云南火焰兰种子无菌萌发和试管育苗

对云南火焰兰进行无菌播种技术试验.结果表明,适宜萌动的培养基为1/4MS 椰子水20% 蛋白胨1 g L-1 蔗糖10 g L-1,播种30 d时萌动率可达93.1%;适宜萌发的培养基为VW 椰子水10%,培养75 d时萌发率达36.6%.盐浓度较高的MS培养基不适合种子萌发和原球茎生长,低盐的KC培养基上种子能较好地萌发和成苗;添加椰子水可明显提高种子萌动率,并有利于原球茎的生长和分化.光培养和暗培养对种子萌动的影响差异不明显,但暗培养3周会对种子后期发育不利.添加150 g L-1的苹果匀浆有利于幼苗生长.试管苗移栽成活率在95%以上.     

小叶兜兰的种子发育和无菌萌发

为建立小叶兜兰的繁育技术体系,本研究通过无菌播种的方法,辅以TTc生活力测定等方法,比较了小叶兜兰种子在授粉后不同发育时期和培养条件下的萌发率,对小叶兜兰种胚的发育过程进行了显微观察,探讨种胚发育程度与萌发的关系。结果表明,小叶兜兰种胚的发育阶段对萌发的影响最大,授粉后255d的种子萌发率最高（90．71％）,该阶段种子仍呈白色但微干燥,种胚刚发育至球形胚阶段,胚柄尚存。1／4MS和1／2MS为小叶兜兰适宜的基本培养基,添加100mg·L^-1的土豆汁对小叶兜兰的无菌萌发有良好的促进作用。     

Study on technology of aseptic sowing and rapid propagation of Demdrobium officinale

以铁皮石斛的蒴果为外植体,采用种子→原球茎→完整植株→移栽的途径快速成苗进行工厂化生产,对各阶段培养基进行筛选,以及其他一些影响因子进行比较研究.结果表明:人工授粉后生长60～180 d的铁皮石斛种子在离体条件下均能萌发,其中授粉150～180 d种子的萌发效果最好,萌发率为87.2%～94.4%,适宜的萌发培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+马铃薯汁200 g/L+AC 1.0 g/L;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 g/L+AC 1.0 g/L,繁殖系数约为20倍/50 d;原球茎在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+马铃薯汁200 g/L+AC 1.0 g/L培养基上进行分化培养,分化的同时还能进行一定的增殖;将已分化的芽苗转接到壮苗培养MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+香蕉汁100 g/L+AC 1.0 g/L上培养1代后,转接到生根培养基1/2MS+NAA 0.8 mg/L+无机盐A 0.2～0.5 mg/L +香蕉汁100 g/L+AC 1.0 g/L上,培养50～70 d后,生根率100%,无机盐A可以有效地控制愈伤或原球茎的形成,明显提高生根苗的数量和质量.在桂林地区,生根苗以3～5月和9～10为最佳移栽期,以通过高温处理并堆沤腐熟的松树皮为基质,移栽成活率可达90%.     

‘金州报春’兜兰的非共生萌发与快速繁殖

收集授粉后不同时期报春兜兰栽培品种‘金州报春’的种子,观察种子形态特征和萌发过程,建立了高效快繁体系。试验结果表明种子萌发的最佳培养基RE＋O-3nag·L～NAA＋0．1mg·L～6-BA＋100mL·L-1椰子乳（体积比）;授粉162d后的种子萌发率较高并且无白化现象,授粉203d的种子播种后萌发率可达94-33％;分化后的原球茎在壮苗培养基上培养4个月后可得到有5～6片叶、高3～5cm的健壮试管苗。     

金线兰种子萌发及其原球茎的增殖培养

研究了影响金线兰种子非共生萌发的因素,并应用正交试验研究基本培养基、6-BA、ZT、NAA四种因素对原球茎增殖的作用。结果表明:授粉类型对金线兰种子非共生萌发影响较大,异株异花、同株异花以及同株同花授粉所得的种子的萌发率分别为78.53%、69.62%、39.87%;蒴果成熟度以生长150d为宜,采收后萌发率可达78.59%;冷藏影响种子的活力,种子的萌发率随冷藏时间的延长而降低;使用次氯酸钠浸泡后的种子与对照相比,其萌发率无明显差异;NAA对原球茎增殖作用显著,适宜于原球茎增殖的培养基为1/2MS+ZT0.5mg/L+NAA1.0mg/L。     

