C57BL/6J小鼠超数排卵的研究

目的　确定C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量和最合适的注射间隔时间 ,提高超排率。方法　 40只C57BL 6J雌鼠随机分为四组 ,分别用 5IU或 10IU的PMSG和HCG ,间隔 48h或 72h注射 ,比较排出卵母细胞的数量。结果　 5IU +5IU剂量的PMSG和HCG、间隔 48h注射组超排效果最好 ;8～ 10周龄雌鼠较 6～ 8周龄雌鼠超排效果好。结论　C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量为 5IUPMSG +5IUHCG ,最合适的注射间隔时间为 48h ,处于繁殖期的雌鼠超排效果好。     

电磁脉冲对C57BL/6J 胸腺的作用

目的:观察电磁脉冲Electromagnetic Pulse(EMP)对C57BL/6J小鼠胸腺的影响。方法:50只C57BL/6J小鼠按体重区组随机化分为对照组和辐照组,每组25只。EMP每天照射400次,连续照射7天,照后1d(天)、3d、7d、14d、28d共5个时间点杀取胸腺。2只辐照组和2只对照组杀取的胸腺做HE染色,观察其病理改变;3只辐照与3只对照组的小鼠,杀后称取小鼠的体重和胸腺的重量,计算胸腺指数;然后提取T淋巴细胞进行计数;同时取小鼠外周血检测其中的IL-4的水平。结果:照后1d胸腺的切片没有明显改变。7天后,胸腺开始有出血,结构不清;胸腺指数呈现递减的趋势,但辐照组与对照组没有的差异没有统计学意义;T淋巴细胞数的变化也呈现先减后增的趋势,在第1d、14d、28d辐照组与对照组的差异没有统计学意义,在第3d和7d辐照组的细胞数小于对照组的细胞数(P<0.05);辐照组与对照组的外周血IL-4水平的差异也没有统计学意义。结论:电磁脉冲对雄性Balb/c小鼠胸腺结构造成一定的损伤,但胸腺指数改变不显著,T淋巴细胞数量增加。表明EMP对胸腺有一定的作用,但是胸腺不是EMP作用的敏感器官。     

C57BL/6J-HBV转基因小鼠的繁育与检测

目的　摸清C57BL 6J -HBV转基因小鼠的繁育规律 ,建立可靠的HBsAg表达检测方法。方法　对C57BL 6J-HBV转基因小鼠两种不同交配方式的繁殖性能和HBsAg的表达情况进行比较研究 ;应用免疫组化的方法证实血清学诊断HBsAg的准确性并用激光扫描共聚焦显微镜确定HBsAg在肝细胞中的表达部位。结果与结论　从繁殖性能来看 ,两种交配方式窝产仔数差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,而离乳数差异具有显著性 ( 0 .0 1

相似文献   

C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100μL(3×10~6个细胞)B16F10细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3组,同上,经尾静脉分别注射3×10~6个细胞、1×10~6个细胞、3×10~5个细胞,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3组,同上,尾静脉注射1×10~6个细胞,分别于1周、2周、3周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况。结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移。2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3×10~5时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少。3)尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少。结论经尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,生长2周时间,为构建C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法。     

C57BL/6小鼠幽门螺杆菌感染动物模型的建立

目的：建立幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）小鼠感染模型。方法：建立Hp经口感染SPF级小鼠的动物模型,取小鼠胃粘膜组织,利用PCR技术、尿素酶实验、细菌培养等方法检测接种小鼠,对结果进行判定。结果：Hp可感染C57BL／6小鼠并在小鼠胃部定植。     

