小麦遗传转化受体系统建立的研究

选用‘小偃22’和‘宁春16’小麦品种的成熟胚和幼胚进行培养,研究不同种类的胚和培养因子对愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,幼胚和成熟胚的愈伤组织诱导率无明显差异,但较高浓度的2,4-D有利于成熟胚的诱导,而幼胚培养时2,4-D浓度的影响效果因品种而异;两种外植体分化率的高低与KT/IAA的配比均有密切关系,但高浓度的激素水平不利于成熟胚的分化;诱导培养基中低浓度的2,4-D有利于所诱导的愈伤组织的分化。同时,在诱导培养基中添加低浓度的KT能显著提高两品种成熟胚愈伤组织的分化率;各种培养基处理与品种间都存在显著的互作效应,‘小偃22’成熟胚培养的最佳培养基组合为MSD 3.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/LIAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L KT;‘宁春16’成熟胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养时为MSD 1.0 mg/L 2,4-D和MSD 2.0 mg/L IAA 2.0 mg/L KT。     

水翁悬浮细胞系的建立及其悬浮培养的生长特性

建立了水翁悬浮细胞系,并对其悬浮培养的生长特性作了初步探讨。以水翁新生芽尖作为外植体,接种于添加有不同浓度和配比的生长调节物质及各种附加物的MS固体培养基中,诱导培养产生初代愈伤组织;挑选Ⅰ和Ⅱ型的愈伤组织进行继代培养改良,考察愈伤组织的生长状况和统计生长量来决定最佳继代培养基的配方和得到适合悬浮培养的愈伤组织;将以上得到的愈伤组织转接于最佳继代液体培养基中,于24±1℃,120r/min条件下振荡培养,筛选分散度好、较均匀、生长快、色浅透明的细胞作为种子传代,数次传代后得到性能良好的悬浮细胞系;以细胞生长量(鲜重)为指标,绘制了水翁悬浮细胞的生长曲线。研究表明:2.0mg/L的2,4-D的诱导率最高(92%,初代愈伤组织为Ⅰ型),Ⅱ型愈伤组织的最高诱导率为75%;最佳的继代培养基配方为MS 0.5mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA 1.0mg/L IAA 0.5mg/L IBA 0.5mg/L NAA 0.1mg/L KT 700mg/L LH,形成Ⅱ型愈伤组织的生长量可达3.28g/瓶(鲜重);液体继代培养3代后,可得到性能良好的悬浮细胞系;水翁悬浮细胞的生长曲线表明,最佳接种期为培养后的16~18d。     

激素对银杏愈伤组织诱导及继代培养的影响

为了探讨激素对银杏愈伤组织诱导及继代培养的影响,以银杏优良品种"佛手"无菌苗的叶片和根段为材料,以MS为基本培养基,研究了5种不同激素配比和光照条件对愈伤组织诱导及长期继代培养的影响.结果表明,所有激素配比都能诱导两种外植体形成愈伤组织,完全黑暗培养条件不利于愈伤组织继代培养;NAA和KT及2,4-D和KT两种激素组合分别有利于叶片和根愈伤组织诱导.在激素配比为3.0 mg/L 2,4-D 5.0mg/L KT中生长的两种愈伤组织鲜重显著高于其它处理;NAA和KT组合适合愈伤组织长期继代保存,叶片诱导的愈伤组织最佳继代培养基为NAA 1.0 mg/L KT 1.0 mg/L,根段诱导的愈伤组织则为NAA 1.0 mg/L KT1.0 mg/L,分别在这两种激素组合下继代的愈伤组织始终为绿色,叶绿素含量变化不显著.     

