高强光下SO^2—3和F^—对盐藻叶绿素荧光特性的影响

高强光下，盐藻以５０ｍｏｌ．Ｌ＾－１和ＳＯ６２－３和Ｆ＾－处理１ｈ后，其体内ＭＤＡ含量上升，ＳＯＤ活性，Ｆｖ／Ｆｍ，Ｆｖ／Ｆｏ，ＰＳⅡ电子传递活性和游离－ＳＨ含量均下降；２．以ＳＯ＾２－３处理后转置于低强江下３ｈ，ＤＮＡ含量下降，Ｆｖ／Ｆｍ，Ｆｖ／Ｆｏ，ΦＰＳⅡ和ＳＯＤ活性回升，游离－ＳＨ含量增加，暗下不能恢复；９３０以Ｆ＾－处理后无论在低强江或暗下上述指标都不能恢复，甚至继续发展。     

菜豆下胚轴中的细胞分裂素结合蛋白

用植物体内天然存在并具有很高活性的玉米素（ｔ－Ｚ）和异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）作为配基,分别与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ偶联,制成亲和吸附介质,分离、纯化菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）黄化幼苗下胚轴中的细胞分裂素结合蛋白。一种分子量为１５．５ ｋＤ（简称ＺＢＰ）,只含一个多肽链;另一种分子量为１６５ ｋＤ（简称ＩＢＰ）,含有两种亚基,分子量分别为４３ ｋＤ和４０ ｋＤ。对ＺＢＰ的结合活性进行了研究,发现ＺＢＰ与ｔ－Ｚ结合时的解离常数（Ｋｄ）为３．２×１０－ ７ ｍ ｏｌ／Ｌ。经计算,每个ＺＢＰ分子只有一个ｔ－Ｚ结合位点     

重组PAI－1对u－PA抑制活性的研究

利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子－１（ｒＰＡＩ－１）具有许多与天然ＰＡＩ－１相同的性质,ｒＰＡＩ－１对ｕ－ＰＡ抑制活性研究的内容包括：几种化学物质（盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、ＳＤＳ、氯化钠等）对ｒＰＡＩ－１的激活作用、盐酸胍激活ｒＰＡＩ－１的浓度与温度效应、显色底物法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影对ｒＰＡＩ－１活性的测定、活性态ｒＰＡＩ－１向潜状态的转变及其与盐浓度和ｐＨ值的关系。     

重组PAI—1对u—PA抑制活性的研究

利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子－１（ｒＰＡＩ－１）具有许多与天然ＰＡＩ－１相同的性质,ｒＰＡＩ－１对ｕ－ＰＡ抑制活性研究的内容包括：几种化学物质（盐酸胍,尿素,硫氰酸钾,ＳＤＳ,氯化钠等）对ｒＰＡＩ－１的激活作用,盐酸胍激活ｒＰＡＩ－１的浓度与温度效应,显色底物法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影对ｒＰＡＩ－１活性的测定,活性态ｒＰＡＩ－１向潜状态的转变及其与盐浓度和ｐＨ值的关系。     

核受体辅助因子及其信号转导

类固醇激素、核受体及其辅助因子在细胞增殖、分化中起重要的作用。核受体与相应的配体结合后同细胞内的辅助激活因子ＣＢＰ／Ｐ３００、ＰＣＡＦ、Ｐ／ＣＩＰ和ＳＲＣ家族等结合形成的复合物能使组蛋白乙酰化促进基因的转录,当缺乏配体时核受体同辅助抑制因子ＳＭＲＩ、mSin3A及ＨＡＤ１具有很强的结合力使组蛋白去乙酰化抑制基因的转录活性。ＭＡＰＫ、ＰＫＡ、ＡＰ－１、Ｓap-a、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ、ＪＡＫ信号传导中核受体辅助因子参与信号传导过程影响基础的转录。     

