血清sPLA2-X、8-羟基-2'-脱氧鸟苷及hs-CRP水平诊断慢性阻塞性肺疾病急性加重的价值

摘要 目的：探究血清sPLA2-X、8-羟基-2''-脱氧鸟苷及hs-CRP水平诊断慢性阻塞性肺疾病急性加重的价值。方法：随机选取2021年3月~2023年11月在我院进行治疗的COPD患者128例,以患者是否出现急性加重分为稳定组和AECOPD组,其中稳定组29例,AECOPD组99例。比较两组研究对象外周血sPLA2-X、8-OHdG及hs-CRP水平水平差异;COX比例风险因素回归模型分析AECOPD的影响因素,采用ROC曲线分析相关指标单独及联合检测诊断AECOPD的价值。结果：AECOPD组FEV₁指标显著低于稳定组,差异具有统计学意义（P<0.05）。与稳定组组相比,AECOPD组患者外周血sPLA2-X、8-OHdG及hs-CRP水平均明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平与GOLD分级成正相关（P<0.05）,外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平与FEV₁/FVC（%）、FEV₁%pred成负相关（P<0.05）。采用COX比例风险因素回归模型分析,外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP均为影响AECOPD的独立危险因素。ROC曲线分析外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP诊断AECOPD的曲线下面积（AUC）分别为0.689、0.708、0.642、0.875,联合各指标预测价值明显高于单独检测。结论：AECOPD 患者外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平高表达。外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平与肺功能严重程度、肺功能指标相关,同时三者可用作诊断COPD患者急性加重的潜在预测指标。三者联合具有更高的诊断价值。     

慢性乙型肝炎病毒感染者HBeAg血清学自然转换及其影响因素分析

目的了解慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者乙型肝炎e抗原(hepatitis Be antigen,HBe Ag)血清学自然转换及其影响因素。方法以寿光市2012年3个强化干预镇街道农村居民乙型病毒性肝炎(简称乙肝)专项调查确诊的HBe Ag阳性感染者的血清学检测结果为基线,与2015年随访的血清学检测结果对比分析。用ELISA检测乙肝血清标志物,用实时荧光定量PCR检测HBV DNA载量,采用速率法检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)。结果 HBe Ag阳性者340例,随访3年,HBe Ag转阴142例,年转阴率13.92%;抗-HBe转换92例,年转换率9.02%。HBe Ag转阴/转换率与HBV DNA载量负相关(r=-0.227,P0.001;r=-0.193,P0.001);HBe Ag转阴/转换率与年龄有关,6~20岁组转阴/转换率低,随年龄增长HBe Ag转阴/转换率增高,各年龄组差异均有统计学意义(χ2=22.74,P0.01;χ2=30.34,P0.01);性别不是HBe Ag转换率的主要影响因素(P0.05)。血清学转换后,HBV DNA载量、ALT水平均较转换前有明显的下降,但仍有一定比例的感染者检出高拷贝的HBV DNA载量。结论 HBV感染过程中存在着HBe Ag血清学自然转换,年龄是HBV DNA载量的主要影响因素,HBe Ag与HBV DNA载量的变化并不完全一致。     

