5-溴脱氧尿苷抑制中国仓鼠核仁形成区活性的研究

当培养基中BrdU浓度提高至9—30μg/ml时,会使中国仓鼠二倍体细胞和细胞株wg3h的银染NORs(Ag-NORs)总数明显减少。不同浓度的BrdU对中国仓鼠细胞NORs活性影响的研究表明,中国仓鼠细胞NORs活性受抑制的程度随培养基中BrdU浓度的提高而加强,还与BrdU处理的时间有密切的关系。这些细胞在无BrdU的培养基里继续生长30小时后,它们的NORs活性可以得到恢复。BrdU对中国仓鼠细胞NORs活性的抑制作用很可能是一种毒性效应。本文还对BrdU抑制中国仓鼠细胞NORs活性的机制进行了初步的讨论。     

四细胞杂交克隆的NORs活性和均染区的巨染色体

通过聚乙二醇使3个小鼠细胞与1个中国仓鼠骨髓细胞融合,获得四细胞杂交克隆。在第6世代,该杂种细胞含有100条小鼠染色体和5条仓鼠染色体。本文报道在杂种细胞中双亲NORs活性均受抑制,不仅73.2％的仓鼠NORs活性被抑制,而且还有18.3％的小鼠NORs失去了活性。由于在杂种细胞中,仓鼠第3号染色体上的NORs活性仍保留它原来的91.2％,因此我们的结果表明:不同染色体上18s和28s rRNA基因的转录活性可有明显的差异,这可能与它们所在的染色体结构有关。我们首次报道了杂种细胞中所出现的均染色区巨染色体,并对这条巨染色体进行了G-带、C-带和Ag-NORs的分析。对这条巨染色体与18s和28srRNA基因扩增的关系进行了初步讨论。     

BrdU抗性细胞特性的研究III．染色体加倍及SCE和胞质可溶蛋白电泳特点

BrdU被细胞吸收后可结合到染色体DNA 上,由于被BrdU标记的DNA对光极为敏感F91 因此可引起染色体结构的损伤。BrdU 还可抑 制细胞核着酸还原酶的活性,导致细胞死亡11770 尽管如此,有些细胞却能在含高浓度BrdU的培 养基中繁殖传代,其原因可以是细胞缺乏胸营 激酶(TK)活性［[1+1;细胞的BrdU吸收系统有 缺陷(a);细胞因核营酸代谢失去平衡而获得 BrdU 抗性[31。抗性细胞的DNA有的是部 分[701、有的是全部191被BrdU标记。某（些）染 色体的特异性改变是否与BrdU抗性有关？目 前的资料表明,BrdU抗性细胞的染色单体断 裂频率较高[1a1,或染色体数很不稳定［’］;但许多 BrdU抗性细胞株染色体平均数等于或略低于 亲本细胞的水平,染色体G一带图样没有明显的 差异131。因此,尚未发现BrdU抗性细胞有染 色体的特异性改变。少数药物抗性细胞蛋白质 合成过量的现象已引起人们很大的兴趣[1a,is7 BrdU抗性细胞是否也会出现蛋白质过量合成 的现象？ 我们过去报道了通过高浓度的BrdU 加可见光处理获得4个抗BrdU 亚系[11,本文 报道这4个抗性亚系细胞第17号染色体有极高 的加倍频率,以及某些胞质可溶蛋白过量合成 的现象,这些均未见报道。 姐妹染色单体互换（(SCE） 是反映正在进 行复制的染色体损伤和修复过程的一个极为敏 感的指标110,131。由于BrdU抗性细胞长期在含 高浓度BrdU 的培养基中生长,BrdU进人细 胞后便均匀地分布在姐妹染色单体DNA 上, 已达到某种程度的相对平衡状态,因此不可能 出现姐妹染色单体差别染色。本文报道采用特 殊的方法所观察到的BrdU抗性亚系SCE频 率,以及第17号染色体加倍对细胞SCE频率 的影响。除了我们过去报道的一个抗性亚系 SCE[a1外,尚未见其他关于BrdU抗性细胞SCE 的报道。     

细胞共养和BrdU对人和小鼠NORs活性的影响

不同种类细胞的共养可引起不同种细胞间的代谢协同现象,即在细胞相互接触的地方进行细胞间分子交换。它可降低姐妹染色单体互换频率、促进细胞DNA合成、细胞代谢缺陷互补和提高细胞对药物的敏感性。 核仁组织者(NORs)是细胞rDNA进行转录的地方,细胞银染NORs(Ag-NORs)数     

