藏酋猴精液深低温冻存的研究──不同的冷冻程序、冷冻稀释保存液冻存效果的比较

以存活率（ＳＲ）、复苏运动度（ＲＭ）、ＳＰＡ为精子活力检测指标,对四种冷冻程序ＰＳＦ、Ｈ３Ｐ、ＬＰ、ＭＤＰ和卵黄的、无卵黄的冷冻稀释保存液进行了藏酋猴（Ｍａｃａｃａ ｔｈｉｂｅｔａｎａ）精液冻存比较研究。 ＰＳＦ的ＳＲ为９０．１±１．９％,ＲＭ为６３．８±２．８％,显著高于其他三种冷冻程序（Ｐ＜０．０１）。卵黄冷冻稀释保存液（ＭＤＭ）的ＳＲ（９５． ４±１．３％）和ＲＭ（８８．０±１０．２％）显著高于无卵黄防冻液（ＦＣＳ－Ｇ／ＴＨ）的ＳＲ（９０．１±１．９％）和ＲＭ（６３．６±２．８％）,但前者在复苏一小时后,ＲＭ（１２．５±１．６％）明显低于后者的ＲＭ（５４． ７±２． ２％）。用 ＦＣＳ～Ｇ／ＴＨ冻存的精液经 ＳＰＡ检测,其穿透率为新鲜精子的 ５１． ９％。结果提示：１）慢速降温冷冻程序适于藏酋猴精液冻存;２）卵黄冷冻稀释保存液能较好地保存藏酋猴精液的活动度;而无卵黄防冻液则有利于延长其冷冻精子的运动寿命。这可能与两者的稀释液及所含的脂蛋白不同有关。     

许昌市新生儿接种乙型肝炎疫苗的成本效益分析

目的分析1992—2015年许昌市新生儿乙型病毒性肝炎(乙肝)疫苗接种成本效益,为乙肝的预防和控制策略提供经济学依据。方法运用成本效益分析方法,对许昌市新生儿乙肝疫苗接种总成本、成本效果、成本效益和成本效用进行测算及分析。结果许昌市对新生儿乙肝疫苗免疫接种投入成本2 263.84万元,获得总经济效益138.29亿元,净效益138.06亿元,效益成本比为601.26∶1。共减少乙肝病毒表面抗原阳性携带者114 320例,慢性乙肝11 432例,肝硬化1 143例,肝癌114例,成本效果比为196.84∶1。共挽回65 992.97个失能调整寿命年(DALY),成本效用比为345.06∶1。结论许昌市实施新生儿乙肝疫苗预防接种的经济效益和社会效益非常显著。     

淡水鱼产销形势与效益分析

分析了2015年淡水鱼的养殖效益,考察了市场低迷的情况下淡水鱼销售和加工形势,并对淡水鱼产业发展提出建议。据调研组2015年12月赴四川、湖北的调研情况反映：大宗淡水鱼价格达到2013—2015年来最低水平,养殖效益整体不佳,如将家庭用工折算在内,大宗淡水鱼养殖户基本亏损;一些地区批发市场成交量出现下滑,加工企业萎缩、经营举步维艰。为此,本文提出以下政策建议：养殖户应把握上市时机,做好品种搭配;企业适应青年消费者习惯,优化加工品的结构;政府应鼓励发展生态养殖模式,加大对中小企业扶持;科研人员要善于总结养殖过程的关键点,形成简单易记、适合普通养殖户的技术操作规程。     

新生儿乙型肝炎血源疫苗的免疫策略和成本效益分析

比较了6种新生儿血源乙型肝炎疫苗的免疫方案,其中一种只免疫HBsAg阳性母亲的婴儿效果最差,群体有效率仅17.79％,成本效益比值亦低。其它5种方案都是对全部新生儿进行免疫,效果均好。这5种方案是10μg与3μg两种剂量的不同组合,其中用10μgg3JI疫者成本效益比值最高,有效率为78.61％。HBsAg阳性母亲新生儿按30μg×3,而阴性母亲婴儿首剂用30μg,第2、3剂各10μg,有效率高达87.47％,但成本效益比值最低。应根据我国经济发展的水平与群众的承受能力,对各地区选用不同的新生儿免疫方案。     

