血清抑癌多肽作用机制的初步探讨——对癌细胞膜及其骨架的影响

本文研究血清抑癌多肽(SCSP)对癌细胞表面的效应和其表面蛋白质分子的侧向扩散及其内的F-actin的变化.扫描电镜观察结果是SCSP作用后,艾氏腹水癌细胞表面的微绒毛变为平坦而光滑的结构.从荧光漂白恢复技术测得的结果是上述癌细胞表面蛋白质分子的侧向扩散系数(?)降低.用Rhodamine—Pha-lloidin标记上述癌细胞得知其内的F—actin增加.从上述结果推测,在SCSP杀伤艾氏腹水癌细胞过程中,使F—actin在癌细胞内重组,有更多的F—actin与癌细胞质膜内大分子紧密相连,使癌细胞表面分子的活动性降低,故在癌细胞表面的结构变平,其蛋白质分子的扩散受限制而变慢.     

日本发现命令癌细胞转移的蛋白质

日本名古屋大学高桥雅英教授等人最近发现命令癌细胞向其他脏器扩散的蛋白质“GIRDIN”,一旦这种蛋白质发挥作用,癌细胞就会向体内其他组织转移,从而使病情恶化。高桥在实验中给这种蛋白质施以细胞增殖因子,使其发挥作用,结果发现通常不移动的癌细胞开始变形移动,并转移至人体组织深处,或者从这一器官转移到另一器官。蛋白质“GIRDIN”通常在受精卵发育过程中与神经细胞的移动和血管的形成有关,但与癌细胞转移有关还是首次发现。摘自《科学时报》2005年9月8日日本发现命令癌细胞转移的蛋白质     

癌细胞分泌蛋白质组富集与鉴定策略研究进展

分泌蛋白质中包含细胞因子、生长因子和激素等具有重要功能的生物活性分子,广泛参与细胞信号传导,细胞增殖、分化和凋亡的调控等多项重要生命过程。因此,从分泌体系中发掘生物标志物和治疗靶标,是癌症蛋白质组研究的一个重要方向。传统的分泌蛋白质体系主要包括血浆、尿液、脑脊液和组织间隙液等,这些系统的一个主要特点是其所包含的蛋白质浓度范围跨度很大,对蛋白质组分离和鉴定提出巨大挑战。而收集肿瘤细胞在无血清体系中培养时所分泌的蛋白质,开展蛋白质组研究,则可以避开常规分泌系统中大量高丰度蛋白质的干扰,获得肿瘤特异性的细胞分泌蛋白谱。近年来,随着蛋白质组学技术的发展和质谱仪的进步,癌细胞分泌蛋白质组学的研究进展很快。我们系统回顾了癌细胞分泌蛋白质组富集方法和鉴定策略的发展,概括了癌细胞分泌蛋白质组研究现状和规模,为该领域的进一步研究奠定基础。     

问:正常尿中不含蛋白质吗?

答：答案是否定的，正常人的尿中是含有微量蛋白质的。尿中蛋白质的来源包括血浆中的白蛋白、球蛋白及泌尿生殖道的糖蛋白等。由于含量极微，用常规临床检验方法不能测出，故认为正常尿中不含蛋白质。确切地说，应该是正常尿中不含可被检出的蛋白质。一般来说，尿中蛋白质含量在0．5％以下，是属于生理性的。因为滤过到原尿中的分子量小于70000的血浆蛋白并不能全部被近曲小管重吸收。临床常规检验查出尿中有蛋白质时，称为蛋白尿。高强度运动、冷水浴或食人过量蛋白质等都有可能使个别人产生暂时性蛋白尿。病理性蛋白尿常是各种肾脏疾病引…     

小鼠再生肝、Hca腹水型肝癌与正常肝组织核内非组蛋白的电泳比较研究

核内非组蛋白蛋白质(简称NHP)是一类极不均一的蛋白质,代谢上不稳定,转换率较快。有人认为 NHP 与基因表达的调控有关,而癌变过程可能是基因表达的调控失常所致,因此当正常细胞转化为癌细胞时,NHP会发生改变。据文献报道,某些分化旺盛的组织,其NHP亦会发生变化,那么,癌变过程中NHP的变化是否与组织增殖者相同。换言之,癌细胞中NHP的变化是特异的,还是非特异的,似有研究的必要。本文以小鼠 Hca 腹水型肝癌为模型,小鼠正常肝为本底,小鼠再生肝为对照,用十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳——等电聚焦双向电泳为手段,观察比较了三组 NHP 的异同。同时还作了三组     

