ICU感染嗜麦芽窄食假单胞菌分布与耐药性分析

目的了解ICU感染嗜麦芽窄食假单胞菌的分布与耐药性,比较本院ICU与非ICU嗜麦芽窄食假单胞菌的耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供科学依据。方法对2011年6月-2014年6月临床标本中分离的嗜麦芽窄食假单胞菌120株采用K-B纸片法进行药敏试验,应用SPSS 20.0对数据进行统计分析。结果嗜麦芽窄食假单胞菌主要来源于呼吸道标本(痰),占69.17%。临床分布以ICU多见,占30.00%。在20种抗菌药物中有14种抗菌药物耐药率50%,仅氧氟沙星、复方磺胺甲唑、米诺环素、左氧氟沙星等有较低耐药率,耐药率分别为0.00%、16.67%、1.67%、9.17%;头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南等12种抗菌药物ICU与非ICU耐药率分别为100.00%,66.67%;97.22%,75.00%;100.00%,40.48%;97.22%,33.33%;100.00%,79.76%;差异有统计学意义(P0.05)。结论临床感染嗜麦芽窄食假单胞菌对常用抗菌药物耐药严重,ICU嗜麦芽窄食假单胞菌耐药率明显高于非ICU,临床应高度重视,控制感染。     

嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因在类产碱假单胞菌中的转移与表达

类产碱假单胞菌 (Pseudomonaspseudoalcaligenes)是从盐城市农村粪池中采集的自然病死蝇蛆体内分离的具有显著杀蛆作用的细菌 ,野外使用易受阳光中紫外线的影响而失活。黑色素具有很强的抗辐射作用。将构建的含有嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因的质粒pWSY导入类产碱假单胞菌体内 ,使后者获得了稳定产生黑色素的能力。Southern杂交实验证实酪氨酸酶基因来源于嗜麦芽假单胞菌。SDS PAGE电泳显示该重组子体内额外表达了一分子量约为 1 8kD的蛋白 ,该蛋白很可能就是重组子表达的酪氨酸酶。经测定 ,重组子抗辐射作用明显增强 ,有效杀蛆时间显著延长 ,对畜、禽安全     

嗜麦芽寡养单胞菌胞外产物对斑点叉尾损伤的病理学研究

采用硫酸铵盐析从嗜麦芽假单胞菌培养物中提取其胞外产物,通过腹腔注射方式,进行了嗜麦芽假单胞菌(P.maltophilia)胞外产物对斑点叉尾(Ictalurus punctatus)损伤的系统病理学研究。结果表明,嗜麦芽假单胞菌胞外产物具有较强的毒力,对斑点叉尾(42.5±4.4)g的半致死剂量(LD50)为3.21mg蛋白/kg体重。病鱼出现神经症状,腹部和下颌充血、出血,腹部膨大,腹腔内充满大量淡黄色或带血的腹水,胃肠道黏膜充血、出血,肠套叠,肝、脾、肾肿大等临床病变。组织学病变主要表现为全身多组织、器官水肿,出血、变性、坏死以及炎症反应,特别是脑、骨骼肌、肝、脾、肾和胃肠道的损伤较为严重。超微结构观察发现病鱼肝、脾、肾和骨骼肌等器官的细胞的超微结构均有较为严重的破坏,线粒体肿胀,嵴断裂或溶解消失,呈空囊状,内质网扩张,细胞核变形,染色质溶解或固缩;研究中还发现嗜麦芽假单胞菌胞外产物可致淋巴细胞凋亡,脾和肾间质内淋巴细胞均表现为细胞核染色质浓缩边移,或核固缩成一个或数个团块凝聚在核膜周边,形成凋亡小体。       

2007年至2009年3种非发酵革兰阴性杆菌耐药性分析

目的研究自临床分离的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌等3种非发酵革兰阴性杆菌的耐药性及其变迁,为合理使用抗菌药物提供依据。方法临床标本按常规方法分离培养,用生物梅里埃API分析系统鉴定细菌种类,根据CLSI规定的标准,采用纸片扩散法进行体外药敏测定,WHONET软件进行统计分析。结果 2007年至2009年共分离到铜绿假单胞菌310株、鲍曼不动杆菌280株和嗜麦芽寡养单胞菌86株。其中亚胺培南不敏感的铜绿假单胞菌为32.5%,亚胺培南不敏感的铜绿假单胞菌对其他药物的耐药率也明显高于亚胺培南敏感菌株;鲍曼不动杆菌对大部分抗生素的耐药率都高于60%,对亚胺培南、美罗培南3年总的敏感率为51.6%和48.2%;嗜麦芽寡养单胞菌对米诺环素的敏感率为93.8%。比较3年耐药率的变迁,2009年部分抗菌药物耐药性增长的势头得到遏制。结论非发酵菌是引起院内感染的重要病原菌,对多种抗菌药物都有较高的耐药性,合理使用抗生素,加强医院感染的控制对减少细菌耐药性的产生有非常重要的作用。     