辣木资源利用中的悬浮细胞培养体系研究

辣木富含多种营养成分,在食品和药物开发方面有巨大的潜在开发价值。本文提供了一种可行的辣木细胞悬浮培养技术。由辣木的根诱导形成愈伤组织和叶诱导形成愈伤组织的合适细胞悬浮培养条件分别为MS培养基(MS)+1.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0mg/L激动素(KT)和MS+0.5mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT,摇床转速均为50~100r/min,将愈伤组织添加到液体悬浮培养基中20d左右可得到大量悬浮细胞。本研究为辣木细胞水平的培养和研究提供了一条途径,为辣木潜在价值的开发利用提供新的思路。     

羊草与灰色赖草F1代细胞悬浮系的建立及植株再生

本研究以羊草(L eym us ch inensis)与灰色赖草(L eym us cinereus)杂种F1代幼穗为外植体诱导愈伤组织,在3.0 m g/L 2,4-D M S培养基上继代1次后,转入不同浓度激素(2,4-D、IAA、KT)配比和不同浓度蔗糖的M S液体培养基进行振荡培养,建立杂种F1代细胞悬浮系和植株再生体系.结果表明,细胞悬浮培养时,M S 1.0 m g/L2,4-D 0.1 m g/L KT 4%蔗糖的液体培养基最佳;悬浮细胞分化时,1.0 m g/L 2,4-D 0.1 m g/L KT 4%蔗糖 M S和1.0 m g/L 2,4-D 4%蔗糖 M S培养的悬浮细胞在1.0 m g/L NAA 0.5 m g/L KT M S分化培养基上的绿苗分化率分别达到83%和80%.细胞悬浮系及再生体系的建立为杂种F1代育性恢复的研究奠定了基础.     

大赖草成熟胚愈伤组织诱导及其植株再生

植物名称:大赖草(Leymus racemosus)。材料类别:成熟胚。培养条件:以MS为基本培养基,诱导愈伤组织和分化培养基为:(1)2,4-D 1.0mg/L(单位下同);(2)2,4-D1.0 KT0.2;(3)2,4-D1.0 KT     

THIDIAZURON对乌蔹莓(Cayratia japanica)体细胞胚胎发生的影响

乌蔹莓的未授粉子房外植体培养于附加不同浓度2,4-D(0,0.05,1.0,1.5,2.0mg/L单位下同)单独作用或2,4-D 与 TDZ(0.002)或 KT(0.05)结合使用的改良 MS 培养基上,诱导胚性愈伤组织。在附加2.4-D(0.5-1.0)和 TDZ 的培养基上得到最好的结果;愈伤组织诱导频率高可达86—87%。愈伤组织鲜重平均可达100mg/外植体以上。2,4-D 与 KT 结合使用时的诱导效果也较其单独使用时为好;TDZ 或 KT 与生长素结合使用时,尤其在2,4-D     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化研究

以2个小麦品种成熟胚为外植体进行离体培养,研究了不同预处理、不同2,4-D浓度及与KT组合、不同蔗糖浓度等因素对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:4℃低温预处理可提高愈伤组织的出愈率及再生苗率,2个材料的出愈率及再生苗率均达到90%和30%以上;在不同预处理条件下,2,4-D浓度对出愈率及再生苗率的影响与基因型有关,2,4-D浓度为1~2 mg/L更有利于愈伤组织诱导及分化;附加KT能缓解高浓度2,4-D对再生苗率的抑制作用,而对于在1、2 mg/L 2,4-D的培养基中附加KT则不表现这种作用;蔗糖浓度则在30 g/L条件下更有利于愈伤组织诱导。因此通过4℃低温预处理,在MS基本培养基中附加1~2mg/L 2,4-D及30 g/L蔗糖亦可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化。     

