骨组织的脱钙及其免疫组织化学技术的探讨

骨组织的免疫组织化学染色 (ＩＨＣＳ)技术不同于普通石蜡切片常用的ＩＨＣＳ技术 ,有许多特殊性。为了提高骨组织ＩＨＣＳ的质量 ,本文根据骨组织及其ＩＨＣＳ技术的特点 ,对影响ＩＨＣＳ质量的几个问题进行了探讨。免疫组织化学染色 (Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇ,ＩＨＣＳ)技术是用已知的标记的特异性抗体或抗原对组织内相应抗原或抗体进行定性、定位或定量检测 ,经组织化学反应 ,使标记于特异性抗体的酶、金属及荧光素等呈现出某种颜色 ,并借助于光镜、荧光显微镜及电子显微镜等观察所显示的颜色和变化 ,从…     

有关免疫组织化学技术方法若干问题的探讨

免疫组织化学技术操作过程中经常可碰到的问题有：切片由于各种原因所引起的松动卷起甚至掉片,造成操作的失败;最后的结果背景较深,难与阳性物进行鉴别和判断;如何判断每一批免疫组织化学最后的反应结果的准确性和可靠性等等。本文根据上述问题,深入地探讨了其发生的原因以及提出了如何处理的方法,尤其是对如何判断免疫组织化学显色结果,并详细地介绍了各种方法     

免疫组织化学切片质量的探讨

在大中型医院,免疫组织化学检测在临床病理诊断中已成为重要的辅助手段,对疾病的确诊、治疗方案的确定及预后评估等非常重要。免疫组织化学切片质量的好坏直接影响结果的判断。虽然免疫组化方法简单,但影响因素较多,常导致结果不稳定。以往有许多献从组织的固定、抗原修复及显     

免疫组织化学技术制片的规范和质量控制

随着免疫组织化学技术的不断发展,该技术在组织学研究和病理诊断尤其是在肿瘤鉴别诊断的应用越来越广泛.     

免疫组织化学染色质控及常见问题分析

免疫组织化学是应用免疫学和组织化学原理,对组织切片中抗原成分进行原位的定位、定性、定量研究的一种技术,在病理科工作中对疑难病例的诊断和分型有重要作用,并对指导临床治疗,了解肿瘤预后发挥重要作用,已成为病理科不可缺少的技术支持,因此免疫组化的质量控制显得尤为重要。本室经过长期实践对其流程进行了严格规范,制定了严格的标准化流程,现介绍本室流程如下并对常见问题作逐一分析。材料和方法1.材料常规送检病理标本,全自动脱水机,Leica切片机,包埋机等。2.主要试剂ER、PR、CK、CEA、CD20、CD30、CD15、Ki67、S100、NF-κB、P27、P53等一抗及免疫组化染色S-P试剂盒、浓缩型DAB试剂盒、抗体稀释液等,均购自上海长嘉生物技术有限公司。3.组织材料处理1)固定:组织取材新鲜,固定及时,形态保存完整,抗原物质的抗原性不丢失、不扩散、不破坏是获得良好免疫组织化学结果的前提。根据组织类型不同其固定时间一般应在6至48h,固定时间不足,会造成抗原丢失,可产生组织表面抗原为阳性表达,中央为阴性表达,固定时间超过72h会使抗原不可逆性破坏,无法修复,而产生阴性表达。本室固定液采用低酒精浓度(75%的酒精)...     

植物激素的免疫组织化学定位

本文介绍目前在植物激素研究中常用的几种免疫组织化学定位方法及其可用性。     

早期心肌梗死后诊断若干免疫组织化学指标的敏感性比较

为探讨纤维连接蛋白（Fn),纤维蛋白原（Fg),补体（C5）,肌红蛋白（Mb),肌动蛋白（HHF35）,结蛋白（Dm)六种指标在诊断早期心肌梗死的敏感性,建立大鼠急性心肌缺血模型。应用免疫组织化学方法和图像分析与统计学处理系统,检测缺血心肌细胞内Mb,HHF35,Dm的缺失面积和Fn,Fg,C5的阳性反应面积。结果：Mb,HHF35,Dm在大鼠急性心肌缺血15min即可出现缺失,Fg,C5在心肌缺血15min即可出现阳性反应,而Ｆn直到心肌缺血３h才出现阳性反应,随缺血时间m,HHF35,Mb的缺失面积和Ｆg,C５,Ｆn的阳性反应面积逐步增大。表明Dm,HHF35,Mb,Fg,C5是反映早期心肌梗死的灵敏的形态学指标。Fn的敏感性不及前五种指标。     