中国仓鼠核仁形成区的活性在仓鼠-小鼠杂交细胞中受抑制

用Polyethyleneglycol(PEG)将中国仓鼠骨髓细胞与小鼠细胞株PG19细胞融合,获得杂交细胞克隆。染色体C-带分析表明,早在细胞繁殖的第4代,杂交细胞就迅速地丢失了17条仓鼠染色体。在杂交细胞中,只有9.4％的仓鼠核仁形成区(NORs)有活性,而且所有这些有活性的NORs都位于仓鼠第3号染色体上,占该号染色体原有NORs总活性的40％,因此我们的结果不仅首次表明在中国仓鼠-小鼠杂交细胞中,绝大部分(90.6％)的仓鼠NORs活性被抑制,而且还发现了位于不同染色体上的仓鼠NORs活性受抑制的程度可有明显的不同,NORs活性很可能与它们所在的染色体的结构有关。小鼠NORs的活性在杂交细胞中没有受到明显的影响。     

蛇毒制剂抗肿瘤活性和机理的研究进展

该文简要综述了蛇毒制剂抗肿瘤活性及其机理。实验已证实 ,眼镜蛇、金环蛇、银环蛇等蛇毒对多株人肿瘤细胞系有杀伤和抑制作用 ,其中以眼镜蛇毒对肿瘤细胞的杀伤作用最强。从蛇毒中可分离出心脏毒素、直接溶解因子、细胞毒素 (CT)、神经毒素 (NTX) ,其中 CT是作用较强的成分。这些毒素毒性都通过破坏细胞膜而实现 ,故称为膜毒素。蛇毒在体内外都有抗癌作用 ,对人高、低分化鼻咽癌细胞株 ,人慢性骨髓性白血病和小鼠肝癌均有明显的细胞毒作用 ,其半数抑制浓度 (IC50 )分别为 79μg/ ml、75μg/ ml、5.5μg/ ml、65μg/ ml,表明对白血病最…     

粘细菌Myxococcus macrosporus STXZ54抗肿瘤活性物质的分离制备及其活性测定

粘细菌作为第三大类次级代谢产物产生菌,是挖掘抗肿瘤新药物的重要资源。将本实验室保藏的粘细菌菌株Myxococcus macrosporus STXZ54进行发酵培养后,通过对发酵液进行硫酸铵沉淀、丙酮沉淀等,分析了该菌株发酵液中抗肿瘤活性物质的性质,采用高效液相色谱技术对发酵液中的抗肿瘤活性物质进行了分离,并对该物质进行了肿瘤细胞毒性的测定,利用激光共聚焦显微镜观察该物质作用B16后的亚细胞结构变化。实验结果表明该物质可能为常温下性质较稳定的蛋白质类化合物,纯化到的单一组分WGF5对B16,Hela,MCF-7,Hep-3B肿瘤细胞均具有较强的抑制作用,其作用48 h的IC_(50)(最低半抑制浓度)分别为2.767μg/ml、2.204μg/ml、3.758μg/ml、3.073μg/ml。MTT实验以及激光共聚焦显微镜下观察分析发现,蛋白WGF5能够明显改变细胞形态并最终导致肿瘤细胞死亡。从粘细菌Myxococcus macrosporus STXZ54分离到的活性物质具有广谱高效的抗肿瘤效果,有开发成抗肿瘤新药物的潜在价值。     

BrdU抗性细胞特性的研究 Ⅲ.染色体加倍及SCE和胞质可溶蛋白电泳特点

BrdU被细胞吸收后可结合到染色体DNA上,由于被BrdU标记的DNA对光极为敏感,因此可引起染色体结构的损伤。BrdU还可抑制细胞核苷酸还原酶的活性,导致细胞死亡。尽管如此,有些细胞却能在含高浓度BrdU的培养基中繁殖传代,其原因可以是细胞缺乏胸苷激酶(TK)活性;细胞的BrdU吸收系统有缺陷;细胞因核苷酸代谢失去平衡而获得BrdU抗性。抗性细胞的DNA有的是部分、有的是全部被BrdU标记。某(些)染色体的特异性改变是否与BrdU抗性有关?目前的资料表明,BrdU抗性细胞的染色单体断     

喷昔洛韦体外抗疱疹病毒活性的研究

为评价新合成的喷昔洛韦的细胞毒性和抗疱疹病毒活性,通过观察病毒感染细胞的CPE、病毒滴度、抗病毒指数,从而判定喷昔洛韦的抗疱疹病毒作用.结果发现喷昔洛韦对HEL细胞、Hep-2细胞的半数中毒浓度(TD\-50)分别为105.2μg/mL和85.1μg/mL;对HSV-1、HSV-2、VZV、HSV-1吴株的平均半数抑制浓度(IC\-50)分别为21.78μg/mL、20.15μg/mL、23.19μg/mL和17.87μg/mL,对各毒株的治疗指数分别为5.84、6.31、5.49和7.11.故喷昔洛韦是一种有效体外抗疱疹病毒药物.     