不常见的革兰氏阳性无芽胞杆菌的鉴定(续一)

<正> 荧光假单胞菌一在琼脂上的菌落和生化特性与绿脓假单胞菌相类似,但仅可产生一种色素即荧光素,可在5℃下生长,但42℃下不生长,蛋黄反应为阳性。本菌为腐生菌,发现在土壤与水中,也是食物腐败菌。 恶臭假单胞菌一类似于绿脓假单胞菌, 但仅形成荧光素。本菌属嗜冷营养型,不能在37℃下生长,但可在22℃下生长。有二个生物型,其一可在4℃下生长,另一则不能生长。二者均水解精氨酸,蛋黄反应阴性,不液化明胶,老培养物有明显的三甲胺气味(臭鱼味),为鱼类重要致病菌,也可从人的材料中分离到。 嗜麦芽假单胞菌-菌落类似绿脓假单胞菌,但产生黄色或褐色可扩散的色素。本菌由Gilardi氏用Difco制造的氧化酶片做氧化酶试验为阴性,而Snell用四甲基-1-苯二胺二盐酸盐做试验则发现为氧化酶阳性菌株。看来所用的方法是重要的。本菌不能水     

肝移植患者术后感染革兰阴性杆菌的分布及其耐药性分析

目的了解肝移植患者术后感染革兰阴性杆菌(G-杆菌)的分布及其耐药性,供临床治疗借鉴。方法采用回顾性分析2003年9月至2005年11月间,从我院肝移植中心103例肝移植术后患者送检的标本中分离到的467株G-杆菌的分布及其耐药情况。结果G-杆菌中,肠杆菌科占77.9%(364/467),最多前3种是大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌,非发酵菌占22.1%(103/467),最多前3种是嗜麦芽假单胞菌、铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌,检出产ESBLs菌148株,检出率为31.7%(148/467),产ESBLs最严重的细菌分别是铜绿假单胞菌(45.7%)、阴沟肠杆菌(41.8%)、嗜麦芽假单胞菌(40.54%)、肺炎克雷伯菌(34.9%)、大肠埃希菌(32.3%),肠杆菌科耐药率最高依次为哌拉西林、氨苄西林、替卡西林、氨曲南,在89.66%-94.13%,耐药率较低依次是亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星、头孢他啶,在5.45%-43.1%,非发酵菌耐药率最高是四环素、氨曲南、哌拉西林、头孢曲松,在59.84%-90.31%,耐药特率最低是阿米卡星、亚胺培南、妥布霉素、替卡西林/克拉维酸,在15.51%-27.63%。结论肝移植患者术后感染的G-杆菌产ESBLs菌高,耐药性严重,应引起关注。     

细菌转化黑色素的抗流感病毒作用

采用敏感的ＭＴＴ法测定了嗜麦芽假单胞菌转化黑色素的抗流感病毒作用。测定结果表明：纯化的黑色素毒性极低,对ＭＤＣＫ细胞的无毒界限为０．２ｍｇ／ｍｌ,远高于其有效的作用浓度;１０～２０μｇ／ｍｌ的黑色素能有效抑制流感病毒（血凝效价１∶３２）致细胞病变。病毒感染７２ｈ后用ＭＴＴ法测定,其宿主ＭＤＣＫ细胞保护百分率达９５％以上;此外,加黑色素后的ＭＤＣＫ细胞,抗流感病毒感染的能力优于目前抗病毒的有效药物病毒唑,前者的最佳作用浓度（２０μｇ／ｍｌ）比后者（１００μｇ／ｍｌ）低５倍。可以认为嗜麦芽假单胞菌转化黑色素具有毒性低、抗流感病毒能力强的特点     

