粉被虫草N~6-(2-羟乙基)腺苷高产菌株的原生质体诱变育种

在粉被虫草（CordycepspruinosaPetch）无性型─-粉被马利娅霉（MariannaeaPruinosaLiang）原生质体形成和再生的前期研究基础上,报道了通过原生质体诱变培育高产N6－（2－羟乙基）腺苷菌株的研究结果。粉被马利娅霉Cp－14单孢子株经15W紫外灯照射后,获得一高产突变株MpM－135。经多代移植后,此突变株比出发菌株Cp－14的N6－（2－羟乙基）腺苷含量提高了14．8％。实验还表明,粉被虫草无性型菌丝提取物对枯草杆菌（Bacillussubtilis）抗紫外辐射效果与菌丝所含N6－（2－羟乙基）腺苷含量有正相关性。     

粉被虫草N6-(2-羟乙基)腺苷高产菌株的原生质体诱变育种*

在粉被虫草(Cordyceps prainosa Petch)无性型——粉被马利娅霉(Mariannaeapruinosa Liang)原生质体形成和再生的前期研究基础上,报道了通过原生质体诱变培育高产N⁶-(2-羟乙基)腺苷菌株的研究结果。粉被马利娅霉Cp-14单孢子株经15W紫外灯照射后,获得一高产突变株MpM-135．经多代移植后,此突变株比出发菌株Cp-14的N⁶-(2-羟乙基)腺苷含量提高了14.8％。实验还表明,粉被虫草无性型菌丝提取物对枯草杆菌(Bacillussubtilis)抗紫外辐射效果与菌丝所含N⁶-(2-羟乙基)腺苷含量有正相关性。     

复合诱变黑曲霉选育β—葡萄糖苷酶高产菌株

对黑曲霉原生质体进行紫外、ＬｉＣｌ复合诱变,观察诱变后原生质体再生菌落,发现了孢子色变异较大的菌株,且其变化与酶产量相关。经发酵筛选,获得β－葡萄糖苷酶活较高菌株,其酶活由出发菌株的１０ｕ／ｍｌ提高到１４．７ｕ／ｍｌ。再对高产突变株进行氮离子注入,酶活又提高２０％（达１７ｕ／ｍｌ）。     

紫云英根瘤菌菌株107exo基因簇的遗传互补分析

紫云英根瘤菌菌株１０７经Ｔｎ５插入诱变,得到１２株胞外多糖缺陷型变种,以质粒ｐＭＮ２为载体,从其中７株ＥＰＳ＾－变种内分别构建了７个Ｒ－ｐｒｉｍｅ质粒（ｅｘｏＲ）大部分变种的ＥＰＳ＾－表型可被ｅｘｏＰ互补,恢复野生型表型（ＥＰＳ＾＋）。互补表明,１２株ＥＰＳ＾－变种可分为６个不同的互补群,其中５个在遗传上连锁,ｅｘｏＰ酶切分析,除ｅｘｏＲ－０２,ｅｘｏＲ－０４外,其余５只的外源片段均整合于ｐＭＮ２     

影响被孢霉产生含r—亚麻酸油脂的几种因素

对培养条件,如氮源种类、Ｃ／Ｎ比率、ｐＨ、种子种龄与接种量对被孢霉（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ）Ｍ１４菌株的细胞生长和油脂形成的影响作了研究。结果表明,二级发酵优于一级发酵。Ｍ１４菌株二级发酵时,种子种龄以４９ｈ为适,接种量宜大（３０％）。无机氮源有利于不饱和脂肪酸的产生,有机氮源有利于细胞的增殖。低Ｃ／Ｎ比率有利于菌丝体产量的提高,提高Ｃ／Ｎ比率则能促进菌体细胞内的油脂合成。ｐＨ对菌体生长、油     

五种虫草无性型菌株产腺苷类物质的分析

采用分光光度计法对虫草菌丝体中腺苷类组分的提取方法进行研究,采用薄层层析法和高效液相色谱法对虫草菌丝体中的腺嘌呤、腺苷、虫草菌素、N6-(2-羟乙基)腺苷等4种物质进行定性和定量分析。结果表明,虫草菌丝体中腺苷类组分的提取方法采用蒸馏水超声波提取30min效果较好,所测5种虫草菌株都能产腺苷和腺嘌呤,在蛹草拟青霉菌株中含有虫草菌素,在粉被玛利亚霉和蝉拟青霉菌株中含有N6-(2-羟乙基)腺苷,同时发现N6-(2-羟乙基)腺苷的累积与培养时间有一定关系。     

粉被虫草无性型的确证与鉴定

用从粉被虫草(Cordyceps pruinosa Petch)新鲜标本分离得到的假定无性型CGAC2281菌株,于室内人工重新养培出了粉被虫草的子实体。经观察表明,人工培养的子实体、子囊壳和次生子囊孢子的形态学特征与野外采集的标本基本相同,从而确证了CGAC 2281菌株是粉被虫草的真正无性型。本文报道了这种真菌的形态学特征,并鉴定它为马利亚霉属一新种,粉被马利亚霉新种(Mariannaea pruinosa Liang sp.nov.)。     