减毒HAV在体外抑制HBV表达HBeAg和HBsAg的实验研究

目的　探索减毒甲型肝炎病毒( HAV) ( H2减毒株)在Hep G2 .2 .15细胞中对乙型肝炎病毒( HBV)表达HBs Ag和HBe Ag的影响。方法　在Hep G2 .2 .15细胞中,加入含3×10 - 2 ( 3×10 4 .5CCID50 / ml) ,3×10 - 3( 3×10 3.5CCID50 / ml)浓度的减毒HAV。按不同疫苗浓度,每4 d换液1次,留取第12和第16天的培养上清液;同时设立对照组。用微粒子酶免分析法检测培养上清液中的HBs Ag和HBe Ag含量。计算减毒HAV在不同浓度,以及不同作用时间长度的条件下,对Hep G2 .2 .15细胞表达HBs Ag和HBe Ag的影响。结果　3×10 - 2 Ampoule/ ml的减毒HAV作用Hep G2 .2 .5细胞12 d后,培养上清液的HBe Ag浓度为( 4 7.2 3±6 .18) S/ CO,低于对照组的( 10 1.15±15 .77) S/ CO,2组比较差异有非常显著性( P<0 .0 1) ;16 d后,上清液HBe Ag含量为( 4 0 .2 7±13.30 ) S/ CO,也显著低于对照组的( 6 5 .85±3.4 6 ) S/ CO( P<0 .0 5 ) ;HBs Ag含量为( 2 .6 8±0 .31) S/ N,低于对照组的( 5 .10±1.2 7)S/ N,差异有显著性( P<0 .0 5 )。而3×10 - 3Ampoule/ ml的减毒HAV作用Hep G2 .2 .15细胞12 d后,培养上清液的HBs Ag浓度与对照组比较有显著性下降( P<0 .0 5 )。结论　一定浓度的减毒HAV可能有直接抑制HBV表达HBs Ag,HBe Ag的作用     

健康人成功接种乙肝疫苗后的细胞免疫应答状态评价

目的:探究健康人成功接种乙肝疫苗后外周血单个核细胞(PBMCs)增殖及其Tbet、GATA-3、Foxp3、RORγt和Bcl-6五种CD4+T淋巴细胞亚群特异性转录因子的表达特征,评价细胞免疫应答状态。方法:本研究共采集64份外周血样本,分别来自43例疫苗免疫[HBs Ab(+)]和21例未疫苗免疫[HBs Ab(-)]的健康人。其中,有部分样本使用HBV重组核心抗原(r HBc Ag)进行诱导培养。通过CCK-8法检测细胞增殖情况;采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测五种转录因子的m RNA表达水平。结果:HBs Ab(+)组五种转录因子基础表达水平均高于HBs Ab(-)组,其中GATA-3、Foxp3和R/F比值有显著差异(P0.001)。经r HBc Ag诱导后,HBs Ab(-)组五种转录因子的m RNA表达水平较基础水平均有意义地增加(P0.05);而在HBs Ab(+)组中,则均有不同程度降低,其中GATA-3显著降低(P=0.044);且诱导后HBs Ab(-)组五种转录因子表达水平均高于HBs Ab(+)组(P0.05)。结论:乙肝疫苗免疫成功人群的细胞免疫在基础和体外再次应答水平上与非疫苗免疫健康者均存在明显的差别。     

不同鼠龄Wistar大鼠肝腺泡Ⅰ、Ⅲ带肝细胞rDNA活化的形态计量学研究

目的　研究不同鼠龄组组间及组内肝腺泡Ⅰ、Ⅲ带肝细胞rDNA活化之形态计量的差异。方法　以甲酸明胶硝酸银混合制成Ag NORs染色液 ,活化的rDNA被染成深棕色 ,Ag NORs颗粒由Mais 2 0 0 0图像分析仪对各鼠龄组 (3、13、2 5、33月 )肝腺泡Ⅰ、Ⅲ带肝细胞核之Ag NORs分别进行了Ag NORs数、平均灰度与核面积比的形态计量测定。结果　Ⅲ带肝细胞核Ag NORs平均数 ,以 33月龄组分别少于 3、13、2 5月龄组 (P <0 0 5 )。Ag NORs平均灰度以 33月龄组分别小于 3、13、2 5月龄组 (P <0 0 5 )。结论　 33月龄肝腺泡Ⅲ带肝细胞核rDNA活性分别较 3、13、2 5月龄低     

