共查询到19条相似文献,搜索用时 46 毫秒
1.
通过与大鼠肝卵圆细胞的对比,对肝脏中一种新的前体细胞——小圆细胞进行分离和初步特性分析。以分步消化法制备小圆细胞,MTT法观察其增殖特点,以白蛋白、细胞角蛋白19、甲胎蛋白为标志物,应用免疫细胞化学染色的方法,对其进行鉴定。同时用DMSO刺激小圆细胞分化,检测分化结果,并与卵圆细胞加以比较。结果显示,小圆细胞增殖不明显。小圆细胞与卵圆细胞均表达白蛋白和角蛋白19。DMSO刺激后小圆细胞向卵圆细胞分化,分化前细胞AFP呈阳性,分化后细胞形状、标志物表达与卵圆细胞一致。本实验提示,小圆细胞很可能是早于卵圆细胞的一种肝脏前体细胞。 相似文献
2.
为了解中脑神经前体细胞的体外培养特性和建立中脑神经前体细胞的体外分化调控机制提供细胞模型。本实验采用含有丝分裂源表皮生长因子(EGF)的无血清培养基培养来源于大鼠胚胎E14.5天的中脑神经前体细胞,应用免疫细胞化学方法了解其前体细胞特性。结果发现中脑神经前体细胞呈神经前体细胞特征性标记Nestin免疫染色阳性,无分化细胞标记;细胞克隆实验证实中脑神经前体细 胞有自我更新能力;在EGF刺激下增殖迅速;当撤去EGF后置于含胎牛血清的培养基和被覆多聚赖氨酸(PLL)的培养皿内,中脑神经前体细胞可分化成神经元和星形胶质细胞。本试验证明我们培养的中脑神经前体细胞具有增殖、自我更新能力和多向分化潜能特性。 相似文献
3.
4.
缺失mir122抑制斑马鱼肝脏前体细胞向肝细胞分化 总被引:1,自引:0,他引:1
作为机体内最大的脏器之一, 肝脏对于机体的新陈代谢、解毒作用以及内环境的稳定有着重要的作用。FGF、BMP以及WNT信号通路及众多转录因子形成的基因调节网络精密调控着肝脏的发育, 然而小分子RNA在肝脏形成中的功能却所知甚少。近年来的研究发现, mir122在肝细胞中高表达, 对于维持肝脏的代谢功能起着至关重要的作用, 但是其在肝脏发育中的功能还不清楚。为了深入探讨mir122在斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育中的作用, 文章首先检测了mir122在发育过程中的时空表达, 发现mir122特异表达在肝脏, 并且在肝脏前体细胞向肝细胞分化过程中表达水平显著增高。文章还通过用反义核苷酸Morpholino (MO)敲降mir122的表达, 发现敲降mir122对肝脏前体细胞的起源、肝原基的形成以及肝脏前体细胞的增殖没有明显的影响, 但是, mir122的缺失导致肝脏前体细胞不能分化为肝细胞。因此, mir122不仅参与了成体肝脏代谢功能的调节, 还在肝脏前体细胞向肝细胞分化过程中不可或缺。 相似文献
5.
神经前体细胞的迁移机制及其应用研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
神经前体细胞脑内移植后可在全脑迁移。在病变的中枢神经系统 ,神经前体细胞的迁移具有损伤区靶向性。神经前体细胞的迁移可能与中枢神经系统微环境中的神经导向分子以及神经损伤区释放的包括炎症因子在内的一些因子有关。神经前体细胞的靶向性迁移特性使其可作为运载治疗性分子的载体细胞 ,特异性治疗多发性中枢神经系统退行性病变和转移性脑肿瘤。同时 ,神经前体细胞还可以参与损伤区的神经修复和功能重建 相似文献
6.
正常人肝脏星形细胞的分离,培养及鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
参考Friedman等分离人肝脏星形细胞(HSC)的方法,采用校正密度的淋巴细胞分离液进行一步梯度离心,成功地分离得到了正常人HSC。HSC的收获量约为1×10~7个/10克肝脏组织,存活率在95%以上,纯度达85%以上。传代后纯度接近100%。对人HSC的标志物进行检测发现,结蛋白不宜作为鉴定初分离的及原代培养初期人HSC纯度的指标,而α-平滑肌肌动蛋白可作为鉴定激活的人HSC的可靠指标。 相似文献
7.