中国主要粮食作物种植结构优化下稳粮减排及成本效益分析

优化粮食作物的种植结构是保障粮食安全与减少农业源温室气体排放的有效手段。基于中国各省农业生产投入、管理经营与农产品成本收益汇编数据,采用排放因子、多目标优化及成本收益分析方法,核算了2021年中国及各省份粮食生产温室气体排放状况并揭示其空间分布特征及贡献份额,优化了其种植结构和布局,开展了主要作物的生产成本和经济效益分析。研究发现:(1) 2021年,中国粮食生产温室气体排放总量达4.33×10⁸tCO₂eq,CH₄和N₂O是主要贡献者,排放量占比分别为40.12%和32.56%;水稻种植是第一大排放源,其排放温室气体2.09×10⁸tCO₂eq,玉米是温室气体排放量最大的旱地作物。(2) 中国粮食作物生产温室气体排放在空间上呈现东高西低、南多北少的格局,东北平原、长江中下游平原和珠江三角洲等水稻主产区是高排放区。(3) 优化作物种植结构后,粮食种植面积相对于2021年下降6.78%,灌溉用水、化肥用量分别下降了4.82%和4.87%;作物产量增加1.1%,其中水稻、小麦产量分别减少0.62%、0.55%,玉米则增产1.48%;温室气体排放总量下降5.09%,其中CO₂、CH₄和N₂O排放分别减少5.98%、5.6%和3.7%。(4) 粮食作物结构种植调整有助于提升成本收益,优化后粮食作物总收益可增加305.74亿元,七种粮食作物除蔬菜种植成本有所增加外,其他作物均不同程度降低。未来,受气候变化、市场竞争和高种植成本等因素影响,中国粮食安全保障和温室气体减排压力将进一步加剧,优化种植结构、推动农业全产业链升级与降低生产资料消耗是实现农业稳粮减排的有效途径。     

无细胞百日咳攻击菌的制备及液氮保存方法分析

为了制备无细胞百日咳效价测定用攻击菌并用液氮进行保存,对此方法进行评价。采用原代攻击菌复苏传代后测定细菌浓度,并用蛋白胨水稀释为27亿个菌/m l,分装冻存管中。放入液氮罐内,并对液氮保存的攻击菌进行相应的检测,用统计软件计算。结果显示,此方法制备的攻击菌与传统的攻击菌无显著性差异,冻后虽攻击菌的毒力有所下降,但都在100-1000/MLD的正常范围内,且冻后0、3、6、9、12月无显著性差异。同批支间差异小,CV<5%。通过此方法制备的攻击菌稳定性好,试验结果符合《中华人民共和国药典》要求,可用于无细胞百日咳的效价测定。     

卵巢组织冻存与移植生育力保存的应用现状与研究进展

年龄增长、疾病以及抗肿瘤治疗等均可能会造成女性生育力的下降甚至丧失。随着诊疗技术的发展,癌症死亡率逐渐下降,因此患者的生育力保存需求较前增加。胚胎冻存、卵母细胞冻存和卵巢组织冻存是目前常用的女性生育力保存方式。卵巢组织冻存与移植至今仅有20余年历史,现已成为临床上具备医学指征的生育力保存方式,有助于重建患者的内分泌和生育功能,已有超200多例患者通过此技术成功完成生育。为提高冻存卵巢组织再移植的安全性,现有研究将卵母细胞体外成熟技术、人工卵巢技术与之相结合,避免携癌风险高的冻存卵巢组织移植后的癌症复发风险。较多的研究均已证实了卵巢组织冻存与移植技术的有效性和安全性。尽管卵巢组织冻存与移植技术得到了快速发展,但是该技术仍面临如何通过减少卵泡储备损失进而延长卵巢组织移植后有效性等挑战,尚需要更多的基础和临床研究促进卵巢组织冻存和移植技术的进步与发展。     