紫球藻胞外多糖抗柯萨奇B3病毒活性研究I

采用MTT法研究了紫球藻胞外磺酸化多糖(ESPS)的细胞毒性,在高浓度(250μg/ml)下尚未发现对HEp-2细胞有明显毒性。CPE抑制法发现ESPS能明显抑制细胞的CPE,在综合、预防、治疗和直接作用四种给药方式下都具有抑制CVB3的作用。直接作用法的活性最高,TI值高达1920．6,是阳性对照药病毒唑的31倍。ES-PS组分中分子量越大,抗病毒活性越高,其中分子量大于300k的组分,IC50可低至0．754μg／ml,TI值高达331．6,是病毒唑的5倍多。结果表明ESPS有强烈的抗CVEb病毒活性,作用机制可能是干扰病毒在细胞表面的吸附及侵染过程。     

喷昔洛韦体外抗疱疹病毒活性的研究

为评价新合成的喷昔洛韦的细胞毒性和抗疱疹病毒活性 ,通过观察病毒感染细胞的CPE、病毒滴度、抗病毒指数 ,从而判定喷昔洛韦的抗疱疹病毒作用。结果发现喷昔洛韦对HEL细胞、Hep 2细胞的半数中毒浓度 (TD50 )分别为 10 5 .2 μg/mL和 85 .1μg/mL ;对HSV 1、HSV 2、VZV、HSV 1吴株的平均半数抑制浓度 (IC50 )分别为2 1.78μg/mL、2 0 .15 μg/mL、2 3.19μg/mL和 17.87μg/mL ,对各毒株的治疗指数分别为 5 .84、6 .31、5 .49和 7.11。故喷昔洛韦是一种有效体外抗疱疹病毒药物     

十一种灵长类染色体核仁组织者(NORs)的比较研究

本文报告了我国灵长类动物5个属11个种染色体的银染色的NORs（Ag-NORs）分布,并作了初步比较。     

魔芋低聚糖硫酸酯的制备及抗病毒活性研究

从酶解魔芋干粉中提取分子量在1500左右的葡甘露低聚糖Apkos,采用吡啶-氯磺酸法制备了它的硫酸酯衍生物S-Apkos,其硫含量为8.28%,取代度(Ds)为0.57.用Vero细胞和单纯疱疹病毒2型(HSV-2)考察硫酸酯化前后低聚糖的抗病毒活性.结果表明,本身无抗HSV-2活性的Apkos硫酸酯化后产生了抗病毒活性,500～4000μg/ml的SApkos能很好地抑制HSV-2引起的Vero细胞病变,而在500μg/ml及以上浓度条件下能完全抑制HSV-2在Vero细胞单层中形成病毒空斑.     

半夏和苦豆子生物碱的抗线虫活性

首次研究了半夏和苦豆子生物总碱,以及3种主要的苦豆子单体生物碱(槐定碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱)的抗线虫活性。半夏生物总碱处理24 h,对松材线虫、南方根结线虫、全齿复合线虫和秀丽隐杆线虫的半抑制浓度(IC50)分别为16.18、20.25、33.24和20.77μg/m L。苦豆子生物总碱处理24 h,对上述4种线虫表现出更强的抑制活性,IC50值分别为0.622、0.383、1.476和1.224μg/m L,抗线虫活性强于或接近阳性对照阿维菌素。3种苦豆子单体生物碱均表现出明显的抗线虫活性,其中氧化槐果碱的抗线虫活性最强。研究结果为植物源杀线虫剂的研究和开发提供了依据。     

啤酒酵母对杀假丝菌素抗性的遗传分析

杀假丝菌素(Candicidin)在0．8μ／ml的YEPG平板上能完全抑制呻酒酵母(Saechar-mycescerevisiae) H802-1B (a,lys2)及H802-5D(a,ade,ural)的生长。将H802-1B涂布在含有5—70μg／ml的抗生素平板上分离得到抗性突变体。第一次突变体的最高抗性水平是50μg／ml,从5—50μg／ml 抗生素平板上共获得39株自发突变株,第二次抗性突变株是将第一次突变体涂布在更高浓度(70—90μg／ml)的抗生素平板上分离到的。部分抗性突变株(70μg／ml和90μg／ml)与亲株H802-5D交配,测其分离子的抗性,所有杂合二倍体表现：抗性：敏感性为2：2分离现象。H1121-1A(a,lys2,CADR9)XH113-8A(a, ural,CADR30)的杂种抗性分离行为：PD(17个子囊),NPD(2个子囊)T(4个子囊)口遗传分析证明,实验用的抗性突变体有两个显性抗性基因CADHr30和CADR90．     

