基孔肯亚病毒垂直传播的研究进展

基孔肯亚病毒(chikungunya virus,CHIKV)是一种由埃及伊蚊和白纹伊蚊传播的蚊媒病毒,属于披膜病毒科甲病毒属.从2005年起,CHIKV在非洲、亚洲和美洲多次发生大规模疫情,其感染率较高,能引起发热性疾病,常伴有关节炎,关节炎症状可维持数月甚至数年,对患者生活和社会生产造成极大影响.除了蚊媒传播,妊娠...     

重庆市中区白纹伊蚊的分布及孳生习性调查

白纹伊蚊为我区优势蚊种。1986～1987年,我们对其生态做了调查,现简报如下。调查方法选海拔195m(命名Ⅰ)、280m(命名Ⅱ)、370m(命名Ⅲ)三个点,冬点顺次放罩截面(cm2)为9.6、12.6、19.6、19.6、23.8,容量(cm3)为250、260、400、470、530的五个竹筒诱殖,以只/100ml计旬密度;七月,以同样原则做一断面调查,计算户指数、百户指数和容器指数;在树荫、寝室、走廊三处,用人饵帐诱法,以只/小时计其昼夜活动频率和密度。调查结果一、Ⅰ～Ⅲ各点诱殖的频率和密度,分别为39%,4.9,43%,3.4和59%、6.9。其频率和生物量的差别均非常显著(P<0.01),与海拔高度…     

白纹伊蚊和埃及伊蚊对基孔肯雅病毒的易感性和传播性的研究

用４株基孔肯雅病毒经口感染白纹伊蚊和埃及伊蚊,进行了易感性和传播性的研究。结果表明,这两种蚊虫对基孔肯雅病毒易感。无论白纹伊蚊或埃及伊蚊,感染后第５－６天即可通过吸血将病毒传播给乳鼠,至第８－１３天,传播率可高达５５．５５％－１００％。感染蚊亦可经叮咬将病毒传播给小鸡。埃及伊蚊的易感性和传播率高于白纹伊蚊。实验还发现,不同来源毒株之间存在一定差异,如分离自云南白纹伊蚊的Ｍ８１株的感染率和传播率均高于其它毒株。这些结果表明,白纹伊蚊和埃及伊蚊在基孔肯雅病毒的保存和传播中起重要作用。     

柞蚕成虫卵巢细胞株的建立及其对病毒敏感性的研究

建立了一株连续生长的柞蚕成虫卵巢细胞株Ap－4,测定了细胞株的生长曲线,细胞株的群体倍增时间为67h,该细胞株亦可以在无血清培养基SF－900Ⅱ中生长。用同源的柞蚕核型多角体病毒感染细胞后,观察了细胞的病理变化以及病毒多角体的形成。检测了病毒多角体的数量以及非包埋型病毒的TCID50数值,细胞株增殖的病毒对柞蚕幼虫和Ap－4细胞株仍具有感染性。     

SV40病毒的培养、增殖及鉴定

目的：建立SV40病毒在Vero细胞上培养的方法,观察其生长过程,获得SV40病毒,并建立相应的SV40病毒检测方法,为SV40灭活疫苗的制备奠定良好的基础。方法：在Vero细胞上培养和增殖SV40-776株病毒。收获病毒后,应用PCR、免疫荧光以及克隆特异性片段进行测序比较来鉴定SV40病毒。结果：SV40在Vero细胞中增殖很快,并且使细胞出现明显的病变。小规模分离到了SV40病毒颗粒,获得了病毒DNA。不同的鉴定方法均显示出良好的特异性。结论：探讨了SV40病毒病变的基本过程,建立了病毒的培养、增殖和鉴定的方法。     

周期加载对VEC-304细胞株迁移、增殖分布的影响

在弹性膜上接种VEC－304,融合生长后擦去周边细胞形成一规则圆斑,使用弹性膜周期加载装置,对生长在弹性膜上的VEC－304圆斑施以15％拉伸应变,经显微镜观察,计算机图像处理了解细胞增殖、迁移时间过程及增殖细胞在应变场中的分布,细胞银染了解细胞形态及细胞连接情况,免疫荧光染色观察增殖细胞的分裂极。结果发现：（1）随加载时间延长圆斑沿与应变垂直向伸展成椭圆形,24h两径出现明显差异;（2）随时间增加圆斑面积扩大,但实验组沿与加载垂直方向的增大较沿加载方向为大;（3）细胞有丝分裂器（中心粒）位于细胞短轴即加载方向;（4）加载后细胞较对照组排列紧密,细胞间距更小,且出现较为明显的重叠生长现象。VEC－304在应变场中的运动迁移、增殖具有方向依赖性,周期加载可以促进细胞间连接。     