基因调控——非组蛋白染色体蛋白质的一种作用

真核细胞基因表达与否受核内非组蛋白染色体蛋白质(NHCP)的调控。核内非组蛋白染色体蛋白质约有450种甚或500种,起调控基因表达的仅是其中磷酸化了的那部分NHCP。在正常细胞转化为癌细胞时,可观察到NHCP的变化。NHCP调控基因表达的机理模式之一,可能是去除组蛋白的阻遏作用。     

“单臂”的治癌抗体

理想的杀死癌细胞的药物,应能识别癌细胞,并有效地杀死它而又不危害正常细胞。当科学家们找到一种制作能识别癌细胞表面上特异标志的蛋白质的方法时,这种理想药物似乎会很快地研制出来,这种高度特异的蛋白质称为单克隆抗体。下一步是使这种抗体与一种名叫蓖麻蛋白的毒素相结合。问题是这种蓖麻蛋白很毒,它只能作为治疗这种不治之癌的一种最后手段。     

发现细胞核分裂相关蛋白

日本京都大家教授成宫周领导的研究小组最近宣布,他们发现了与细胞核分裂相关的蛋白质,这对探索细胞内染色体异常诱发癌症的机理大有帮助。研究人员在实验中发现与细胞核分裂相关的蛋白质有两种,分别是“cDc42”和“mDia3”。在用人的子宫上皮细胞进行的实验中,研究人员让细胞中控制合成“cDc42”蛋白质的基因不起作用之后,发现细胞核不发生分裂。研究人员认为,”cDc42”蛋白质决定细胞是否具有活性,与“cDc42”结合在一起的“mDia3”蛋白质的活化,则对细胞核分裂的正常进行起着辅助作用。肠癌、乳腺癌和白血病等癌细胞的细胞核分裂时,细…     

人肝癌细胞系的糖蛋白质组学研究

糖基化是最重要的蛋白质翻译后形式之一,糖基化蛋白的糖链部分影响着蛋白质的折叠和稳定性以及其生物学功能.许多恶性肿瘤组织与正常组织相比已显示出蛋白质糖基化的差异.采用蛋白质组学分析方法结合先进的糖蛋白荧光染色技术,研究了正常人肝细胞系(ChangLiver)和人肝癌细胞系(Hep3B)糖蛋白糖基化的差异.首先用细胞裂解法提取细胞总蛋白质,进行双向电泳(2-DE),然后用pro-QEmerald488糖蛋白荧光染料进行糖蛋白染色,得到两种细胞系糖基化蛋白表达谱,经2-DE分析软件Dymension分析2-DE图像,比较糖蛋白的糖基化程度,并对糖基化蛋白进行质谱鉴定.结果显示正常人肝细胞表达(74±2)个(n=3),而人肝癌细胞系表达(78±3)个糖蛋白(n=3).两者匹配的糖蛋白质点31个,Hep3B表达而ChangLiver不表达的糖蛋白质点47个,ChangLiver表达而Hep3B不表达的糖蛋白质点43个.两种细胞系糖基化程度存在明显差异,与正常人肝细胞相比,肝癌细胞发生糖基化改变的糖蛋白有25个,其中糖基化水平上调的有10个,下调的有15个,质谱鉴定出12个发生糖基化改变的糖蛋白.这些结果显示蛋白质糖基化改变可能在肝癌的发生和发展中起一定作用.     

癌细胞转移的关闭与启动

在6月出版的《自然一细胞生物学》上,一篇论文报告了一种在癌细胞转移过程中发挥作用的新因子。与此同时,Sung Hee Baek和同事还描述了一种全新的控制某种蛋白质的方法,这种蛋白质负责指挥癌细胞的转移。     

异种“免疫”核糖核酸介导人肝癌细胞的免疫细胞溶解

从人肝癌细胞(BEL-7402)高度免疫过的绵羊的淋巴器官中抽提的肝癌“免疫”RNA,和正常人外周血淋巴细胞温育后,在体外能介导肝癌细胞的免疫细胞溶解。用5-~(125)碘-2′-脱氧尿嘧啶核苷标记人肝癌靶细胞的微量细胞毒性试验进行测定时观察到,正常人淋巴细胞经肝癌“免疫”RNA处理后,其细胞毒性指数在16次实验中有10次有显著增高,但是,在与对照RNA温育后其细胞毒性指数(除一次实验外)均未出现有显著意义的变化。肝癌“免疫”RNA在用RNA酶降解后,传递细胞毒性免疫反应的活性即消失,而用DNA酶或灰链霉菌蛋白酶处理,却仍保持这种传递能力。由此证明,异种“免疫”RNA能够把针对人肝癌细胞表面抗原的细胞免疫性传递给正常人淋巴细胞。     

