黑木耳种内杂交子的鉴定技术

采用原生质体技术,获得黑木耳（Auricularia auricula)栽培菌株He- 1的单核化菌株H1、H2、H3和栽培菌株Ju-1的单核化菌株J1、J2、J3,将H1、H2、H3分别与J1、J2、J3配对杂交,核对观察确认H2J1、H2J2和H2J3均为双核体。酯酶同工酶分析表明,H2J1、H2J2和H2J3不仅具有相应的亲本单核体共有的酶带,而且具有两个亲本各自的特异性标记酶带。RAPD分析表明,引物S30和S62对杂交子H2J1、H2J2和H2J3的扩增图谱中不仅包含相应的亲本单核体所共有的DNA带,而且包含亲本单核体各自的特异性DNA带。拮抗和栽培试验表明,杂交子H2J1、H2J2、H2J3与双核体亲本He-1和Ju-1的菌落之间有窄细的黑色拮抗线,子实体形态上有较明显差异。     

香菇亲本菌株及其杂交后代的RAPD分析

运用随机扩增多态性DNA（RandomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD）技术对源于两个香菇（Lentinulaedodes）双核菌株的孢子单核体、原生质体单核体及其杂交后代进行了基因组DNA多态性分析。用9个随机引物共扩增出116条DNA片段,其中82．5％具有多态性。综合分析9个随机引物的扩增谱带,可将所有供试亲本单核体清楚地分开,且早核体聚类分析的结果与其来源及遗传背景相吻合。此外,用两个双核亲本菌株的各4个不同交配型的孢子单核体两两支配所得的所有杂交组合,也均可与双核亲本菌株明确地区分开来。因此,在杂交育种中,RAPD分析可为亲本的选配及杂种的鉴定提供可靠依据。     

香菇亲本菌株及其杂交后代的RAPD分析*

运用随机扩增多态性DNA（RandomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD）技术对源于两个香菇（Lentinulaedodes）双核菌株的孢子单核体、原生质体单核体及其杂交后代进行了基因组DNA多态性分析。用9个随机引物共扩增出116条DNA片段,其中82．5％具有多态性。综合分析9个随机引物的扩增谱带,可将所有供试亲本单核体清楚地分开,且早核体聚类分析的结果与其来源及遗传背景相吻合。此外,用两个双核亲本菌株的各4个不同交配型的孢子单核体两两支配所得的所有杂交组合,也均可与双核亲本菌株明确地区分开来。因此,在杂交育种中,RAPD分析可为亲本的选配及杂种的鉴定提供可靠依据。     

黑木耳种内杂交子同工酶基因座的遗传分析

从黑木耳（Auricularia auricula）种内杂交子H2J3的子实体上单孢分离培养得到F1代52个单核体菌株,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对杂交子H2J3的单核体亲本（H2、J3）及F1代52个单核体菌株进行EST、MDH和FDH3个酶系统的同工酶分析。结果表明,黑木耳EST,MDH和FDH3个酶系统分别由7个、5个和4个基因座控制,其多态性基因座分别为4个、1个和0个,其中两个基因座（EST-5,EST-6）之间存在紧密连锁关系。     

香菇亲本菌株及其杂交后代的RAPD分析

运用随机扩增多态性ＤＮＡ技术对源于两个香菇双核菌的孢子单核体,原生质体单核体及其杂交后代进行了基因组ＤＮＡ多态性分析,用９个随机引物共扩增出１１６条ＤＮＡ片段,其中８２．５％具有多态性,综合分析９个随机引物的扩增谱带,可将所有供试亲本单核本清楚地工,且单聚类分析的结果与其来源及遗传背景相吻合。此外,用两个双核亲本菌株的各４个不同酱 孢子单核体两两酱所得的所有杂交组合,也均可与双核亲本菌株明确地区分     

有性杂交选育银耳优良菌株的初步研究

为了解决银耳栽培生产中存在菌株优良性状单一,生产效率较低等问题,采用银科1#和Tr21两个不同品种菌株为亲本菌株,通过单孢子分离选取50个有性孢子单核体、两两配对有性杂交试验,显微观察镜检鉴定,统计杂交成功率为36%、杂交菌株与亲本的拮抗试验选育出7株杂交株,栽培对比农艺性状评价选育出1株(GT3)比亲本菌株生长快,生物转化率较高的菌株。试验结果表明有性杂交育种可作为一种行之有效的筛选银耳优良菌株的方法。     