农村学生营养改善措施的成本—效益分析：以校园种菜为例

目的：评估校园种菜的成本 效益,探讨其在农村学生营养改善中的作用,为农村学校因地制宜地开展校园经济提供参考依据。方法：采用问卷调查收集校园种菜的成本、产量和收益等信息;通过与校长访谈,了解开展校园种菜的总体情况;实地考察学校食堂和菜地,了解学生就餐情况以及在校园种菜项目中的受益情况。结果：校园种菜可降低学校食堂的经费支出。种植0.07hm2蔬菜需投入成本为3 970元,净效益为1 030元。种菜学校提供200g蔬菜的成本为0.3元,比直接购买节省0.3元。每0.07hm2能满足31名学生一学年、每日400g的蔬菜需求。用近0.87hm2的地种菜,能满足大规模学校（800人）学生一学年、每人每日200g的蔬菜需要。结论：在农村学校开展蔬菜种植,既能减少学校食堂的经费支出,还能增加学生新鲜蔬菜的摄入量,弥补其微量营养素摄入不足,可在农村学校开展并推广。     

养殖菜蛇的效益分析与技术要点

蛇全身是宝 ,蛇肉及蛇制品的市场需求量大 ,养蛇成为农民朋友和下岗职工脱贫致富的一条好门路。国家为了保护稀有的野生动物 ,维护自然界的生态平衡 ,颁布实施了《野生动物保护法》,把蕲蛇、眼镜王蛇、眼镜蛇等多种毒蛇纳入法律保护范围。同时 ,全国各地执法部门保护这类蛇种的力度不断加大 ,不少养蛇者由于手续不全或无证饲养等原因而成为被打击对象 ,致使原本养殖难度大、成功率低的毒蛇养殖业更是雪上加霜 ,陷入困境。　　菜蛇 ,即王锦蛇等 ,是无毒或低毒蛇种 ,同样可以食用 ,其营养价值和口味足以和蕲蛇等保护蛇种相媲美。菜蛇性情温顺…     

尿蛋白定性与定量检测结果的差异性和相关性分析

目的：探讨尿液干化学法及免疫透射比浊法检测尿白蛋白结果的差异性及相关性。方法：对514例住院患者随机尿标本进行尿液干化学法及免疫透射比浊法尿蛋白的检测。结果：尿液干化学法阳性率为82．1％,免疫透射比浊法阳性率为72．8％。两种方法检测结果均为阴性标本的符合率为98．9％,为（±）的标本二者符合率为69．7％,为㈩的标本二者符合率为75．6％,为（＋＋）的标本二者符合率为67．2％,为（卅）标本中二者符合率为42．5％,为（＋＋H）标本二者的符合率为37．5％。两种方法的检测结果有显著性差异（P〈O．05）;UmAlb／Ucr、NAG、和NAG／Ucr与UmAlb具有显著相关（P〈0．05）,且UmAlb／Ucr与UmAlb的相关性最高。两种方法所得等级结果比较,＋＋～卅之间差异有统计学意义（P〈0．05）,-～±、±～＋、＋～＋＋、＋＋＋～＋＋＋＋之间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：尿蛋白定性与定量检测结果存在显著性差异,而UmAlb／Ucr与UmAlb相关性较高。在泌尿系统疾病的诊断中,检测尿中UmAlb比尿常规更有意义。     

Urimem,a membrane that can store urinary proteins simply and economically,makes the large-scale storage of clinical samples possible

