子宫内膜接受性与金属蛋白酶及其抑制因子表达之间的关系

为了研究RU486抗着床的机理和子宫内膜接受性与金属蛋白酶MMP-2及其抑制剂TIMP-1,3之间的关系, 用注射RU486的小鼠作为模型, 研究了注射不同剂量RU486对小鼠胚胎着床率的影响, 以及在着床窗口期子宫内膜中MMP-2和TIMP-1,3表达量的变化. 结果显示, 注射RU486能明显抑制胚胎的着床, 而且有剂量依赖性. 在着床窗口期, 子宫内膜中MMP-2表达量的升高和TIMP-1,3表达量的降低不利于胚胎着床. 提出RU486的抗着床作用可能是通过诱导MMP-2的表达和抑制TIMP-1,3的表达实现的.     

子宫内膜接受性与金属蛋白酶及其抑制因子表达之间关系的研究

子宫内膜接受性与金属蛋白酶及其抑制因子表达之间关系的研究@高飞$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @魏鹏$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @陈鑫磊$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @张志宏$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @刘以训$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080…     

子宫内膜接受性的建立和分子调控

胚泡着床是一个复杂的生理过程,依赖于胚泡发育和子宫内膜获得接受能力的同步进行.着床只发生在具有接受性的子宫内膜,而子宫内膜只在很短的时间内具有接受性.被称为"着床窗口".子宫内膜接受性的建立涉及子宫腔上皮的形态学改变,以及甾类激素和许多细胞因子复杂的调控作用.本文综述了子宫内膜接受性的建立及其分子调控.     

金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1,-3)mRNA在小鼠胎盘中的表达

本实验利用原位杂交对小鼠妊娠不同时期胎盘中MMP－2,TIMP－2,－3mRNA的表达进行了研究。结果表明;MMP－2主要在具有很强的侵润能力的海绵滋养层细胞中表达,到妊娠13．5天时,MMP－2的表达明显降低,说明此时的滋养层细胞基本上失去侵润能力。TMIP－1和TMIP－3在滋养层细胞和蜕膜细胞中都有表达,这两种抑制因子的协同表达,一方面能够调控滋养层细胞侵入子宫内膜的深度,另一方面,滋养层细胞自身既表达MMP－2又表达TIMPs,可能对其自身有保护作用,使得MMP的水解功能局限于子宫蜕膜的特定区域。在妊娠10．5天,滋养层巨细胞同时表达TIMP－1,－3mRNA,这可能与其功能的转换是一致的;因为此时小鼠滋养层巨细胞体积最大,且不再增殖,同时其功能屯从侵入型向内分泌型转换。所以,MMPs和TIMPs在小鼠滋养层细胞和子宫蜕膜中的协同表达表明其在着床过程中可能发挥重要作用。     

肿瘤转移抑制因子基因MRP-1/CD9对小鼠胚胎着床影响的研究

目的研究外源性MRP-1/CD9抗体对小鼠胚胎着床的影响。方法1.将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度MRP-1/CD9抗体的培养液中,观察囊胚形成及囊胚脱透明带的情况。2.妊娠D4小鼠子宫角注射MRP-1/CD9抗体,于妊娠D8观察小鼠胚胎植入数量。结果1.体外培养时,MRP-1/CD9抗体显著抑制胚胎的囊胚形成率(1:400,P<0.05)和脱带率(1∶800,P<0.05)。2.宫角注射MRP-1/CD9抗体可以显著提高小鼠胚胎的着床数(8.33±0.15vs4.57±0.21)。结论MRP-1/CD9参入小鼠胚胎的发育及植入。     

极具潜力的子宫内膜容受性形态学标志——胞饮突的研究进展

胞饮突是种植窗期在扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)下子宫内膜上皮细胞膜顶端出现的大而平滑的膜突起.近年胞饮突被认为子宫内膜容受性的一个标志性结构.其功能可能是直接或间接参与囊胚与子宫内膜的黏附反应.本文就胞饮突的形态、功能及与其他子宫内膜容受性相关因子相互作用作一综述.     

极具潜力的子宫内膜容受性形态学标志-胞饮突的研究进展

胞饮突是种植窗期在扫描电镜（Scanning electron microscopy,SEM）下子宫内膜上皮细胞膜顶端出现的大而平滑的膜突起。近年胞饮突被认为子宫内膜容受性的一个标志性结构,其功能可能是直接或间接参与囊胚与子宫内膜的黏附反应。本文就胞饮突的形态、功能及与其他子宫内膜容受性相关因子相互作用作一综述。     