特异性杀虫基因Bt cry3A在桑粒肩天牛幼虫两种肠道常驻内生菌中的转化和表达

[目的]将特异性杀虫毒蛋白基因Bt cry3A转入桑粒肩天牛(Apriona germari Hope,Ag)幼虫肠道常驻内生菌中,构建能在天牛幼虫肠道中定殖并表达特异性杀虫基因Bt cry3A的工程菌.[方法]以传统方法和16S rDNA分子生物学分析等方法分离、鉴定Ag幼虫肠道优势的常驻内生菌,从中筛选出适合转化的候选菌株.利用电转化技术将含有对鞘翅目昆虫具专一性毒力Bt cry3A基因的Escherichia coli-Bacillus thuringiensis穿梭表达质粒pHT305a和pHT7911分别转入Ag幼虫肠道常驻内生菌短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis Ag12,Ag12)和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis Ag13,Ag13)中.[结果]从Ag幼虫肠道共分离获得18个不同种的可培养细菌菌株,并从中选取菌株Ag12和Ag13作为出发菌株转入Bt cry3A基因.经质粒稳定性试验、转化子生长特性测试、伴胞晶体电镜检测、毒蛋白SDS-PAGE分析、工程菌定殖性分析以及生物毒力测试,结果显示cry3A基因已经成功转入Ag幼虫的常驻内生菌短短芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌中,并且工程菌Ag12-305a、Ag13-305a、Ag 12-7911和Ag13-7911都能在天牛幼虫肠道内稳定生长、繁殖并表达分子量约65kDa的伴孢晶体杀虫蛋白Cry3A.[结论]Bt cry3A基因已成功转入桑粒肩天牛幼虫肠道优势常驻内生菌中,获得了四株能在桑粒肩天牛幼虫肠道内定殖,并能表达目的杀虫基因Btcry3A的转基因工程菌.     

miR-375 在HBV相关性肝细胞癌肿瘤组织与癌旁组织中的表达

目的:比较HBV相关性肝细胞癌患者的肝癌组织与癌旁组织中miR-375的表达。方法:以西京医院进行肝癌切除术治疗的HBs Ag阳性的25例患者为研究对象,收集肝癌组织、癌旁组织及术前外周血标本,并采集相关临床信息。采用反转录和实时荧光定量PCR的方法检测组织中miR-375的表达水平。结果:本研究共收集的25例肝癌患者HBs Ag均为阳性,在肝癌组织中miR-375的表达水平为2.51×10-3±3.61×10-3,显著低于在癌旁组织中的表达水平(15.23×10-3±20.85×10-3;t=3.12,P0.05)。结论:miR-375在HBV相关性肝细胞癌肝癌组织中表达显著下调。     

分泌抗黄曲霉毒素M1抗体的大鼠－小鼠淋巴细胞杂交瘤细胞株的建立及其特性的研究

通过大鼠、小鼠对AFM1－BSA抗体应答的比较,选用应答强的大鼠脾细胞作为亲本细 胞,与小鼠骨髓瘤P3X63一Ag8．653系细胞融合制作杂交瘤。经HAT培液选择和RIA的筛选, 克隆化,最终获得生长良好、稳定分泌抗AFMl抗体的5株大鼠－小鼠淋巴细胞杂交瘤细胞 株。以EusA、竞争结合的RIA进一步证明获得的5个单抗是针对AFMl,并与其衍生物 AFB1有明显的交叉反应。5个单抗亲和力的平衡常数K为10⁹－10¹¹l／M,这表明这些单抗 具有组建检测AF试剂盒的潜在实用价值。     

人红细胞生成素单克隆抗体的制备、鉴定及应用研究

用rhEPo作为抗原,免疫BALB／c小鼠,取其脾细胞与x63Ag8．653小鼠骨髓瘤细胞融合,再碱性PAGE方法进一步分离并纯化的rhEpo,包被Pvc板,对杂交瘤用ELlSA方法进行筛选,获得两株稳定分泌抗hEPO单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于IgG1、IgG2b,轻链均为k链,Kd分别为5．53×10^-10mol／L和1．34×1O^-10mol／L．用western blot方法证明两者对hEPO具有高度韵专一性．能特异地识别rhEPO和尿源hEPO。所制备单抗可作为亲和层析的配体,用于再生障碍性贫血病人尿中EPO及哺乳类工程细胞所表达的hEPO的分离、纯化,并可用于hEPO的定量检测．     

