荞麦属种质资源发芽种子酯酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳对荞麦属8个种(含大粒组7个和小粒组1个)33份材料发芽种子的酯酶同工酶进行了研究。结果表明:酯酶同工酶不同酶带合计22条,不同物种的酶带数4到8条。其中,甜荞有8条带,苦荞为7条。酶带及聚类分析表明,大粒组荞麦种的谱带与细野荞等小粒组荞麦种间差异极大,甜荞和苦荞酶带分别与大野荞和毛野荞相似,并分别与F.megaspartanium和F.pilus聚类最近,支持F.megaspartanium和F.pilus可能分别是甜荞和苦荞祖先种的假说。     

荞麦属植物三叶期幼叶酯酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对荞麦属(Fagopyrum Mill)8个种(含大粒组7个种和小粒组1个种)29份栽培及野生荞麦植株三叶期幼叶的酯酶同工酶进行了研究.结果发现:酯酶同工酶酶带共31条,不同物种的酶带数4～9条,其中甜荞有8条带,而苦荞为9条.酶带分析及聚类分析表明:大粒组荞麦种的谱带与细野荞(F.gracilipes)等小粒组荞麦种间差异极大,甜荞(F.esculentum)和苦荞(F.tataricum)酶带分别与大野荞(F.megaspartanium)和毛野荞(F.pilus)相似,并分别与大野荞和毛野荞聚类最近, 提示大野荞和毛野荞可能分别是甜荞和苦荞的祖先种.     

荞麦属植物三叶期幼叶过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对荞麦属(Fagopyrum Mill)8个种(含大粒组7个种和小粒组1个种)28份栽培及野生荞麦植株三叶期幼叶的过氧化物酶同工酶进行了研究.结果发现:过氧化物酶同工酶酶带共23条,不同物种的酶带数4～9条,其中甜荞有6条带,而苦荞为9条.酶带及聚类分析表明:大粒组荞麦种的谱带与细野荞(F.gracilipes)等小粒组荞麦种间差异极大,甜荞(F.esculentum)和苦荞(F.tataricum)酶带分别与大野荞(F.megaspartanium)和毛野荞(F.pilus)相似,并分别与大野荞和毛野荞聚类最近, 支持Chen(1999)提出的大野荞和毛野荞可能分别是甜荞和苦荞的祖先种的假说.     

芒果属植物过氧化物酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定了芒果属１７个种群近缘植物过氧化物酶同工酶,并根据酶谱分布及酶谱特征,结合不同的表现形式,分析了属内种间的亲缘关系。结果表明,异（同）地种间、不同器官酶谱数目、酶含量、迁移率（Ｒｆ）、酶活性及分布特征均有不同程度的差异,可以作为芒果属种间亲缘关系的生化遗传指标。     

东半区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究

采用过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱作为遗传标记,结合形态学,细胞学及野外居群调查等工作,对东北地区野豌豆属植物进行深入研究,结果表明分子资料基本上同形态学、细胞学以得比较一致的结果,对一些在分类上有争议的类群提出了处理意见,并推测了该属内一些多倍体的起源方式。     

东北地区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究

采用过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱作为遗传标记, 结合形态学、细胞学及野外居群调查等工作, 对东北地区野豌豆属植物进行深入研究。结果表明分子资料基本上同形态学、细胞学研究取得比较一致的结果。对一些在分类上有争议的类群提出了处理意见, 并推测了该属内一些多倍体的起源方式。     

甘薯属植物过氧化物酶同工酶分析

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对23份甘薯属不同倍性材料进行过氧化物酶同工酶酶谱分析。初步结果表明,过氧化物酶同工酶酶带数目与材料倍性无明显相关性;二倍体或四倍体野生种的种间酶谱差异显著;六倍体野生种不同株系间以及六倍体栽培种甘薯的不同品种间酶谱差异较小;但栽培种甘薯与六倍体野生种I.trifida(6x)、四倍体野生种I.littoralis(4x)以及二倍体野生种I.trifida(2x)的酶谱有4条明显共同标记带,表明其间有一定亲缘关系。     

甘蔗过氧化物酶同工酶分析

以３０个甘蔗品种为材料,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析甘蔗不同生长时期过氧化物酶同工酶。个别品种还进行同一品种在不同种植地区、同一植株不同叶位的同工酶酶谱比较,结果表明,不同品种的酶谱其酶带分布有明显的区别,但同一品种在不同种植地区、不同生长时期、不同植株、同一植株不同叶位其酶带分布无差异,体现了同工酶作为品种标记具有多态性及稳定性。用单一酶系即可准确、方便地鉴定甘蔗品种。     

甘蔗过氧化物酶同工酶分析

以30个甘蔗品种为材料,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析甘蔗不同生长时期过氧化物酶同工酶。个别品种还进行同一品种在不同种植地区、同一植株不同叶位的同工酶酶谱比较,结果表明,不同品种的酶谱其酶带分布有明显的区别,但同一品种在不同种植地区、不同生长时期、不同植抹、同一植株不同叶位其酶带分布无差异,体现了同工酶作为品种标记具有多态性及稳定性。用单一酶系即可准确、方便地鉴定甘蔗品种。     

