MUTZ-3树突细胞对B型流感嗜血杆菌结合疫苗组分的应答

<正>对于疫苗注册和批签发而言,疫苗效力测定应该是指令性进行的,由于体内效力测定受到各种各样因素的限制,因此有必要采用相关的体外替代效力测定。这些替代试验应当最好包括来源于目标(人类)种系的细胞,针对人体体内发生的因免疫接种导致的一系列免疫应答是不可能通过使用单一细胞类型就可测定出来的,即使树突细胞能成为一种     

美国用基因操作改进百日咳疫苗

美国国立卫生研究所(NIH)的Camille L.和Jerry M.K.鉴定了百日咳毒素基因的克隆和碱基序列。这一结果向开发安全的百日咳疫苗迈进了重要的一步。详文请参考“Science”第232卷1258—1259页。百日咳毒素是由百日咳病原菌百日咳博德特氏菌(Bordatclla pcrtussis)产生的。给儿童注射百日咳疫苗之所以常有副作用,推测其原因就是此毒素引起的。     

戊型肝炎疫苗上市后质量控制

目的对中国独创的基因重组戊型肝炎(hepatitis E,HE)疫苗Hecolin~?上市后质量的一致性进行评价。方法比较了Hecolin~?批签发疫苗与III期临床试验疫苗的效力试验检测结果,进而通过趋势分析评价Hecolin~?疫苗上市5年来的批间质量一致性。结果批签发疫苗与Ⅲ期临床试验疫苗的体内效力试验结果一致。批签发疫苗体内效力、铝含量、硫柳汞含量、p H等关键指标,中国食品药品检定研究院与企业的趋势分析结果均显示具有较好的一致性。结论趋势分析结果表明,上市后Hecolin~?疫苗批间质量一致性较好,质量稳定。     

抗百日咳毒素单克隆抗体及其应用研究进展

疫苗是预防百日咳(pertussis)的最有效措施,但无细胞百日咳疫苗接种后免疫力的迅速衰退是近年来百日咳发病率上升的原因之一。百日咳毒素(pertussis toxin, PT)是由百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)分泌的主要毒力因子,具有多种生物学活性。在无细胞百日咳疫苗设计初期,为确保疫苗的有效性,抗PT的单克隆抗体(单抗)常被用来检测PT表面重要的抗原表位。研究表明,与天然PT特异性结合的部分单抗无法识别经化学方法脱毒后的PT,提示化学脱毒会改变疫苗中PT的一些抗原表位,进而影响疫苗保护效果。现结合单抗可用来研究抗体干扰PT功能的分子机制,对机体在感染百日咳后的保护性免疫机制进行综述,以期为无细胞百日咳疫苗的进一步改进及开发人源化抗PT单抗治疗百日咳提供科学依据。     

用于快速测定流感疫苗效力的新型抗体非依赖性受体结合SPR检测法

<正>2009年H1N1流感大流行之后世界卫生组织举办研讨会,提出优先开发测定流感疫苗效力的替代检测方法,以期满足流感大流行时加快流感疫苗批签发的需求。作者开发了一种抗体非依赖性的,简单的高通量的以受体结合SPR为基础的效力检测法,这种方法不需要任何参考抗血清,而且能够用于快速血凝素定量测定以及在流感大流行情况下便于流感疫苗的快速批签发。在这种受体结合SPR表面等离振共振测定中,利用在α-2,6或者在α-2,3     

无细胞百日咳疫苗的质量控制及其标准化

无细胞百日咳疫苗在全世界范围内已逐渐用于婴幼儿的计划免疫和加强注射中,但到目前为止没有完全令人满意的效力试验方法。小鼠保护试验不适合对无细胞百日咳疫苗进行效力评估,免疫原性试验在衡量制品一致性方面是有用的,但与临床保护之间缺乏相关性,最近建立的气雾攻击主动保护试验为功能性效力试验开创了美好的前景。用生物学结合物理化学方法对疫苗抗原含量,纯度,安全性和免疫原性的研究,对新开发的尚无有效效力试验方法的同类疫苗质量控制及标准化问题提供了指导。     

新型百日咳疫苗研究进展

百日咳(whooping cough)是一种由百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)感染所引起的急性呼吸道传染病,严重时可导致婴幼儿死亡。近年来百日咳的复发流行表明,百日咳的防控效果不理想,现有疫苗的保护力衰减是其重要的原因,亟需研发新型百日咳疫苗。现从不同研发角度对加强免疫、提高产能和优化工艺以及对全细胞百日咳疫苗(whole-cell pertussis vaccine,w P)、无细胞百日咳疫苗(acellular pertussis vaccine,a P)的改进,新抗原来源形式、应用新运送系统、新佐剂的新型百日咳疫苗作一概述。     