香菇半亲和双单杂交研究初报

选用一栽培株苏香两种孢子单核体自交后代作双核体亲本,与相应的孢子单核体进行半亲和双单杂交,得到6个杂交后代,均具有结实能力,说明半亲和双单杂交后代可以用于育种研究。大多数杂交菌株(核基因相同)在菌丝生长速率与CMC酶活方面显示出不同程度遗传差异,其中3号与4号菌株在菌丝生长速率与CMC酶活方面呈现明显杂种优势。     

灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选和分子鉴定

【背景】营养缺陷型是一种应用广泛的分子标记,但是目前在灵芝中还未有研究和应用报道。【目的】为灵芝遗传转化研究、杂交育种和菌种鉴别提供亲本材料和技术支持。【方法】采用紫外光诱变、单单杂交、孢子单核化的方法从灵芝单核体菌株出发得到尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株。【结果】获得8株稳定的尿嘧啶营养缺陷型单核体突变菌株和7株尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株。【结论】灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株在添加外源营养物的基础上可恢复正常生长,可以为灵芝遗传转化体系的构建和灵芝育种提供材料。     

金针菇子实体颜色的遗传规律研究

以金针菇黄色菌株F19和白色菌株F8801为亲本,原生质体单核化获得两亲本的单核菌株,配对杂交获得F1,从F1的子实体分离单孢菌株,与两亲本的原生质体单核化菌株进行回交配对,出菇观察子实体颜色,分析菇体颜色的遗传规律。研究结果表明,黄色为显性、白色为隐性,菇体颜色受一对基因(Cc)控制,与不亲和性因子A或B都没有连锁。     

黑木耳亲本、单核、杂交菌株鉴定的研究

应用荧光核染色技术、酯酶同工酶鉴定技术,对黑木耳亲本双核菌株、原生质体单核菌株和单-单杂交菌株进行筛选鉴定。结果表明:荧光核染色技术可快速有效地鉴定获得菌株的核相,酯酶同工酶技术可准确地区分单核菌株及杂交新菌株的不同核型,研究得到1个酶带差异显著的新菌株。     

中山杉302和墨西哥落羽杉及其回交一代的同工酶分析

落羽杉属有落羽杉〔Ｔａｘｏｄｉｕｍｄｉｓｔｉｃｈｕｍ (Ｌ .)Ｒｉｃｈ .〕、墨西哥落羽杉 (Ｔ .ｍｕｃｒｏｎａｔｕｍＴｅｎｏｒｅ)和池杉 (Ｔ .ａｓｃｅｎｄｅｎｓＢｒｏｎｇｎ .) 3个种 ,该属是世界重要的园林及用材树种 ,墨西哥落羽杉是其中较耐盐碱的树种 ,它的引种选育历来受到广泛重视。中山杉 30 2 (Ｔ .‘Ｚｈｏｎｇｓｈａｎｓｈａ 30 2’)是江苏省·中国科学院植物研究所于 2 0世纪 80年代从落羽杉×墨西哥落羽杉杂交后代中选育出来的优良品种 ,具有生长快和耐盐碱等特性[1 ] 。本实验从中山杉 30 2×墨西哥落羽杉回交一代中选…     

不同类型杂交水稻组合及其亲本苗期同工酶位点分析

对6个杂交水稻组合及其亲本苗期14种酶的同工酶进行检测,并对其中较为清晰稳定的酶带进行了位点分析,以探讨杂种优势遗传基础。共获得了28个位点的相关资料,包括每个位点的性质、表型多态性和每个位点所编码的酶活性及酶带平均迁移率。所有供试材料在其中25个位点上均未表现出多态性,只有部分组合与其亲本在Est-4、Amy-1、Aat-2等3个位点上存在多态性,其中有81．8％的差异组合其酶带表现出共显性特征。对共显性与杂种优势的关系进行了探讨。     