天麻3种变型过氧化物酶的同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）对天麻3种变型的过氧化物酶（POD）的同工酶进行了研究。结果表明,天麻3种变型的过氧化物酶的同工酶活性不同,酶谱条带数在5～7条之间,且具有特征谱带。其中乌天麻和红天麻的酶谱条带数相同,两者的酶谱条带数均多于绿天麻;绿天麻、乌天麻和红天麻的酶谱条数依次分别为5条、7条和7条;其中基本酶带有5条,Rf值分别为0．06、0．24、0．83,0．89、0．98;乌天麻与红天麻的相似度指数为0．86,说明这两个种亲缘关系近;乌天麻与绿天麻的相似度指数为0．71,反映它们之间的亲缘关系相对较远。     

荞麦属植物淀粉酶和甲酸脱氢酶同功酶研究

以聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了荞麦属植物8个种42个收集系干种子和发芽种子的淀粉酶和甲酸脱氢酶同功酶。结果表明,荞麦淀粉酶在于种子中缺乏活性,但是在发芽种子中活性很强。在供试材料的发芽种子中共发现23个淀粉酶谱带,其中甜荞和苦荞分别有10条和8条。不同荞麦种间淀粉酶谱带差异很大,但是同种内不同收集系间差异较小。谱带聚类分析表明大野荞和毛野荞分别与甜荞和苦荞较近缘,支持它们分别为甜荞和苦荞祖先种的假说。在干种子和发芽种子中,发现所有荞麦种类均只有1条位置一致的甲酸脱氢酶谱带,暗示该酶在进化中具有高度稳定性。     

十种淫羊藿属植物的谷草转氨酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对淫羊藿属植物10个种(含7个大花种和3个小花种)32个幼叶样品的谷草转氨酶同工酶进行了研究.结果发现,谷草转氨酶同工酶酶带共15条.不同物种的酶带数为2～15条,不同植株的谱带数为2～10条.种间存在明显差异,可以作为物种鉴定的辅助依据.     

罗汉果雌雄株同工酶性别鉴定研究

采用电泳技术结合同工酶染色,分析了罗汉果雌雄株叶片的过氧化物酶同工酶、酯酶同工酶、超氧化物歧化酶同工酶、多酚氧化酶同工酶和过氧化氢酶同工酶。结果表明:罗汉果雌雄叶片在同工酶谱上,存在着与性别性状相关的酶带;雌雄间的差异酶带在每一种同工酶中均有一条以上,可作为罗汉果雌雄株间的性别鉴定。此外,还比较了高产、低产、不结果雌株之间同工酶的酶带和活性差别。     

自交可育甜荞、金苦荞、米苦荞不同品系总黄酮、粗蛋白及其蛋白组分含量研究北大核心CSCD

为探究荞麦新品种的营养保健价值,该文对自交可育甜荞、金苦荞、米苦荞共56个不同品系荞麦种子的粗蛋白、总黄酮、蛋白组分含量及其果实性状的变异进行了研究。结果表明:(1)甜荞、金苦荞、米苦荞种子中粗蛋白含量平均值分别为13.19%、15.44%、11.75%,总黄酮含量平均值分别为0.14%、2.50%、2.09%,清蛋白含量的平均值分别为5.22%、6.13%、4.56%,球蛋白含量的平均值分别为1.29%、1.15%、0.91%,醇溶蛋白含量的平均值分别为0.42%、0.58%、0.55%,谷蛋白含量的平均值分别为2.66%、3.36%、2.80%,三种荞麦的蛋白组分均符合清蛋白>谷蛋白>球蛋白>醇溶蛋白。(2)果实性状中,甜荞果实千粒重、果实面积、果实直径的变异系数最大,米苦荞果实周长、果实长宽比、果实长、果实宽和50 mL容重的变异系数最大。(3)相关分析表明甜荞种子粗蛋白含量与果实长宽比、果实长,金苦荞种子粗蛋白含量与果实周长、果实长,米苦荞种子粗蛋白含量与果实宽、总黄酮含量与果实面积、果实宽、果实直径、50 mL容重的相关性均达到了显著或极显著水平。(4)该研究筛选出甜荞(1808-166贵甜2号优系)、金苦荞(多苦74、多苦78)、米苦荞(1906-136黑米荞麦、43-2)等高蛋白含量或高黄酮含量的荞麦品系。该研究结果对荞麦优良品种的选育和荞麦新产品的开发具有一定指导意义。     

A study of resources of Fagopyrum (Polygonaceae) native to China

Morphology, taxonomy, reproductive biology, esterase isozyme patterns and chromosome number were studied in 16 accessions of cultivated and wild buckwheat native to Tibet, Sichuan, Guizhou and Yunnan. Among these are four established species: Fagopyrum esculentum, F tataricum, F. pleioramosum and F gracilipes. The first three species are diploid (2 n = 16) and the last one is tetraploid (2 n = 32). In addition to the above, three new species are described: F. zuogongense, F. megaspartanium and E pilus. There are clear differences in esterase isozyme patterns between these species. The zymographs of esterase isozyme of diploid F. megaspartanium (native to Sichuan) and F. pilus (native to Tibet) are similar to those of F. esculentum and F tataricum respectively. F. gracilipes , in the small achene group of the genus, has a zymograph of esterase isozyme that is very different from the species in the large-achene group. The diploid accessions of F. pilus and F. megaspartanium may be ancestors of cultivated buckwheat.     