三种被孢霉的电泳核型分析

利用等强度均一电场（Ｃｏｎｔｏｕｒ－ｃｌａｍｐｅｄ Ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ Ｅｌｅｃｔｒｉｃ Ｆｉｅｌｄ,ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术比较了三种被孢霉菌株及两株诱变菌株的电泳核型。结果显示深黄被孢霉ＡＳ３．３４１０（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｉｓａｂｅｌｌｉｎａ ＡＳ３．３４１０）及其诱变株Ｍ６－２２、ＭＨ２３具有相同的染色体ＤＮＡ分子的数目和大小,而与拉曼被孢霉ＡＳ３．３４１１（Ｍ．ｒａｍａｎｎｉａｎａ     

中国五种锄足蟾科无尾两栖动物的细胞遗传学研究

本文对中国５种锄足蟾科无尾两栖动物的骨髓细胞有丝分裂中期作了细胞遗传学研究,内容包括核型、Ａｇ－ＮＯＲｓ和Ｃ－带。研究结果表明景东角蟾：２ｎ＝２６（２０Ｍ＋４ＳＭ＋２ＳＴ）,５＋８,ＳＣ和Ａｇ－ＮＯＲｓ位于６ｐ＾ｐｅｒ,同时呈Ｃ－带正染。Ｃ－带以着丝点区域正染为主;粗皮角蟾：２ｎ＝２６（２０Ｍ＋６ＳＭ）,５＋８,Ａｇ－ＮＯＲｓ在６ｑ＾ｉｎｔｅｒ,以着丝点Ｃ－带为主,但Ｎｏｓ．１２,１３有明显的端位     

双丁酰环烯酸腺苷对人肝癌细胞株SMMC—7721表面N—糖…

本文采用系列凝集素柱层析法,并配合外切糖苷酶研究了在双丁酰环磷酸腺苷（ｄＢ－ｃＡＭＰ）作用１－５过程中人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞表面Ｎ－糖链类型及复杂型糖链天线数的变化。结果表明,ｄＢ－ｃＡＭＰ促进＾３Ｈ－Ｍａｎ参人细胞表面Ｎ－糖链,使高甘露糖型Ｎ－糖链的百分比下降,并促进二天线Ｎ－糖链的生物合成,使多天线特别是四天线和Ｃ２Ｃ２Ｃ６三天线Ｎ－糖链的百分比减少。结果提示,Ｎ－糖链结构的这些变     

复合诱变黑曲霉选育β-葡萄糖苷酶高产菌株

对黑曲霉原生质体进行紫外、ＬｉＣｌ复合诱变,观察诱变后原生质体再生菌落,发现了抱子颜色变异较大的菌株,且其变化与酶产量相关。经发酵筛选,获得卜葡萄糖昔酶活较高菌株,其酶活由出发菌株的１０ｕ／ｍｌ提高到１４．７ｕ／ｍｌ。再对高产突变株进行氮离子注入,酶活又提高２０％（达１７ｕ／ｍｌ）。     

转座子Tn916对固氮螺菌Azospirillum brasilense的接合诱变及氨分 …

以携带质粒ｐＡＭ１２０（Ａｐ＾ｒ,Ｔｃ＾ｒ／Ｔｎ９１６）的大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＧ１２０）为供体菌株,与受体菌巴西固氮螺菌采用膜接合法进行接合转移,在选择平板上得到具较高频率的接合子（１０＾－５／每个供体菌,选择四环素抗性）。从８４６株四环素抗性接合子中进一步用奈氏法筛选得到氨分泌突变株３株。在无氮培养基上,其氨分泌量可达７．５￣１４．０ｍｍｏｌ／Ｌ。用乙炔还原法分析氨分泌突变株在不同浓度氮源     

阿维菌素高产菌株的选育及阿维菌素B1的鉴定

自阿维链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ ＡＴＣＣ３１２７２）中分离出了３种不同类型的菌株,其中只有产灰色了的菌株能产生阿维菌素（Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎｓ）,摇瓶发醇单位约１００μｇ／ｍＬ。从其菌丝体中提取纯化了阿维菌素Ｂ１晶体,其紫外吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振谱Ｈ－ＮＭＲ和＾１３Ｃ－ＮＭＲ）和质与国外报道的一致。Ｓａ－７６菌株又经２次亚硝基胍诱变,筛选出发酵单位２０００     

复合诱变黑曲霉选育β-葡萄糖苷酶高产菌株*

对黑曲霉原生质体进行紫外、ＬｉＣｌ复合诱变,观察诱变后原生质体再生菌落,发现了抱子颜色变异较大的菌株,且其变化与酶产量相关。经发酵筛选,获得卜葡萄糖昔酶活较高菌株,其酶活由出发菌株的１０ｕ／ｍｌ提高到１４．７ｕ／ｍｌ。再对高产突变株进行氮离子注入,酶活又提高２０％（达１７ｕ／ｍｌ）。     