刺葡萄幼胚愈伤组织诱导及其高产原花青素细胞系筛选

以刺葡萄幼胚为材料,研究不同培养方式、培养基配方和培养条件对其愈伤组织诱导的影响,采用正交试验设计法筛选刺葡萄愈伤组织继代增殖的培养基配方,并对继代保持的培养条件和方式进行优化,同时进行了高产原花青素刺葡萄愈伤组织细胞系的筛选研究。结果表明,刺葡萄幼胚以平放的方式接种到MS＋1.0 mg·L^-1 2,4-D或MS＋1.0 mg·L^-1 2,4-D＋0.5mg·L^-1 KT的固体培养基上,在黑暗的条件下,能有效的诱导出愈伤组织,诱导效率为80%;刺葡萄愈伤组织继代增殖以MS＋1.5 mg·L^-1 2,4-D或MS＋1.5 mg·L^-1 2,4-D＋0.5 mg·L^-1 KT的固体培养基为佳,并且采用此两种培养基交替继代培养,在光照条件下能长期保持旺盛且生长一致的刺葡萄愈伤组织;筛选出了紫红色松脆状的高产原花青素的刺葡萄愈伤组织细胞系,培养35 d后每克鲜样的原花青素含量可达1 671.16μg。     

麻疯树悬浮细胞系的建立与优化

以麻疯树无菌幼苗为外植体,研究疏松愈伤组织诱导方案及不同培养条件对麻疯树悬浮细胞生长的影响,旨在建立麻疯树悬浮细胞体系.结果表明,麻疯树疏松愈伤组织诱导的最适培养基及激素组合为:MS+2,4-D0.6mg/L+BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L,此培养基上诱导出的愈伤组织湿润松散,颜色鲜艳.接种愈伤组织进行悬浮培养的液体培养基最适激素组合为:NAA 0.2mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+BA 0.5 mg/L.初代愈伤组织适宜用于悬浮培养,摇床转速应低于120 r/min为宜,这样培养的悬浮细胞分散度最高.培养基中添加500 mg/L水解酪蛋白能有效地促进悬浮细胞的生长.悬浮细胞振荡培养过程中悬浮细胞生长的时间进程为起始培养的第5天前,细胞增殖十分缓慢;第5-11天期间生长迅速;第13天后基本停止生长.在上述优化培养条件下,麻疯树悬浮细胞系增长速率最快,细胞生长状态最佳.     

Study on Tissue and Protoplast Culture of Wild Cotton (Gossypium davidsonii)

This paper deals with the study on the condition of callus formation, embryogenesis, organogenesis, plant regeneration and protoplast culture of wild cotton (G. davidsonii) Callus cultures derived from several organs such as root, stem, leaf, cotyledon and hypocotyl. The results obtained in these cultures showed that the modified MS medium containing 2,4-D 1.0+KT 0.1; 2,4-D 0.1+KT 0.01; NAA (IAA) 2.0+KT 0.1 and NAA (IAA) 1.0+KT 0.1 mg/L were favorable to callus formation. Modified MS medium containing 2,4-D was suitable for initiated callus of G. davidsonii Besides, suspension cultures from callus of G. davidsonii were saccessfully initiated. Optimum concentration of 6BA (or ZT, or 2ip) and NAA (IAA) was for shooting, somatic embryo or leaf formation. Plantlets regenerated from somatic embryo at lower concentration of 6BA, or ZT, or 2ip. As to protoplast culture of this species, the age and physiological condition of callus or suspension cells and concentration of enzymes used for protoplast isolation affected the yield and survival of protoplasts. Protoplast of this species cultured in modified MS medium containing 2,4-D 0.5+NAA 0.5+ZT 0.1–0.2 mg/L. and divied after 3–4 days. The rate of division was 3--4% and cell cluster formed after 14 days, then these cells died.     

人参细胞悬浮培养中的激素调节及细胞分裂的研究

在人参细胞悬浮培养中,单使用植物生长调节剂时以Zmg/L 2,4—D和2mg/LNAA的效果较好.在不同激素组合的试验中,以2mg/L 2,4—D+2mg/L NAA+0.5mg/L KT的效果最好.悬浮条件下人参细胞的再生方式有有丝分裂、无丝分裂和出芽繁殖,其中直径为50μm以下的小型园形细胞的分裂为有丝分裂,而葫芦形、肾形、长园形及不定形的巨型细胞常表现为无丝分裂和出芽繁殖.植物激素对不同类型细胞的分裂有一定的影响作用.和愈伤组织固体培养相比,细胞悬浮培养可使细胞干重增加近5倍.     

