、组织再生与修复、消化系统对食物中蛋白质的消化等均与蛋白水解酶有关(Baimbridge et al.,1992),许多病理过程也与蛋白水解酶功能失调有关(Teichert et al., 1989; Monard, 1988).因此开展大鲵消化系统各器官的蛋白水解酶种类和性质的研究,对了解大鲵消化系统各器官的功能、演化及大鲵的营养需求、食性、消化生理等是必要的.本文对大鲵消化系统各器官的蛋白水解酶特征进行了初步分析,现将结果报道如下.     

SidK-VatA蛋白复合物的表达和纯化

军团菌以吞噬泡的形式进入宿主细胞,借助宿主细胞环境进行自身的繁殖传代。为避免被宿主识别,通过分泌自身效应蛋白来逃避宿主对含病原菌液泡（legionella containing vacuoles,LCVs）的识别和消化,军团菌通过分泌效应蛋白SidK结合宿主v-ATPase,抑制v-ATPase对吞噬泡的酸化,以实现吞噬泡不被溶酶体消化。在大肠杆菌中表达了效应蛋白SidK,利用昆虫细胞表达了VatA（v-ATPase）蛋白,得到了均一性较好的SidK-VatA蛋白复合体,为进一步解析这个复合体的结构奠定了基础。     

水果酵素对小鼠胃肠道消化功能的影响

目的:研究水果酵素对小鼠胃肠道消化功能的影响。方法:80只小鼠随机分为4组,分别为对照组、实验组1、2、3。实验组分别喂养浓度为2.5%、5%、7.5%的水果酵素,对照组喂养正常饲料。饲养28天后,作胃排空实验以及肠推进功能检测。结果:1与对照组相比较,实验组小鼠的肠推进功能较强。2随着水果酵素浓度的增高,小鼠的胃内残留率呈下降趋势。3实验组小鼠红细胞数与血小板数水平高于对照组,白细胞水平随喂养水果酵素浓度的上升而呈下降趋势,淋巴细胞则相反。4与对照组相比,实验组小鼠,平均体重明星减轻。结论:水果酵素对小鼠胃肠动力、肠道机械运动功能提升均有促进作用,且随着水果酵素喂养浓度的增加,促进作用逐渐增强。