MTHF对C57BL/6鼠Lewis肺癌细胞生长的影响

通过观察MTHF纯体对C57BL/6鼠移植瘤细胞生长的影响,初步探讨MTHF抗肿瘤作用的机理。将42只接种Lewis肺癌LL2细胞的C57BL/6鼠随机分成对照组、MTHF组和顺铂组。分别处理后观察各组肿瘤生长情况,于接种22 d后处死荷瘤鼠,收集肿瘤标本后测量瘤体质量,并进行电镜以及组织学分析,通过免疫组化检测肿瘤组织PCNA、Bcl-2及Bax的表达。结果表明MTHF组、顺铂组抑瘤率分别为46.2%、54.5%。电镜显示MTHF组出现细胞凋亡。MTHF处理Lewis肺癌细胞后,PCNA和Bcl-2基因下调,Bax基因上调。MTHF可显著抑制C57BL/6鼠移植瘤肺癌细胞的生长,其机制可能与诱导Lewis肺癌细胞凋亡并抑制其增殖有关,是一种有前景的抗肿瘤药物。     

不同方法建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型的探讨

目的用不同方法建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型,为探讨GalR蛋白对小鼠抑郁症的治疗作用打下基础。方法 C57BL/6J小鼠经体重、敞箱实验及反抗抓获实验初筛后,随机分为4组:Ⅰ.CUMS组,Ⅱ.CUMS+CORT组,Ⅲ.CORT组,Ⅳ.正常对照组。每天记录小鼠体重及摄食量。28d后进行液体消耗及强迫游泳实验测试。结果小鼠抑郁模型在第28d建立成功。Ⅱ组小鼠短期内体重迅速下降并死亡。与Ⅰ组小鼠相比,Ⅲ组小鼠液体消耗和强迫游泳实验指标改变更明显。结论成功建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型。CUMS和CORT模型结合,小鼠不能耐受,短期内死亡。单独CORT模型造模效果要优于CUMS模型。在后续试验中,将用CORT法建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型。     

C57BL/6小鼠听皮层A1区LTP特性

应用在体细胞外记录群体细胞兴奋性突触后场电位方法,研究C57BL6小鼠听皮层A1区突触长时程增强(LTP)特性。观察到,给予模拟的θ节律电刺激(TBS),刺激听皮层白质,可在听皮层灰质ⅡⅢ层记录到明显LTP。根据TBS后LTP幅度变化特征,LTP可分为瞬时增强型(有PTP)和缓慢增强型。高强度TBS诱导的LTP增幅百分数比低强度TBS诱导的LTP增幅大,但两者诱导的LTP成功率无显著差异。实验还表明,2月龄小鼠较4月龄小鼠LTP幅度增长率更高,提示听皮层LTP具有年龄依赖性特征。实验结果为进一步研究听觉模态学习记忆的神经机制提供了资料。     

寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响*

目的:研究寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响。方法:12只雌性小鼠随机分为对照组、低温组,每组6只;低温组每天4℃暴露4 h,每天阴道涂片法观察小鼠动情状况,对照组饲养于常温动物房;每2 d称量体重,2周后心脏取血、子宫和卵巢,检测小鼠血清E2、FSH、LH、Prl、P水平,进行子宫、卵巢的组织病理学检查。结果:与对照组比较,低温组小鼠体重无显著性差异(P＞0.05),小鼠子宫脏器系数明显较低、动情间期明显延长(P＜0.01),血清FSH显著升高、Prl显著降低(P＜0.01),小鼠子宫腺管扩张,卵巢卵泡数量明显减少。结论:寒冷可使雌性C57BL/6小鼠动情周期延长,进而可能影响生殖功能。     

利用CRISPR-Cas9敲除Tyr基因制作白化C57BL/6N小鼠

目的 为了获得白化的C57BL/6N小鼠,扩大其在皮肤移植和胚胎干细胞方面研究中的应用。方法 通过体外设计合成Cas9 mRNA和系列sgRNA(single guide RNAs),注射到小鼠的受精卵内,破坏合成C57BL/6N小鼠黑色素生成必须的酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因序列的第1和第2外显子,产生基因突变,获得F0代白化的C57BL/6N小鼠,然后经过重复回交和自交,形成白化C57BL/6N小鼠近交系。结果 经过注射两对sgRNA,成功的获得了F0代的白化小鼠,在Tyr基因的第1和第2外显子中均发生了缺失突变,小鼠可以将突变基因传递给后代,并在其后代中产生了纯合的白色C57BL/6N小鼠,最后对白化小鼠突变类型进行了分析。结论 通过CRISPR-Cas9技术破坏了小鼠Tyr基因,成功地建立了白化C57BL/6N小鼠近交系,为将来的嵌合体制作、组织移植提供了新的研究工具。     