By nature,biomarker is the measurable change associated with a physiological or pathophysiological process.Unlike blood which has mechanisms to minimize changes and to keep the internal environment homeostatic,urine is more likely to reflect changes of the body and is a better biomarker source.Because of its potential in biomarker discovery,urinary proteins should be preserved comprehensively as the duration of the patients’corresponding medical records.Here,we propose a method to adsorb urinary proteins onto a membrane we named Urimem.This simple and inexpensive method requires minimal sample handling,uses no organic solvents,and is environmentally friendly.Urine samples were filtered through the membrane,and urinary proteins were adsorbed onto the membrane.The proteins on the membrane were dried and stored in a vacuum bag,which keeps the protein pattern faithfully preserved.The membrane may even permit storage at room temperature for weeks.Using this simple and inexpensive method,it is possible to begin preserving urine samples from all consenting people.Thus,medical research especially biomarker research can be conducted more economically.Even more objective large-scale prospective studies will be possible.This method has the potential to change the landscape of medical research and medical practice.     

尿液蛋白富集方法的比较

人尿液中蛋白含量低,在进行质谱分析时易被高丰度蛋白掩盖。因此,发展高效和高选择性的富集方法,是实现尿蛋白标记物深度覆盖的必要前提。探究不同实验方法对尿液蛋白富集和尿蛋白质组的影响尤为重要。本研究采用超滤法、硝酸纤维素膜富集法和饱和硫酸铵沉淀法,等体积各处理5例健康志愿者和膀胱癌患者10 mL尿液样本,富集尿液蛋白,SDS-PAGE分离尿蛋白,比较不同方法纯化的效率;通过质谱分析,比较不同纯化方法的肽段鉴定效果,确定针对尿液蛋白质组蛋白的最佳富集方法。相对于超滤和硝酸纤维素膜富集法,饱和硫酸铵沉淀法成功地应用于健康人尿蛋白的富集和质谱检测,在保证回收蛋白质量的前提下,可减少高丰度白蛋白的干扰,富集更多低丰度蛋白,提高了质谱鉴定的灵敏度。综上所述,饱和硫酸铵提取尿蛋白的效果较好,该方法具有大规模处理尿液、提高蛋白质组学筛选临床诊断标记物研究的应用潜力。     

血浆低分子量蛋白与多肽的研究进展

血浆是临床上使用频率最高的体液样本,具有采样无创、使用便捷以及内含物丰富等特点,是挖掘疾病相关潜在生物标志物的重要来源.血浆中低分子量蛋白与多肽(low molecular weight proteins and peptides,LMWPs)包括细胞因子、生长因子、多肽类激素和蛋白质降解产物等,其以分子质量较小、序列...     

综述与专论：血浆低分子量蛋白与多肽的研究进展

血浆是临床上使用频率最高的体液样本,具有采样无创、使用便捷以及内含物丰富等特点,是挖掘疾病相关潜在生物标志物的重要来源。血浆中低分子量蛋白与多肽(low molecular weight proteins and peptides,LMWPs)包括细胞因子、生长因子、多肽类激素和蛋白质降解产物等,其以分子质量较小、序列可表征、来源广泛等优势,得到了研究人员的青睐。近年来,随着高分辨率、高灵敏度质谱仪与计算科学的不断发展,新技术新方法的融入,LMWPs相关研究也有了新的发展。本文结合当前本领域的研究热点,介绍了血浆LMWPs的分类,包括完整小蛋白、蛋白质降解物、神经肽、免疫多肽、载体蛋白结合的LMWPs和小开放阅读框编码的多肽,同时总结了血浆LMWPs在富集方法、研究策略、功能研究以及疾病相关生物标志物方面的研究进展,并对血浆LMWPs面临的挑战和未来的研究方向进行了讨论。     