百日咳丝状血凝素酶联免疫检测法的建立

目的建立百日咳组分疫苗丝状血凝素(FHA)抗原含量监控的ELISA检测法。方法制备的多克隆抗血清,经辛酸硫酸铵法纯化抗体,用过碘酸钠氧化法辣根过氧化物酶标记,以棋盘滴定法确定最佳包被抗体及酶标抗体的浓度配伍,建立了双抗体夹心ELISA检测法。结果对双抗体夹心ELISA法的特异性、最佳线性范围、检测限度、精密度、准确度、测定限量、适用性的一系列验证试验表明,该方法与百日咳组分疫苗中PT和Prn无明显交叉反应,特异性较好。在0至20 ng/mL测量区间有最佳线性,相关系数大于0.99;经实验内12次及不同试验间3次测定16、8、4 ng/mL中的FHA含量,变异系数在0.2%～11.4%间,回收率在96.9%～114.5%间,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,因此测定限量为4 ng/mL。结论该方法能有效检测出百日咳杆菌培养上清中的FHA含量,可用于百日咳组分疫苗生产过程的中间品质量控制。     

疫苗新协议

Amvax Inc.(Beltsville,MD)是北美疫苗公司的子公司.Statens Seruminstitut(SSI)则是丹麦的国有公司,位于哥本哈根.二者正在建立密切的业务联系.他们已就其儿童疫苗签订了几项协议.其中一项协议促使两公司采用Amvax的百日咳疫苗和SSI的白喉、破伤风和脊髓灰质炎疫苗,共同开发DTP-脊髓灰质炎疫苗.该疫苗的目的在于使儿童对四种疾病产生免疫.SSI拥有一种DT-脊髓灰质炎疫苗,目前日常应用于丹麦;Amvax的DTP疫苗目前则还在美国进行三期试验.附加的协议则授权两公司相互获取某些疫苗产品.     

无细胞百日咳疫苗效价检定用攻击菌液氮保存的稳定性

为了考察无细胞百日咳疫苗效价检定用攻击菌在液氮中保存的稳定性,对液氮保存1~7年的4~9代百日咳攻击菌随机抽取7~11批次样品,采用LD50检测并经统计学处理,分析其样品的毒力变化。试验结果显示,4~9代的百日咳攻击菌液氮保存5年,毒力仍能达到《中华人民共和国药典》三部(2005版)的要求;保存6年和7年,4~7代的百日咳攻击菌毒力仍符合上述要求,8、9代的攻击菌毒力的合格率分别为84%和40%。试验证实,无细胞百日咳效价检定用攻击菌液氮保存5年具有良好的稳定性,可用于无细胞百日咳疫苗的效价检定。     

2008—2012年麻疹减毒活疫苗的质量分析

目的对中国2008—2012年连续5年麻疹减毒活疫苗(简称麻疹疫苗)的批签发情况进行总结,评价其麻疹疫苗的总体质量。方法通过对送检样品的资料审查和关键项目的实验室检定,采用趋势分析法对病毒滴度等进行分析和比较,回顾麻疹疫苗质量的整体情况。结果中国麻疹疫苗整体质量较好,批签发通过率为98.6%。疫苗关键指标数据稳定,病毒滴度100%符合国家标准,其中8批疫苗病毒滴度由于超过警戒线企业主动撤检。结论中国麻疹减毒活疫苗的质量稳中有升。国家疫苗批签发程序对确保上市疫苗的质量发挥重要作用,趋势分析在批签发中的应用更加严格保证了上市疫苗的安全性和有效性。     

婴幼儿及学龄前儿童百日咳初免对4岁儿童记忆B细胞免疫应答的影响

<正>由博特百日咳杆菌引起的百日咳疾病在接种过百日咳疫苗的人群中再度发生。接种了全细胞百日咳疫苗(wP)和无细胞百日咳疫苗(aP)之后机体内百日咳抗体会迅速衰退,免疫力则主要来自于B细胞和T细胞的长期保护。荷兰根据计划免疫程序,给2、3、4和11月龄的婴幼儿分别接种wP和aP,4     

肺炎球菌表面蛋白A不影响小鼠对百白破疫苗的免疫应答

<正>肺炎球菌表面蛋白A(PspA)是一种抗肺炎链球菌的构成蛋白疫苗的很有希望的候选物。之前我们已经表明,全细胞百日咳疫苗(wP)对于PspA是一种很好的佐剂,在小鼠中诱导抗肺炎球菌感染的保护性应答。在巴西,wP与白喉、破伤风类毒素(DTPw)及氢氧化铝(明矾)佐剂一起施用于儿童。在小鼠中PspA5-DTP.的单一皮下注射剂量(配方包含得自进化支5的PspA和新一代DTPw,并含有低剂量的百日咳杆菌脂多糖和明矾)诱导高水平的全身PspA5抗体,并针对两种不同的呼吸道致命性肺     