假单胞基因工程菌的开发应用现状与展望

假单胞菌 (Pseudomonas)是一群革兰阴性的杆菌或球杆菌 ,需氧生长 ,多数有鞭毛有动力。按照《伯杰氏系统细菌学手册》第二版 ,假单胞菌科包括 2 9个属 ,数百个种和亚种。假单胞菌广泛存在于自然界 ,是土壤和水体微生态系统的重要组成部分 ,也是自然界的碳、氮循环的重要组成部分[1] 。尽管其中的某些种如铜绿假单胞菌可引起人和动物的机会感染、个别种如丁香假单胞菌可某些农作物致病 ,但大多数种是无害的 ,某些假单胞菌和荧光假单胞菌还是植物生长的有益菌。更重要的是 ,假单胞菌拥有极为复杂的酶系统 ,具有非凡的降解能力 ,在环保方面意…     

重症监护病房与呼吸内科下呼吸道感染病原谱分布及耐药性分析

目的通过对比台州医院重症监护病房(ICU)与呼吸内科下呼吸道革兰阴性菌的分离情况及其主要分离菌——铜绿假单胞菌的耐药性,为临床合理防治提供依据。方法用WHONET5软件回顾分析该医2004年1月至2005年12月间发生于ICU与呼吸内科所有送检痰标本革兰阴性菌的分布及其主要分离菌铜绿假单胞菌的耐药性变迁。结果在2年中,ICU痰标本革兰阴性菌的前几位分别为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、肺炎克雷伯菌、脑膜败血黄杆菌。呼吸内科痰标本所分离革兰阴性菌的前几位分别为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、嗜麦芽窄食单胞菌。铜绿假单胞菌在ICU的分离率从2004年的31.0%(92/617)上升到2005年的36.0%(257/713),在呼吸内科的分离率从2004年的23.0%(170/741)上升到2005年的25.0%(530/2118)。两个病区痰标本所分离的铜绿假单胞菌对16种抗菌药的耐药率均大于50%,仅对其中6种的耐药率每年均低于50%。但也呈逐年递增的趋势,分别为:头孢他啶38.1%-39.0%、庆大霉素13.1%-18.0%、妥布霉素7.2%-12.4%、头孢哌酮/舒巴坦10.2%-12.5%,等。结论两个科室革兰阴性菌的临床分离率在逐年增加,其主要感染菌铜绿假单胞菌在两个病区之间的耐药性均较高,差异存在着显著性。     

超声法重组细菌HCG受体的研究

用超声法将嗜麦芽假单胞菌(Pseudomonas maltophilia)HCG受体进行重组,经电镜及结合实验证明该法是可行的,作者对pH及金属离子对重组的影响进行了初步探讨。     

下呼吸道非发酵菌的分布及其耐药性研究

目的了解2000～2003年安微医科大学第一附属医院下呼吸道非发酵菌的分布及其耐药性,为临床合理选用抗生素提供依据。方法细菌鉴定、药敏试验和诱导β-内酰胺酶(IB)检测采用WalkAway-40全自动微生物分析仪,超广谱β-内酰胺酶(ESBb)检测采用纸片确证试验。结果2000～2003年下呼吸道非发酵菌的检出率为28．2％。其构成以铜绿假单胞菌为最多(56．6％),其次为洛菲不动杆菌(9．3％)、嗜麦芽窄食单胞菌(8．6％)和鲍曼或溶血不动杆菌(8．5％)。对复方新诺明,嗜麦芽窄食单胞菌的耐药率最低(14．3％)。对头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林或他巴坦,铜绿假单胞菌的耐药性较低,分别为20．3％、20．8％和28．3％;洛菲不动杆菌耐药率比鲍曼或溶血不动杆菌普遍偏低。铜绿假单胞菌ESBLs和IB的检出率分别为15．7％和84．2％。结论下呼吸道非发酵菌的检出率较高,主要为铜绿假单胞菌。非发酵菌耐药现象严重,不同非发酵菌的耐药谱差异较大。铜绿假单胞菌IB发生率高。     