亨利兜兰的离体快速繁殖

1植物名称 亨利兜兰（Paphiopedilum henryanum Bream）。 2材料类别 种子。 3培养条件 种子萌发和原球茎分化培养基：（1）1/2MS;（2）1/2MS＋1g·L-1活性炭;（3）1/2MS＋1g·L-1活性炭＋100mL·L-1椰子乳;     

白旗兜兰种子非共生萌发与试管苗快速繁育

对我国极小种群野生植物白旗兜兰的种子非共生萌发与试管苗快速繁育开展研究,对比了不同培养基、预处理、种子成熟度及光照对种子萌发的影响。白旗兜兰种子萌发的最适条件是授粉后270 d的种子,在1/4MS+10%椰汁培养基上,用1%Na OCl溶液处理种子40 min并在播种后的前4周进行黑暗培养。最适合原球茎转化幼苗的培养基是3.0 g·L-1花宝一号+1.0 mg·L-1NAA+0.5 g·L-1活性炭+10%香蕉匀浆,而最佳幼苗生根壮苗的培养基是3.0 g·L-1花宝一号+1.0 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-16-BA+0.5 g·L-1活性炭+10%香蕉匀浆。     

铁皮石斛无菌播种产业化繁育技术研究

以铁皮石斛的蒴果为外植体,采用种子→原球茎→完整植株→移栽的途径快速成苗进行工厂化生产,对各阶段培养基进行筛选,以及其他一些影响因子进行比较研究。结果表明:人工授粉后生长60～180d的铁皮石斛种子在离体条件下均能萌发,其中授粉150～180d种子的萌发效果最好,萌发率为87.2%～94.4%,适宜的萌发培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+马铃薯汁200g/L+AC 1.0g/L;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L+香蕉汁100g/L+AC 1.0g/L,繁殖系数约为20倍/50d;原球茎在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+马铃薯汁200g/L+AC 1.0g/L培养基上进行分化培养,分化的同时还能进行一定的增殖;将已分化的芽苗转接到壮苗培养MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+香蕉汁100g/L+AC 1.0g/L上培养1代后,转接到生根培养基1/2MS+NAA 0.8mg/L+无机盐A 0.2～0.5mg/L+香蕉汁100g/L+AC 1.0g/L上,培养50～70d后,生根率100%,无机盐A可以有效地控制愈伤或原球茎的形成,明显提高生根苗的数量和质量。在桂林地区,生根苗以3～5月和9～10为最佳移栽期,以通过高温处理并堆沤腐熟的松树皮为基质,移栽成活率可达90%。     

中药材铁皮石斛组培苗不同培养基的筛选与优化

铁皮石斛组培苗在生长各个阶段对营养物质的需求不一样,培养条件不同组培苗生长结果也不一样。本研究以铁皮石斛种子为材料,通过无菌播种进行原球茎诱导、增殖、分化、生根试验,对各阶段培养基进行比较,以期筛选出最佳培养基条件,为将来铁皮石斛走向工厂化、标准化生产提供思考和借鉴。结果表明,种子萌发以及原球茎诱导的最佳培养基配方是1/2 MS培养基,35 d后萌发率达93.1%。原球茎增殖最佳培养基配方组合是MS+6-BA(1.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),增殖系数达14.8。原球茎分化成苗的最佳培养基配方组合是MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L),分化率达92.1%,且长势良好。组培苗生根的最佳培养基配方组合是1/2 MS+NAA(1.5 mg/L),生根率达97.7%,根系健壮发达。     