石蒜愈伤组织的诱导及其继代培养

以石蒜鳞茎为外植体,研究了不同激素组合、鳞茎不同部位和不同生长时期等因素对石蒜愈伤组织诱导的影响及其继代培养。结果表明：MS＋2,4-D 1 mg·L~（-1）＋6-BA 1 mg·L~（-1）激素组合能较好的诱导出石蒜愈伤组织,诱导率达61.13%;外植体的选择是石蒜愈伤组织诱导的关键因素,内层鳞茎诱导愈伤组织的效果最好;在一个生长周期中,9、10月的鳞茎作为外植体诱导愈伤组织最佳;MS＋2,4-D 0.5 mg·L~（-1）＋KT 0.5 mg·L~（-1）是愈伤组织较好的继代培养基,继代周期为24～27 d。     

High efficiency shoot regeneration from callus of quaking aspen (Populus tremuloides Michx.)

Callus was induced from leaf segments of aspen (Populus tremuloides Michx.) on modified B5 (mB5) medium with 0.1 mg/1 benzyladenine (BA) and 0.5 mg/1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The resulting callus was either subcultured to solidified Woody Plant Medium (WPM) with 0.5 mg/1 BA directly for shoot regeneration or sieved into liquid mB5 medium for suspension culture. After 3 weeks of suspension culture, when the callus clumps grew to 3–4 mm in diameter, they were transferred onto solidified WPM with 0.5 mg/1 BA for shoot regeneration. Almost 100% of the clumps formed shoots on WPM when subcultured directly from mB5 with an average number of 6 shoots per callus. When transferred from suspension culture in mB5 to WPM, an average of 6 shoots per callus were produced from 51% of calli. These shoots could be easily rooted on either mB5 or WPM with 0.2 mg/1 indole-3-butyric acid (IBA) and transferred to pots. Transplanted plants were kept under intermittent mist for 2–4 weeks before normal growth in the green house.Abbreviations BA 6-Benzyl-adenine - IBA indole-3-butyric acid - 2,4-D 2,4-dichlorophenoxyacetic acid - mB5 medium modified B5 medium - WPM Woody Plant medium     

抗茎枯病芦笋品种离体培养的研究

选用芦笋（Asparagus officinalis）茎枯病高抗品种格兰蒂为材料,研究各种生长素及细胞分裂素对其茎尖诱导的愈伤组织、不定芽增殖和生根的效果。实验结果表明,最适芦笋茎尖诱导愈伤组织的培养基为：MS＋6-BA0.3 mg/L＋2,4-D 1.5 mg/L＋蔗糖25 g/L＋琼脂7 g/L,pH 5.8;最适愈伤组织增殖诱导、分化不定芽的培养基为：MS＋NAA 0.3 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂7 g/L,pH 5.8;最适生根培养基为：1/2 MS＋0.5 mg/L IBA＋1 mg/L PP333＋0.3 mg/L 6-BA＋蔗糖30 g/L＋琼脂7 g/L,pH 5.8。     

骨干玉米自交系丹598遗传再生体系的建立

目的:以玉米骨干自交系丹598的幼胚为外植体,诱导愈伤组织建立遗传再生体系。方法:探讨胚龄、培养基种类、2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响。结果:在授粉后16～18 d,2,4-D浓度为2.0 mg/L时诱导最佳;设置N6、NB、改良NB、MS、MB等5种培养基,筛选出改良NB培养基为最佳诱导培养基;分化培养基中添加1 mg/L激动素、0.5 mg/L 6-卞基嘌呤和0.5 mg/L萘乙酸能促进绿苗分化和根系生长。结论:建立了玉米自交系丹598的优良再生体系,为以后的基因转化工作打下了良好基础。