嗜麦芽假单胞菌（P.maltophila）质粒的研究

本文用4种不同的方法对18株嗜麦芽假单胞菌是否含有质粒进行了检测,实验结果表明其中5株含有质粒。对其中的P2株不同生长期质粒存在状况的研究表明,该菌所含质粒与宿主不同生长期具有明显的相关性,其最高含量出现在稳定生长期,当细菌进入衰亡期时,其质粒量也随之减少,直至完全消失。 通过双向琼脂糖凝胶电泳、限制酶切分析以及分子量测定等方法,确定了嗜麦芽假单胞菌P2只含有1种质粒,分子量约为4.4×10~6道尔顿。有BamHⅠ、PitⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ单一酶切位点。该质粒可望进一步改建成十分有用的克隆载体。     

铜绿假单胞菌铁摄取调节子Fur诱导表达突变株构建及表型分析

铁摄取调节子 (Ferric uptake regulator,Fur) 是细菌控制细胞内铁平衡的一类重要的调节子。铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa的fur为必需基因,不能直接敲除。文中通过构建诱导型缺失突变株Δfur/attB::PBAD-fur,来研究该基因对铜绿假单胞菌的生长、生物被膜形成、运动能力和抗氧应激能力等方面的影响。结果表明,当Fur低表达时,铜绿假单胞菌在高铁和低铁环境中出现了生长阻滞的现象;低表达Fur的铜绿假单胞菌抵抗H2O2的能力降低,形成生物被膜的能力减弱,游动、颤动 (Twitching) 和丛集 (Swarming) 运动能力也出现了减弱的现象。Fur的表达直接影响铜绿假单胞菌荧光嗜铁素的产量。在铜绿假单胞菌体内表达来自格瑞菲斯瓦尔德磁螺菌Fur超级家族中的蛋白,可以部分恢复铜绿假单胞菌荧光嗜铁素的产量。由此说明,Fur对铜绿假单胞菌的生长、生物被膜形成、抗氧应激能力和运动能力方面都起着至关重要的作用。本研究为铜绿假单胞菌的防治提供理论指导。     

美罗培南对1139株革兰阴性杆菌抗菌活性研究

目的分析美罗培南对革兰阴性杆菌的抗菌活性,为临床合理使用美罗培南提供正确依据。方法将宁波市第一医院2004年6月至2005年8月的临床各种标本分离获得的革兰阴性杆菌在VITEK-32微生物自动鉴定分析仪中进行鉴定和药敏试验。用双纸片法及2-巯基丙酸抑制试验进行ESBLs、AmpC和金属酶的检测。结果共检出临床常见的革兰阴性杆菌1139株,其中肠杆菌科559株（大肠埃希菌309株,肺炎克雷伯菌186株,阴沟肠杆菌64株）,非发酵菌580株（铜绿假单胞菌227株,嗜麦芽窄食单胞菌72株,脑膜脓毒黄杆菌44株．鲍曼不动杆菌178株．洋葱伯克霍尔德菌30株,荧光假单胞菌29株）。美罗培南对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、脑膜脓毒黄杆菌、荧光假单胞菌的耐药率分别为0．0％、0．0％、0．0％、22．9％、23．6％、90．3％、100．0、63．3％和3．4％。结论美罗培南对革兰阴性杆菌有很强的抗菌活性,其抗菌活性要强于亚胺培南,是目前治疗肠杆菌科细菌特别是产ESBLs、AmpC酶细菌感染的危重患者的最理想用药。美罗培南耐药率呈逐年增加趋势,应引起重视。美罗培南对嗜麦芽窄食单胞菌、脑膜脓毒黄杆菌、洋葱伯克霍尔德菌活性很低,临床对于上述细菌感染不应选用美罗培南。     

假单胞菌研究现状及应用前景

假单胞菌是自然界分布最广的微生物之一,广泛的分布必然面对多样的生境,多样的生境造就了假单胞菌丰富的遗传多样性,此遗传多样性不仅为假单胞菌的环境适应性奠定了物质基础,也为人类提供了宝贵的遗传资源,具有巨大的理论和应用价值。从环境的生物修复、生物防治、生物转化、铜绿假单胞菌的耐药机制等4个方面总结假单胞菌的国内外研究现状,并对假单胞菌的应用前景进行展望。     

嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶功能研究进展

嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)是广泛分布于自然界的革兰氏阴性杆菌。作为一种新型、与高死亡率相关的条件致病菌,嗜麦芽寡养单胞菌能够导致人类或其他生物感染多种疾病。近年来,越来越多的研究结果显示来自于细菌的胞外蛋白酶是导致宿主发病的关键蛋白质。因此,探究嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的组成成分和功能将不仅有助于阐明其致病机制,更为今后以其为靶点进行临床治疗奠定基础。本文试图对嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的性质、功能及其应用进行归纳总结。     