利用蛋白质组学方法筛选及确定喉癌诊断的标志分子

采用蛋白质芯片和生物信息学方法从喉癌患者血清中筛选标志蛋白. 采用SELDI(surfaced enhanced laser desorption/ionization)蛋白质芯片技术对33例喉癌(12例声门癌, 18例声门上癌, 3例声门下癌)病人血清和31例正常人血清蛋白质谱图进行了检测. PBSII-C型蛋白质芯片阅读机读取数据, 获得的结果采用Ciphergen 公司的Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件分析. 结果显示与正常人血清蛋白质谱相比时, 喉癌病人血清中有16个差异蛋白, 其中8个标志分子在病人血清中高表达, 8个标志分子在病人血清中低表达. Biomarker Pattern软件在设定条件下自动选取上述标志分子中的两个蛋白质8153和2035 Da用于建立喉癌诊断的分类树模型. 此分类树具有两层3个叶结点, 可将96.9%的喉癌病人和96.7%正常人正确划分出来. 实验证明利用蛋白质组学和生物信息学方法可从血清中筛选出喉癌相关的标志蛋白, 而且蛋白质芯片技术对于发现和筛选血清中的喉癌标志蛋白是一种有效、快速的工具.     

美路易斯安那州立大学开发一种多用途新药

美国路易斯安那州立大学(LSU)从天蚕蛾中提取了一补特殊蛋白质,据该大学的研究人员声称,它算得上是一种治疗传染病和癌症的万应灵药。研究组的领导人是主要兴趣在于植物生物技术的生物化学家Jesse Jaynes。他说,他们的研究组已研制出此种蛋白质的三种变型,它们把供试的每种病原和每种癌细胞都杀死了,而正常细胞则未受影响。其中一种变型还有刺激人淋巴细胞和成纤维细胞生长的作用。这些肽对得病的哺乳动物细胞的外包的     

miRNA-181在肝癌中表达变化的研究

目的:观察微小RNA(miRNA)-181在正常人肝细胞L02、肝癌细胞株SMMC7221和Hep3B中的表达,以及在正常肝脏组织和肝癌组织中的表达,探讨其与肝癌发生发展的关系.方法:应用荧光实时定量PCR方法检测miRNA-181,包括miRNA-181a、miRNA-181b、miRNA-181c、miRNA-181d,在正常肝细胞和肝癌细胞的含量.同时收集并检测肝细胞癌患者术中取得的正常肝脏组织和癌症组织的含量.结果:MiRNA-181在肝癌细胞株中的表达明显高于正常人肝细胞(P＜0.05或P＜0.001).MiRNA-181在肝癌组织中表达明显高于正常肝脏组织(P＜0.05).结论:MiRNA-181在不同肝癌细胞株中表达不同,但都高于正常肝细胞,并且miRNA-181在肝癌组织中的表达高于正常肝脏组织.这说明miRNA-181与肝癌的发生发展有相关性,可能成为肝癌诊断和预后的一个指标.     

癌细胞与正常细胞相比有哪些不同特征?

问:癌细胞与正常细胞相比有哪些不同特征?答:癌是威胁人们生命的最危险的疾病之一。癌的根本问题是细胞畸形分化的问题。细胞不按正常的规律发育,恶化而成癌细胞。于是,它不再受机体的控制,不受约束地连续分裂,产生新的癌细胞,破坏身体内环境的平衡。癌细胞与正常细胞相比,主要有以下几点不同:形态上最明显的不同是细胞核一般都比正常细胞的大,形状不规则,核仁也变大了;癌细胞的有丝分裂常有“多极分裂”的现象,在1个分裂细胞中出现多个纺缍体,产生3~5个甚至更多的细胞;细胞表面发生了变化,膜上的糖脂或糖蛋白的糖链短缺不全,因而癌细胞可以…     

p21基因的克隆及其对肺癌细胞生长的抑制

用反转录PCR从正常人胚胎肺细胞中获得了p21基因cDNA,将其插入真核表达载体pMSCVneo,构建成重组质粒pMS21,并将其转染至肺癌细胞株A549。通过集落形成观察到p21对肺癌细胞具有明显的抑制作用,经RNA狭缝杂交、Western印迹分析和免疫细胞化学实验证实这是p21表达的结果。荷瘤裸鼠实验也进一步证实了p21对肺癌细胞具有明显的抑制作用。     