乳腺癌患者化疗后乙肝病毒再激活及拉米夫定预防性应用的临床研究

目的:探讨化疗引起的乳腺癌患者肝功能损害与乙肝病毒(HBV)感染的相关性及抗病毒治疗在预防化疗引起的HBV再激活中的作用。方法:2006年3月-2010年10月在武汉市第三医院接受化疗的病理确诊为乳腺癌患者(包括术后辅助化疗)为研究对象,比较HBs Ag阴性138例和HBs Ag阳性50例患者化疗后肝功能损害的发生情况,并分析在HBs Ag阳性患者中,预防性使用(21例)与未预防性使用(27例)抗病毒药物拉米夫定后乙肝病毒再激活率的差异。结果:化疗后出现肝功能损害的乳腺癌患者中,HBs Ag阳性患者(31.25%)与HBs Ag阴性患者(16.67%)所占比例的差异有统计学意义(P<0.001)。化疗前预防性使用拉米夫定(4.62%)与未预防性使用(25.93%)拉米夫定,患者出现HBV再激活率的差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:乳腺癌患者化疗后,HBs Ag阳性患者较HBs Ag阴性患者更易出现肝功能损害,预防性使用核苷类似物抗病毒药物拉米夫定,可明显降低乳腺癌合并乙肝患者化疗后HBV再激活肝炎的发生。     

口服结核Ag85A-CD226 DNA疫苗在小鼠脾与肠道的表达水平检测

目的了解结核Ag85A-CD226 DNA疫苗经灌胃方式接种小鼠后在脾淋巴细胞与肠道的表达情况。方法将构建的pcDNA3.1-Ag85A-CD226、pcDNA3.1-Ag85A和pcDNA3.1-CD226真核表达质粒转化DH5α感受态大肠杆菌,扩增并提取纯化质粒,用脂质体包裹制成DNA疫苗。经灌胃方式将制备的DNA疫苗接种C57BL/6小鼠,设置Ag85A-CD226疫苗组、Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组。采用间接免疫荧光法检测Ag85A和CD226在肠道的表达。采用流式细胞术检测脾CD4+T细胞、CD8+T细胞和NK细胞的CD226表达。结果 CD226在Ag85A-CD226疫苗组脾脏CD4+T细胞和NK细胞的表达均明显强于Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P0.01);CD226在Ag85A-CD226疫苗组脾脏CD8+T细胞的表达明显强于Ag85A疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P0.01),与CD226疫苗组相比虽有所增加,但差异无统计学意义(P0.05)。CD226在Ag85A-CD226疫苗组小肠派氏淋巴结表达明显强于Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。Ag85A只在Ag85A-CD226疫苗组和CD226疫苗组小肠固有层表达,且在Ag85A-CD226疫苗组的表达明显强于CD226疫苗组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论 Ag85A-CD226 DNA疫苗接种后,CD226在脾淋巴细胞和肠道表达增强,Ag85A在肠道表达增强,CD226的表达增加会增强Ag85A在肠道的表达水平。     

水蕹菜（Ipomoea aquatica）对含银废水的净化功能研究

 本文通过对水蕹菜净化含银废水的室内外静、动态试验研究得出：(1)水蕹菜对离子态银(Ag+)的去除速率高于对络合态银(Ag(S2O3)2)3-的去除速率即KAg+>K[Ag(S2O3)2]3-;(2)水蕹菜对银的净化率R与污水停留时间t呈指数函数关系(R=AeB/t,A、B为常数,B<0),其表面去除负荷Ps则与t呈幂函数关系(Ps=AtB B<0);(3)试验证明水蕹菜是生物净化含银废水的优良品种之一。     