C57BL/6小鼠听皮层脑片的长时程增强特性

采用脑片细胞外记录群体细胞兴奋性突触后电位方法,在成年C57BL／6小鼠听皮层上,研究长时程增强(10ng-termpotentiation,LTP)特征。用100Hz高频电脉冲刺激听皮层白质,可在听皮层灰质Ⅱ/Ⅲ层记录到明显的LTP。根据条件刺激后LTP的变化特征,将其分为缓慢上升(A类)和短暂快速上升(B类)两种类型。使用模拟的θ节律刺激参数,可更有效地诱导听皮层LTP,其群体细胞兴奋性突触后电位斜率增加更为明显(P＜0．01),诱导成功率也更高。     

幽门螺杆菌jhp947基因对C57BL/6小鼠致病性研究

摘要：【目的】 检测jhp947对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp )所致动物胃上皮细胞病变和基因表达的影响。【方法】 将27只无特定病原体的（specified-pathogens free,SPF）6 w 龄 C57BL/6小鼠随机分成3组,分别以J99 、△J99-947（缺失jhp947基因）和PBS灌胃,菌量为109CFU/mL,0、2、4 d各一次,4w后宰杀所有小鼠,无菌操作取胃组织,分别作快速尿素酶试验,Hp培养,组织病理学检查;免疫组化检测ESE-3A、NDRG1、MATP基因表达;半定量RT-PCR检测jhp947基因对小鼠ESE-3A、NADG1、MATP等基因转录的影响。【结果】 J99组和△J99-947组快速尿素酶试验和Hp培养的阳性率均为100%,PBS对照组快速尿素酶试验和Hp培养阴性。 组织病理学检查,PBS对照组小鼠胃黏膜100%正常, J99组小鼠胃黏膜33.3%（3/9）轻度糜烂,66.7%（6/9）重度糜烂。△J99-947组小鼠胃黏膜22.2%（2/9）正常,77.8%（7/9）轻度糜烂,没有重度糜烂。J99组小鼠胃黏膜的损伤比△J99-947组重。 免疫组化检测结果, J99组比△J99-947组ESE-3A、NDRG1、MATP表达显著降低（p<0.05）。 半定量RT-PCR检测结果, J99组比△J99-947组ESE-3A、NDRG1、MATP表达显著降低（p<0.05）。【结论】 JHP947基因存在可使Hp感染所致的胃黏膜损伤程度加重。在体内jhp947基因可能通过下调NDRG1、MATP等肿瘤抑制基因的表达,这可能与胃癌的发生有关。     

Sex-restricted non-Mendelian inheritance of mouse Chromosome 11 in the offspring of crosses between C57BL/6J and (C57BL/6J × DBA/2J)F1 mice

We report on the observation of sex-restricted, non-Mendelian inheritance over a region of mouse Chromosome (Chr) 11, occurring in the offspring of crosses between two commonly used Mus musculus-derived inbred strains, C57BL/6J and DBA/2J. In the surviving backcross progeny of reciprocal matings between (C57BL/6J × DBA/2J)F₁ hybrids and the C57BL/6J parental strain, we observed the preferential appearance of C57BL/6J alleles along a region of Chr 11. The deviation from Mendelian predictions was observed only in female offspring from both reciprocal backcrosses, and not in males from either cross. The sex-specificity of the observed non-Mendelian inheritance points to an explanation based on embryonic or neonatal lethality. Our data add to previously obtained evidence for a Chr 11 locus or loci with sex-specific and allele-specific effects on viability. Received: 19 December 1997 / Accepted: 10 June 1998     