精-甘-天冬-丝氨酸四肽对二磷酸腺苷诱导大鼠血小板活化的信号转导的影响

本工作在二磷酸腺苷（ＡＤＰ）活化的大鼠血小板上,观察精－甘－天冬－丝上肽（ＲＧＤＳ肽）对血小板聚集、蛋白磷酸化、蛋白激酶Ｃ和丝裂素活化蛋白激酶活性的影响。结果发现,５０μｍｏｌ／ＬＡＤＰ引起血小板聚集时,蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ０及丝裂经蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性增加,并引起９５和６６ｋＤ蛋白磷酸化。应用５０,１００和２００μｍｏｌ／ＬＲＧＤＳ肽与基共同孵育,呈浓度依赖地抑制ＡＤＰ引起的血小板聚集和对ＰＫ     

胶凝素（Collectin）

胶凝素是具有胶原样结构的凝集素,属于Ｃ型凝集素超家族,已确定的胶凝素家族成员有ＳＰ－Ａ、ＳＰ－Ｄ、胶固素、ＭＢＰ和ＣＬ－４３,可能还有新的成员。胶凝素的结构和功能均与补体成分Ｃｌｑ高度同源,主要通过调理吞噬和激活补体系统而发挥其天然抗感染免疫作用。     

磷脂酰甘油对光系统Ⅱ放氧活性的影响

通过重组试验表明,磷脂酰甘油（ＰＧ）对菠菜（Ｓｐｉｎａｃｉａ ｏｌｅｒａｃｅａＬ．）光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）的放氧活性产生显著影响,具有明显的浓度效应。随ＰＧ浓度的增加,ＰＳⅡ的放氧能力逐渐增强,到１０ｍｇＰＧ／ｍｇＣｈｌ时ＰＳⅡ活性达到最大。此后在１０￣２２ｍｇＰＧ／ｍｇＣｈｌ浓度范围内,ＰＳⅡ放氧活性变化不大。而当ＰＧ浓度继续增大时,ＰＳⅡ放氧活性迅速降低,４０ｍｇＰＧ／ｍｇＣｈｌ时的ＰＳⅡ活性已降     

应激活化的蛋白激酶在神经酰胺介导细胞凋亡中的作用

第二信使神经酰胺激活ＳＡＰ／ＪＮＫ,活化的ＳＡＰＫ／ＪＮＫ导致ＡＰ－１转录因子磷酸化,ＡＰ－１刺激自身表达,增强自身活性,介导细胞凋亡,神经酰胺及其代谢产物鞘氨醇和鞘氨醇－１磷酸酯分别激活ＪＮＫ－ｐ３８路径和ＥＲＫ路径,调节细胞增殖,分化或凋亡。     

重组腺病毒介导的白细胞介素—12（IL—12）在肝癌细胞中的表达

利用腺病毒表达系统在肝癌细胞中成功地表达了有生物活性的白细胞介素－１２（ＩＬ－１２）。ＩＬ－１２的Ｐ３５和Ｐ４０ ｃＤＮＡ分别克隆到腺病毒载体ｐＡＣＣＭＶ．ｐＬｐＡ,构建ｐＡＣ／Ｐ３５和ｐＡＣ／Ｐ４０表面质粒。与腺病毒重组质粒ｐＪＭ１７共转染２９３细胞,通过基因重组产生ＩＬ－１２Ｐ３５和Ｐ４０重组腺病毒。用重组腺病毒感染肝癌细胞株ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１,经ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ检测证明,     

菜豆幼苗EPSP合成酶的分离纯化和它的部分性质

利用硫酸铵分级沉淀,Ｓｅｐｈｅｄｅｘ Ｇ－５０凝胶柱层析,ＦＰＬＣ Ｍｏｎｏ－Ｑ和磷酸纤维素离子层析法从菜豆幼苗中分离提纯了ＥＰＳＰ合成酶。该酶被纯化２９６１．６倍,比活性达到６２１９．４ｎｍｏｌｍｇ＾－１蛋白ｍｉｎ＾－１。该酶分子量经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测为５１ｋＤ,等电点为ｐＨ５．７,酶促反应最适ｐＨ７．５,最适温度４５℃。６．２μｍｏｌ／Ｌ的除草剂草甘膦能抑制ＥＰＳＰ合成酶活性的５０％。     