Collection fluid helps preservation in voided urine cytology

Objectives:  Degenerative change caused by delay in processing contributes to false-negative and false-positive diagnosis of urothelial carcinoma in cytology. The aim of the study was to see if the use of a collection fluid for urine samples made a significant difference to urine cytology diagnosis, and if one was better suited for routine use in the hospital laboratory. Three cell collection fluids were evaluated by analysing the preservation and degeneration of cells in urine samples, as was the routine preparation which did not use a collection fluid.
Methods:  In the design study 50 voided urine specimens were taken at random from the hospital haematuria clinic. Three commercially available collection fluids cytolyt^TM, cytospin^® and cytoRich^®Blue and the hospital's routine conventional preparation of urine were compared. The degree of degeneration, and so preservation, was assessed by a table of chosen criteria; then ranked and analysed by Friedman's nonparametric test, at P  = 0.05. A second table showing the cell content of each slide was also made.
Results:  These showed no significant diagnostic difference between the collection fluids, but there was a significant difference between the collection fluids and the routine preparation. Minor differences that do not affect diagnosis, such as crystals and ghost red blood cells, were noted in cytospin^® and cytoRich^®Blue.
Conclusion:  It is recommended that a collection fluid is used. This choice should be made after health and safety issues and cost are considered.     

加热洗脱硝酸纤维膜上保存的尿蛋白质

用膜保存尿蛋白质对于生物标志物的研发意义重大,从保存尿蛋白质的硝酸纤维膜上洗脱蛋白质的有效性,决定着保存方法被接受的程度和应用的范围。加热洗脱蛋白质的方法,通过提高硝酸纤维膜溶解时的温度等方式;并运用SDS-PAGE和LC-MS/MS分析加热洗脱方法所制备的尿蛋白质样品,将其与强烈涡旋洗脱方法和直接丙酮沉淀方法所制备的尿蛋白质样品比较。结果显示,加热洗脱方法比强烈涡旋洗脱方法获得更多的蛋白质(P0.05),且蛋白质无降解;加热洗脱方法和直接丙酮沉淀方法制备的蛋白质样品,质谱所鉴定到蛋白质重叠率无明显差异(分别是92.6%、96.8%),蛋白质丰度CV值20%的蛋白质占总蛋白质的比例均很高(分别是85.2%、94.4%)。加热洗脱法具有很好的技术重复性,操作更加高效、简单,有利于用膜保存尿蛋白质方法的推广应用。     

硝酸纤维膜和丙酮沉淀尿蛋白质保存方法的比较

硝酸纤维膜法是一种简单、快速、经济的尿液蛋白质保存方法,但其与传统尿液蛋白质丙酮沉淀方法的差异有待进一步研究。相同尿液分别经硝酸纤维膜法和丙酮沉淀法制备尿蛋白质,经液相串联质谱分析鉴定蛋白质,采用谱图数定量,研究两种不同方法的差别。结果显示硝酸纤维膜法和丙酮沉淀法鉴定蛋白质数目几乎相同,鉴定蛋白质在谱图数的分布上几乎相同,鉴定蛋白质在蛋白质变异系数的分布上也几乎相同。因此,硝酸纤维膜法处理尿蛋白质与丙酮沉淀法基本一致,可以应用于大规模临床尿液样本的保存。     

Characterization of 13 polymorphic microsatellite loci for an evergreen tree,Myrica rubra

We developed 13 microsatellite markers from a genomic library enriched for dinucleotide (CT) repeats in a dioecious evergreen tree, Myrica rubra. We screened loci from 32 adult trees. The number of alleles ranged from two to 14, and the expected heterozygosity ranged from 0.324 to 0.884. The total paternity exclusionary power where the mother was known equalled 0.99965. These loci are of clear value in studying mating system and parentage analysis of this species.     

Phosphoproteome Analysis

Protein phosphorylation is directly or indirectly involved in all important cellular events. The understanding of its regulatory role requires the discovery of the proteins involved in these processes and how, where and when protein phosphorylation takes place. Investigation of the phosphoproteome of a cell is becoming feasible today although it still represents a very difficult task especially if quantitative comparisons have to be made. Several different experimental strategies can be employed to explore phosphoproteomes and this review will cover the most important ones such as incorporation of radiolabeled phosphate into proteins, application of specific antibodies against phosphorylated residues and direct staining of phosphorylated proteins in polyacrylamide gels. Moreover, methods to enrich phosphorylated proteins such as affinity chromatography (IMAC) and immunoprecipitation as well as mass spectrometry for identification of phosphorylated peptides and phosphorylation sites are also described.