免疫组织化学中的抗原修复技术

概述了免疫组织化学中固定对组织抗原性的影响,综述了抗原修复的方法及其原理。组织块的大小、固定液的种类、浓度及固定时间的长度都影响组织的抗原性。免疫组织化学实践中常用酶消化法、酸水解法、微波金属盐法、高压锅加热法等修复组织的抗原性。     

免疫组织化学技术常见问题分析及对策

免疫组织化学染色是目前常规病理诊断及鉴别诊断的重要方法和手段,但在制作免疫组织化学切片中存在着影响结果的许多因素,本文较全面地阐述了影响制片质量的常见因素,并对出现的问题进行了分析和提出了切实可行的对策。     

免疫组织化学中抗原修复的研究进展

组织中抗原性的妥善保存和抗原修复技术与免疫组织化学染色的成败有着十分密切的关系 ,因此如何妥善保存抗原以达到最大限度保留组织的抗原性及如何对抗原加以修复成为做好免疫组化染色的重要步骤。免疫组织化学 (ｉｍｍｕｎｏ ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ) ,简称免疫组化 ,是免疫学与分子生物学技术和形态学相结合的一门学科 ,是用已知抗体 (或抗原 )检测组织细胞中的未知抗原 (或抗体 )的技术 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等优点 ,已广泛用于病理诊断、鉴别诊断及胚胎发育、神经解剖等相关学科的研究。大量实践证明组织中抗原性的…     

垂体腺瘤分类的免疫组织化学研究

目的：研究我国垂体腺瘤的功能分类及其与临床病理的联系。方法：采用Dako-Envision法进行免疫组织化学染色,检测45例手术切除垂体腺瘤中6种激素（GH,PRL,ACTH,TSH,LH,FSH）的表达情况,据此进行垂体腺瘤的分类及临床病理研究。结果：在45例垂体腺瘤中,生长激素细胞腺瘤为15例（33.3％）,催乳素细胞腺瘤6例（13.3％）,促肾上腺皮质激素细胞腺瘤9例（20％）,促性腺激素细胞腺瘤3例（6.7％）,多种激素细胞腺瘤4例（8.9％）,无功能细胞腺瘤8例（17.8％）。结论：垂体腺瘤中不同类型腺瘤所占的比例存在差异,生长激素腺瘤在外科切除的腺瘤中最常见。     

人小肠粘膜内神经元的组织化学与免疫组织化学观察

使用ＮＡＤＨ黄递酶组化法,我们观察到小肠的固有层和粘膜肌层内的神经元和小神经节。粘膜内神经元经ＮＡＤＨ黄递酶组化与ＮＳＥ免疫组化法联合染色,由蓝色转变为黑色;在同一切片内粘膜下丛和肌间神经丛的神经元具有相同的染色性。粘膜内一些ＡＣｈＥ阳性反应神经元,胞体呈校形,两端伸出较长的突起;另一些神经元胞体呈卵圆形或不规则形,可见突起伸入肠膝下部,参与腺周丛。粘膜内神经元的类型和性质有待进一步研究。     

早期心肌梗死后诊断若干免疫组织化学指标的敏感性比浇

为探讨纤维连接蛋白(Fn)、纤维蛋白原(Fg)、补体 (C5)、肌红蛋白(Mb)、肌动蛋白(HHF35)、结蛋白(Dm)六种指标在诊断早期心肌梗死的敏感性,建立大鼠急性心肌缺血模型,应用免疫组织化学方法和图像分析与统计学处理系统, 检测缺血心肌细胞内Mb、HHF35、Dm的缺失面积和Fn、Fg、C5的阳性反应面积.结果Mb 、HHF35、Dm在大鼠急性心肌缺血15 min即可出现缺失,Fg、C5在心肌缺血15min即可出现阳性反应,而Fn直到心肌缺血3 h才出现阳性反应.随缺血时间延长,Dm、HHF35、Mb的缺失面积和Fg、C5、Fn的阳性反应面积逐步增大.表明Dm、HHF35、Mb、Fg、C5是反映早期心肌梗死的灵敏的形态学指标,Fn的敏感性不及前五种指标.     