目的:建立一种能稳定获得高活力和高纯度原代小鼠肝脏细胞的分离、纯化及培养方法。方法:应用改良的Seglen 二步法原位灌注和机械离心分离肝脏细胞,并用改良的高糖DMEM培养基进行培养。台盼蓝拒染法检测接种时肝脏细胞的存活率,倒置显微镜动态观察肝脏细胞形态变化,应用免疫荧光技术对肝脏细胞进行Albumin 染色。结果:每只小鼠可获取肝脏细胞的总产量平均为1.35× 10^6 / g体重,肝脏细胞存活率> 90%。倒置显微镜下观察贴壁前肝细胞直径为35.14 滋m± 4.35 滋m,肝脏细胞在接种后3 h基本完成贴壁;肝脏细胞接种后24h,所有肝脏细胞均强阳性表达成熟肝脏细胞标志物Albumin,肝细胞纯度> 95%。结论:改良的分离纯化及培养方法能稳定获得高产量、高活率及高纯度的小鼠肝脏细胞。 相似文献
8.
《生命科学研究》2017,(6):534-541
少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)在脊椎动物中枢神经系统(central nervous system,CNS)中负责形成包裹神经元轴突的髓鞘,保证神经冲动沿轴突的快速传导,并为其提供营养支持。OLs发育异常及损伤会导致严重的神经系统疾病,比如脑白质营养不良(leukodystrophy)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等。少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)在胚胎期由神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)产生,该过程受到一系列细胞内外因素的调控,对这一问题的研究也是神经系统研究的重要内容。现主要基于遗传学结果,简述关于OPCs产生的调控机制的最新研究进展。 相似文献
9.
张钰付亮鲁超锁涛宋陆军 《现代生物医学进展》2014,14(6):1005-1008
摘要目的:建立一种能稳定获得高活力和高纯度原代小鼠肝脏细胞的分离、纯化及培养方法。方法:应用改良的Seglen 二步法原
位灌注和机械离心分离肝脏细胞,并用改良的高糖DMEM培养基进行培养。台盼蓝拒染法检测接种时肝脏细胞的存活率,倒置
显微镜动态观察肝脏细胞形态变化,应用免疫荧光技术对肝脏细胞进行Albumin 染色。结果:每只小鼠可获取肝脏细胞的总产量
平均为1.35× 106 / g体重,肝脏细胞存活率> 90%。倒置显微镜下观察贴壁前肝细胞直径为35.14 滋m± 4.35 滋m,肝脏细胞在接种
后3 h基本完成贴壁;肝脏细胞接种后24h,所有肝脏细胞均强阳性表达成熟肝脏细胞标志物Albumin,肝细胞纯度> 95%。结
论:改良的分离纯化及培养方法能稳定获得高产量、高活率及高纯度的小鼠肝脏细胞。 相似文献
10.
目的研究人胚不同脑区神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)培养及增殖分化特性。方法取14-17周人胚脑区组织,分为新皮质、纹状体、间脑、中脑、后脑和延髓组,悬浮培养。鉴定细胞球巢蛋白抗原的表达,分化及自我更新能力。观察各脑区培养细胞的生长、增殖状况。新皮质、纹状体及间脑来源的神经球分化后,运用免疫荧光细胞化学法比较神经元及星形胶质细胞的比例。结果各脑区培养出的悬浮细胞球巢蛋白抗原阳性,可分化为MAP2或GFAP阳性细胞,且BrdU掺入实验阳性。体外培养第3d,纹状体及间脑组均可见大量神经球,且纹状体组明显多于间脑组;新皮质组传代后可见较多神经球;其它组仅见个别神经球。新皮质、纹状体、间脑来源的NPCs诱导分化后,MAP2或GFAP阳性细胞率各组间比较差异无显著性。结论人胚不同脑区均可培养出NPCs,从易到难依次为纹状体、间脑、新皮质及其它脑区。新皮质、纹状体、间脑来源的NPCs体外分化比例一致。 相似文献
11.
Abstract—
- 1 Relatively pure brain nuclei were prepared on a discontinuous sucrose gradient which gave yields of between 40 and 60 per cent.
- 2 An extraction procedure has been developed for the isolation of total histones from brain and liver nuclei. This procedure is also applicable to the isolation of histones directly from whole brain and liver.
- 3 The electrophoretic pattern of histones prepared from brain and liver by the above procedure was similar to that of calf thymus histones.
12.
13.
大鼠肺微血管内皮细胞培养及鉴定 总被引:17,自引:0,他引:17
取大鼠周边肺组织进行肺微血管内皮细胞培养。将肺组织切成小块,用含有20%新生牛血清、肝素90μg/ml、L-谷胺酰胺4mmol、青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml的RPMI-1640培养基培养。血细胞立即从肺组织周围游出。继而是肺微血管内皮细胞。成纤维细胞及其他细胞72h才游出。培养60h后取出肺组织块,培养瓶中只有微血管内皮细胞和血细胞。后者可通过传代除去。获得的肺微血管内皮细胞具有规律的鹅卵石样形态和对异植物血凝素结合试验及八因子相关抗原免疫荧光染色均阳性。 相似文献
14.