亲和层析纯化HepG_2细胞分泌的PAI－1

本文报道用抗ＰＡＩ－１单克隆抗体（ＭｃＡｂ）亲和层析建立了纯化ＰＡＩ－１的简便方法。经免疫亲和层析,ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ２００凝胶过滤,从ＨｅｐＧ２细胞培液中分离到糖基化和非糖基化两种形式的ＰＡＩ－１,回收率为８４％,ＰＡＩ－１比活性６．１×１０４ＩＵ／ｍｇ。糖基化ＰＡＩ－１分子量为５０ｋＤ,比活性５．８×１０４ＩＵ／ｍｇ。非糖基化ＰＡＩ－１分子量４３ｋＤ,占总ＰＡＩ－１３０％,仍具有ＰＡＩ－１活性。用ＣｏｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析进一步纯化得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纯的糖基化ＰＡＩ－１。     

南方鲇碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质的研究

用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－纤维素和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱层析,从南方鲇（Ｓｉｌｕｒｕｓ　ｍｅｒｉｄｉｏｎａｌｉｓ　Ｃｈｅｎ）肠粘膜中提取出碱性磷酸酶（ＡＫＰ）。提纯倍数为３９．５０倍,比活为６８．３５μ／ｍｇ蛋白,提取酶液经ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ只呈现一条区带。该酶的分子量为１３２１４０,Ｎ末端氨基酸为门冬氨酸,最适ｐＨ为１０．１０,７．５＞ｐＨ＞１１．５时不稳定,最适温度为４０℃左右,对热不很稳定,以磷酸苯二钠为底物其Ｋ_ｍ值为１．７２×１０~（－３）ｍｏｌ／Ｌ。Ｍｇ~（２＋）、Ｍｎ~（２＋）为该酶的激活剂,ＫＨ_２ＰＯ_４、Ｌ－ＣｙＳ、ＭＥ、ＤＦＰ、ＥＤＴＡ－Ｎａ_２为抑制剂。选用ＫＨ_２ＰＯ_４和ＤＦＰ作抑制类型的判断,结果表明,ＫＨ_２ＰＯ_４属竞争性掏剂,其抑制常数为２．３ｍｍｏｌ／Ｌ;ＤＦＰ为非竞争性抑制剂,抑制常数为１．０５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

三唑酮对黄瓜子叶抗氧化酶活力的影响

黄瓜子叶衰老过程中超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和抗坏血酸－过氧化物酶（ＡＳＡ－ＰＯＤ）活性降低,而过氧化物酶（ＰＯＤ）活性升高。２０ｍｇ／Ｌ三唑酮右明显提高ＳＯＤ,ＡＳＡ－ＰＯＤ,ＣＡＴ活性,抑制ＰＯＤ活性升高。膜脂过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量在叶片衰老过程中提高,三唑酮可降低ＭＤＡ含量。表明三唑酮减轻脂氧化程度,延缓了叶片的衰老。     

孕牛血清早孕因子的分离纯化

本文以透析、离子交换层及聚丙烯凝胶电泳等手段从孕牛血清中分离纯化早孕因子（ＥＰＦ）。ＥＰＦ的活性用玫瑰花环抑制实验确定,其分子量用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测定,含量用Ｌｏｗｒｙ方法测定。     

猪精子中与卵透明带糖蛋白ZP3结合的蛋白质

依次经ＰＳＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析柱和纤维素ＣＭ－５２离子交换层析柱,从猪精子的ＣＨＡＰＳ抽提液分离得４个蛋白质组分。用固相透明带精蛋白结合试验（ＩＺＰＧＢＡ）检测;表明精子蛋白ＳＰ１和ＳＰ２具有结合透明带糖蛋白ＺＰ３的活性,ＳＰ２并显示凝集血球的活性。精子蛋白ＳＰ１与卵预温育明显抑制精卵结合,抑制活性与加入的精子蛋白的浓度呈正相关。用生物素标记的ＺＰ３和蛋白质印迹技术,证明ＳＰ１中的６８ｋＤ精子蛋白与ＺＰ３结合,提示６８ｋＤ精子蛋白参与精卵结合。     