多次注射乌拉坦诱导的BALB/C及C57BL/6J小鼠肺癌模型的比较

目的探讨一种稳定的多次乌拉坦注射诱导小鼠肺癌模型的构建方法,比较BALB/C及C57BL/6J小鼠对该肺癌模型的敏感性。方法 10只BALB/C小鼠及10只C57BL/6J小鼠适应性饲养3周,随后每只小鼠分别被给予每周1次腹腔注射1 g/kg体重乌拉坦,连续注射10周,继续喂养15周后处死小鼠取肺组织。由3名不同的检测者在解剖显微镜下观察计数肺组织表面肿瘤数目并以直径记录肿瘤大小;HE染色检测肺组织病理变化。结果多次乌拉坦注射诱导的BALB/C及C57BL/6J小鼠肺癌发生率均为10/10(100%);BALB/C小鼠荷瘤数明显多于C57BL/6J小鼠(P0.01),同时,直径也大于C57BL/6J小鼠(P0.05);HE染色显示多次乌拉坦注射诱导的肺癌有非典型性腺瘤增生及腺瘤两种病变类型。结论 BALB/C和C57BL/6J小鼠均可以作为多次注射乌拉坦诱导性肺癌模型的动物,BALB/C小鼠对该肺癌模型的敏感性高于C57BL/6J小鼠。     

C57BL/6小鼠的大脑和心脏对FDG摄取的昼夜节律变化

目的:利用正电子断层扫描技术(PET)成像检测一天的不同时间点C57BL/6小鼠大脑和心脏组织对18F-氟代脱氧葡萄糖(FDG)摄取的昼夜节律变化。方法:使用同窝出生的成年C57BL/6小鼠,给予12 h光照-12 h黑暗的光照周期。注射FDG后,进行X-射线计算机断层扫描(CT)和正电子发射(PET)扫描。结果:C57BL/6小鼠整个大脑摄取FDG在黑暗的中期阶段(ZT18)显著增加,与其他时期相比平均达150%;而不同个体的心脏对FDG的摄取变化大,但所测量的四个时期的平均值则相近。结论:C57BL/6小鼠大脑摄取葡萄糖具较强的昼夜节律性,而心脏对葡萄糖的摄取没有明显的节律性,且在一天的各个时间均有较大变动。     

C57BL/6J慢性应激小鼠血中胆固醇和甘油三酯的变化

目的观察慢性应激对C57BL/6J小鼠行为和血液中血脂的影响。方法将20~25 g雄性C57BL/6J小鼠分成应激组及相应的对照组。应激组小鼠独笼饲养,将6个日相和6个夜相刺激及1个全天刺激随机安排到1周内,每周刺激顺序随机重新组合,连续8周。对照组动物则每5~6只小鼠合笼饲养,自由给水,整个实验过程中不接受任何刺激。2组动物均于刺激后的1、2、4和8周经内眦取血,用于血脂的检测。结果行为学实验结果显示:除第8周外,刺激后各时间点模型组小鼠体重均明显低于对照组(P<0.05)。空腹胆固醇及甘油三酯检查结果显示:与对照组相比较,模型组小鼠自刺激后的第2、4、8周显著增加(P<0.01),相反甘油三酯则在个时间点均显著降低(P<0.05)。结论复合式慢性应激是一种建立应激动物模型的有效方式;应激形成过程中动物体内胆固醇的增加提示长期的应激很可能对心血管系统造成一定危害。     

C57BL/6小鼠脑脊液抽取——毛细玻璃虹吸管真空吸引技术

本研究旨在建立一种适合C57BL/6小鼠脑脊液(cerebrospinal fluid, CSF)抽取的方法。用膜片钳电极拉取仪拉制毛细玻璃虹吸管,用脑立体定位仪将小鼠头部固定,使之与身体之间角度为135°。在立体显微镜下分离小鼠颅脑背部皮肤和肌肉组织,暴露出小脑延髓池处硬脑膜,用毛细玻璃虹吸管(与硬脑膜平面之间角度为20°～30°)在Y形脊椎背侧动脉内侧1 mm处穿刺,进行CSF采样。第一次抽取后将毛细玻璃虹吸管与1 mL无菌注射器相连,构成负压装置,进行第二次抽取。结果显示,CSF抽取成功率为83.33%(30/36),CSF平均抽取量为(7.16±0.43)μL/只。另外,经鼻给予C57BL/6小鼠枸橼酸铁胺(ferric ammonium citrate, FAC)建立脑内高铁模型,采用本研究建立的CSF抽取技术进行采样。结果显示,生理盐水对照组CSF铁含量没有检出,FAC处理组CSF铁含量为(76.24±38.53)μmol/L,组间差异具有显著性。以上结果提示,本研究建立的小鼠CSF毛细玻璃虹吸管负压吸引技术具有简单易行、成功率高、抽取量多、出血率低的优点,适合在C57BL...     