羽毛降解菌的分离鉴定及角蛋白酶基因克隆

为了从废弃羽毛堆积土壤中分离筛选具有高效降解羽毛角蛋白的细菌,采用形态学观察、生化测定和16S rDNA序列分析鉴定菌株,测定蛋白水解研究酶活性及酶特性,鉴定该菌为假单胞菌属的嗜麦芽窄食单胞菌,降解羽毛的最适发酵培养温度为30℃,最适pH 7.0,最适接种量1%,最适发酵时间48 h,羽毛含量在0.25~0.5 g/50m L时产酶酶活性最高且较稳定,适合降解羽毛和头发。嗜麦芽窄食单胞菌角蛋白酶的作用温度和pH宽泛、稳定性好,具有良好的开发价值和应用前景。     

嗜麦芽窄食单胞菌感染危险因素与其耐药特征的研究

目的　研究嗜麦芽窄食单胞菌感染危险因素及其耐药特征,以提高临床对嗜麦芽窄食单胞菌防治水平。方法　对6 8例嗜麦芽窄食单胞菌感染者的临床资料进行统计分析,并用K- B法测其耐药情况。结果　嗜麦芽窄食单胞菌占非发酵革兰阴性杆菌的9.5 2 % ,居铜绿假单胞菌与不动杆菌之后,列第3位。药敏试验表明,该菌广泛耐药,敏感率>5 0 %者仅有复方新诺明、替卡西林-克拉维酸与头孢哌酮-舒巴坦,在感染者中,有85 .3%患者有基础病,98.5 %使用过广谱抗生素,70 .6 %曾接受侵入性检查和治疗。结论　嗜麦芽窄食单胞菌已成为医院感染重要致病菌,多发生在免疫功能低下的老人,慢性疾病、长期疾病、长期接受激素及使用抗菌药物、施行各种侵入性检查和治疗的患者。嗜麦芽窄食单胞菌对多种抗生素耐药,一旦感染,治疗颇为困难     

ICU革兰阴性菌院内感染病原菌及耐药变化

目的探讨ICU革兰阴性菌院内感染的病原菌及抗生素耐药情况,为临床防治提供依据。方法对温州医学院附属第一医院ICU2002年1月-2004年12月院内感染的所有标本分离的革兰阴性菌及耐药性进行回顾性分析。结果革兰阴性菌院内感染的部位主要在下呼吸道,其次为尿路。372株G^-菌中,前5位的分别是鲍曼不动杆菌62株（16．67％）、洋葱假单胞菌61株（16．4％）、铜绿假单胞菌58株（15．59％）、嗜麦芽窄食假单胞菌41株（11．02％）,肺炎克雷伯杆菌34株（9．14％）。3年中,鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食假单胞菌所致的院内感染有所增加;在细菌耐药性方面,G^-菌的耐药率普遍提高,对头孢哌酮／舒巴坦（13．25％）、哌拉西彬他唑巴坦（23．93％）、头孢他啶（39．66％）、美罗培南（32．17％）、奈替米星（48．36％）的耐药率〈50％,但对亚胺培南高达50．87％。结论ICU院内感染革兰阴性菌对除头孢他啶外的3代头孢耐药率普遍高,对亚胺培南耐药率高,加强细菌耐药性检测,合理使用抗生素很关键。     

类产碱假单胞菌酪氨酸酶基因重组子所产黑色素性质的研究

将构建的含有嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因的重组质粒导入从自然病死蝇蛆体内分离的具有显著杀蛆作用的类产碱假单胞菌体内 ,使后者获得了稳定产生黑色素的能力 ,具有很强的抗辐射作用。所产黑色素是无定形物质 ,在大多数有机和无机溶剂中溶解度低或不溶解 ,在碱性溶液中有较好的溶解性 ,在中性及弱酸性溶液中溶解度低 ,在pH <4的溶液中沉淀 ;可用过氧化氢或次氯酸钠氧化 ,也能被银离子或硫化氢还原 ;含有自由基 ,并能清除由紫外线诱导产生的自由基 ;能吸收所有波长的光线 ,在紫外波长下吸收值最大 ,能有效地保护紫外辐射对蛋白质及DNA等生物大分子物质的损害。