薯蓣属植物人工杂交后代的检测

以湖北武当山的盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis C.H.Wright)为主要亲本,与重庆金佛山的盾叶薯蓣、小花盾叶薯蓣(D.parviflora C.T.Ting)及黄独(D.bulbifera L.)进行种内和种间杂交,并获得部分杂交组合的F1代植株。将F0代种子与F1代植株进行结实率及种子萌发率比较,并与亲本进行过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和酯酶(EST)同工酶比较。结果表明,不同亲本及其杂交后代的结实率、种子萌发率和实生苗存活率均存在明显差异;亲本和F1代的同工酶酶谱较丰富,部分杂种与亲本的相似度较高,并出现各自的特征酶带。运用同工酶技术可以鉴别杂种的真伪。     

小麦杂交种与亲本发育早期种子的基因表达差异及其与杂种优势关系的初步研究

为深入探讨小麦杂种优势形成的分子机理,选取3个冬小麦品种(系)为一组亲本,3个为另一组亲本,配制了正反交18个杂交组合,以授粉后6d的杂交和自交种子为材料,应用mRNA差异显示技术(DDRT—PCR)研究了小麦杂交当代种子与其亲本自交种子基因的表达差异,并与杂种优势进行相关分析。为降低DDRT—PCR技术假阳性的不利影响,对每个引物组合均作了两次PCR扩增,在处理数据时,仅统计能重复出现的条带。结果发现：杂交种和亲本之间的基因表达模式有8类共15种：(1)单亲沉默型(2种),(2)单亲一致型(2种),(3)正交或反交沉默型(2种),(4)正交或反交特异型(2种),(5)正交或反交单亲一致型(4种),(6)杂交种特异型(1种),(7)双亲共沉默型(1种),(8)表达一致型(1种)。分析发现,小麦杂交种和亲本间存在显著的表达差异。在差异表达类型中,杂交种特异型和双亲共沉默型比例最低。对上述15种表达模式与杂种优势进行相关分析,结果表明,表达一致型与各产量性状杂种优势之间的相关均不显著,说明杂种优势是由某些有表达差异的基因造成。9个产量性状均能检测到一种以上与其显著或极显著相关的基因表达模式,有些性状受正负相关效应的共同影响;沉默型(包括单亲沉默型、正交或反交沉默型和双亲共沉默型)和正交或反交单亲一致型在杂种优势形成中发挥重要作用。这些研究表明,在种子发育早期,基因的差异表达与杂种优势形成之间可能存在较为复杂的关系。     

元江芦荟与皂质芦荟的杂交育种及POD同工酶比较

以元江芦荟(AloeyuanjiangensisXiong,ZhengetLiu)和皂质芦荟(A.saponaria(Ait.)Haw.)为亲本进行了远缘有性杂交试验,获得了19株F1代植株。对F1代植株与亲本进行了外部形态比较;同时与亲本种及同属的华芦荟(中国芦荟)(A.chinensis(Haw.)Baker)和库拉索芦荟(A.veraL.)进行了过氧化物酶同工酶(POD)比较。其结果表明,F1代与亲本在外部形态上存在明显差异;POD同工酶酶谱显示,F1代与各个种间具有较高的相似程度,且各个种又具有各自特征酶带。这证实了F1是元江芦荟与皂质芦荟的杂种(A.yuanjiangensis×A.saponaria)。     

Analysis of the Esterase Isozymes in Three Lines and F1 in Oryza sativa and Prediction of Heterosis

Esterase isozyme patterns in the embryos of dry seeds of 114 combinations of steriles, maintainers, restorers and their F1 hybrids were analyzed with acrylamide gel eleetrophoresis. Usually six major bands were found and named 1A, 3A, 4A, 5A, 6A and 7A. The isoesterase zymograms in three lines--sterile, maintainer and restorer were diffcrent. There were seven types of zymograms in F1 hybrids. The eomplementary bands were shown in F1 hybrids when sterile with 6A band and restorer with 3A or 5A band were used as parents. F1 hybrids with 3A and 6A complementary each other were more vigorous in vegetative growth and only those 5A and 6A complemontary each other displayed economic superiority. It was shown that the pattern of esterase zymograms of F1 hybrids was influenced by both cytoplasm and nucleus of their parents. It was concluded that esterase isozyme patterns could be used as one of the biochemical markers for the predicting hybrid vigor in heterosis breeding.     