基质金属蛋白酶-2 在子宫内膜异位症中的表达及应用价值

目的:探讨粘附分子CD44拼构变异体6(CD44v6)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在子宫内膜异位症(EMs)组织中的表达及相关性。方法:选取20例异位内膜组织标本、20例在位内膜组织标本及20例正常子宫内膜标本,用病理常规免疫组织化学方法检测MMP-2和CD44v6的表达,并分析其相关性。结果:CD44v6在异位内膜组的表达明显高于在位内膜组和对照组,且对照组明显高于在位内膜组,差异具有统计学意义(P0.05);CD44v6在在位内膜组和对照组中分泌期的表达明显高于同组增生期,差异具有统计学意义(P0.05)。MMP-2在异位内膜组和在位内膜组的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.01);MMP-2在各组增生期和分泌期表达不规律。异位内膜组中,CD44v6和MMP-2在Ⅲ-Ⅳ期的表达明显高于Ⅰ-Ⅱ期,差异具有统计学意义(P0.01)。Spearman相关性分析结果显示:EMs组织中MMP-2和CD44v6之间呈现正相关性(r=0.724,P0.05);EMs不同分期组织中MMP-2和CD44v6之间亦呈现正相关性(r=0.623,P0.05)。结论:MMP-2和CD44v6在EMs异位内膜中高表达,且有正协同作用,二者可能与EMs的发生发展有关。     

金属蛋白酶及其抑制因子与肝癌侵袭及转移

金属蛋白酶是一组先由细胞分泌,嗣后又在细胞外获得活性的锌离子依赖性酶,它们彼此间具有同源性,但其底物不同。它们维系着细胞外基质的平衡;在肝癌细胞的侵袭和转移的过程中,起着一定的作用;还作为一种内源性的细胞表面蛋白脱落酶,移转某些细胞因子及细胞因子受体的功能。金属蛋白酶抑制因子则是金属蛋白酶的拮抗剂,属糖蛋白,对肝癌的转移有抑制作用,它们不断地接受某些因子如白介素-6的调节。     

巨噬细胞迁移抑制因子拮抗剂对子宫内膜异位症的影响

目的：探讨巨噬细胞迁移抑制因子拮抗剂（ISO-1）对子宫内膜异位症的影响。方法：以裸鼠为研究对象,构建子宫内膜异位元症动物模型,应用巨噬细胞迁移抑制因子拮抗剂进行干预,观察子宫内膜异位症小鼠的成活率和体重变化;采用RT-PCR检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）,基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）,血管内皮细胞生长因子（VEGF）,TNF-αmRNA的表达,ELISA检测TNF-α蛋白的表达。结果：ISO-1对子宫内膜异位症小鼠的存活率无明显影响,但可增加其体重（P〈0.05）。ISO-1减少子宫内膜异位症小鼠受损组织中MMP-2、VEGF、TNF-α的表达（P〈0.05）,但对TIMP-2的表达无明显影响。结论：巨噬细胞迁移抑制因子被特异性阻断后,可明显抑制受损组织的重构、血管生成和炎症,最终影响子宫内膜异位症的组织生长及进一步恶化,这可能是临床治疗子宫内膜异位症的新策略。     

原位杂交检测组织金属蛋白酶抑制因子—1 mRNA在IgA肾病肾脏中的表达

为探讨组织蛋白酶抑制因子在IgA肾病肾小球硬化中的作用。本文用原位杂交法研究组织金属蛋白酶抑制因子－1（TIMP－1）mRNA在3种类型IgA肾病（轻度系膜增生型、中度系膜增生型及局灶型）肾组织中的表达。结果表明：TIMP－1 mRNA原位杂匀的阳性信号主要分布于部分肾小管上皮细胞内。在肾小球系膜细胞也可检测到TIMP－1 mRNA阳性信号,但较肾小管弱,中度系膜增生型的TIMP－1 mRNA阳笥信号明显地较其他两型IgA肾病为强。以上结果表明：由肾小管上皮细胞及系膜细胞合成的TIMP－1通过抑制基质金属酶的活性,可导致细胞外基质（ECM）在肾小管间质及肾小球内过度沉积,从而对肾小球硬化有促进作用。     

基质金属蛋白酶-2,-9在子宫腺肌病的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 , 9(MMP 2 , 9)在子宫腺肌病的表达及与发病机制的关系。方法　采用免疫组织化学SP法对 2 8例子宫腺肌病 (疾病组 )异位及原位内膜 ,35例子宫肌瘤 (对照组 )原位内膜中MMP 2 , 9的表达进行测定 ,应用图像分析系统分析MMP 2 , 9平均光密度值。结果　MMP 2 , 9于两组原位内膜中表达均呈月经周期依赖性 ,分泌期的表达强度高于增生期 (P <0 0 5 ) ;于疾病组异位内膜中表达无周期性显著差异 (P >0 0 5 )。疾病组内增生期异位内膜MMP 2 , 9的表达强度高于原位内膜 (P <0 0 5 )。疾病组整个月经周期中 ,MMP 2 , 9于原位及异位内膜的表达皆持续明显高于对照组 (P <0 0 5 )。结论　研究显示子宫腺肌病原位和异位内膜MMP 2 , 9的过度表达可能与其发病机制有关     

子宫内膜异位症患者在位内膜及异位内膜中Claudin-1、Claudin-3的表达及意义

目的:探讨紧密连接蛋白claudin-1、claudin-3在子宫内膜异位症(内异症)发生发展中的作用及意义.方法:免疫组织化学方法检测正常子宫内膜、内异症患者的在位内膜和异位内膜组织中claudin-1、claudin-3蛋白质的表迭.结果:chudin-1、claudin-3蛋白主要定位于子宫内膜细胞的细胞膜/质,内异症患者的异位内膜中claudin-1、claudin-3蛋白的表达显著低于在位内膜及正常子宫内膜(P＜0.01).结论:claudin-1、claudin-3蛋白在内异症患者异住内膜中的表达明显下调,二者可能与内异症的发生发展相关.     

