果蝇唾腺染色体制片技术的改进

观察果蝇唾腺细胞染色体,是高中生物学中的一个主要实验。通过实验使学生对遗传物质的载体——染色体有一个感性认识。虽然在许多书刊上较详细地介绍了果蝇唾腺染色体装片的制作方法,但许多中学教师仍感到困难。主要问题是染色体成团,染色体的臂伸展不开,影响实验效果。为此我们进行了多方面的实验探索,以三龄幼虫低温冷冻方法效果较好,现     

果蝇唾腺染色体制片的小技巧

笔者在进行果蝇唾腺染色体制片实验时,发现了两项很有效用的小技术。现将它们介绍如下：     

果蝇唾腺染色体实验的改进

果蝇唾腺巨型染色体是大约1000-4000多条同源染色线精确配对聚集而成的多线染色体,这是染色体多次复制,但细胞只生长、不分裂的结果.染色体长达0.5mm.粗细是一般体细胞染色体的100-200倍左右,其上有深浅间隔、宽窄不等的染色带,果蝇4对唾腺染色体上已确定了6000多条染色带,它们宽窄、疏密、顺序、数目恒定,有种的特异性,同种个体的是相同的,不同的种则不一样,因此果蝇多线染色体可以建立染色带及间带分布图,它们的表现和遗传学图大致平行,多数遗传学家认为这些横纹与基因有对应关系,     

果蝇唾腺多线染色体研究进展及其在遗传学教学中的应用

果蝇唾腺多线染色体是细胞遗传学的3大经典染色体之一,从1934年至今因其具有显著的特点已经作为一个优异的模型用在不同的遗传学研究中。果蝇唾腺多线染色体最大的贡献就是为研究间期染色体结构和基因的表达调控提供了一个非凡的视角;另外,果蝇唾腺多线染色体还可以用于解释一些特殊的遗传现象,例如剂量补偿效应和花斑位置效应。文章一方面就以上进展作一简要总结,另一方面尝试将这一典型案例系统地用于遗传学教学中,引导和激发学生学习遗传学的兴趣。     

果蝇唾腺染色体的装片制作

1.唾液腺的剖离把已选出的一条果蝇三龄幼虫,放在洁净的载玻片中央,先区别出它的头部和尾部然后置头部于右方,尾部于左方,用0.65%生理盐水清洗幼虫。左手持解剖针按住虫体中部,右手持解剖针插入口器,向右轻拉,把头部自虫身拉开,腺体及其它组织等即随之而出。     

用Feuglen染色法制做果蝇唾腺染色体

制作果蝇唾腺染色体通常以改良苯酚品红或醋酸洋红为染色剂 ,这些常规方法存在 1个共同的弊病 ;染色体被着色的同时 ,细胞质也着色较深 ,染色体与其背景形成的反差很小 ,不利于显微摄影。为此笔者改变传统方法用 Feuglen染色法对果蝇唾腺染色体进行染色制片 ,收到了良好的效果。1　方法和步骤1)将盛有 1mol盐酸的小烧杯置于 6 0℃的恒温水浴中 ,待用 ;2 )取较肥大的果蝇三龄幼虫 ,置于滴有 0 .85 %生理盐水中 ,在解剖镜下剖出唾腺 ;3)弃去杂物 ,剔除唾腺上的脂肪 ;　　 4 )将唾腺小心移至 1mol盐酸的恒温小烧杯中 ,2 0～ 30 s;5 )取出唾腺 …     

果蝇唾腺染色体制片方法的改进

1　果蝇的培养培养基为常规的玉米粉培养基 ,培养基要松软、含水量较高、发酵良好。放入 7～ 8对果蝇 ,在 18℃恒温培养。待幼虫出现后 ,将其移至 10～ 12℃恒温培养 ,稍低的温度有利于幼虫的充分生长发育 ,实验时选用肥大的三龄幼虫作为材料 (最好选雌性幼虫 )。2　唾腺的剥离将幼虫放在滴有一滴低渗液 ( 0 .0 75% KCl)的载片口 ,实验者两手各持一枚解剖针 (或大头针 ) ,在解剖镜下左手用解剖针压住幼虫尾端 1/ 3处 ,右手用解剖针自幼虫口沟慢慢地向前拉出 ,一对唾腺也随之被拉出。拉出的唾腺带有脂肪体 ,在低渗液下处理几分钟 ,用解剖针…     

果蝇唾腺染色体观察材料的制备

选择夜间气候为南风、多云、20～28℃的条件下,用香蕉培养基引诱、采集果蝇.室内或恒温箱中培养12 d,取野外果蝇三龄幼虫替代实验室长期饲养的果蝇幼虫,制作果蝇唾腺染色体.经剥离、解离、染色、压片,观察到比实验室饲养的果蝇染色体较大、个体更清楚的片子.     