银离子对辣根过氧化物酶的影响

实验研究Ag 对HRP的影响对检测银的污染有重要意义。以ABTS[2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)]和H2O2为底物,在pH值5.0的条件下,用分光光度法考察了Ag 存在下的辣根过氧化物酶催化氧化反应。Ag 对辣根过氧化物酶的催化活性显示出抑制作用,并进一步分别探讨了对两种底物的抑制类型和对酶结构的影响。结果表明Ag 对底物H2O2而言,对酶的抑制效应属于反竞争性抑制类型,抑制常数Ki=14.83mmol/L;对底物ABTS而言,对酶的抑制效应属于非竞争性抑制,抑制常数Ki=16.139mmol/L。不同浓度Ag 分别与酶作用后,测定酶的内源荧光光谱。光谱结果表明Ag 影响酶活性的同时也影响酶的构象。     

标记滞留细胞技术结合干细胞标记物检测小鼠子宫内膜干细胞

目的通过标记滞留细胞技术检测昆明小鼠子宫内膜干细胞的存在及其分布情况;观察P63和Musashi-1在不同周龄小鼠子宫内膜的表达以及两者与标记滞留细胞的关系,探讨P63和Musashi-1作为子宫内膜干细胞特异性标记物的可能性。方法出生3天雌性昆明小鼠皮下注射BrdU,分别在1w、2w、3w、4w、6w、8w和10w处死小鼠取其子宫。采用免疫组化法分别检测BrdU、P63和Musashi-1在各周龄小鼠子宫内膜的表达情况。结果标记后1w的小鼠,子宫内膜绝大部分的上皮和基质细胞都被BrdU标记。随着小鼠周龄的增加,子宫内膜BrdU阳性细胞百分率逐渐降低。至第8w时,仅在基质中有极少量的BrdU阳性细胞,主要位于基质与肌层交界处。早期小鼠子宫内膜组织中P63和Musashi-1阳性细胞数量较多,随着子宫内膜的逐渐发育成熟,P63和Musashi-1的表达逐渐减少,其表达规律及分布与标记滞留细胞基本一致。结论 (1)小鼠子宫内膜标记滞留细胞主要位于基质内膜与肌层交界处,这些细胞的分布与推测的子宫内膜干细胞的分布部位相符。(2)P63和Musashi-1是较特异的干细胞标记物。     

单克隆抗体减少了移植肾脏的排斥现象

据新英格兰医学杂志(1985年8月8日,313卷6期第337页)报道,Ortho Pharmaceutical公司(拉里坦,新泽西州)研制了一种老鼠单克隆抗体,OKT3。这种抗体用在63个病人身上,已使94％的病人扭转了移植肾脏的排斥现象。这些病人在用OKT3的同时,减少了其它免疫抑制药物的使用剂量。而60个使用常规大剂量类固醇的病人移植成功率只有     

实时定量RT-PCR对乙型肝炎病毒全长RNA(fRNA)的定量检测

目的:建立一种简便的定量检测慢性乙型肝炎患者血清中终止于聚腺苷酸化位点的乙型肝炎病毒全长RNA(f RNA)的方法。方法:选取53例未治疗的乙型肝炎患者及22例HBs Ag阴性的健康者为研究对象,使用锚定oligo-d T的引物对其血清中f RNA进行实时定量反转录PCR检测,统计分析其与HBV DNA、HBcr Ag和HBe Ag的相关性。结果:对f RNA进行实时荧光定量RT-PCR检测的下线为2.3 log copies/ml,标准曲线的相关系数为0.99(P0.0001)。53例乙型肝炎患者中,29例(54.7%)可以检测到f RNA,22例正常对照中没有检测到f RNA。27例HBe Ag阳性和/或高水平HBV DNA的患者全部检测到f RNA,26例HBe Ag阴性并且低水平HBV DNA的乙型肝炎患者中有2例(7.7%)检测到f RNA(P0.0001)。HBe Ag阳性患者血清中f RNA水平高于HBe Ag阴性患者(5.0±0.3 vs.2.9±0.4 log copies/ml,P0.001)。f RNA与HBV DNA/HBcr Ag具有显著相关性(r=0.905、0.881,P0.0001)。Hayashi's定量分析法I显示f RNA与HBV DNA相关性强于其与HBcr Ag的相关性。结论:与HBV DNA和HBe Ag一样,f RNA可作为常规检测判断HBV的复制水平并指导用药。     