含硫多肽类抗生素那西肽的菌种诱变及产量提高

那西肽（Ｎｏｓｉｈｅｐｔｉｄｅ）产生菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｃｔｕｏｓｕｓ Ｚ１１,经ＮＴＧ处理和对Ｃｕ＾２＋,Ｍｎ＾２＋耐受选育,获得突变株Ｚ１５,其可耐受Ｃｕ＾２＋为３００μｇ／ｍｌ,耐Ｍｎ＾２＋１０００μｇ／ｍｌ,产生那西肽可达１５００μｇ／ｍｌ是Ｚ１１活力的１．６倍。     

四种无尾两栖动物的核型和银染

本文报道了二种角蟾和二种树蛙的核型和银染ＮＯＲ：无量出角蟾：２ｎ＝２６（２４＋２ＳＭ），５＋８，ＳＣ和Ａｇ－ＮＯＲｓ位于６ｑ＾ｐｅｒ沙坪角蟾：２ｎ＝２６（１６Ｍ＋８ＳＭ＋２ＳＴ），５＋８，ＳＣ位于１ｑ＾ｐｅｒ，但Ａｇ－ＮＯＲｓ有二对，分别是ｌｑ＾ｐｅｒ和２ｑ＾ｐｅｒ；黑蹼树蛙：２ｎ＝２６（２４Ｍ＋２ＳＭ），５＋８，ＳＣ和Ａｇ－ＮＯＲｓ在ｌｐ＾ｉｎｔｅｒ；背条跳树蛙；２ｎ＝１６（１２Ｍ＋４ＳＭ），Ｓ     

肯氏相思^60Co—γ辐照诱变研究

采用不同剂量（３０００，５０００，７０００Ｒａｄ）＾６０Ｃｏ－γ辐照肯氏相思种子，选育出诱变优株（Ｍ１），以Ｍ１的种子（Ｍ２）扩种试验，观测Ｍ１和Ｍ２代的形态，物候，并测定过氧化物酶同功酶带谱，酶活性，蛋白质含量，结果表明，各处理的优株与对照都存在差异。在相同生态条件下，Ｍ１代林木生长量和Ｍ２代地上部生物量分别高于对照１１．４８％￣２１．６４％和１４．６２％￣７３．８９％，以５０００Ｒａｄ辐照剂量     

粉被虫草无性型单孢子株间和单孢子株内的营养亲和性

在含５％氯酸钾的ＫＭＭ和ＫＰＳ培养基上,粉被虫草无性型以３种途径产生不利用硝酸盐的突变株（ｎｉｔ突变株）。（１）由菌落基质菌丝形成的快速生长气生菌丝角变;（２）菌落表面快速生长的气生菌丝;（３）菌落基质菌丝缓慢生长形成的基质菌丝角变。来自１８个单孢子株的９４个ｎｉｔ突变株中,６４．８％的突变株是稳定的。配对试验结果表明：在全部１９个配对中,单孢子株内配对率为５７．９％,单孢子株间配对率为４２．１％     

三种被孢霉的电泳核型分析

利用等强度均一电场（Ｃｏｎｔｏｕｒ－ｃｌａｍｐｅｄ　Ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ　Ｅｌｅｃｔｒｉｃ　Ｆｉｅｌｄ,ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术比较了三种被孢霉菌株及两株诱变菌株的电泳核型。结果显示深黄被孢霉ＡＳ３．３４１０（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ｉｓａｂｅｌｌｉｎａ　ＡＳ３．３４１０）及其诱变株Ｍ(６－２２)、ＭＨ(２３)具有相同的染色体ＤＮＡ分子的数目和大小,而与拉曼被抱霉ＡＳ３．３４１３（Ｍ．ｒａｍａｎｎｉａｎａ　ＡＳ３．３４１３）和葡酒色被孢霉ＡＳ３．３４１４（Ｍｖｉｎａｃｅａ　ＡＳ３．３４１４）显示出明显的差异。三种被抱霉明显的染色体带数分别为１５条,１０条和１１条,分离的染色体ＤＮＡ大小范围大约为３９０ｋｂ－２６６０Ｋｂ,基因组大小分别约为２１６４０Ｋｂ、１５０４０Ｋｂ、１９６７０Ｋｂ。     

深黄被孢霉△~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及序列分析

γ－亚麻酸（ＧＬＡ,Ｃ１８：３△６,９,１２）是由△６－脂肪酸脱氢酶以亚油酸（ＬＡ,Ｃ１８：２△９,１２）为底物,在Ｃ６位脱氢形成的。由于在人体中,γ－亚麻酸是花生四烯酸、前列腺素类和白三烯类等生理活性物质的前体物,而深黄被孢霉是目前用于微生物发酵生产γ－亚麻酸的主要菌株。本文根据脂肪酸脱氢酶的保守区设计引物,利用反转录聚合酶链式反应从丝状真菌深黄被孢霉中克隆了编码△６－脂肪酸脱氢酶的ｃＤＮＡ,全长为１３７４个核苷酸,编码４５７ 个氨基酸,但与其他位点的脂肪酸脱氢酶不同的是, △６－脂肪酸脱氢酶在其序列的 Ｎ 端特有细胞色素 ｂ５（Ｃｙｔｂ５）区。这是国际上对深黄被孢霉△６－脂肪酸脱氢酶基因的首次报道。