Abstract— By chromatography on borate-coated silicic acid, glucocerebrosides, galactocerebrosides, sulfatides and sphingomyelins from brain tissue could be efficiently separated. Adult rat brain was found to contain 54.1 ± 1.5 nmol of glucocerebrosides per gram fresh weight. Ninety percent of the glucocere-broside fatty acids were palmitate, stearate and oleate; fatty acids with chain lengths above C20 were virtually absent. No hydroxy fatty acids were found. The long chain bases of adult rat brain glucocerebrosides consisted of 74.6% C18-sphingosine, 24.4% C18-sphinganine and 1.1% C20-sphingosine. These results are compared to those obtained from glucocerebrosides from immature rat brains (Abe & Norton , 1974) and discussed in respect to changes occurring during brain development. 相似文献
15.
鼠脑微血管内皮细胞的分离与长期培养 总被引:15,自引:1,他引:14
采用胶原酶消化、差速离心、尼龙网滤过技术分离和获取鼠脑微血管内皮细胞,接种后4h换液使获得的内皮细胞纯化,体外进行长期培养。细胞在体外生长176天,传至30代,细胞初期成活率为92%,纯度近90%。经形态学、超微结构和免疫组化鉴定,培养细胞为血管内皮细胞。培养至第30代的细胞仍能合成和分泌PGI2、ACE等,ⅧF:Ag阳性表达,染色体为二倍体(2n=42),基本保持着细胞的主要特征。该分离和培养方法的建立,将为研究与脑血管相关疾病提供有用工具。 相似文献
16.
Microsomes, isolated from rat liver homogenate in 0.88 M sucrose, have been fractionated by differential centrifugation. The 2nd microsomal fraction, sedimented between 60 minutes at 105,000 g and 3 hours at 145,000 g, consists mainly of smooth vesicles, free ribosomes, and ferritin. By utilizing the differences in density existing between the membranes and the granular elements it has been possible to separate the smooth membranes from the free ribosomes and ferritin. The procedure is to resuspend the 2nd microsomal fraction in a sucrose solution of 1.21 or 1.25 density and centrifuge it at 145,000 g for 20 or 40 hours. A centripetal migration of membranes and a centrifugal sedimentation of granular elements are obtained. Phospholipids, as well as the enzymatic activities DPNH-cytochrome c reductase, glucose-6-phosphatase and esterase are localized in the membranes. The free ribosomes have been purified by washing. A concentration of 200 µg RNA per mg nitrogen has been reached. RNA is also present in the membranes. These results are discussed in relation to current views on microsomal structure and chemistry. 相似文献
17.
A procedure is described for isolating cell membranes from rat liver homogenates. 20 gm. of rat liver was homogenized in a Dounce homogenizer in ice cold water buffered to pH 7.5 with NaHCO3, rupturing all of the cells and most nuclei. The diluted homogenate was filtered through cheesecloth to remove precipitated nucleoprotein and centrifuged at 1500 g, 10 minutes, to sediment a crude membrane fraction. The membrane containing sediment was recentrifuged 3 times in conical tubes (1220 g, 10 minutes), the top layer of the 2-layered sediment being retained. Flotation in a sucrose solution d = 1.22 freed the preparation from contaminating cell fragments and nuclear membranes not previously disintegrated. The floating material ~0.4 ml. was quite homogeneous and consisted of thin amorphous membranes. Electron micrographs revealed numerous double profiles similar in shape and dimensions to apposed liver cell membranes in intact tissue. 相似文献
18.
胎肝干细胞的分离、培养与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的体外扩增培养大鼠胎肝干细胞,研究其形态、生物学特性及表面标志物,探讨胎肝干细胞的性质。方法分离培养胎龄12-16d的胎肝细胞,SABC法检测原代、传代后及细胞克隆中的肝干细胞特异表面标志物OV-6、CK-19及nestin的表达。结果原代、传代培养的胎肝细胞部分表达OV-6、CK-19及nestin;培养3d开始出现小细胞团,1个月即形成肉眼可见的细胞集落,5-7d传代一次;细胞克隆几乎全部为干细胞标志阳性细胞。结论胎肝干细胞可通过克隆筛选法进行体外扩增,胎肝内存在nestin阳性干细胞,可能是一种更为原始的干细胞,在胚胎发育中起重要作用。 相似文献
19.
1997年Asahara等在人外周血中发现内皮祖细胞(endothelial progenitorcell.EPC),随后有文献报道,从骨髓中分离出EPC.异体骨髓移植研究显示成体外周血EPC来源于骨髓。许多作者报告EPC参与生理性和病理性血管新生.具有潜在的临床应用前景。目前关于EPC的不少基本生物学问题尚不完全清楚,其生理和病理意义也有争议。 相似文献