八种氨基酸对水稻硝酸盐吸收的影响

目的:在较低NO3-浓度下,研究不同氨基酸对水稻硝酸盐吸收的调控作用.方法:使用非侵害性硝酸盐检测系统测定了谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸和丝氨酸8种氨基酸对水稻硝酸盐吸收的动力学影响.结果:加入谷氨酸、天门冬氨酸后对水稻硝酸盐的吸收有短暂的促进作用,硝酸盐净吸收率分别上升258±123%和217±34%;另外,加入赖氨酸和精氨酸以后发现水稻硝酸盐的吸收率降低-63±34%和-64±27%,反应延迟时间为30min以上,而其他4种氨基酸并没有产生明显的影响.结论:氨基酸不是直接调控水稻高亲和力NO3-转运系统,而可能是对NO3-同化过程进行调控.     

检测A型肉毒毒素的单克隆抗体

<正> 目前,抗A型肉毒毒素的单克隆抗体(Mab＇s)已得到发展,并使用于ELISA法快速检出可疑食物和培养液中的毒素。这些单克隆抗体具有同型特异性,A型中和力并与其他型毒素起交叉反应的特性。通过使用鼠骨髓瘤细胞系P3-x63-Ag8.653和获自用A型类毒素免疫的balb/c小鼠脾细胞融合,建立了22个产生抗A型毒素单克隆抗体的杂交癌细胞系。选择杂交瘤第424号,用双夹心ELISA法来检测A型毒素,用小鼠     

全血γ-干扰素释放试验在结核诊断中的应用价值

目的:评价全血γ-干扰素释放试验在结核病中的诊断价值。方法:将173例疑似结核病患者分为临床明确诊断肺结核63例(肺结核组)、肺外结核43例(肺外结核组)、排除结核67例(非结核组),观察各组γ-干扰素释放试验阳性率。结果:肺结核组、肺外结核组阳性率分别为85.7%(54/63)和88.4%(38/43),显著高于非结核组11.9%(8/67)(P0.01);诊断灵敏度为86.8%,特异度为88.1%。结论:全血γ-干扰素释放试验具有较高灵敏度和特异度,可用于肺结核及肺外结核的辅助诊断,适合临床推广使用。     

乙肝免疫标志物与乙肝病毒核酸含量与肝功能的关系研究

目的:研究乙肝免疫标记物(HBV-M)与乙肝病毒脱氧核苷酸(HBV-DNA)载量与肝功能的关系。方法:检测104例乙肝患者HBs Ag、HBe Ag、HBc Ab、HBs Ab、HBe Ab5种HBV-M;用PCR法检测HBV-DNA含量;同时检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆碱酯酶(CHE)等肝功能指标,对三者关系采用Spearman相关性分析。结果:HBs Ag、HBc Ab、HBe Ag阳性组HBV-DNA阳性率及载量均大于其余组(P0.05);HBe Ag含量、ALT浓度与HBV-DNA载量均呈正相关(r=0.48,P0.05)、(r=0.36,P0.05);AST、CHE与HBV-DNA含量无明显相关性,但在无病毒载量与有病毒载量组之间AST比较有统计学意义(P0.05)。结论:HBV-M、HBV-DNA与肝功能之间有一定的相关性,但HBe Ag阴转不代表病毒复制停止,HBV-DNA也不能完全反应肝损害程度,临床应加大重视。