铁皮石斛快速繁殖和离体种质保存的研究

对铁皮石斛种子发芽、原球茎增殖、丛芽分化和壮苗培育进行了试验、观察和分析,研究了培养基、植物激素、光强和添加剂等对其分化和生长的影响。结果显示种子在1/2MS+蔗糖2%的培养基上,30d萌发95%以上。原球茎在1/2MS+椰子汁25%+蔗糖3%的培养基上,45~60d原球茎增殖速度可达1∶10。丛芽分化较适宜的培养基为1/2MS+BA2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+蔗糖3%,45~60d芽丛增殖速度为1∶4~5。试管苗在MS+香蕉泥20%+蔗糖2%培养基上,大约60d苗快速长高,茎粗壮且根系发达。离体保存材料可采用试管丛芽和原球茎两种方式,以保持其遗传多样性。保存方法是在15℃左右条件下,保存离体材料,继代间隔期为12~18个月;也可以采用室温保存,在1/2MS+蔗糖1%培养基上,继代间隔期可延长至10~12个月。     

大花斑叶兰种子无菌萌发及快繁技术研究

对大花斑叶兰（Goodyera biflora）成熟种子无菌萌发、原球茎分化及根诱导进行了研究。结果表明：黑暗或弱光照培养有利于大花斑叶兰种子萌发,而较强的光照对形成健壮的原球茎有利;1/2MS＋NAA0.2mg/L培养基较为适合大花斑叶兰种子的萌发;MS＋KT1.0mg/L＋NAA0.5mg/L＋活性炭2.0g/L对原球茎增殖形成类原球茎有较好效果;1/2MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.5mg/L＋2.0g/L活性炭对根诱导效果较为理想。     

多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究

以多花兰种子为材料,研究了无机盐浓度、植物生长调节剂和光照条件对多花兰种子非共生萌发的影响,在此基础上,通过研究原球茎增殖和分化、芽苗壮苗和生根的培养基配方及培养条件,建立多花兰组培快繁技术体系.结果表明:多花兰种子萌发培养基为1/6 MS十NAA0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg· L-1+马铃薯泥50g·L-1+AC 1.0g·L-1,光照度为1.25μmol·m-2·s-1,萌发率63.6％;原球茎增殖继代培养基为1/4 MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg· L1+AC 1 g·L-1+PE 200 g·L-1,繁殖倍数6.5倍/60 d,芽分化率60.2％;再生芽分化培养基为1/4 MS十6-BA2.0mg·L-1+NAA 0.2 mg· L-1+AC 1 g·L-1+PE 200g· L-1,繁殖倍数4.0倍/60 d,芽分化率85.0％;芽苗壮苗和生根培养基为1/6 MS+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+AC 1 g·L-1+蔗糖20g·L-1 +PE 200 g·L-1和1/4 MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA1.2 mg·L-1+AC1 g·L-1十蔗糖20g·L-1+PE200g· L-1,生根率达100％,生根苗移栽成活率90％.此技术可用于多花兰种苗繁育和种质资源保护.     

In vitro propagation and mass scale multiplication of a critically endangered epiphytic orchid, Gastrochilus calceolaris (Buch.-Ham ex J.E.Sm.) D.Don. using immature seeds

In vitro asymbiotic seed germination potential of its immature seeds (36 weeks after pollination) of G. calceolaris was successfully tested on three different agar gelled nutrient media i.e. Murashige and Skoog (MS), Mitra et al. (M) and potato dextrose agar (PDA). Seeds germinated within 15.75+/-0.75 to 35.75+/-0.75 days in the three different media. The protocorms developed therefrom subsequently differentiated into first leaf and root primordia, and complete seedlings were obtained within 111.25+/-1.25 to 141.25+/-1.25 days on MS and M media. The protocorms, though failed to differentiate further on basal PDA medium, despite repeated subculturings, incorporation of peptone (P; 1 gl(-1)), yeast extract (YE; 2 gl(-1)) and coconut water (CW; 20%) in the medium proved beneficial in inducing differentiation, in these germinating entities. Additional use of growth additives (P/YE/CW), in general, favoured better germination, protocorm formation and seedling development. The optimal nutritional combination during seed germination, protocorm growth and multiplication and seedling development was found to be CW (10%) enriched MS medium.     