促乳素抑制培养的大鼠颗粒细胞中卵泡素介导的组织纤溶酶原激活因子的表达

本文主要是观察促乳素（ＰＲＬ）是否曩体外培养的大鼠颗粒细胞中,组织纤溶酶原激活因子（ｔＰＡ）和Ｉ型纤溶酶原激活因子抑制因子（ＰＡＩ－Ｉ）基因表达间的协调作用。我们采用了多种方法,例如ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹等,来检测ＰＲＬ对ｔＰＡ和ＰＡＩ－Ｉ基因表达的作用。结果证实：（１）在离体条件下促乳素（ＰＲＬ）能刺激颗粒细胞（ＧＣ）中ＰＡＩ－Ｉ ｍＲＮＡ的合成,而ＦＳＨ无此作用。但ＦＳＨ可与ＰＲＬ协同增加     

硒对培养人胚肝细胞Ⅲ型前胶原,羟脯氨酸合成的影响

原代培养人胚肝细胞经１．１５６×１０￣(－７）ｍｏｌ／Ｌ硒预处理４ｈ,加入２０ｍｍｏｌ／Ｌ四氟化碳作用２０ｈ,观察硒对其Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）和羟脯氨酸（Ｈｙｐ）生成的影响。结果培养液中ＰＣⅢ水平、细胞内Ｈｙｐ含量及细胞内外丙二醛（ＭＤＡ）水平均降低,与未加硒对照组比较差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。而硒谷腕甘肽过氧化物酶（Ｓｅ－ＧＳＨ－ＰＸ）活性则较对照组显著增高（Ｐ＜０．００１）,且ＰＣⅢ水平与Ｓｅ－ＧＳＨ－Ｐ＿Ｘ／ＭＤＡ比值呈负相关（ｒ＝－０．９１５６,Ｐ＜０．０１）。提示硒可提高Ｓｅ－ＧＳＨ－Ｐ＿Ｘ／ＭＤＡ比值,抑制脂质过氧化激发的肝细胞胶原合成。     

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳纤维蛋白自显影法检测不同分子量的纤溶酶原激活剂

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）纤维蛋白显影方法是经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ将不同分子量的纤溶酶原激活剂（ＰＡ）分开,然后再转溶纤维蛋白板使之产生溶带而检测ＰＡ物质活性及分子大小的方法。此法与Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法比具有检测更简便、灵敏、快速的特点,且是活性检测,但其分子量分析精度不如Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法。本研究用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影方法对本室表达的重组组织型－ｐＡ（ｒｔ－ＰＡ）及突变体Ｎｌｌ７Ｑ／Ｎｌ８４Ｑ／△（Ｋ２９６——Ｇ３０２）及标准尿激酶（ＵＫ）和ｒｔ－ＰＡ进行了分析鉴定。     

小牛碱性磷酸酶同工酶的一些特性

我们用正丁醇抽提,经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析两步纯化,得到了比活性增大４０倍和ＰＡＧＥ纯的牛ＡＫＰ同工酶。对各ＡＫＰ同工酶分别进行酶活性、电泳迁移率（Ｒｆ值）、热抑制、尿素抑制、组织特异性抑制实验,以鉴别每种同工酶的特性。实验结果表明：①各同工酶Ｒｆ值,肝同工酶＞骨同工酶＞小肠同工酶;②经５６℃加热１０ｍｉｎ,只有骨同工酶完全失活,而肠同工酶对热是稳定的;③尿素强烈地抑制骨同工酶活性;肠同工酶对尿素是稳定的;④组织特异性抑制剂苯丙氨酸强烈抑制肠ＡＫＰ活性。