人子宫内膜纤蛋白溶酶元激活因子及其抑制因子的分布与调控

人子宫内膜中存在组织型(tPA)及尿激酶型(uPA)两类纤蛋白溶酶元激活因子,其含量在增殖期高于分泌期。本文应用免疫组织化学定位证实uPA及tPA两类抗原存在于子宫内膜的腺体细胞和间质细胞中。应用SDS-PAGE分高蛋白质,继而应用纤蛋白-琼脂糖铺盖技术测得离体培养下间质细胞仅释放tPA,腺体细胞仅释放uPA,但两种细胞均分泌PA的抑制因子(PAI)。培液中加入孕酮,明显抑制PA和刺激PAI生成。雌二醇作用与孕酮相反。某些肽类激素hCG、PRL、GnRH及cAMP作用基本与雌二醇相同。但福司克林(FK)则刺激间质、腺体两种细胞产生tPA及少量uPA,抑制PAI生成。本工作表明人子宫内膜中存在PA及PAI作用相反的酶,受激素调控,其生理意义尚待进一步探讨。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂mRNA在正常及异位子宫内膜中的表达

目的：观察正常及异位子宫内膜中基质金属蛋白酶－1,－2（MMP－1,－2）和基质金属蛋白酶组织抑制剂－1（TIMP－1）基因表达的变化,以探讨其与子宫内膜异位症的关系。方法：应用原位技术,采用地高辛生物素标记的cDNA探针（MMP－1,MMP－2,TIMP－1）对子宫内膜异位症患者（EM组）的子宫内膜（14例）、异位病灶组织（20例）及非子宫内膜异位症患者（对照组）的子宫内膜（12例）,分3批进行分子杂交检测,结果：3批结果相似。MMP－1,－2,TIMP－1mRNA在腺上皮细胞和间质细胞均有表达,EM组的子宫内膜MMP－1,－2及TIMP－1mRNA表达量与对照组无显著性差异（P＞0．05）,异位病灶组织的MMP－1,－2mRNA表达量明显高于对照组（P＜0．05）,而TIMP－1mRNA表达量则低于对照组（P＜0．05）。结论：子宫内膜异位症患者的异位病灶中,存在MMP－1,－2和TIMP－1明显的平衡失调,这可能与子宫内膜异位症的发生、发展和不孕有关。     

单克隆非特异性抑制因子—β（MNSFβ）在大肠杆菌中的表达、抗体的制备及在小鼠子宫内膜上的组织定位

为了获得足够量的单克隆非特异性抑制因子-β蛋白（monoclonal nonspecific supressor factorβ,MNSFβ）及其抗体用于探讨MNSFβ在着床中的作用机理,本研究构建了表达质粒pBV220/MNSFβ-hCCβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白MNSFβ-hCCβ,用抗hCGβ抗体对表达产物进行鉴定,结果表明融合蛋白MNSFβ-hCGβ得到了正确表达,且分子量和理论值相近,表达产物MNSFβ-hCGβ经初步纯化后用于免疫Balb/C小鼠,制备抗体,同时,我们还构建了表达质粒pGEX-4T-2/MNSFβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白GST-MNSFβ,用融合蛋白GST-MNSFβ对融合前的免疫小鼠回忆刺激并进行检测,制备了抗MNSFβ多克隆抗体和单克隆抗体,应用所制备的多克隆抗体进行免疫组化研究,对MNSFβ在小鼠子宫内膜上进行了组织定位,结果显示,MNSFβ在着床日（受精后第4.5天）小鼠子宫非着床位点的表达和着床位点相比明显提高。     

着床期小鼠子宫内膜中EGF及其受体转录和表达状况的研究

为探讨表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF)在胚泡着床过程中的作用。本文应用原位杂交和免疫组织化学方法,检测了EGE及其受体在胚泡着床前后小鼠子宫内膜中的转录和表达。结果显示：未孕和受精后第4-5天,子宫内膜表面上皮和腺上皮细胞仍呈EGF,EGFR原位杂交和免疫组化阴性着色,受精后第4-5天子宫内膜基质细胞EGF及其受体转录和表达较未孕期增强,受精后第6天,EGF及其受体免疫组化和原位杂交阳性着色主要分布于初级蜕膜带（primary decidual zone,PDZ);随着胚泡植入的进行,PDZ区蜕膜细胞EGF及其受体的转录和表达明显减少,而PDZ周围蜕膜细胞EGF及其受体的转录和表达增强,结果提示,EGF是小鼠胚泡着床过程中的一个重要调节因子。