影响杏黄兜兰种子萌发的因素

通过在不同条件下杏黄兜兰 (Paphiopedilumarmeniacum)种子萌发的观察 ,对影响其萌发的诸因子报道如下 :1)果实的生长期与种子的萌发率有关。实验表明种子采自生长期为 6 0d的果实 ,发芽率为 3 5 % ,采自 12 0d的果实 ,发芽率为 4 0 % ,采自 180d的果实 ,发芽率为 18 3%。 2 )培养基也会影响到种子的萌发 ,种子在 1 5MS内培养 ,萌发率明显高于培养于MS ,RE和改良HyponexNo 1内的种子。 3)培养基 (1 5MS)掺入添加物也会影响到种子的萌发率 ,如掺入 10 %椰子水会促使种子的萌发率达到很高的水平 ,掺入马铃薯泥 (5 0g L)或胰化胨 (2g L) ,种子的萌发率会达到较高的水平 ,而掺入香蕉泥则会对种子的萌发率产生负面影响 ,掺入活性炭 (2g L)会促使种子萌发和幼苗发育。 4 )与固态培养基相比 ,种子在液体悬浮培养基内的萌发速度更快 ,幼苗更为整齐划一。     

In vitro propagation of <Emphasis Type="Italic">Epipactis flava</Emphasis> Seidenf., an endangered rheophytic orchid: a first study on factors affecting asymbiotic seed germination,seedling development and greenhouse acclimatization

Epipactis flava Seidenf., is an endangered Thai rheophytic orchid that has decreased rapidly throughout its natural habitat and urgently requires conservation using in vitro techniques. Effect of pollination types (self- and cross-pollination) and seed from different capsule ages (2, 4, 6 and 8 weeks after pollination) on asymbiotic seed germination efficiency was performed on semi-solid VW medium supplemented with 150 mL/L coconut water and 50 g/L potato extract. Highest germination rate was 79.2% with definite rate of protocorm developmental stage 5 at 24.0% using seeds from 6 week old cross-pollination capsules. Anatomical investigation revealed young seed has been formed at 6 weeks old capsules. Identical seeds were then cultured on semi-solid and liquid systems of five different media including modified-VW, MS, BM, MM and KC for 2 months. Results showed that semi-solid and liquid VW medium promoted the highest seed germination rates at 70.2% and 70.4%, respectively, with the highest definite rate of protocorm developmental stage 5 at 54% found on semi-solid BM medium. In vitro seedlings were transferred to culture on both semi-solid and liquid VW and MS media for 2 months. Higher growth parameters, as indicated by shoot number and fresh weight, were obtained on liquid MS medium. Clumps of plantlets containing 5–8 shoots were acclimatized and transplanted into different potting media for 3 months. Survival percentages in all tested substrates were recorded at nearly 100% with no significant differences, while 63–68% of the living plantlets produced new shoots.     

橙黄玉凤花种子萌发培养及小苗组培快繁研究

对橙黄玉凤花Habenaria rhodocheila种子进行无菌萌发培养以获得大量原球茎,并对原球茎组培,建立其快繁体系。结果表明,橙黄玉凤花种子以0.1%升汞消毒15 min为最佳处理。种子萌发培养基中,添加0.2%活性碳(AC)有利于种子萌发。种子萌发的最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.5 mg·L-1＋AC 0.2%,原球茎增殖分化最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.2 mg·L-1＋ZT 3.0 mg·L-1＋AC 0.2%;生根最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.1 mg·L-1＋6-BA 2.0 mg·L-1＋AC 0.2%。     

狭叶薰衣草的离体培养及挥发性成分的分析

为建立新疆狭叶薰衣草(Lavandula angustifolia)的快速繁殖体系,以种子、茎、叶为外植体,对种子萌发、愈伤组织诱导、丛芽分化和生根的最适培养条件进行了研究;用水蒸气蒸馏法提取狭叶薰衣草挥发油,采用气相色谱-质谱法测定挥发油成分。结果表明,种子浸泡的适宜时间为6 h,切开种皮培养,出芽时间最少为6 d;诱导种子出芽的适宜培养基为MS+6-BA2 mg/L;以茎为外植体诱导愈伤组织效果较好,适宜培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;诱导分化丛芽的适宜培养基为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;生根的适宜培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;盆栽薰衣草和无菌苗薰衣草的挥发油主要成分相差较大,离体培养的薰衣草的主要挥发性成分有叶绿醇、丁香油烃、氧化石竹烯等。