绵羊皮肤成纤维细胞对G418及Blasticidin S抗性的研究

抗生素常被用于对转基因动物、植物及微生物细胞进行筛选。在进行抗生素抗性筛选前,需要摸索合适的抗生素使用浓度,其原因在于:过低的筛选浓度无法抑制非转基因细胞的生长;反之,过高的筛选浓度会导致转基因细胞死亡。为了摸索绵羊皮肤成纤维细胞(sheep skin fibroblasts, SSFs)对G418及Blasticidin S的抗性,本实验以体外培养的SSFs为实验材料,采用不同浓度的上述两种抗生素处理SSFs,采用活细胞计数的方式检测SSFs对上述两种抗生素的抗性。单独使用G418或Blasticidin S导致SSFs全部死亡的最低致死浓度分别为200μg/mL及4μg/mL;当两种抗生素联合使用时,其最低致死浓度为100μg/mL G418+3μg/mL Blasticidin S或150μg/mL G418+2μg/mL Blasticidin S。该实验为采用这两种抗生素筛选转基因SSFs提供了理论基础。     

白皮锦鸡儿黄酮醇类化合物及其抗菌和抗氧化活性(英文)

从豆科植物白皮锦鸡儿(Caragana leucophloea Pojark.)地上部分分离到3个黄酮醇类化合物,经理化和波谱分析鉴定为3-O-甲基山奈酚(1)、3-O-甲基槲皮素(2)和槲皮素(3)。活性测定表明,1表现出较强的抗细菌活性,对大肠杆菌和番茄疮痂病菌的半抑制浓度分别为9.00μg/mL和7.42μg/mL,最低抑制浓度均为12.5μg/mL;而2和3则表现出较强的抗氧化活性,对DPPH还原的半抑制浓度分别为14.39μg/mL和13.64μg/mL;对β-胡萝卜素-亚油酸氧化的半抑制浓度分别为10.26μg/mL和9.87μg/mL。上述黄酮醇类化合物均为首次从白皮锦鸡儿中分离得到。     

大豆根瘤菌对福美双杀菌剂抗性的研究

通过不同大豆根瘤菌对福美双抗性的研究证明:不同大豆根瘤菌自身固有的对福美双的抗性不同,一般可耐50～100μg/ml浓度的福美双。种子拌0.3％福美双同时拌根瘤菌会使种子上的根瘤菌数降低。本文探讨了利用自发突变选育双抗菌种的可能性。试验还证明:对福美双抗性低的菌种产生自发突变抗福美双的机率要多。     

紫球藻胞外多糖抗柯萨奇B3病毒活性研究Ⅰ

采用MTT法研究了紫球藻胞外磺酸化多糖(ESPS)的细胞毒性,在高浓度(250μg/mL)下尚未发现对HEp-2细胞有明显毒性.CPE抑制法发现ESPS能明显抑制细胞的CPE,在综合、预防、治疗和直接作用四种给药方式下都具有抑制CVB3的作用.直接作用法的活性最高,TI值高达1920.6,是阳性对照药病毒唑的31倍.ESPS组分中分子量越大,抗病毒活性越高,其中分子量大于300 k的组分,IC50可低至0.754μg/mL,TI值高达331.6,是病毒唑的5倍多.结果表明ESPS有强烈的抗CVB3病毒活性,作用机制可能是干扰病毒在细胞表面的吸附及侵染过程.     

改良内皮抑素对人脐静脉内皮细胞抑制作用的实验研究

目的:探讨改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对最佳作用浓度和时间。方法:通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达载体。表达、纯化改良内皮抑素(RGDRGD-ES),运用MTT法和流式细胞仪检测RGDRGD-ES对人脐静脉内皮细胞的抑制作用。结果:1.诱变了ES基因,获得了改良的RGDRGD-ES基因,并成功构建其原核表达载体。2.获得了RGDRGD-ES蛋白。3.改良的RGDRGD-ES能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长(P<0.01);抑制率随着药物浓度(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)的增加和作用时间(24 h、48 h、72 h)的延长而逐渐增加,具有浓度和时间依赖性(P<0.01);而30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间、72 h与96 h组间无明显差异(P>0.05)。4.细胞凋亡率(作用24 h)具有药物浓度(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)依赖性(P<0.01),30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论:成功构建了改良RGDRGD-ES基因的原核表达载体,RGDRGD-ES蛋白在30μg/ml浓度作用72小时条件下能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长,改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对HUVEC的抑制作用较ES明显提高。