白纹伊蚊细胞株——ACK_4的建立及对六株虫媒病毒的影响

Singh报道,白纹伊蚊(Aedes albopictus)细胞对分离登革热病毒比小白鼠乳鼠和Vero细胞更敏感,并产生特异性细胞病变。Pav又用于对登革热病毒的鉴定上,效果颇佳。鉴于此情况,我们参照Singh白纹伊蚊幼虫的组织培养方法加以改进,建立了白纹伊蚊细胞株——ACK_1~*,现已传至第81代。用登革热Ⅱ     

“化疗”对机体RBCc3b受体花环及白念珠菌增殖的临床观察

通过检测ＲＢＣｃ３ｂ 受体花环及白念珠菌培养,探讨乳腺癌、肺癌术后辅助“化疗”对病人免疫功能影响和菌群失调后白念珠菌增殖感染情况。辽宁省肿瘤医院８０ 例乳腺癌、肺癌术后辅助化疗病人,化疗后均行痰、便真菌学检查,并以３０ 例经痰、便检查无白念珠菌生长的健康人体对照。随机抽样４０ 例病人化疗前后作ＲＢＣｃ３ｂ 受体检测。结果显示８０ 例病人化疗前痰、便检查白念珠均阴性,化疗后１ 个、２ 个月和３ 个月痰和（ 或） 便检阳性者分别为７ 例（８．８ ％ ） ;４１ 例（５１ ％ ） 和６２ 例（７７．５ ％ ） 与正常对照组三个月内白念珠菌检阳性仅１ 例（３．３ ％ ） 比差异非常显著（Ｐ＜０．０１） 。白念珠菌检阳性病人体有不同程度临床症状。化疗前病人ＲＢＣｃ３ｂ 受体花环率为１５．６２ ％ ±２．２ ％ （ 正常组为１９．３０ ±０．４４） ,化疗２ 个月后平均９．９８ ％ ±０．８１ ％ ,其差异非常显著（Ｐ＜ ０．０１） 。从此得出结论：乳腺癌、肺癌病人术后辅助化疗后出现免疫功能下降,在化疗三月内有７７．５ ％ 痰、便中白念珠菌增殖生长,提示对恶性肿瘤化疗应注意监测病人的免疫功能以及机体内菌群失调情况。     

RNA干扰Ezrin体外对肾癌细胞株786-0增殖、凋亡的影响

目的：构建膜- 细胞骨架联接蛋白Ezrin 基因特异性短发卡RAN 表达载体（small hairpin RNA,shRNA）,探讨其对肾癌细胞株786-0 细胞凋亡、增殖的影响。方法：以Ezrin 为靶基因,以Pgenesil-1 质粒为载体,设计和构建重组体,设计2 条发夹式RNA（shRNA）,合成后克隆入载体Pgenesil-1,扩增并中量提取质粒,应用脂质体Lipofectamine 2000 转染进786-0 细胞,重组质粒转染786-0 肾癌细胞株,用运实时荧光定量PCR 进行筛选鉴定,筛选出抑制率较高的重组质粒载体shRNA-Ezrin1,用shRNA-Ezrin1转染786-0 细胞,采用MTT、流式细胞仪、电镜检测,观察RNA干扰Ezrin 后肾癌细胞株786-0 细胞增殖能力的改变。结果：shRNA干扰后786-0 细胞增殖活性减弱,G0/G1时段明显延长（P〈0.01）,PI缩短（P〈0.01）,细胞凋亡率增加（P〈0.01）。结论：Ezrin与肾癌细胞凋亡、增殖有关,有望成为肾癌基因治疗的一个新靶点。     