一种在两栖类胚胎的免疫组织化学研究中有多种用途的方法

本文介绍了我们最近发展的一项用于两栖糊不胎的免疫组织化学研究的技术。两栖类胚胎经过适当的化学固定以后,用振动切片机可以得到５０－１００μ的切片,我们用这样的切片进行免疫萤光和免疫酶标染色,均得到满意的结果,可以进行光镜（共聚焦显微镜,普通显微镜）及透射电镜的观察。由于在整个过程中避免了使用有机溶剂及包埋剂,所以最大限度地保存了抗原性。与传统的各种免疫组化技术比较,切片的各部分组织均能迅速与抗体反应     

结肠腺瘤的免疫组织化学及组织化学研究

本文应用免疫组织化学CEA、MC_5(PAP法)和组织化学AB(PH2.5)/PAS、HID/AB(PH2.5)染色方法,对43例结肠腺瘤、52例结肠腺瘤伴中、重度不典型增生,13例结肠腺瘤伴癌变,15例结肠腺癌和10例正常结肠组织进行了相关抗原及大肠粘蛋白的研究探讨。结果发现五类组织之间其着色含量都呈现一定的差异,尤其是随着腺瘤的异型程度增大,这种差异更为明显。本实验结果提示,上述染色法对结肠腺瘤癌变的逐渐演变过程的变化具有一定的参考价值。     

EnVision与特异性抗体的一步法免疫组织化学标记

探讨En Vision与特异性抗体复合一步法免疫组织化学标记的可行性及其应用效果。筛选适合于该法的特异性抗体。利用辣根过氧化物酶标记的第二抗体（En Vision）分别与72种单克隆和多克隆特异性抗体混合配制成即用型试剂,将两步标记法变为快速微波一步法,并对2100余例各种良性和亚性肿瘤的免疫组化标记结果进行观察和分析。结果显示绝大发特异性抗体的特异性和敏感性与标准En Vision法相似,其中46种特异性抗体结果稳定,重复性佳;14种特异必抗体稳定性欠佳,但临用前新配制效果仍较理想;12种不理想,不主张用于此法,结果表明En Vision与特异性抗体复合免疫组化一步法是一种有效、快速、简便的免疫组化染色技术。适用于临床病理快速免疫组化诊断,但对所用的特异性抗体应注意选择。     

免疫组织化学染色定量方法研究（Ⅲ）

本文对免疫组织化学染色反应的定量方法进行了研究,导出阳性单位（ＰＵ）测算新公式。根据测试区域Ａ的灰度级ＧＡ和面积（ｍ＋ｎ）及阳性反应产物α相的灰度级Ｇα和面积ｎ（或背景面积ｍ）即可求得ＰＵ。公式如下：ＰＵ＝１００×｜Ｇα－ＧＡ｜／（ＡＡβ·Ｇｍａｘ）＝１００×｜Ｇα－ＧＡ｜／［（１－ＡＡα）·ｍａｘ］。式中ＡＡα＝ｎ／（ｍ＋ｎ）,ＡＡβ＝ｍ／（ｍ＋ｎ）,Ｇｍａｘ为测试仪器的最大灰度分级。本法灰度测试无需考虑灰度设定方法,只需在同一灰度设定条件下测试即可。本法还可用于其它组织化学、细胞化学和原位分子杂交反应显色程度定量。     

Ramos免疫组织化学技术的敏感性研究

观察快速微波一步法（Ｒａｍｏｓ法）免疫组织化学技术的敏感性。选用１５种辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的特异性抗体（ＥＰＯＳ）,对５９例相应的恶性肿瘤组织进行快速微波免疫组织化学一步法标记。结果显示５８例为阳性（９８．３％）,其中弱阳性４例,中度阳性和强阳性为５４例。结果表明,Ｒａｍｏｓ法具有敏感性高、特异性强、快速而简便等特点,有广阔的应用前景     

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

目的:探讨脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色影响.方法:用不同脱钙液处理小鼠颅骨标本,组织切片后进行苏木素一伊红染色、甲苯胺蓝染色、醛品红染色以及免疫组织化学染色.结果:经过不同脱钙液处理后的颅骨组织切片组织结构保存完好,肥大细胞的组织化学染色(甲苯胺蓝和醛品红染色),及肥大细胞中胰蛋白酶的免疫组织化学染色清晰.结论:不同脱钙液(8%盐酸脱钙液、EDTA脱钙液、混合酸脱钙液)处理不影响鼻腔粘膜中肥大细胞的组织化学和免疫组织化学染色.     

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究夏立群,王庆堂（同济医科大学组织胚胎学教研室武汉４３００３０）关键词乌鳢,内分泌细胞,免疫组织化学ＰＡＰ方法ＩＭＭＵＮＯＣＹＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＥＮＤＯＣＲＩＮＥＣＥＬＬＳＩＮＴＨＥＧＡＳＴＲＯ...