苦荞籽粒芦丁降解酶的纯化、酶学性质及部分一级结构分析

芦丁降解酶催化芦丁降解为水溶性降低的槲皮素,是形成苦荞苦味的主要因素。研究以榆6-21苦荞籽粒粉为材料,通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析、阳离子交换层析、凝胶过滤层析分离纯化芦丁降解酶,SDS-PAGE显示纯化的芦丁降解酶为分子量66 kDa的单一条带。芦丁降解酶的最适pH值为5.0,最适温度为50℃。对其催化特性研究表明,该酶的K_m值为0.27 mmol/L,V_(max)值为39.68 U/mg。Cu~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)和EDTA对其有不同程度的抑制作用。纯化的芦丁降解酶可耐受50%(V/V)的甲醇。Edman降解法测定其N端序列为TVSRSSFPDGFLFGL。MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)二级质谱获得了其15个内肽序列。该研究为从转录组数据中确定芦丁降解酶的候选基因及深入研究芦丁降解酶的生物学功能奠定了基础。     

苦荞FtF5H基因克隆及表达分析

阿魏酸-5-羟基化酶(Ferulate 5-hydroxylase)是调控S型木质素合成的关键酶,为研究其在苦荞木质素生物合成途径中的分子机制,该文从苦荞转录组数据中筛选获得一个F5H基因,命名为FtF5H(GenBank登录号:MW455111),采用生物信息学方法对苦荞F5H蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、亚细胞定位、亲疏水性、蛋白质二级结构、蛋白质三级结构、氨基酸结构、系统进化树等进行分析和预测,并运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析FtF5H基因在厚果壳苦荞与薄果壳苦荞的叶、花、茎、果壳中的差异表达。结果表明:(1)FtF5H基因序列包含1395 bp的完整cDNA开放阅读框,编码464个氨基酸。(2)FtF5H蛋白具有P450超家族结构,为亲水性稳定酸性蛋白,不具有跨膜结构域,且为非分泌性蛋白。(3)FtF5H蛋白的二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,三级结构预测显示FtF5H蛋白与5ylw.1.A的相似度较高。(4)系统进化分析显示FtF5H属于CYP84A亚家族。(5)qRT-PCR显示FtF5H基因在两种苦荞中的不同部位均有表达,且在厚果壳苦荞果壳中的表达量是薄果壳的5倍,表达具有极显著差异。该研究为进一步研究苦荞木质素合成的分子调控机制奠定了基础,对苦荞新品种的培育具有重要意义。     

Peroxidase variation in Robinia pseudoacacia roots

Investigation of multiple forms of peroxidase were made by slab starch gel electrophoresis of root extracts of black locust (Robinia pseudoacacia L.) roots. Thirty-seven trees representing dominant-stem forms (R. p. var rectissima (L.) Raber) and typical forms (R. p. var pseudoacacia) from diverse habitats were sampled. Dominant-stem forms and typical forms exhibited very similar peroxidase patterns. Specific activity of peroxidase from extracts of the two forms showed no significant differences. The total average hypergeometric probability was 0.111. The overall per cent similarity was 88.9 and the average within a location was 95.9 and that among the locations was 84.3. One rapidly moving peroxidase band in samples from a single location was attributed to extensive locust borer attack.     

Peroxidase isozyme patterns in the skin of maturing tomato fruit

The cessation of tomato fruit growth is thought to be induced by an increase in the activity of enzymes which rigidify cell walls in the fruit skin. Peroxidase could catalyse such wall‐stiffening reactions, and marked rises in peroxidase activity were recently reported in skin cell walls towards fruit maturity. Peroxidase isoforms in the fruit are here analysed using native gel electrophoresis. New isoforms of apparent M_r 44, 48 and 53 kDa are shown to appear in cell walls of the fruit skin at around the time of cessation of growth. It is inferred that these isozymes are present in the cell wall in vivo. Fruit from a range of non‐ripening mutants were also examined. Some of these do not soften or ripen for many weeks after achieving their final size. The new isozymes were found in skin cell walls of mature fruit in each of these mutants, as in the wild‐type and commercial varieties. It is concluded that the late‐appearing isozymes are not associated with fruit ripening or softening, and are probably not ethylene‐induced. They may act to control fruit growth by cross‐linking wall polymers within the fruit skin, thus mechanically stiffening the walls and terminating growth.