七氟醚、异氟醚对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

目的:观察不同浓度的七氟醚(Sev)、异氟醚(Iso)对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及对顺铂化疗敏感性的影响。方法:体外培养骨肉瘤MG63细胞。用噻唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度七氟醚和异氟醚对MG63细胞增殖的影响。平板克隆形成检测不同浓度七氟醚和异氟醚对MG63细胞克隆形成率的影响。流式细胞术检测细胞凋亡。结果:七氟醚、异氟醚对骨肉瘤MG63细胞增殖有一定抑制作用(P0.05),相对其它浓度5.1%Sev和2.6%Iso抑制作用更明显(P0.05)。七氟醚、异氟醚对骨肉瘤MG63细胞克隆形成有抑制作用(P0.05)。不同浓度Sev、Iso促进MG63凋亡作用不明显(P0.05)。2.5%Sev、2.0%Iso使骨肉瘤MG63细胞对顺铂诱导的凋亡率降低(P0.05)。结论:不同浓度的七氟醚、异氟醚可抑制骨肉瘤MG63细胞的增殖及克隆形成,高浓度的七氟醚、异氟醚对其增殖抑制作用更明显。七氟醚和异氟醚不促进骨肉瘤MG63细胞的凋亡,但可以降低其对顺铂化疗敏感性。     

人参皂苷Rb1、Rg1、Re对白血病细胞株KG1α增殖的影响

目的:探讨人参皂苷Rb1、Rg1、Re对急性髓系白血病细胞株(KG1α)增殖的影响.方法:取对数生长期KG1α细胞,分设人参皂苷Rb1、Rg1、Re组和常规培养组,以MTT比色法检测作用24h、48h、72h时对KG1α细胞增殖抑制作用,并计算Rb1的IC_(50)值,以此浓度为工作浓度,设常规培养组和处理组,台盼蓝计数法观察对KG1α细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞周期分布的变化.结果:MTT、台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1、Rg1可抑制KG1α细胞增殖,呈浓度依赖性,以Rb1抑制效应最佳,于作用48h抑制率最高.台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1-120μmol/L作用48h时抑制率达50.22%;流式细胞术结果提示,与对照组比较,Rb1-120μmol/L组G_2/M期KG1α细胞比例增加(P<0.05).结论:Rb1可抑制KG1α细胞体外增殖,其增殖抑制作用与将KG1α细胞阻滞于G_2/M期有关.     

“化疗”对机体RBCc3b受体花环及白念珠菌增殖的临床观察

通过检测RBCc     

云南番茄致病疫霉的交配型、甲霜灵敏感性及毒力类型

对2003~2004年云南省番茄致病疫霉的交配型、甲霜灵敏感型、毒性因子及毒力类型进行了系统的测定和分析。结果表明:云南番茄致病疫霉只存在A1交配型,未发现A2交配型或自育型。甲霜灵抗性和中抗菌株是主要菌系,抗性、中抗、敏感菌株分别占测定菌株的51.2%、31.7%、17.1%。云南番茄致病疫霉居群对已知的抗性基因R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11有毒性,其毒性频率在9.8%~95.1%之间。测定的61个菌株中检测到26种不同的毒力类型,每种类型平均含有5.2个毒性因子,其中毒力类型1.3.4.7.9出现频率最高,为优势的毒力类型,出现频率为44.3%,其次为1.3.4.6.7.9、1.3.7.9,出现频率均为4.9%,其它23种毒力类型出现频率仅在1.6%~3.3%之间。云南番茄致病疫霉居群显示了复杂的表型特征。     

异甘草素对人肺癌细胞株H460增殖、凋亡及NF-κB信号通路的影响

研究异甘草素对人肺癌NCI-H460细胞增殖、周期及凋亡的影响,并探讨其相关分子机制为其治疗肺癌提供新的科学依据。取对数生长期人肺癌NCI-H460细胞,用不同浓度异甘草素处理,采用CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡的变化;PCR array检测肺癌相关基因mRNA表达;Western-blot检测p-p65,IκBα、IκBβ、Bax、Bcl-2表达量变化;细胞免疫荧光实验观察异甘草素对NF-κB p65分布的影响;结果显示,异甘草素能有效抑制人肺癌H460细胞的增殖和诱导细胞周期阻滞,并促进其凋亡,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路的活化,抑制NF-κB p65入核使其不能发挥转录活性,最终影响其下游凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达来实现的。     

小鼠、大鼠、豚鼠和沙鼠对禽流感病毒致病敏感性的比较初报

目的比较不同物种和品系的哺乳类实验动物对H5N1禽流感病毒(AIV)致病的敏感性。方法对不同动物经鼻腔接毒,然后通过体温、体重、临床症状、病理变化、病毒分离和抗体测定进行比较分析。结果在实验的4个不同物种共7个品系的哺乳动物中,小鼠对AIV较豚鼠、沙鼠和大鼠敏感。结论ICR和NIH小鼠适宜用来制作AIV感染的动物模型。     