高脂饮食诱导C57BL/6J肥胖小鼠骨关节炎模型的建立

目的通过高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖来建立骨关节炎模型并观察其病理特征,为肥胖相关骨关节炎研究中动物模型的建立提供实验依据。方法 C57BL/6J雄鼠20只随机分为对照组和高脂组,分别喂饲基础饲料和高脂饲料。每周测体重及摄食量,16周后收集血清,ELISA法检测血清Ⅱ型胶原C端肽水平;取小鼠左下肢膝关节,固定、脱钙、石蜡包埋,切片后行HE及番红O染色并进行修改后的Mankin评分;TUNEL法检测软骨细胞凋亡。结果与对照组相比,高脂组小鼠体重、血清Ⅱ型胶原C端肽水平显著升高,而摄食量方面则无明显差异。HE及番红O染色结果显示,高脂组小鼠的膝关节软骨细胞减少,排列混乱,基质染色不均匀,可出现潮线部分缺失,颜色变浅等;且高脂组的修改后的Mankin评分也显著高于对照组。TUNEL检测结果显示,高脂组小鼠关节软骨凋亡细胞数增多,但与对照组相比差异不显著。结论利用高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖的方法可以建立骨关节炎模型,该模型可用于肥胖相关骨关节炎的研究。     

维生素D受体在C57BL/6小鼠十二指肠中的定位表达分析

目的为探讨维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在C57BL/6小鼠十二指肠中的定位与表达,研究维生素D系统与肠道发育过程的相关性。方法利用实时定量PCR(quantitative PCR,q PCR)、苏木精伊红染色、免疫荧光染色、免疫印迹(Western blotting,WB)的检测技术,对C57BL/6小鼠十二指肠中VDR定位表达做定性与定量的分析。结果 VDR的mRNA在C57BL/6小鼠十二指肠组织中的表达在其出生的第21天达到峰值。此外,VDR主要分布在C57BL/6小鼠十二指肠上皮细胞和平滑肌细胞的胞质中。对组织样品的WB检测显示,C57BL/6小鼠十二指肠发育过程中,VDR没有发生明显的核转位。结论从分子生物学角度分析了VDR在C57BL/6小鼠十二指肠不同生长发育阶段的表达规律,为了解和完善VDR在肠道中的作用奠定理论基础。     

提高利用C57BL/6胚胎干细胞系制作基因打靶小鼠效率的研究

为了提高通过C57BL/6(B6)胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)获得基因打靶小鼠的效率,该研究利用经过体外和体内多能性验证的C57BL/6 ES细胞系B6-1-6,开展了37组平行的制作基因打靶小鼠的实验。首先,对不同的囊胚获取的方式进行对比;其次,统计37组实验中的嵌合鼠表观嵌合度与种系遗传效率,并对二者相关性进行分析。对于BALB/c小鼠,自然排卵相较于激素超排能够得到更多囊胚(2.91个囊胚/只vs 0.82个囊胚/只);对于最佳注射个数的探索,利用C57BL/6 ES细胞系B6-1-6进行基因修饰并注射囊胚,注射65~97个胚胎获得阳性打靶动物的可能性为95%;嵌合鼠毛色嵌合率与种系遗传率有一定相关性(r=0.316,P=0.057),而嵌合鼠眼睛颜色与种系遗传效率显著正相关(r=0.328,P0.05)。该研究探索了用于C57BL/6 ES细胞注射的BALB/c囊胚获取方式的优化和最佳的注射数量,以及嵌合鼠表观嵌合度与种系遗传效率相关性等方面,以期为相关的研究提供有益的参考。