Nature:研究解开乳腺癌“暗物质”之谜

正虽然癌细胞基因组中的蛋白质编码基因往往存在突变现象,但对于非编码区域来说,它们的突变也会导致肿瘤的生长。最近一项研究则从乳腺癌中找到了这样的例子。癌症基因组相关的研究已经有20年的历史,基因组中2%的蛋白质编码序列对于研究者们来说已经是丰富的保藏,其中研究者们已经找到了数百种与癌症发生相关的基因突变,从而促进了多种癌症靶向疗法的开发。     

shRNA沉默HuR抑制肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移及侵袭能力

人抗原R (human antigen R,HuR)基因在肺癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中高表达。推测HuR基因也参与肝癌的发展过程。为探索HuR对肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和侵袭的作用,本研究通过蛋白质印迹实验,检测HuR在肝细胞癌细胞系和正常肝细胞中蛋白质的表达水平。结果显示,肝细胞癌细胞系SMMC-7721 HuR的表达量显著高于正常肝细胞HL-7702。合成特异性靶向HuR基因的shRNA,转染肝细胞癌细胞系SMMC-7721,检测结果发现,HuR基因表达量下调90%。沉默HuR,实时细胞分析技术(real time cell analysis,RTCA)结果显示,细胞增殖能力降低55%,侵袭能力下降75%;细胞划痕实验结果显示,迁移能力下降80%;克隆形成实验中细胞克隆数减少85%;此外,在HuR敲低稳转肝细胞癌细胞系SMMC-7721细胞中过表达Bcl-2,其细胞学现象部分获得逆转。激光共聚焦扫描系统检测结果显示,Bcl-2主要定位于肝细胞癌细胞系SMMC-7721的核膜及胞质。蛋白质印迹法检测结果显示,沉默HuR,Bcl-2下调92%,Survivin下调55%,Twinst1下调69%,N-钙黏着蛋白(N-cadherin)下调48%,E-钙黏着蛋白(E-cadherin)上调1.5倍。以上结果表明,HuR可能通过调控定位于核膜及胞质上的Bcl-2来参与肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移、侵袭及克隆形成过程,HuR基因有望成为临床上治疗肝癌的一个新的潜在靶点。     

正常小鼠肝和腹水型肝癌细胞核内酸溶性蛋白质磷酸化的比较研究

染色质的组成成分,组蛋白和非组蛋白在特异的蛋白激酶作用下可以发生磷酸化修饰,组蛋白和非组蛋白的磷酸化和脱磷酸化可能在染色质的结构,基因表达以及DNA复制中起着重要的作用。本文比较是小鼠腹水型肝癌细胞核和正常小鼠肝细胞核内酸溶性蛋白质及其磷酸化的差异。正常小鼠肝细胞核酸溶性蛋白质的电泳染色图谱有一条明显可见的组蛋白H_1~0蛋白带,而对小鼠腹水型肝癌来说,此带极浅,但在腹水型肝癌细胞核酸溶性蛋白质的电泳染色图谱上可见到表观分子量约为68K的一条蛋白带,而正常小鼠肝未见此带。此外,从电泳胶片~(32)P放射自显影图谱可见腹水型肝癌组蛋白H_1,H_2A和非组蛋白带Ⅱ(MW43K),带Ⅲ(MW.67K)带Ⅳ(M.w.97K)磷酸化程度明显高于正常小鼠肝。     

血卟啉衍生物加光对人红血球膜蛋白构象的影响

大量资料表明,细胞质膜可能是光敏引起细胞死亡的临界靶结构之一。有的作者认为临界靶分子是膜上的蛋白质,有的则认为膜上的靶事件是膜脂的过氧化。由此可见,为了揭示光敏的靶分子机理,必需进一步探讨膜脂和膜蛋白在光敏损伤中的地位。血卟啉衍生物(HPD)除了能较多地潴留于癌细胞外,也能潴留在正常细胞膜中,它杀死正常细胞和癌细胞的靶分子机理是相似的。基于这一考虑,我们采用血影细胞为材料,观察了HPD对血影细胞的圆二色性的影响。