树鼯对森林脑炎病毒的敏感性及发病机理的研究

从云南新分离森林脑炎病毒（YH和T57）及东北株经脑内、皮下及腹腔感染成年中国云南树鼯,均发生病毒血症,持续时间为7-9天。抗体应答反应和病理改变程度成反比,病变轻的能产生较好的免疫应答。血凝抑制抗体、中和抗体和补体结合抗体分别于感染后的第5、7、13天出发,且血凝抑制抗体和中和抗体的升高呈正相关。经抗原定位研究发现,腹腔注射后48小时,各组织器官均能查到抗原,除中枢神经系统外,其它组织内病毒抗原消失都很快,随病毒血症的消失而转阴,中枢神经系统携带抗原可持续27天,且病变随病程的延长而加重,表现为充血、血管周围淋巴细胞呈套状浸润,局灶性出血,神经元变性,胶质细胞增生,轴索断裂等,说明靶器官是中枢神经系统。试验表明,成年中国云南树鼯对森林脑炎病毒比较敏感,是森林脑炎病毒动物模型研究首选动物。     

树Ju对森林脑炎病毒的敏感性及发病机理的研究

从云南新分离森林脑炎病毒（YH和T570及东北株经脑内、皮下及腹腔感染成年中国云南树Ju,均发生病毒血症,持续时间为7－9天。抗体应答反应和病理改变程度成反比,病变轻的能产生较好的免疫应答。血凝抑制抗体、中和抗体和补体结合抗体分别于感染后的第5、7、13天出现,且血凝抑制抗体和中和抗体的升高呈正相关。经抗原定位研究发现,腹腔注射后48小时,各组织器官均能查到抗原,除中枢神经系统外,其它组织内病毒抗原消失都很快,随病毒血症的消失而转阴,中枢神经系统携带抗原可持续27天,且病变随病程的延长而加重,表面为充血、血管周围淋巴细胞呈套状浸润,局灶性出血,神经元变性,胶质细胞增生,轴索断裂等,说明靶器官是中枢神经系统。试验表明,成年中国云南树Ju对森林脑炎病毒比较敏感,是森林脑炎病毒动物模型研究首选动物。     

树鼬对森林脑炎病毒的敏感性及发病机理的研究

从云南新分离森林脑炎病毒(YH和T57)及东北株经脑内、皮下及腹腔感染成年中国云南树鼩,均发生病毒血症。持续时间为7—9天。抗体应答反应和病理改变程度成反比,病变轻的能产生较好的免疫应答。血凝抑制抗体、中和抗体和补体结合抗体分别于感染后的第5、7、13天出现,且血凝抑制抗体和中和抗体的升高呈正相关。经抗原定位研究发现,腹腔注射后48小时,各组织器官均能查到抗原,除中枢神经系统外,其它组织内病毒抗原消失都很快,随病毒血症的消失而转阴,中枢神经系统携带抗原可持续27天,且病变随病程的延长而加重,表现为充血、血管周围淋巴细胞呈套状浸润,局灶性出血,神经元变性,胶质细胞增生,轴索断裂等,说明靶器官是中枢神经系统。试验表明,成年中国云南树勉对森林脑炎病毒比较敏感,是森林脑炎病毒动物模型研究首选动物。     

狗牙根、白三叶草对淡剑纹灰翅夜蛾生长发育和繁殖的影响

利用室内饲喂法,以高羊茅分别为对照,研究狗牙根(Cynodon dacyton)、白三叶草(Trifolium repens)对淡剑纹灰翅夜蛾Spodoptera depravata(Butler)存活、生长发育及繁殖的影响。结果表明,用狗牙根、白三叶草饲喂淡剑纹灰翅夜蛾的化蛹率、幼虫成蛾率均显著低于对照组。幼虫历期显著长于对照组。用狗牙根、白三叶草饲喂幼虫时,淡剑纹灰翅夜蛾的蛹期、产卵前期、产卵期、产卵量、♀成虫寿命与对照组均无显著差异,但幼虫龄期明显增加。狗牙根、白三叶草饲喂的淡剑纹灰翅夜蛾种群增长参数与对照组相比存在明显差异:(1)世代净生殖率(R0);(2)内禀增长率(rm);(3)周限增长率(λ);(4)种群数量趋势指数(I)明显降低;世代平均周期(T)和种群加倍时间(DT)明显延长。由此可见,狗牙根和白三叶草并不是淡剑纹灰翅夜蛾喜好的寄主植物。