果蝇唾腺染色体制片方法的改进

对果蝇唾腺染色体制片方法进行了改进．结果表明：改良苯酚品红染色液配好15d后使用,浓度为6％时,染色5～8min可以获得染色体横纹和背景清晰的图像;通过改变脂肪剥离的顺序即染色后再去除脂肪,压片效果明显提高。     

制作果蝇唾腺染色体标本的改良方法

(一)临时唾腺染色体标本制作过程 1.挑取肥大的三龄幼虫于几滴生理盐水中,洗去体表的培养基。拉取唾腺后,细心剥去附着的脂肪组织。 2.挑取唾腺放置于1滴0.2％氯化钾水溶液中低渗处理15分钟。根据室温高低适当调整低渗时间。 3.除去低渗液,加1mol盐酸处理1-2分钟。吸去盐酸,并用生理盐水冲洗。     

果蝇唾腺染色体的改良苯酚品红染色法

我们将一种植物材料中常用的细胞核染色剂——改良苯酚品红应用于果蝇唾腺染色体的染色,取得了较为满意的效果。该法具有操作简便、易于掌握、染色时间短、制成的永久标本不易褪色等特点。文中讨论了这种染色法的操作程序和注意事项。     

因陋就简开好观察果蝇唾腺染色体的实验课

我们经过反复摸索,因陋就简地开设了观察果蝇唾液腺染色体实验,收到了满意的效果.做法如下: 1.自制简易解剖针实验前,要求每个学生用两根缝被的大针和一支筷子做两根解剖针. 2.用低倍显微镜代替解剖镜(或带支架的放大镜)虫体拉开后,将载玻片置于5×10倍的镜头下观察,找到唾液腺,并用解剖针指示.     

果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较

《生物学通报》编委 :您好。笔者对贵刊 2 0 0 2年第 37卷第 2期第 2 3页刊登的“用 Feuglen染色法制作果蝇唾腺染色体”一文感兴趣 ,但笔者认为文中几处不妥 ,比如 1)水浴温度波幅偏高 ;2 )染色时间不确定 ;3)试剂配方不全 ;4 )盐酸的浓度单位有误 ,mol?M?;5 )注意事项影响实验结果表述不清。特撰写下文与各位读者商榷。双翅类昆虫如黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster)的唾腺染色体 (Salivary chromosome)比普通染色体大的多 ,处于体细胞同源染色体的配对状态 ,是由于唾腺染色体经过多次复制而并不分开形成的 ,大约有 10 0 0～4 0 0 0根…     

果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与比较

唾腺染色体是最早发现于双翅目昆虫唾腺细胞的一种巨大染色体,现已广泛应用于细胞遗传、基因定位等研究中。用黑腹果蝇3龄幼虫为材料,压片法制备染色体标本,并对3种品系果蝇幼虫的唾腺染色体的形态结构进行比较。结果表明:果蝇唾腺染色体臂端粒端的横纹特征基本恒定,是辨认各染色体臂的最便捷方法;黑腹果蝇的3种品系果蝇幼虫在唾腺染色体横纹的宽窄、数目、排列顺序及疏密程度上不存在明显的差异,在不同变种之间无法区分。     

中国D. virilis果蝇唾腺染色体的初步观察

果蝇的唾腺染色体是一种由数千条核蛋白 纤维丝形成的一束巨大染色体。唾腺染色体上 呈现出许多染色深浅不同、粗细各异的横纹，清 晰可辨。正是这些横纹，代表了不同基因的分 布。横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数 目都具有种的特异性。     

用家蝇取代果蝇制作唾腺多线染色体新技术

组建学生科技兴趣小组,对家蝇唾液腺染色体制片方法进行研究,开发了制片新技术,即加热处理家蝇三龄幼虫,然后用改进的缓冲液进行解离前预处理,再酸性解离、染色、观察、永久制片、显微照相.利用新方法,学生均能一次就获得细胞膜破裂、背景清晰、染色体分散良好、横纹清楚的制片.     

果蝇唾腺染色体的观察和制片方法的改进

几年来我们在教学中进行了多方面的实验探索,在果蝇唾腺制片方法上加以改进,采用加蔗糖液保色,树脂胶封边,制备一种半永久制片标本。操作过程如下: 1.取出唾腺,在其上加2滴(37℃)蒸馏水低渗处理10～20分钟,使唾腺细胞涨大有利于染色体的分散。 2.用滤纸吸去蒸馏水,加1滴1N HCl解离8～15分钟(时间随当时的温度而定),吸去解离液,用蒸馏水轻轻冲洗2～3次,将水吸净。     

中国D.virilis果蝇唾腺染色体的初步观察

果蝇的唾腺染色体是一种由数千条核蛋白纤维丝形成的一束巨大染色体。唾腺染色体上呈现出许多染色深浅不同、粗细各异的横纹,清晰可辨。正是这些横纹,代表了不同基因的分布。横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有种的特异性。 果蝇D.virilis属于Drosopbila亚属,Virilis种胁种群中的体型较大的黑色种,体长约     

提高果蝇唾液腺染色体制片成功率的关键操作

在遗传学实验中,果蝇是最为常用的实验材料之一。但果蝇三龄幼虫的染色体制片,按传统的方法,实验材料的选择培养及方法技术存在一些不足,学生难以把握,实验成功率较低。笔者就上述情况在以下几点做了一些改进,取得了良好的实验效果。