萝卜-芥蓝杂种F1代创制及杂种鉴定

以萝卜为母本,以芥蓝为父本,采用人工去雄授粉的方法进行杂交,然后通过胚抢救（embryo rescue）得到F1代植株,并利用RAPD技术对杂种F1代幼苗进行了鉴定。RAPD鉴定结果表明：杂种表现出亲本的特异带或者亲本不具备的新谱带,有的还遗失了亲本的特异带或者共有带。     

萝卜-芥蓝杂种F_1代创制及杂种鉴定

以萝卜为母本,以芥蓝为父本,采用人工去雄授粉的方法进行杂交,然后通过胚抢救(embryo rescue)得到F1代植株,并利用RAPD技术对杂种F1代幼苗进行了鉴定.RAPD鉴定结果表明:杂种表现出亲本的特异带或者亲本不具备的新谱带,有的还遗失了亲本的特异带或者共有带.     

应用过氧化物酶同工酶鉴定山茶属植物杂种F1代的研究

对4个杂交组合的12个杂种F1代植株与亲本进行了形态学比较和过氧化物酶同工酶分析,结果表明以金花茶为父本,云南山茶或云南野山茶为母本杂交产生的11个杂种的幼枝、叶的特征均与母本相似,H-86-1-1的花与母本一致,H-87-2-2的花兼有父母本的特征;H-78-1-1的幼枝、叶的特征与父本相似,其花也兼有父母本的特征。有9株的酶谱为“互补型酶带”,且都出现了杂种带,为真正的杂种;其余2株的酶谱与母本一致,与其形态特征表现出一定的相关性,可能为非真正的杂种。同一个杂交组合产生的杂种,酶谱却有差异,金花茶最为特征的一条带(Rf=0.813)在其所有11个杂种F1代植株中都未表达。     

甘蓝型油菜Ogura 雄性不育×白菜的回交杂种后代与亲本之间蕾期基因表达差异比较研究*

以甘蓝型油菜（Brassica napus L, AACC,2n＝38）Ogura细胞质雄性不育材料为母本,以不同白菜（B campestris ssp. chinensis Makino, AA, 2n＝20） 自交系‘新选一号’和‘矮脚黄’为父本进行杂交,获得了杂种F1、BC1、BC2代。利用cDNA-AFLP技术对两种材料的不同回交世代BC1、BC2代与其亲本在蕾期的基因表达进行分析。结果表明,两种白菜回交世代与其亲本的基因表达有明显差异,在质和量上都存在差异。基因表达模式有5类共7种：（1）单亲沉默型（2种）,（2）单亲一致型（2种）,（3）双亲共沉默型,（4）杂种特异型,（5）表达一致型。随着回交世代的增加,回交杂种和亲本的基因表达在单亲沉默型、双亲共沉默型呈增加趋势。而在母本一致型、父本一致型、杂交种特异型、表达一致型呈下降的趋势。两种白菜在F1、BC1、BC2 3个世代与回交亲本花蕾间的基因差异表达有15种类型,其中以在轮回亲本、F1、BC1、BC2中共同出现表达的带的比例最高。Abstract: Crosses between female parent of Ogura male sterility Brassica napus L. and male parents of B. campestris ssp. chinensis Makino were made and F1, BC1 and BC2 generations produced. Gene expression of two Chinese cabbage backcross hybrid BC1, BC2 and their parents at bud stage was analyzed by means of cDNA-AFLP technique. The results indicated that the patterns of gene expression differ significantly between BC1 and BC2 generations and their parents. There were many patterns of gene expression, including gene overexpression and gene silencing. Five patterns (seven kinds) of gene expression were observed, which include: (1) bands occurring in only one parent (two kinds); (2) bands observed in hybrids and one parent (two kinds); (3) bands occurring in only parents (one kind); (4) bands visualized in only hybrids (one kind); (5) bands observed in parents and hybrids (one kind). In accompany with the addition of backcross, the increase trend in backcross hybrids and their parents were described in the aspects of differential gene expression, bands expressed only in one parent and bands expressed only in both parents. The declined trend in backcross hybrids and their parents were observed in the aspects of bands expressed in both hybrids and one parent (two kinds), bands visualized in only hybrids and bands observed in parents and hybrid. Fifteen patterns of gene expression were observed in F1、BC1、BC2 and backcross parents. The percent of bands expressed in F1、BC1、BC2 and backcross was highest.