百日咳毒素对人亲血色蛋白的亲和性:用于毒素的体外测定

<正>百日咳毒素,由百日咳杆菌产生的一种蛋白质已被采用许多不同的名称而为人们所知道,诸如淋巴细胞增多促进因子(LPF),组织胺敏感因子(HSF),胰岛激活蛋白(LAP)和淋巴细胞增多促进因子——血凝素(LPF—HA)等,每一种都能在体内或体外反映一种特别的生物学反应,从前我     

第二代百日咳疫苗毒性国家标准品的建立

目的建立第二代百日咳疫苗毒性国家标准品(简称二代毒性标准品)。方法选用百日咳疫苗生产菌株(编号CS株CMCC58003)进行发酵罐培养,将收获的百日咳菌液灭活后分装冻干后,作为第二代百日咳国家毒性标准品的候选品(简称候选毒性标准品)。以第一代百日咳疫苗毒性国家标准品为标准(简称一代毒性标准品),由4个单位协作标定候选毒性标准品,采用热加速法考察候选毒性标准品的稳定性。结果共获得检定合格的候选毒性标准品1 800支;经4个实验室协作标定,每支二代毒性标准品LPU为21,HSU为41;且稳定性良好。结论候选毒性标准品各项指标均符合要求,可作为第二代百日咳疫苗毒性国家标准品使用。     

人类期待新的百日咳疫苗问世

<正>尽管有效的百日咳疫苗有很高的接种覆盖率,尚未有一个国家将百日咳得到控制。百日咳初免有两种疫苗可用,白喉/破伤风/全细胞百日咳疫苗和白喉/破伤风/无细胞百日咳疫苗,除此之外还有抗原含量较低的推荐用于加强免疫的疫苗。利用这些疫苗,正在探索几种应对当前百日咳问题的免疫策略,包括多次接种、"蚕茧策略"(注:是指对产妇和其他所有与<12月龄婴儿有密切接触的人接种     

腺苷酸环化酶毒素在无细胞百日咳疫苗中的免疫保护效果评价

目的 利用小鼠百日咳感染模型评估在无细胞百日咳疫苗中加入腺苷酸环化酶毒素的C端结构域(RTX751),能否提升无细胞百日咳疫苗的免疫保护效果.方法 ①用腺苷酸环化酶毒素的C端结构域与百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)、百日咳黏附素...     

百日咳菌苗的毒性和毒性试验

<正>百日咳至今仍是公共卫生方面的重要疾病。百日咳菌苗在许多国家仍然是社会需求的一项制品。世界卫生组织技术报告丛书(第638号69页)指出“由于百日咳菌苗的毒性还未完全清楚,各制造厂商和国家检定部门应继续进行毒性试验研究。” 本文着重评述了日本81规程制订的毒性试验方法及许可的毒性含量,并对百日咳杆菌所含毒性物质及其活性进行全面分析。     

百日咳微颗粒疫苗可诱导保护性免疫

<正>我们对预防百日咳的新型微粒(MP)疫苗的效力进行了小鼠实验研究,该疫苗组分包含百日咳类毒素(PTd)、聚磷腈(PCEP)、CpG ODN 10101和合成的阳离子天然防御调节肽1002(IDR)。与包含PCEP(SOL)或不包含PCEP(AQ)的可溶性配方相     

两种不同类型无细胞百日咳疫苗诱导小鼠免疫应答分析

目的比较两种不同类型无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后诱导体液免疫和细胞免疫应答的特点。方法将BALB/c小鼠分为3组(分别纯化Pa组、共纯化Pa组、PBS组),分别用稀释后的两种不同工艺生产的无细胞百日咳疫苗及PBS皮下接种,接种量0.5 m L/只,于第4周加强免疫,剂量与初免相同。于免疫后第1周、第4周和第5周取血,分离血清用于检测小鼠抗百日咳抗体Ig G水平(抗-PT和抗-FHA);同时于加强免疫后第7天,分离小鼠脾淋巴细胞,经刺激后,取其培养上清,用流式细胞微球芯片捕获法(cytometric bead array,CBA法)测定脾淋巴细胞经体外刺激后所产生的Th1、Th2和Th17型细胞因子的含量。结果对两种类型无细胞百日咳疫苗组检测的结果进行比较,在免后第4周,分别纯化Pa组和共纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平差异无统计学意义(P0.05);但在免后第5周,分别纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平均高于共纯化Pa组,差异均具有统计学意义(P0.05)。经PT刺激后诱导产生的细胞因子,分别纯化Pa组的IL-4含量高于共纯化Pa组,差异具有统计学意义(P0.05);分别纯化Pa组和共纯化Pa组的其他细胞因子差异均无统计学意义(P0.05)。结论两种类型的无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后均能诱导产生体液免疫应答和细胞免疫应答。